小梁细胞

摘要： 目的 小梁网是由小梁薄片和其上的小梁细胞构成的网状结构,它对眼压和房水流出具有重要的调节作用,同时小梁细胞的力学特性和生物学特性与房水流出阻力密切相关.因此本研究主要探讨体外培养的大鼠小梁细胞的生物学特性并应用原子力显微镜测量其弹性模量,为今后建立高眼压动物模型并探究原发性开角型青光眼的发病机制提供理论依据.方法 取3只SD大鼠双眼小梁网组织,应用消化法对小梁细胞进行体外混合培养.倒置相差显微镜和免疫组化SABC染色的方法确定小梁细胞并观察其生物学特性.应用原子力显微镜压痕方法测量细胞的弹性模量.结果 大鼠小梁细胞10 d左右达到融合,细胞形态多样,免疫组化检测结果显示层粘连蛋白、纤维连接蛋白和神经元特异性烯醇化酶染色阳性.小梁细胞弹性模量为1.02 kPa±0.66 kPa.结论消化法成功培养出大鼠小梁细胞,并利用原子力显微镜测得小梁细胞的弹性模量,为之后研究青光眼小梁细胞的特性奠定基础.

摘要： 目的:探讨不同浓度白细胞介素-6(IL-6)刺激下体外培养的牛眼小梁细胞中纤维连接蛋白的表达变化.方法:采用组织块培养法取新鲜牛眼的小梁网组织,提取并培养第3代牛眼小梁细胞,采用细胞形态学对细胞进行鉴定.经终浓度为0、0.1、0.5、1ng/mL的IL-6药物刺激24h后,采用荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹法检测各浓度IL-6刺激下牛眼小梁细胞中FN mRNA和蛋白的表达.结果:培养出的牛眼小梁细胞符合第3代牛眼小梁细胞形态特征.实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹法显示,不同浓度IL-6刺激下的牛眼小梁细胞所产生的FN mRNA量分别为1.000±0.000、0.213±0.004、0.056±0.001、0.019±0.002,FN蛋白表达量分别为1.167±0.012、0.662±0.009、0.238±0.011、0.061±0.011,均呈下调趋势(rs=-0.713、-0.901,均P<0.05),4组间FN mRNA和蛋白表达均有差异(P<0.05).结论:体外培养的牛眼小梁细胞在外源性IL-6刺激下影响FN mRNA和蛋白的表达,且IL-6浓度与蛋白表达呈负相关性,推测IL-6可能通过影响FN基因与蛋白的表达,进而改变小梁网组织结构.

摘要： 目的 探讨瞬时受体电位M7(TRPM7)在地塞米松诱导的小梁细胞骨架重塑中的作用.方法 采用人小梁细胞株进行体外培养,第3～6代小梁细胞用于实验.采用免疫荧光检测技术对TRPM7在小梁细胞中的表达进行定位.在细胞培养基中加入0.2 mg地塞米松处理小梁细胞4d,终浓度分别为1×10-5、1×10-6和1×10-7 mol/L,采用Western blot法检测细胞中TRPM7蛋白在细胞中的表达量.将培养的小梁细胞分为正常对照组、siRNA转染组、TRPM7-siRNA1转染组和TRPM7-siRNA2转染组,采用Western blot法检测细胞中TRPM7和p-cofilin相对蛋白表达量.将培养的细胞分为正常对照组、TRPM7-siRNA转染组、地塞米松处理组和TRPM7-siRNA转染+地塞米松组,采用免疫荧光技术法观察各组细胞中细胞骨架蛋白Phalloidin和黏着斑蛋白Vinculin的表达.将培养的细胞分为正常对照组、地塞米松处理组、siRNA转染组、TRPM7-siRNA转染组、TRPM7抑制剂2-APB处理组和钙离子螯合剂EGTA处理组,采用免疫荧光技术测定各组细胞内钙离子荧光强度变化. 结果 TRPM7主要分布于小梁细胞的细胞膜,TRPM7蛋白相对表达量随着地塞米松剂量的增加而逐渐下降,组间总体比较差异有统计学意义(F=4.210,P＜0.05),1×10-5 mol/L地塞米松组细胞中TRPM7蛋白表达量明显低于正常对照组,差异有统计学意义(P=0.011).与正常对照组和siRNA转染组比较,TRPM7-siRNA1组和TRPM7-siRNA2组细胞中TRPM7蛋白相对表达量均明显降低,差异均有统计学意义(均P＜0.05).倒置显微镜下可见地塞米松处理组和TRPM7-siRNA转染组细胞突起减少,细胞体稍变大.免疫荧光法显示地塞米松处理组小梁细胞骨架张力纤维和黏着斑蛋白增多,TRPM7-siRNA转染组细胞中张力纤维变少、变细.与正常对照组和siRNA转染组比较,地塞米松处理组和TRPM7-siRNA转染组细胞内钙离子荧光强度变弱.Western blot检测显示,TRPM7-siRNA转染组细胞中p-confilin蛋白相对表达量明显低于siRNA转染组(0.317±0.031 vs.0.092±0.071),差异有统计学意义(t=5.030,P=0.007). 结论 高剂量地塞米松作用后可导致小梁细胞中TRPM7蛋白表达量下调,TRPM7蛋白下调可能通过使小梁细胞骨架微丝蛋白解聚和细胞内钙离子浓度的降低而参与地塞米松诱导的小梁细胞中细胞骨架的重塑.%Objective To investigate the effects of transient receptor potential melastatin (TRPM) 7 on dexamethasone (Dex)-mediated cytoskeleton remodeling in human trabecular meshwork.Methods Human trabecular meshwork cells (HTMs) were primarily cultured and the cells of generation 3 to 6 were used in this study.The expression of TRPM7 protein in the cells was located using immunofluorescence technology.Dex at the dose of 0.2 mg was added into culture medium for 4 days with the final concentration of 1×10-5,1×10-6 and 1×10-7 mol/L,respectively.Western blot assay was employed to detect the relative expression level of TRPM7 protein.Cultured cells were divided into non-transfected group,siRNA transfected group,TRPM7-siRNA1 transfected group and TRPM7-siRNA2 transfected group,and the expressions of TRPM7 protein and p-cofilin protein in the cells were assayed by Western blot method.Cultured cells were divided into normal control group,Dex-treated group,siRNA transfected group and TRPM7-siRNA transfected group,and the expression of phalloidin (a cytoskeletal protein) and Vinculin (focal adhesion protein) was detected by immunofluorescence staining.In addition,cultured cells were divided into normal control group,Dex-treated group,2-APB (a Ca2+ inhibitor) treated group,ethylene glycol tetraacetic acid (EGTA) (a calcium chelator)-treated group,TRPM7-siRNA transfected group and TRPM7-siRNA+Dex group,and the [Ca2+] i in the cells was observed by Fluo-3AM immunofluorescence staining.Western blot assay was used to detect the expression of p-cofilin in the cells.Results TRPM7 was positively expressed on the cell membrane.The relative expression of TRPM7 was gradually reduced with an increase of Dex dose (F=4.210,P＜0.05),and the expression of TRPM7 was significantly decreased in 1 × 10-5 mol/L Dex group compared with the normal control group (P＜ 0.05).Western blot assay revealed that the relative expression levels of TRPM7 in the TRPM7-siRNA1 and TRPM7-siRNA2 group were significantly lower than those of non-siRNA transfected group and siRNA transfected group (all at P＜0.05).In the Dex-treated group and TRPM7-siRNA transfected group,the cells were enlarged in size with the lessened processes in comparison with the normal control group.Immunofluorescence staining showed that the actin fiber and vinculin increased in the Dex-treated group,and more spread but depolymerized actin fiber was seen in the TRPM7-siRNA transfected group.Compared with the normal control group,the fluorescence intensity of [Ca2×] i was weak in the Dex-treated group and TRPM7-siRNA transfected group.The relative expression levels of p-confilin protein was lower in the TRPM7-siRNA transfected group than that in the siRNA transfected group (0.317 ±0.031 vs.0.092±0.071) (t =5.030,P =0.007).Conclusions Dex induces the downregulation of TRPM7 expression in HTMs.The downregulation of TRPM7 probably participates in Dex-induced cytoskeletal remodeling by causing the depolymerization of actin cytoskeleton and reduction of [Ca2+] i in HTMs.

摘要： 目的探讨瞬时受体电位M7（TRPM7）在地塞米松诱导的小梁细胞骨架重塑中的作用。方法采用人小梁细胞株进行体外培养，第3～6代小梁细胞用于实验。采用免疫荧光检测技术对TRPM7在小梁细胞中的表达进行定位。在细胞培养基中加入0．2mg地塞米松处理小梁细胞4d，终浓度分别为1×10^-5、1×10^-6和1×10^-7mol／L，采用Western blot法检测细胞中TRPM7蛋白在细胞中的表达量。将培养的小梁细胞分为正常对照组、siRNA转染组、TRPM7-siRNA1转染组和TRPM7-siRNA2转染组，采用Western blot法检测细胞中TRPM7和p-cofilin相对蛋白表达量。将培养的细胞分为正常对照组、TRPM7-siRNA转染组、地塞米松处理组和TRPM7-siRNA转染＋地塞米松组，采用免疫荧光技术法观察各组细胞中细胞骨架蛋白Phalloidin和黏着斑蛋白Vinculin的表达。将培养的细胞分为正常对照组、地塞米松处理组、siRNA转染组、TRPM7-siRNA转染组、TRPM7抑制剂2-APB处理组和钙离子螯合剂EGTA处理组，采用免疫荧光技术测定各组细胞内钙离子荧光强度变化。结果TRPM7主要分布于小梁细胞的细胞膜，TRPM7蛋白相对表达量随着地塞米松剂量的增加而逐渐下降，组间总体比较差异有统计学意义（F=4．210，P〈0．05），1×10^-4mol／L地塞米松组细胞中TRPM7蛋白表达量明显低于正常对照组，差异有统计学意义（P=0．011）。与正常对照组和siRNA转染组比较，TRPM7-siRNAl组和TRPM7-siRNA2组细胞中TRPM7蛋白相对表达量均明显降低，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。倒置显微镜下可见地塞米松处理组和TRPM7-siRNA转染组细胞突起减少，细胞体稍变大。免疫荧光法显示地塞米松处理组小梁细胞骨架张力纤维和黏着斑蛋白增多，TRPM7-siRNA转染组细胞中张力纤维变少、变细。与正常对照组和siRNA转染组比较，地塞米松处理组和TRPM7-siRNA转染组细胞内钙离子荧光强度变弱。Westernblot检测显示，TRPM7-siRNA转染组细胞中p-confilin蛋白相对表达量明显低于siRNA转染组（0．317±0．031vs．0．092±0．071），差异有统计学意义（t=5．030，P=0．007）。结论高剂量地塞米松作用后可导致小梁细胞中TRPM7蛋白表达量下调，TRPM7蛋白下调可能通过使小梁细胞骨架微丝蛋白解聚和细胞内钙离子浓度的降低而参与地塞米松诱导的小梁细胞中细胞骨架的重塑。

摘要： Objective To investigate the protection and mechanism of procyanidins (PC) against H2O2 induced oxidative damage of human trabecular meshwork cells (HTMC) in order to provide an experimental foundation for glaucoma clinical treatment.Methods HTMC were cultured and then divided randomly into 5 groups.As untreated group:Normal cultured HTMC;Control group:Normal cultured HTMC + H2O2 (500 μmol · L-1 for 1 hour);Treated group:Normal cultured HTMC + H2O2 (500 μmol ·L-1 for 1 hour) + PC (PC fmal concentrations were 0.02 g · L-1,0.05 g · L-1,0.10 g· L-1).Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (PCR) was used to investigate the expression of mitochondrial complex Ⅰ mRNA.Results Compared with untreated group (1.000 0 ± 0.000 0),the differences of mitochondrial complexⅠ mRNA expression in 0.02 g · L-1 PC (0.401 3 ±0.010 3),0.05 g · L-1 PC (0.791 5 ± 0.008 5) groups were statistically significant (all P ＜ 0.01),but the 0.10 g ·L-1 PC group (1.043 0 ± 0.062 2) had no significant differences (P ＞ 0.05).The differences between PC treated groups and control group were statistically significant (P ＜0.01),which showed HTMC treated with PC could increase the expression of mitochondrial complex Ⅰ mRNA.The differences in each PC treated groups were statistically significant (P ＜ 0.01),which showed the expression of mitochondrial complex Ⅰ mRNA were increased along with the concentration of PC gradually increased.Conclusion Exogenetic PC can increase the expression of mitochondrial complex Ⅰ mRNA in the oxidative damaged HTMC,and in a certain range of concentration,the protective effects of PC have the positive relationship of dose-effect,which suggest that PC may be a good candidate for further study of the clinical treatment of glaucoma.%目的 研究原花青素(Procyanidins,PC)对H2O2诱导人眼小梁细胞(human trabecular meshwork cells,HTMC)氧化应激的抗氧化作用,为青光眼的临床治疗提供实验依据.方法 将正常HTMC进行细胞传代后随机分为5组.未处理组:正常培养的HTMC;对照组:正常培养的HTMC+ H2O2(500 μmol·L-1处理1h);PC组:正常培养的HTMC+ H2O2(500 μmol·L-1处理1h) +PC(浓度分别为0.02 g·L-1、0.05 g· L-1、0.10 g· L-1).应用实时荧光定量PCR方法检测线粒体复合物Ⅰ mRNA的表达.结果 与未处理组(1.000 0±0.000 0)相比,0.02 g· L-1 PC组(0.401 3±0.010 3)和0.05 g· L-1 PC组(0.791 5±0.008 5)线粒体复合物Ⅰ mRNA表达差异有统计学意义(均为P＜0.01),而0.10g·L-1 PC组(1.043 0 ±0.062 2)差异无统计学意义(P＞0.05);与对照组(0.095 0±0.006 5)相比,各PC处理组线粒体复合物Ⅰ mRNA表达均增加,差异均有统计学意义(均为P＜0.01);不同浓度PC组间随PC浓度增加线粒体复合物Ⅰ mRNA表达增加,各PC浓度组组间差异有统计学意义(P＜0.01).结论 外源性PC可以增加氧化应激HTMC线粒体复合物I mRNA的表达,有较强的抗氧化作用,并在一定范围内随着浓度的增加其抗氧化作用逐渐增强,PC在青光眼的临床治疗中的作用值得进一步研究.

摘要： 背景 研究证实莱菔硫烷（SFN）可以激活多条通路,促进机体内抗氧化蛋白的表达.硫氧还蛋白（Trx）是维持细胞内氧化还原稳态的重要抗氧化蛋白之一. 目的 研究SFN对体外培养的牛眼小梁细胞内Trx表达的影响及其机制.方法体外培养牛眼小梁细胞并进行形态学观察,取第3代培养的牛眼小梁细胞,分别加入终浓度为0、10、20和30 μmol/L SFN培养30 min,应用实时荧光定量PCR技术检测细胞内Trx mRNA的表达.将细胞按照随机抽样的方法分为6个组,即空白对照组、LY294002组、U0126组、SFN组、LY294002＋ SFN组和U0126＋SFN组.采用Western blot法检测各组细胞中Nrf2蛋白和Trx蛋白的相对表达量.结果 体外成功培养牛眼小梁细胞.不同浓度SFN干预下,细胞Trx mRNA相对表达量总体比较差异有统计学意义（F=88.090,P＜0.01）.LY294002＋ SFN组、U0126＋SFN组和SFN组细胞中Trx蛋白和Nrf2蛋白相对表达量显著高于空白对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）.LY294002＋ SFN组和U0126＋SFN组细胞中Trx蛋白和Nrf2蛋白相对表达量显著高于SFN组,差异均有统计学意义（均P＜0.01）. 结论 SFN可通过磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）通路与丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）/细胞外调节蛋白激酶1/2（ERK1/2）通路活化Nrf2,促进小梁细胞Trx mRNA及其蛋白的合成,保护细胞抵抗氧化应激损伤.

摘要： 背景 研究证实莱菔硫烷(SFN)可以激活多条通路,促进机体内抗氧化蛋白的表达.硫氧还蛋白(Trx)是维持细胞内氧化还原稳态的重要抗氧化蛋白之一. 目的 研究SFN对体外培养的牛眼小梁细胞内Trx表达的影响及其机制.方法体外培养牛眼小梁细胞并进行形态学观察,取第3代培养的牛眼小梁细胞,分别加入终浓度为0、10、20和30 μmol/L SFN培养30 min,应用实时荧光定量PCR技术检测细胞内Trx mRNA的表达.将细胞按照随机抽样的方法分为6个组,即空白对照组、LY294002组、U0126组、SFN组、LY294002+ SFN组和U0126+SFN组.采用Western blot法检测各组细胞中Nrf2蛋白和Trx蛋白的相对表达量.结果 体外成功培养牛眼小梁细胞.不同浓度SFN干预下,细胞Trx mRNA相对表达量总体比较差异有统计学意义(F=88.090,P＜0.01).LY294002+ SFN组、U0126+SFN组和SFN组细胞中Trx蛋白和Nrf2蛋白相对表达量显著高于空白对照组,差异均有统计学意义(均P＜0.01).LY294002+ SFN组和U0126+SFN组细胞中Trx蛋白和Nrf2蛋白相对表达量显著高于SFN组,差异均有统计学意义(均P＜0.01). 结论 SFN可通过磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)通路活化Nrf2,促进小梁细胞Trx mRNA及其蛋白的合成,保护细胞抵抗氧化应激损伤.%Background Recent studies have confirmed that sulforaphane (SFN) can activate multiple pathways,and promote the expression of the antioxidants in cells.Thioredoxin (Trx) plays an important role in maintaining the intracellular redox in the steady state.Objective This study was to investigate the effect and mechanism of SFN on Trx expression in bovine trabecular meshwork cells (BTMCs) cultured in vitro.Methods BTMCs were cultured in vitro and identified by morphological evaluation.The third generation of BTMCs were cultured in the medium with 0,10,20 and 30 μmol/L SFN for 30 minutes.Real-time PCR was applied to measure the expression of Trx mRNA in BTMCs.The BTMCs were randomly divided into normal control group,LY294002 group,U0126 group,SFN group,LY294002 +SFN group and U0126+SFN group.The expressions of Nrf2 protein and Trx protein in each group were measured by Western blot.Results The BTMCs was successfully cultured in vitro.The expressions of Trx mRNA were significantly different among the different concentrationss of SFN treatment (F=88.090,P＜0.01).The expressions of Trx protein and Nrf2 protein in the LY294002 +SFN group,U0126 +SFN group and SFN group were significantly higher than those in the normal control group (all at P ＜ 0.01).The expressions of Trx protein and Nrf2 protein in the LY294002+SFN group and U0126+SFN group were significantly higher than those in the SFN group (all at P＜0.01).Conelusions SFN can activate Nrf2 by phosphatidylinositol-3-kinase (PI3K)/protein kinase B (Akt) and mitogen-activated protein kinase (MAPK)/extracellular regulated protein kinases 1/2 (ERK1/2) signaling pathways,which can increase the expression level of Trx in BTMCs cultured in vitro.

摘要： 目的 检测原发性开角型青光眼(Primary Open-angle Glaucoma,POAG)患者房水及小梁网组织中Gremlin的表达.方法 取20例POAG患者房水及小梁网组织标本,取18例单纯老年性白内障的房水及5例成年人尸眼的小梁网标本作为对照组.采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定房水中Gremlin的含量,应用免疫组织化学方法检测小梁组织Gremlin的表达.结果 POAG患者房水中的Gremlin含量明显高于非POAG患者,差异具有统计学意义(P<0.05).POAG患者小梁细胞中Gremlin呈阳性表达,正常人的小梁网组织中Gremlin不表达.结论 POAG患者房水及小梁细胞中Gremlin表达明显增加,提示Gremlin在POAG发病中起重要作用.

摘要： 目的：研究地塞米松（DEX）对兔眼小梁内皮细胞（TM）和睫状体无色素上皮（NPCE）细胞水通道蛋白-1（AQP1）表达的影响。方法建立兔皮质类固醇性高眼压模型，用免疫组化和免疫荧光方法检测高眼压组与正常对照组AQP1表达水平的差异。结果实验组兔眼NPCE的AQP1表达比正常对照组增强（P＜0.05），而在TM细胞则减弱（P＜0.05）。结论地塞米松能使兔眼眼压升高，可能是通过抑制AQP1在TM的表达，并使NPCE的AQP1表达上调，这可能是皮质类固醇性青光眼的病理机制之一。%Objective To study the effects of dexamethasone (DEX) on expression of aquaporin-1 (AQP1) in rabbit eye’s trabecular meshwork (TM) and non-pigmented ciliary epithelium (NPCE) cells. Methods To establish a rabbit model of high intraocular pressure induced by corticosteroids, and to detect the difference of AQP1 expression between high intraocular pressure group and normal control group by immunohistochemistry and immunofluorescence method. Results The expression of AQP1 of NPCE in the experimental group was stronger than that in the normal control group (P<0.05), while the TM cells were decreased (P<0.05).Conclusion Dexamethasone can increase the intraocular pressure of the rabbit eyes, may be through inhibiting the expression of AQP1 in TM, and make AQP1 of NPCE expression up regulation, which may be one of the pathological mechanisms of corticosteroid glaucoma.

摘要： 通过观察糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)对体外培养牛眼小梁细胞凋亡的影响,研究AGEs与开角型青光眼(primary open angle glaucoma,POAG)之间的关系,进一步探讨糖尿病开角型青光眼的发病机制.方法：体外培养牛眼小梁细胞,通过形态学观察和神经元特异性烯醇化酶(NSE)染色对培养的细胞进行鉴定.将第3代小梁细胞接种于6孔培养板,在培养基中加入不同质量浓度(0、50μg·mL-1、100μg·mL-1、200μg·mL-1)的AGEs-BSA培养96h.

摘要： 青光眼是一种较为复杂的眼病，绝大多数患者具备的共同体征是眼压升高、青光眼性视野改变和视网膜视神经受损害。目前青光眼的主要治疗方法仍以手术或药物降眼压治疗为主。以减少疾病进行性损害的可能性。而引起眼压升高的机制相当复杂，可能包括小梁细胞外基质堆积、细胞吞噬功能下降、离子通道表达和分布异常有关.青光眼降眼压治疗后，小梁的细胞保护是应该进行的后续治疗模式。现代中、西医学者均在探索某种保护小梁细胞的有效办法，但仍然处于实验阶段，到目前为止，临床尚无保护小梁细胞的专用制剂。为了探讨中医药对青光眼小梁细胞的保护作用，作者对人眼小梁细胞的体外培养实验进行研究。

摘要： 青光眼是以进行性视神经变性和视野缺损为特征的一类综合征，位居全球不可逆性致盲眼病的第二位。原发性开角型青光眼(primary open angle glaucoma, POAG)是青光眼常见类型，其发病机制不明。近年来，随着生物学及分子生物学技术的不断发展，有病理研究结果提示小梁细胞凋亡是原发性开角型青光眼小梁组织的重要改变，细胞凋亡是一种由细胞内基因调控的主动死亡过程，半胱氨酸天冬蛋白酶(cysteinyl aspartate-specificproteinase, Caspase)级联反应在凋亡过程中起关键作用，Caspase-8是细胞凋亡的始动子、位于级联反应上游，能在其它蛋白参与下发生自我活化并激活下游的Caspases。而Caspase-3则主要与细胞凋亡的最终执行有关，是细胞凋亡的效应子，位于级联反应下游，能被上游的始动子激活，激活后的Caspase作用于特异性底物使细胞发生生化及形态学改变，导致细胞凋亡。青光安颗粒剂是集医院眼科多年临床经验结合现代制剂制备工艺研制而成，主要成分是黄茂、生地、茯苓、车前子、地龙、赤芍、红花、白术等，共奏益气养阴、活血利水的作用，应用于临床能够明显提高青光眼术后患者的视力，扩大视野，预防其术后眼压回升。由于直接在人体上观察小梁细胞的生理病理特征非常困难，因此作者采用不同浓度青光安颗粒等含药血清作用于体外培养加压的小梁细胞，通过免疫组化技术和流式细胞仪检测来观察药物作用后引起的小梁细胞凋亡情况和Caspase-3,Caspase-8蛋白表达变化，以探讨青光安颗粒预防青光眼术后眼压回升的作用机理。

摘要： 青光安颗粒剂是集本院眼科多年临床经验结合现代制剂制备工艺研制而成，具有益气养阴、活血利水作用，运用临床取得了良好疗效的药物，有扎实的临床和实验前期研究，为进一步探讨青光安颗粒剂对青光眼患者小梁细胞的保护机理，本文将利用体外培养的人眼小梁进行体外实验，观察了青光安颗粒剂含药血清对体外培养的小梁细胞Bcl-2、Bax的影响。

摘要： 青光眼是一种较为复杂的眼病，绝大多数患者具备的共同体征是眼压升高、青光眼性视野改变和视网膜视神经受损害。目前青光眼的主要治疗方法仍以手术或药物降眼压治疗为主，以减少疾病进行性损害的可能性。而引起眼压升高的机制相当复杂，可能包括小梁细胞外基质堆积、细胞吞噬功能下降、离子通道表达和分布异常有关。在发达国家中，青光眼得到诊治后仍有每年3%的患者病情继续恶化。青光眼降眼压治疗后，小梁的细胞保护是应该进行的后续治疗模式。现代中、西医学者均在探索某种保护小梁细胞的有效办法，但仍然处于实验阶段，到目前为止，临床尚无保护小梁细胞的专用制剂。为了探讨中医药对青光眼小梁细胞的保护作用，本文对人眼小梁细胞体的外培养实验进行了研究。

摘要： 青光安颗粒剂是本院眼科多年临床经验结合现代制剂制备工艺研制而成，具有益气养阴、活血利水作用，以治疗青光眼术后患者的有效制剂。为进一步探讨青光安颗粒剂对青光眼患者小梁细胞的保护机理，本文将利用体外培养的人眼小梁进行体外实验，从分子生物学角度研究了青光安颗粒剂含药血清对体外培养的小梁细胞细胞外基质的影响。

摘要： 本发明提供了一种用于诱导性多能干细胞定向分化小梁网细胞的培养体系，所述培养体系包括第一阶段诱导分化培养基和第二阶段诱导分化培养基；所述第一阶段诱导分化培养基由基本培养基添加TGF‑beta1、NGF‑bet和Erythropoietin制备得到；所述第二阶段诱导分化培养基由基本培养基添加TGF‑beta1、NGF‑beta、Erythropoietin、PGF2alpha和EGF制备得到；所述基本培养基为含血清替代品的MEM‑alpha培养基。通过定向诱导分化培养体系诱导分化的细胞与原代小梁网细胞极其相似，满足了干细胞治疗青光眼的临床要求；同时该培养体系中不存在外来物种以及同种其他个体的“污染”，是一种稳定、有效且不存在污染的定向诱导分化体系。

摘要： 本发明公开了WS6对小梁网细胞肌动蛋白形成的影响。WS6为促胰岛β细胞增殖活性化合物。WS6对小梁网细胞的细胞毒性。WS6抑制小梁网细胞肌动蛋白的形成。本发明的有益效果是揭示了WS6能够显著抑制TRPV4激动剂GSK101引起的小梁网细胞肌动蛋白的形成。这有助于降低眼压，对眼压升高引起的青光眼有潜在的治疗意义。

摘要： 本发明提供了一种用于诱导性多能干细胞定向分化小梁网细胞的培养体系，所述培养体系包括第一阶段诱导分化培养基和第二阶段诱导分化培养基；所述第一阶段诱导分化培养基由基本培养基添加TGF‑beta1、NGF‑bet和Erythropoietin制备得到；所述第二阶段诱导分化培养基由基本培养基添加TGF‑beta1、NGF‑beta、Erythropoietin、PGF2alpha和EGF制备得到；所述基本培养基为含血清替代品的MEM‑alpha培养基。通过定向诱导分化培养体系诱导分化的细胞与原代小梁网细胞极其相似，满足了干细胞治疗青光眼的临床要求；同时该培养体系中不存在外来物种以及同种其他个体的“污染”，是一种稳定、有效且不存在污染的定向诱导分化体系。

摘要： 本发明提供了一种双模态指示小梁类细胞及其制备方法和应用，所述双模态指示小梁类细胞由双模态纳米探针标记小梁类细胞制备而成，所述双模态纳米探针以PLGA为载体，包被功能性近红外染料cypate和超顺磁性氧化铁纳米粒子SPIO，从而形成PLGA‑Cypate‑SPIO多功能纳米探针，该探针与小梁类细胞共同孵育后，得到所述双模态指示小梁类细胞。本发明所述的双模态指示小梁类细胞，作为示踪剂可用于荧光及核磁共振双模态成像，是一种具备物理磁靶向定位的小梁类细胞。因此，通过本发明的技术方案，可实现在不影响细胞生物学特性的前提下，监测小梁类细胞的状态，具有体内显像与提高干细胞修复小梁网能力的双重功能。

摘要： 本发明提供了ITGA6阳性iPSC源小梁网类细胞在制备治疗高眼压疾病药物中的应用及筛选方法，属于细胞治疗技术领域，具体为ITGA6阳性iPSC‑TM细胞样品在制备治疗高眼压疾病药物中的应用；还提供了一种筛选ITGA6阳性iPSC‑TM细胞样品的方法，主要步骤：将人源iPSC‑TM细胞与FITC‑ITGA6抗体混合，加入带有Anti‑FITC的磁珠，制得磁珠细胞混合物；置于磁场中的LS分选株进行纯化，筛选ITGA6阳性iPSC‑TM细胞比率为5.8％以上的细胞样品。

摘要： 本发明提供了一种用于小梁类细胞标记的双模态纳米探针及其制备方法和应用，所述双模态纳米探针以PLGA为载体，包被功能性近红外染料cypate和超顺磁性氧化铁纳米粒子SPIO，从而形成PLGA‑Cypate‑SPIO多功能纳米探针。本发明所述的双模态纳米探针作为近红外成像的显影剂，可用于共聚焦荧光显微镜对小梁类细胞进行近红外荧光成像；作为磁共振成像的显影剂，可用于核磁共振成像仪对小梁类细胞进行磁共振成像；同时该磁性纳米探针可作为药物递送载体，可载送包括Rho激酶抑制剂在内的多种药物，实现Rho激酶抑制剂的靶向递送，有效提高小梁网通路房水外排效率。

摘要： 本发明公开了WS6对小梁网细胞肌动蛋白形成的影响。WS6为抗糖尿病药物格列本脲、正钒酸钠及促胰岛β细胞增殖活性化合物。WS6对小梁网细胞的细胞毒性。WS6抑制小梁网细胞肌动蛋白的形成。本发明的有益效果是揭示了WS6能够显著抑制TRPV4激动剂GSK101引起的小梁网细胞肌动蛋白的形成。这有助于降低眼压，对眼压升高引起的青光眼有潜在的治疗意义。

摘要： 本发明公开了一种基于松质骨显微CT生成骨小梁多孔结构模型和制备骨小梁多孔结构的方法，涉及生物医学技术领域。基于松质骨显微CT生成骨小梁多孔结构模型的方法的一具体实施方式包括：基于显微CT对松质骨进行扫描，得到松质骨的三维图像；根据所述三维图像中各个点的灰度值确定松质骨的空穴位置；根据所述空穴位置，基于Voronoi算法生成骨小梁多孔结构模型。该实施方式能够复现骨头的微观结构、密度分布、传质特性以及生物性能，同时具有良好的机械性能和骨长入性能。

摘要： 本发明公开了一种金属骨小梁，包括至少三条相交的金属骨小梁支架，所述金属骨小梁还内嵌有微拓扑网格结构，所述微拓扑网格结构与所述金属骨小梁支架至少有三处交点，所述金属骨小梁的部分外表面设有骨小梁涂层。本发明所述骨小梁是由镂空单元结构体在三维空间的规则或者不规则阵列形成的，不仅具有明显的减重效应，而且能同时满足零部件不同区域的刚度和强度，避免应力遮挡，实现高强度和高减重比的良好匹配；此外，人体骨质长入所述骨小梁结构，可与骨骼相融成一体，使得骨小梁假体可以稳固的与骨床相结合，能最大程度上诱导骨骼长入，从而达到假体长期的生物固定。同时，本发明还公开一种包含所述金属骨小梁的骨骼植入物。

摘要： 一种小梁网切除装置及小梁网手术设备，涉及医疗器具技术领域，所述小梁网切除装置包括手柄和刀具，所述刀具与所述手柄连接，所述刀具用于切除小梁网；所述刀具设置有抽吸孔，所述手柄设置有抽吸通路，所述抽吸通路与所述抽吸孔连通，所述抽吸通路用于将所述刀具切除的小梁网吸出。所述刀具还设置有灌注孔，所述手柄还设置有灌注通路，所述灌注通路与所述灌注孔连通，所述灌注通路用于向前房灌注液体。所述小梁网手术设备包括上述小梁网切除装置和超声乳化仪。所述小梁网切除装置能够将小梁网切割下来并吸出，从而在一定程度上避免遗留在眼内的游离小梁网组织引发术后并发症或增加手术不良反应。