XIAP

摘要： 目的 探讨Caspase-9、XIAP与非小细胞肺癌(NSCLC)的相关性.方法 采用免疫组织化学方法和构建慢病毒表达质粒由EF1α启动子控制目的基因检测Caspase-9、XIAP蛋白在NSCLC中的表达情况.结果 XIAP在NSCLC中的阳性表达率明显高于癌旁肺组织,而Caspase-9的阳性表达率明显低于癌旁肺组织(P<0.05),和转染结果相吻合(P<0.05).结论 Caspase-9的表达则相应下调,而XIAP在NSCLC中的表达明显上调.XIAP在NSCLC中的阳性表达与Caspase-9的表达呈负相关,两者表达的情况可能在NSCLC的发生、发展中起重要的作用.

摘要： 目的探讨miR-200c-3p对缺氧复氧心肌细胞凋亡的影响及作用机制。方法构建缺氧复氧(H/R)H9c2细胞。运用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测细胞中miR-200c-3p、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)信使核糖核酸(mRNA)的表达。将H9c2细胞分为H/R+anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、H/R+anti-miR-200c-3p组(转染anti-miR-200c-3p)、H/R+pcDNA组(转染pcDNA)、H/R+pcDNA-XIAP组(转染pcDNA-XIAP)、H/R+anti-miR-200c-3p+si-NC组(共转染anti-miR-200c-3p和si-NC)、H/R+anti-miR-200c-3p+si-XIAP组(共转染anti-miR-200c-3p和si-XIAP),用脂质体法转染至H9c2细胞,再进行缺氧复氧处理。免疫印迹(Western blot)、噻唑蓝(MTT)、流式细胞术检测细胞中XIAP、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase-3)、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(cleaved Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病2 X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2)的表达、细胞增殖、细胞凋亡;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞中miR-200c-3p与XIAP的结合力。结果成功构建缺氧复氧H9c2细胞;与正常培养的H9c2细胞比较,H/R组H9c2细胞中miR-200c-3p表达明显上调,XIAP表达明显下调;抑制miR-200c-3p、过表达XIAP均可抑制H/R H9c2细胞的凋亡,下调cleaved Caspase-3、Bax,上调Bcl-2;miR-200c-3p可显著抑制XIAP 3′UTR野生型报告基因活性,并负向调控XIAP的表达;敲减XIAP可逆转抑制miR-200c-3p对H/R H9c2细胞的凋亡抑制作用。结论miR-200c-3p可诱导缺氧复氧心肌细胞的凋亡,其机制与靶向XIAP有关,可为心血管疾病的治疗提供新靶点。

摘要： 目的:探讨凋亡抑制蛋白XIAP(X-linked inhibitor of apoptosis protein)在急性白血病患者中的表达及其临床意义.方法:酶联免疫吸附法检测64例急性白血病患者血清XIAP水平.结果:初发急性白血病患者血清XIAP水平明显高于正常对照组及完全缓解组(P0.05).结论:XIAP水平的变化有助于急性白血病病情及疗效的判断,可作为急性白血病疗效观察的一个新指标.

摘要： 目的 探讨XIAP在H2 O2诱导牙周膜细胞凋亡的作用机制.方法 不同浓度的H2O2刺激牙周膜细胞,Western blot检测XIAP和凋亡相关蛋白的表达;过表达及沉默XIAP后,给予250 μM H2O2作用72 h,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测Akt、JNK2和GSK3β,免疫荧光检测Akt、p-Akt,激光共聚焦显微镜检测c-jun、Ap-1在细胞中的定位和表达.结果 250 μM H2O2作用72 h后,XIAP蛋白显著下降(P＜0.05);随着作用时间的增加,细胞内Caspase-3、Caspase-8、PTEN蛋白水平显著升高(P＜0.05);250 μM的H2 O2作用过表达XIAP与PDLC 72 h后,过表达XIAP细胞内JNK2、Akt、p-Akt及GSK3β蛋白显著高于PDLC;过表达组细胞凋亡率显著下降,c-jun以及AP-1蛋白的表达显著上升(P＜0.05);沉默XIAP后,细胞凋亡率显著上升,JNK2、Akt、p-Akt及GSK3β蛋白表达水平显著下降(P＜0.05).结论 H2 O2通过诱导XIAP表达水平的下降,抑制XIAP与凋亡执行蛋白Caspase-3的结合,致使牙周膜细胞凋亡的发生;AKT、JNK2、GSK3β蛋白在H2 O2诱导牙周膜细胞凋亡的机制中起着重要作用.

摘要： 目的 研究益气解毒方抑制鼻咽癌CNE2细胞增殖的效应.方法 采用实时无标记细胞功能分析技术(real-time unla-beled cell function analysis technique,RTCA)动态监测不同浓度(0.125、0.250、0.500、1.000 mg/mL的益气解毒方水提物对人鼻咽癌CNE2细胞增殖的影响;采用CCK-8法检测不同浓度益气解毒方水提物对人鼻咽癌CNE2细胞增殖能力的影响;通过高通量细胞成像多功能检测系统Cytation5监测不同浓度益气解毒方水提物对鼻咽癌CNE2细胞增殖形态的影响;采用Western Blot技术检测不同浓度益气解毒方水提物对鼻咽癌CNE2细胞增殖相关蛋白Survivin、XIAP、PCNA表达的影响.结果 RTCA和CCK-8法实验结果显示,与空白对照组比较,益气解毒方水提物可以明显抑制鼻咽癌CNE2细胞的增殖,而且随着益气解毒方水提物的作用时间越长,其抑制效应越显著(P<0.05);Cytation5结果显示,与空白对照组比较,不同浓度益气解毒方水提物处理CNE2细胞后,细胞形态发生了明显变化,且浓度越高,作用时间越长,细胞膜皱缩,细胞核质浓缩、破碎更明显;Western Blot结果显示,与空白对照组比较,益气解毒方水提物能明显抑制CNE2细胞中增殖相关蛋白Survivin、XIAP、PCNA的表达(P<0.05).结论 益气解毒方水提物能明显抑制鼻咽癌细胞增殖,该效应与其抑制增殖相关蛋白Survivin、XIAP、PCNA的表达有关.

摘要： 本发明涉及肿瘤的靶向治疗药物领域，尤其涉及一种基于靶向survivin‑XIAP复合物的抗肿瘤多肽Sur‑X，及其在包括结直肠癌和胃癌在内的多种肿瘤治疗中的应用。本发明的抗肿瘤多肽Sur‑X通过抑制survivin‑XIAP复合物的形成迅速高效地诱导结直肠癌和胃癌细胞死亡，而对人类正常细胞无影响，从而发挥特异性靶向肿瘤细胞的治疗作用。另外，该多肽易于在体外合成，方便临床应用。因此，多肽Sur‑X具有潜在的商业产业价值，可广泛应用于肿瘤靶向治疗技术领域之中。

摘要： 本发明属于基因工程技术领域，具体是人免疫缺陷病毒HIV的TAT基因编码的蛋白转导结构域与X-连锁凋亡抑制蛋白核苷酸序列融合形成的融合蛋白，该融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。与现有技术相比，本发明先利用大肠杆菌偏爱密码子对核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示的原XIAP基因进行优化，使其在大肠杆菌高效表达，用人免疫缺陷病毒HIV的TAT基因编码的蛋白转导结构域的转导能力来弥补X-连锁凋亡抑制蛋白不能跨过血脑屏障进入脑内发挥抗凋亡作用的不足，使得该基因的最终表达产物能够进入脑组织细胞中，产生抵抗细胞凋亡作用，用于中枢神经系统疾病的治疗与研究。

摘要： 本发明涉及一种XIAP靶基因siRNA(小干扰RNA)表达模板。发明设计了一段敲除人凋亡抑制基因XIAP(X-linked Inhibitor ofApoptosis Protein)的siRNA表达模板，插入到siRNA表达载体pRNAT-U6.1/Neo中，得到重组表达质粒pRNA-XIAP，通过转染肝癌细胞，产生靶向有致癌作用的细胞凋亡抑制基因XIAP的siRNA；经序列测定，它由70个核苷酸组成，与设计相符；经MTT法、RT-PCR、wester blotting、免疫组化、细胞流式法等体外实验，表明pRNA-XIAP可明显抑制XIAP的表达，从而抑制肝癌细胞HepG2的增殖，促进其调亡，本发明为研制治疗肿瘤的基因药物提供了新的途径。

摘要： 本发明涉及肿瘤的靶向治疗药物领域，尤其涉及一种基于靶向survivin‑XIAP复合物的抗肿瘤多肽Sur‑X，及其在包括结直肠癌和胃癌在内的多种肿瘤治疗中的应用。本发明的抗肿瘤多肽Sur‑X通过抑制survivin‑XIAP复合物的形成迅速高效地诱导结直肠癌和胃癌细胞死亡，而对人类正常细胞无影响，从而发挥特异性靶向肿瘤细胞的治疗作用。另外，该多肽易于在体外合成，方便临床应用。因此，多肽Sur‑X具有潜在的商业产业价值，可广泛应用于肿瘤靶向治疗技术领域之中。

摘要： 本发明涉及医学诊断技术领域，公开了一种检测XIAP蛋白的试剂盒及其应用。本发明所述试剂盒包括与抗人XIAP蛋白抗体同源种属的血清全IgG抗体和红细胞裂解液。本发明采用裂解红细胞方式对全血进行XIAP蛋白检测，通过与抗人XIAP蛋白抗体同源种属的血清全IgG抗体对待测样本进行非特异性位点的封闭，降低了XIAP蛋白流式荧光检测中的非特异性混杂信号，整个检测过程采样量小，对患者创伤小，避免了采用单个核细胞检测的长耗时，并且由于消除了抗体非特异性结合的情形而具备较高的检测准确度。

摘要： 本发明属于基因工程技术领域，具体是人免疫缺陷病毒HIV的TAT基因编码的蛋白转导结构域与X-连锁凋亡抑制蛋白核苷酸序列融合形成的融合蛋白，该融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。与现有技术相比，本发明先利用大肠杆菌偏爱密码子对核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示的原XIAP基因进行优化，使其在大肠杆菌高效表达，用人免疫缺陷病毒HIV的TAT基因编码的蛋白转导结构域的转导能力来弥补X-连锁凋亡抑制蛋白不能跨过血脑屏障进入脑内发挥抗凋亡作用的不足，使得该基因的最终表达产物能够进入脑组织细胞中，产生抵抗细胞凋亡作用，用于中枢神经系统疾病的治疗与研究。

摘要： 本发明涉及一种XIAP靶基因siRNA(小干扰RNA)表达模板。发明设计了一段敲除人凋亡抑制基因XIAP(X－linked Inhibitor of Apoptosis Protein)的siRNA表达模板，插入到siRNA表达载体pRNAT－U6.1/Neo中，得到重组表达质粒pRNA－XIAP，通过转染肝癌细胞，产生靶向有致癌作用的细胞凋亡抑制基因XIAP的siRNA；经序列测定，它由70个核苷酸组成，与设计相符；经MTT法、RT－PCR、wester blotting、免疫组化、细胞流式法等体外实验，表明pRNA－XIAP可明显抑制XIAP的表达，从而抑制肝癌细胞HepG2的增殖，促进其调亡，本发明为研制治疗肿瘤的基因药物提供了新的途径。