α-乳白蛋白

摘要： 为了建立RP-HPLC方法快速准确测定不同热处理方式的市售液态牛乳中主要活性蛋白包括α-乳白蛋白(α-La)和β-乳球蛋白(β-Lg)的质量浓度,建立了测定活性乳蛋白所使用的RP-HPLC法,该法具有良好的稳定性(RSD95%)。测定结果表明,与原料乳相比,经过高温处理(常温存放)的液态乳中的活性α-La和β-Lg显著偏低(<0.16 g/L);而经巴氏杀菌后低温存放(2~6°C)的液态乳样品中活性乳蛋白可得到很好地保持,部分灭菌后低温存放的样品中活性蛋白损失较大。本研究旨为优化液态乳热处理工艺和规范乳企业对于液态乳的工业生产提供借鉴,为消费者对液态乳制品的选择提供指导。

摘要： 建立了体积排阻色谱法检测牛奶、乳粉、乳清粉中α-乳白蛋白含量的分析方法。使样品中的α-乳白蛋白经过盐酸胍变性以及2-巯基乙醇还原后,形成展开的α-乳白蛋白的单体结构,调节pH至6.5~7.5,串联使用两根体积排阻色谱柱MAbPac SEC-1300A(7.8 mm×300 mm),盐酸胍为流动相,等梯度洗脱,用光电二极管阵列检测器在280 nm进行检测。本方法可以同时适用于牛奶、乳粉以及乳清粉中α-乳白蛋白的分离分析。α-乳白蛋白的线性范围为10~500 mg/L,线性相关系数均大于0.99。α-乳白蛋白的检出浓度为3.00μg/mL(S/N=3),定量浓度为10.0 g/mL(S/N=10)。牛奶、乳粉-乳白蛋白含量的分析方法。样1品中的α-乳白蛋白经过盐酸胍变性以及2-巯基乙醇还原后,形成展开的α-乳白蛋白的单体结构,调节pH至6.5~7.5,串联使用两根体积排阻色谱柱MAbPac SEC-1300A(7.8 mm×300 mm),盐酸胍为流动相,等梯度洗脱,用光电二极管阵列检测器在280 nm进行检测。本方法可以同时适用于牛奶、乳粉以及乳清粉中α-乳白蛋白的分离分析。α-乳白蛋白的线性范围为10~500 mg/L,线性相关系和乳清粉中α-乳白蛋白低中高3种浓度的加标平均回收率分别为90.9%~98.2%、100.0%~101.4%和95.1%~100.4%,6次重复性实验的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均小于10%。该方法简便、准确、灵敏,适合测定牛奶、乳粉和乳清粉中α-乳白蛋白的含量。

摘要： 乳不仅能够提供婴幼儿生长发育和人们日常所需的营养物质,还含有大量生物活性成分。乳中的酪蛋白糖巨肽、α-乳白蛋白、乳铁蛋白、骨桥蛋白和乳脂肪球膜等,不仅提供营养,还具有抗氧化、改善肠道健康、促进骨骼健康、免疫调节、促矿物质吸收、抗菌等生物学功能特性。动物实验和临床研究证实:乳铁蛋白、骨桥蛋白、α-乳白蛋白和乳脂肪球膜能够改善婴幼儿营养吸收、提高婴幼儿免疫力、促进肠道健康和神经发育;此外,酪蛋白糖巨肽、α-乳白蛋白及其酶解物等还具有抗炎、改善胰岛素抵抗等功能。随着食品科学研究的深入和分离技术的发展,乳源活性成分及其衍生物得到了广泛研究与开发,且应用于配方食品生产。将乳源活性成分开发成配料添加到婴幼儿配方乳粉中能够在一定程度上缩小婴幼儿配方乳粉与母乳之间的差距,也可以针对中老年人和慢性疾病患者等特殊群体开发功能性食品,提高其生活质量,促进健康老龄化。对5种常见乳源活性成分的结构和功能特性进行了系统地阐述,以期为功能性乳源配料的研发及其在配方食品中的应用提供借鉴和参考。

摘要： 采用Q Exactive组合型四极杆Orbitrap质谱仪配合Proteome Discoverer 2.2软件,筛选出牛乳中α-乳白蛋白和β-乳球蛋白的热负荷特征肽段,研究其含量与加热温度的关系,用于不同热处理方式牛乳的鉴别。研究发现,乳清蛋白质变性程度和本研究筛选出的热负荷特征肽段的含量存在相关性。随热处理温度升高和时间延长,热负荷特征肽段的含量均增加显著,当加热温度超过乳清蛋白质变性温度后,热负荷特征肽段的含量不再变化。当热处理温度超过80°C时,肽段3#的含量明显增加,经不同热处理的市售巴氏杀菌乳和超高温灭菌乳样品中肽段1#~6#的含量均具有极显著差异(P<0.01)。因此,基于超高效液相色谱-串联质谱仪测定方法结合主成分分析模型,本研究可为热处理牛乳质量控制和品质评估提供技术支持。

摘要： 建立一种超高温(ultra high temperature,UHT)灭菌乳中α-酪蛋白、β-酪蛋白、κ-酪蛋白、α-乳白蛋白及β-乳球蛋白含量的液相色谱检测方法。采用含双[三(羟甲基)氨基甲烷]、盐酸胍、柠檬酸钠、二硫苏糖醇等的缓冲液及试剂使蛋白溶解变性,运用液相色谱仪紫外检测器进行检测,外标法定量。结果表明:各蛋白标准曲线线性良好,相关系数在0.995以上,加标回收率为95.2%~105.0%,检出限为0.01~0.02 g/100 mL,相对标准偏差为0.78%~2.70%。该方法具有分离效果好、重复性好、操作简便的特点,适用于UHT灭菌乳中α-酪蛋白、β-酪蛋白、κ-酪蛋白、α-乳白蛋白及β-乳球蛋白的定量分析。

摘要： 动物乳质蛋白中富含酪蛋白、乳铁蛋白、乳清蛋白等优质蛋白质,具有活性高、功能多、应用范围广等优点.文章主要介绍了酪蛋白、乳铁蛋白、α-乳白蛋白和β-乳球蛋白等典型天然乳蛋白的来源、氨基酸组成及其分子结构特征,并归纳了四种乳质蛋白在食品营养、生物学、医药等方面的主要生理功能,重点论述了生物工程下游技术中四种不同乳蛋白的各种分离提取及纯化方法.

摘要： 帕米尔牦牛分布在新疆克孜勒苏柯尔克孜自治州和喀什地区境内的帕米尔高原,帕米尔牦牛乳蛋白含量高,营养丰富,是当地牧民重要的食物来源。该研究利用等电点沉淀法对新疆帕米尔牦牛乳中大分子蛋白进行分离,得到乳清蛋白和酪蛋白,对其含量进行测定,并采用硫酸铵分级沉淀和离子交换层析等方法对α-乳白蛋白(α-lactalbumin,α-La)进行纯化。结果表明,帕米尔牦牛乳中总蛋白含量为(2.81±0.23)g/100mL,其中乳清蛋白和酪蛋白质量比为43∶57;帕米尔牦牛乳蛋白质包含α-La、β-乳球蛋白(β-lactoglobulin,β-Lg)、酪蛋白、血清白蛋白、乳铁蛋白和免疫球蛋白G等多种活性蛋白;另外,用饱和度为80%的硫酸铵可将α-La和β-Lg有效分离;再用DEAE-Sepharose离子交换层析进一步纯化,可除去β-Lg,得到高纯度的α-La。该研究可为新疆帕米尔牦牛产业发展及牦牛乳产品开发提供理论基础。

摘要： 皂苷小分子具有很强的生理活性,在人体中必须与靶细胞生物大分子相互作用才能发挥其生物作用。α-乳白蛋白(α-lactalbumin,α-LA)是球状蛋白质,能结合疏水配体,在食品工业作为功能性配料。采用计算机模拟的方法,对2类皂苷(达玛烷型皂苷和齐墩果型皂苷)和α-LA相互作用进行研究,并获得其相互作用模式的相关图像。分子对接结果表明,2种类型的皂苷与α-LA活性口袋内的氨基酸残基均以疏水相互作用及氢键作用结合,但达玛烷型皂苷结构更复杂,可以提供更多结合位点,且其形成氢键的作用力更强。

摘要： 本文以牛乳为原料,离心脱脂后采用酸沉法分离酪蛋白,微滤除菌后得到乳清蛋白溶液,结合膜分离法和离子交换色谱法分离纯化乳清蛋白溶液中的α-乳白蛋白,并利用高效液相色谱法检测其纯度.结果表明,分离酪蛋白沉淀得到的上清溶液,经0.45μm的陶瓷膜微滤除菌后,除菌率可达99％以上,微滤得到的乳清蛋白溶液蛋白质含量可以达到6.53±0.22 mg/mL.乳清蛋白溶液经卷式聚砜膜超滤,富集α-乳白蛋白,并优化超滤条件,在35°C、出口压力0.3 MPa的条件下,得到的溶液中α-乳白蛋白含量可达24.28±0.32％.使用DEAE Sepharose Fast Flow对蛋白粗品进一步纯化,所获得的α-乳白蛋白纯度为90.89±0.31％,乳清中α-乳白蛋白的回收率可达79.02±0.13％.

摘要： α-乳白蛋白(bovineα-lactalbumin,BLA)可引发过敏反应,且与肠道菌群有关,通过不同蛋白质修饰技术对BLA进行改性,探究其对致敏性和人肠道菌群的影响.以糖基化、磷酸化及乙酰化修饰的BLA为研究对象,采用电泳、光谱学和ELISA等技术研究其结构和IgE结合能力的变化,并运用16S rRNA测序方法分析人肠道菌群的结构及组成.结果表明:BLA经磷酸化、糖基化和乙酰化修饰后,其结构发生了改变;修饰后BLA的IgE结合能力逐渐降低;16S rRNA高通量测序结果表明,与BLA相比,修饰后的BLA在门水平上降低拟杆菌门的相对丰度,增加厚壁菌门的相对丰度;在属水平上,其能明显增加巨单胞菌属和罗姆布茨菌属的相对丰度,而降低普雷沃氏菌属和粪杆菌属的相对丰度.研究结果表明,糖基化、磷酸化和乙酰化修饰通过破坏BLA的结构降低其致敏性,且影响人肠道微生物的结构,影响程度为乙酰化>糖基化>磷酸化.

摘要： 文章通过对高效液相色谱条件中色谱柱、流动相、流速、检测波长、柱温优化的试验,建立了反相高效液相色谱对鲜牛乳中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、乳铁蛋白同时微量检测的分析方法,最终确定采用Agela Venusil ASB C8(5μm,4.6×250 mm,150(A))色谱柱;三氟乙酸/乙腈/水流动相,流速0.8 mL/min,检测波长215 nm,柱温30 C的色谱条件,并利用外标法定量.结果表明,α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、乳铁蛋白三种组分的线性关系良好,相关系数分别为0.9999、0.9991、0.9998,检出限为0.001-0.012mg/mL,样品平均回收率在86.5％-109.08％之间,精密度和重现性试验RSD值均小于5％.该方法前处理方法简单、耗时少,样品损失少,分离效果好,能够实现乳中三种蛋白的同时微量检测.

摘要： 文章通过对高效液相色谱条件中色谱柱、流动相、流速、检测波长、柱温优化的试验,建立了反相高效液相色谱对鲜牛乳中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、乳铁蛋白同时微量检测的分析方法,最终确定采用Agela Venusil ASB C8(5μm,4.6×250 mm,150(A))色谱柱;三氟乙酸/乙腈/水流动相,流速0.8 mL/min,检测波长215 nm,柱温30 C的色谱条件,并利用外标法定量.结果表明,α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、乳铁蛋白三种组分的线性关系良好,相关系数分别为0.9999、0.9991、0.9998,检出限为0.001-0.012mg/mL,样品平均回收率在86.5％-109.08％之间,精密度和重现性试验RSD值均小于5％.该方法前处理方法简单、耗时少,样品损失少,分离效果好,能够实现乳中三种蛋白的同时微量检测.

摘要： 文章通过对高效液相色谱条件中色谱柱、流动相、流速、检测波长、柱温优化的试验,建立了反相高效液相色谱对鲜牛乳中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、乳铁蛋白同时微量检测的分析方法,最终确定采用Agela Venusil ASB C8(5μm,4.6×250 mm,150(A))色谱柱;三氟乙酸/乙腈/水流动相,流速0.8 mL/min,检测波长215 nm,柱温30 C的色谱条件,并利用外标法定量.结果表明,α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、乳铁蛋白三种组分的线性关系良好,相关系数分别为0.9999、0.9991、0.9998,检出限为0.001-0.012mg/mL,样品平均回收率在86.5％-109.08％之间,精密度和重现性试验RSD值均小于5％.该方法前处理方法简单、耗时少,样品损失少,分离效果好,能够实现乳中三种蛋白的同时微量检测.

摘要： 文章通过对高效液相色谱条件中色谱柱、流动相、流速、检测波长、柱温优化的试验,建立了反相高效液相色谱对鲜牛乳中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、乳铁蛋白同时微量检测的分析方法,最终确定采用Agela Venusil ASB C8(5μm,4.6×250 mm,150(A))色谱柱;三氟乙酸/乙腈/水流动相,流速0.8 mL/min,检测波长215 nm,柱温30 C的色谱条件,并利用外标法定量.结果表明,α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、乳铁蛋白三种组分的线性关系良好,相关系数分别为0.9999、0.9991、0.9998,检出限为0.001-0.012mg/mL,样品平均回收率在86.5％-109.08％之间,精密度和重现性试验RSD值均小于5％.该方法前处理方法简单、耗时少,样品损失少,分离效果好,能够实现乳中三种蛋白的同时微量检测.

摘要： 文章通过对高效液相色谱条件中色谱柱、流动相、流速、检测波长、柱温优化的试验,建立了反相高效液相色谱对鲜牛乳中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、乳铁蛋白同时微量检测的分析方法,最终确定采用Agela Venusil ASB C8(5μm,4.6×250 mm,150(A))色谱柱;三氟乙酸/乙腈/水流动相,流速0.8 mL/min,检测波长215 nm,柱温30 C的色谱条件,并利用外标法定量.结果表明,α-乳白蛋白、β-乳球蛋白、乳铁蛋白三种组分的线性关系良好,相关系数分别为0.9999、0.9991、0.9998,检出限为0.001-0.012mg/mL,样品平均回收率在86.5％-109.08％之间,精密度和重现性试验RSD值均小于5％.该方法前处理方法简单、耗时少,样品损失少,分离效果好,能够实现乳中三种蛋白的同时微量检测.

摘要： 建立一种用凝胶过滤色谱测定婴儿配方乳粉中α-乳白蛋白的方法.色谱条件:色谱柱为TSK-2000SWXL(7.8×300mm),流动相为6mol/L盐酸胍溶液,检测波长280nm.结果表明:α-乳白蛋白的检出限为2.8μg/mL,回收率为93％～106％,RSD为3.2％.本方法结果准确、操作简单,适于婴幼儿配方乳粉中α-乳白蛋白的测定.

摘要： 建立一种用凝胶过滤色谱测定婴儿配方乳粉中α-乳白蛋白的方法.色谱条件:色谱柱为TSK-2000SWXL(7.8×300mm),流动相为6mol/L盐酸胍溶液,检测波长280nm.结果表明:α-乳白蛋白的检出限为2.8μg/mL,回收率为93％～106％,RSD为3.2％.本方法结果准确、操作简单,适于婴幼儿配方乳粉中α-乳白蛋白的测定.

摘要： 建立一种用凝胶过滤色谱测定婴儿配方乳粉中α-乳白蛋白的方法.色谱条件:色谱柱为TSK-2000SWXL(7.8×300mm),流动相为6mol/L盐酸胍溶液,检测波长280nm.结果表明:α-乳白蛋白的检出限为2.8μg/mL,回收率为93％～106％,RSD为3.2％.本方法结果准确、操作简单,适于婴幼儿配方乳粉中α-乳白蛋白的测定.

摘要： 建立一种用凝胶过滤色谱测定婴儿配方乳粉中α-乳白蛋白的方法.色谱条件:色谱柱为TSK-2000SWXL(7.8×300mm),流动相为6mol/L盐酸胍溶液,检测波长280nm.结果表明:α-乳白蛋白的检出限为2.8μg/mL,回收率为93％～106％,RSD为3.2％.本方法结果准确、操作简单,适于婴幼儿配方乳粉中α-乳白蛋白的测定.

摘要： 牛乳含有丰富的营养物质，是除母乳外婴儿最理想的食品来源。但是，部分婴儿对牛乳会产生过敏反应。通过美拉德反应对乳清蛋白进行糖基化改性是一种比较新的方法，但已经成为食品中研究的热点。本文对牛乳中主要过敏原的结构特征、致敏性、表位等进行了阐述，详细的介绍了乳清蛋白中α-乳白蛋白和β-乳球蛋白糖基化改性的国内外研究进展。糖基化法作为降低乳清蛋白致敏性的方法之一，能较好地保持其原有结构和功能特性。

摘要： 本发明涉及酶解α‑乳白蛋白多肽、酶解α‑乳白蛋白多肽纳米胶束及其制备。本发明以一定纯度的α‑乳白蛋白为原料，在特定的酶存在条件下进行酶解制得较为理想的酶解α‑乳白蛋白多肽；采用该酶解α‑乳白蛋白多肽可制得一种稳定的小粒径酶解α‑乳白蛋白多肽纳米胶束，原料成本低，易获得，且制备工艺简单；而胶束粒径较小，分散性好，生物相容性好，稳定性高；该胶束可以包埋疏水性物质，以该胶束为载体可以制成能够包埋疏水性物质的负载型酶解α‑乳白蛋白多肽纳米胶束，该负载型纳米胶束粒径小、稳定性好、封装效率高且无毒。

摘要： 本发明公开了一种α‑乳白蛋白粉和/或β‑乳球蛋白粉的制备方法及产品。该制备方法包括如下步骤：①将乳清调节pH值至6.8～7.2后，采用孔径为100kDa的膜材料进行超滤得渗透液A；②渗透液A调节pH值至3.5～5.0，采用孔径为30kDa的膜材料进行恒定体积洗滤，分别收集分离过程中渗透液B和截留液；③将渗透液B进行真空浓缩、喷雾干燥，即可得到α‑乳白蛋白粉，和/或，将所述的截留液进行真空浓缩、喷雾干燥，即可得到β‑乳球蛋白粉。本发明的α‑La蛋白粉纯度至少85％以上、β‑Lg蛋白粉纯度至少70％以上，制备方法简单，易于工业化生产，减少了膜污染，提高膜分离效率，在食品加工中具有广泛的应用前景。

摘要： 本发明提供了一种优化了氨基酸序列的α‑乳白蛋白，所述α‑乳白蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还提供了编码该α‑乳白蛋白的基因、插入有该基因的表达载体、高表达该α‑乳白蛋白的酵母菌株、制备该乳白蛋白的方法以及一种人造乳。通过上述技术方案，本发明得到了致敏性几乎消失的α‑乳白蛋白，并且还能够使得α‑乳白蛋白在毕赤酵母中高表达，因此可以用于制备具有更高应用价值的人造乳制品。

摘要： 本发明涉及酶解α‑乳白蛋白多肽、酶解α‑乳白蛋白多肽纳米胶束及其制备。本发明以一定纯度的α‑乳白蛋白为原料，在特定的酶存在条件下进行酶解制得较为理想的酶解α‑乳白蛋白多肽；采用该酶解α‑乳白蛋白多肽可制得一种稳定的小粒径酶解α‑乳白蛋白多肽纳米胶束，原料成本低，易获得，且制备工艺简单；而胶束粒径较小，分散性好，生物相容性好，稳定性高；该胶束可以包埋疏水性物质，以该胶束为载体可以制成能够包埋疏水性物质的负载型酶解α‑乳白蛋白多肽纳米胶束，该负载型纳米胶束粒径小、稳定性好、封装效率高且无毒。

摘要： 本发明公开了一种检测α‑乳白蛋白、β‑乳球蛋白和乳铁蛋白的核酸适配体探针，属于食品分析的免疫分析技术领域，本发明公开的检测α‑乳白蛋白、β‑乳球蛋白和乳铁蛋白的核酸适配体探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.1～3所示。本发明方法可以快速准确的同时测定α‑乳白蛋白、β‑乳球蛋白和乳铁蛋白的含量，灵敏度高，检测时间短，操作简单易行。

摘要： 本发明公开了一种同时检测α‑乳白蛋白、β‑乳球蛋白和乳铁蛋白含量的方法，包括以下步骤：利用生物芯片点样仪在芯片载体上固定α‑乳白蛋白、β‑乳球蛋白和乳铁蛋白，再封闭载体基片上没有结合点样物的活性基团；在生物芯片的部分反应孔内加入α‑乳白蛋白、β‑乳球蛋白和乳铁蛋白的混合标准溶液，在剩余反应孔内分别加入待测样品溶液，继续向所有反应孔中依次加入α‑乳白蛋白、β‑乳球蛋白和乳铁蛋白所对应的抗体和标记二抗，反应后洗涤液洗涤；所有反应孔内加入显色剂，显色反应；反应后终点颜色的深浅可目视定性判断样品中待测物的含量，再使用仪器利用外标曲线定量计算待测物溶液中α‑乳白蛋白、β‑乳球蛋白和乳铁蛋白的含量。本发明方法可以快速准确的同时测定α‑乳白蛋白、β‑乳球蛋白和乳铁蛋白的含量，灵敏度高，检测时间短，操作简单易行。

摘要： 本发明公开了一种α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和β-酪蛋白三联检测卡及其检测方法，属于乳产品检测技术领域。本发明三联检测卡外壳内有测试条，由支承背板上依次粘贴样品垫、数段胶体金膜、硝酸纤维素膜和吸水膜所组成，硝酸纤维素膜上有3条检测带，分别含α-乳白蛋白蛋白质偶联物、β-乳球蛋白蛋白质偶联物、β-酪蛋白蛋白质偶联物，另有1条含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带。本发明优点是能同时检测出牛奶中α-乳白蛋白、β-乳球蛋白和β-酪蛋白是否达标。检测卡易于制备且节省检测费用，使用方便快速，结果准确。

摘要： 本发明涉及一种共表达分子伴侣蛋白生产α‑乳白蛋白的菌株及其应用，该菌株表达了氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的人α‑乳白蛋白、氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的α‑factor信号肽和分子伴侣蛋白，分子伴侣蛋白选自内质网氧化还原酶1ERO1、Atf/CREB1同源蛋白HAC1、重连结合蛋白BIP、内质网到高尔基体的转运因子ERV29、毕赤酵母二硫键异构酶PpPDI、人二硫键异构酶A1hPDIA1、人二硫键异构酶A3hPDIA3、人二硫键异构酶A4hPDIA4、人二硫键异构酶A5hPDIA5和人二硫键异构酶A6hPDIA6中的一种，优选分子伴侣人二硫键异构酶A3hPDIA3。本发明的菌株实现了α‑乳白蛋白产量的提高，摇瓶发酵产量达到6.0mg/L，在3L发酵罐发酵后，α‑乳白蛋白最高产量为56.3mg/L。

摘要： 本发明涉及一种含IgG、α‑乳白蛋白和乳铁蛋白的调制乳粉及其制备方法，含IgG、α‑乳白蛋白和乳铁蛋白的调制乳粉，由以下原料按照质量份数制成：含IgG的分离乳清蛋白粉383~408份，含乳铁蛋白的分离乳清蛋白粉37~42份，含α‑乳白蛋白的乳清蛋白粉122~134份，无水葡萄糖187~204份，全脂乳粉164~176份，水苏糖48~52份，异构化乳糖3.4~4.8份，L‑抗坏血酸0.7~0.9分，牛磺酸0.1~0.3份。本发明在不改变营养成分和生化组成的前提下，让异构化乳糖和水苏糖颗粒和乳清蛋白粉颗粒物理性结合在一起，以阻止乳清蛋白颗粒的聚合，以及阻止乳清蛋白粉与其他蛋白粉的结合，以提升粉剂的流动性，溶解性，溶解速度，生产效率，和用户口感。

摘要： 本发明公开了一种同时检测乳制品中β‑乳球蛋白和a‑乳白蛋白两种过敏原的方法，属于生物免疫分析领域。该方法将β‑乳球蛋白和α‑乳白蛋白标准品等量混合作为包被抗原，抗β‑乳球蛋白抗体和α‑乳白蛋白抗体等量混合成混合抗血清作为一抗，羊抗兔IgG辣根过氧化物酶(HRP)标记抗体为二抗，四甲基联苯胺(TMB)作为底物显色液，然后建立灵敏、特异性强的间接竞争ELISA，最后对结果进行数据分析。该方法不仅具有ELISA法的灵敏度高、特异性强、重复性好特点，而且最大优势在于省时省力，一次可包被两种抗原，并同时检测两种抗原性，突破以往检测单一过敏原的模式，可用于同时检测乳制品中过敏原β‑乳球蛋白和a‑乳白蛋白的总含量。