小分子干扰

摘要： 目的 RNA干扰技术靶向敲除TLR4基因对子宫颈癌Siha细胞生物学行为影响.方法 试验分为重组载体组、空载体组与空白组3组,利用RT-PCR技术对3组细胞中的TLR4 mRNA表达情况进行检测,分别在MMT实验以及细胞划痕实验中对细胞的增殖情况进行观察并绘制其增长曲线.结果 (1)重组载体组细胞中TLR4mRNA转染前的表达水平为(81.6±2.1)％,显著高于转染后的表达水平(23.6±1.8)％,差异有统计学意义(P＜0.05);空载体组与空白组中的TLR4mRNA增殖情况在转染前后对比,差异无统计学意义(P＞0.05).(2)转染72h时,重组载体组吸光度A值为(0.12±0.02),空载体组吸光度A值为(0.15±0.01),空白组吸光度A值为(0.16±0.02),空载体组与空白组的细胞增殖速度在转染72h时均快于重组载体组,差异均统计学意义(均P＜0.05).(3)重组载体组细胞在划痕后培养细胞的48 h与72 h时的迁移率均慢于未转染组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 小分子RNA靶向敲除TLR4基因可有效抑制子宫颈癌Siha细胞的生长速度.

摘要： 目的 研究迁移诱导基因7(Mig-7)通过MEK/ERK信号通路抑制人脑胶质瘤细胞株U251体外血管生成拟态(VM)形成能力和迁移、侵袭能力的影响.方法 采用RNA干扰技术将特异性针对Mig-7基因的sh-Mig-7转入人脑胶质瘤U251细胞中,并观察感染效率;用携带有sh-Mig-7和阴性对照(sh-NC)的慢病毒感染U251细胞后,采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞中Mig-7的表达水平;采用体外三维培养和Transwell小室侵袭实验观察Mig-7基因沉默对各组U251细胞VM形成能力和侵袭能力的影响.采用western-blot检测各组细胞中MEK/ERK的蛋白表达水平.结果 携带有sh-Mig-7和sh-NC的慢病毒成功感染U251细胞,并获得稳定低表达Mig-7基因的U251细胞株;与感染sh-NC慢病毒和未感染病毒的的细胞相比,sh-Mig-7感染组U251细胞中Mig-7的表达水平以显著降低(P均<0.01);与空白对照组和sh-NC感染组相比,sh-Mig-7感染组U251细胞的侵袭能力明显下降(P<0.01),并且sh-Mig-7感染组U251细胞VM形成能力明显下降(P<0.05).与空白对照组和sh-NC感染组相比,sh-Mig-7感染组U251细胞的MEK、ERK蛋白的表达水平均显著降低(P<0.05).结论 沉默Mig-7基因的表达,可能通过MEK/ERK信号通路抑制U251细胞的VM形成及侵袭能力,提示Mig-7基因在人脑胶质瘤细胞的VM和侵袭中发挥重要的作用.

摘要： 目的 探讨子宫内膜癌组织中瞬时受体电位阳离子通道-6(TRPC6)的表达变化及其在子宫内膜癌细胞增殖中的作用.方法 选取2011年1月至2015年6月在河南省人民医院和许昌市人民医院手术治疗的子宫内膜癌患者30例作为研究组,24例不典型增生和28例子宫肌瘤患者作为对照组;应用分子生物学技术检测30例子宫内膜癌、24例不典型增生和28例正常子宫内膜组织中TRPC6的表达;用阻断剂SKF96365和siRNA干扰两种方法阻断TRPC6后,用细胞计数方法和氚胸腺嘧啶核苷掺入试验观察子宫内膜癌HEC-1A细胞增殖的变化.结果 子宫内膜癌组织中的TRPC6 mRNA的表达量明显高于不典型增生组织和正常子宫内膜组织TRPC6 mRNA的表达量(0.98±0.56 vs.0.30±0.24和0.23±0.13,P＜0.01);子宫内膜癌组织中TRPC6蛋白的表达量明显高于不典型增生组织和正常子宫内膜组织中TRPC6蛋白的表达量(1.22±0.39 vs.0.75±0.27和0.73±0.26,P＜0.01);子宫内膜癌组织中TRPC6的表达水平与手术病理分期无关,但与病理分级有关;SKF96365呈剂量依赖性方式阻滞细胞增殖,使细胞生长曲线下移;转染siRNA细胞TRPC6蛋白表达量为转染阴性对照siRNA细胞的(38.51±6.21)％,与转染阴性对照相比,转染TRPC6 siRNA显著减少细胞的增殖.结论 TRPC6的异常表达与子宫内膜癌细胞的增殖相关,降低其表达可减少子宫内膜癌细胞的增殖.

摘要： 缺氧引起的急性肺损伤氧自由基介导的肺损伤，其损伤机理目前尚不十分清楚，研究农明，许多参与全身炎症过程的介质均可对细胞凋亡产生影响，细胞凋亡在肺损伤发病机制中起着重要作用。HIF-1是缺氧下细胞产生的主要转录因子，HIF-Ia引起一系列不同的基因表达且这些基因调节缺氧细胞，根据不同的细胞类型和实验条件HIF-1a及缺氧起着促进或抑制凋亡作用。本研究利用化学缺氧诱导剂级化钻模拟缺氧，研究不同时间的缺氧对肺泡上皮细胞凋亡的影响，同时应用小分子干扰技术沉默HIF-1a，并研究该基因与细胞凋亡的关系，从新的角度来阐述缺氧诱导细胞凋亡的可能机制。

摘要： 目的：观察小分子干扰RNA(siRNA)对人食管癌EC9706细胞中血管内皮生长因子C(VEGF-C)体内表达的抑制作用。rn 方法：将转染VEGF-C siRNA载体质粒、并稳定遗传的各组EC9706细胞分别注射于裸小鼠皮下,并以转染无关序列组和正常EC9706细胞组为对照,SPF环境饲养4w后处死,取移植瘤组织常规制片,以免疫组化S-P法和定量分析技术,分别检测上述各组瘤组织中VEGF-C蛋白的表达。rn 结果：正常EC9706细胞对照组和无关序列转染组,均有大量VEGF-C蛋白阳性颗粒,在siRNA转染的3组中,仅有少量VEGF-C阳性表达颗粒,与正常细胞对照组和无关序列组相比,差异均有统计学意义(p<0.01)。rn 结论：VEGF-C siRNA能有效抑制食管癌EC9706细胞中VEGF-C蛋白的体内表达,可望成为一种抗淋巴管生成的新方法。

摘要： 目的:探讨特异性小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对晚期糖基化终产物受体(receptor for advancedglycation end products, AGER or RAGE)介导肝星状细胞(hepatic stellate cells, HSCs)激活和胶原生成的影响。方法:构建RAGE特异性siRNA表达载体,经脂质体将其转染HSC-T6细胞,以空白和转染非特异性siRNA表达载体pGCsi-C为对照,分别用实时荧光定量PCR和Western印迹法检测各组HSC-T6细胞RAGE、α-SMA和Ⅰ型胶原基因及蛋白的表达。结果：与空白对照组相比,转染特异性siRNA表达载体pGCsi-R1的HSC-T6细胞的RAGE mRNA和50KD、46KD RAGE蛋白的表达分别下调(79.65±8.88)％(F=26.005,P<0.01)、(56.09±1.18)％(F=365.185,P<0.01)和(63.67±0.78)％(F=386.07,P<0.01),同时α-SMAmRNA和蛋白、Ⅰ型胶原mRNA和蛋白的表达也受到明显抑制,分别为空白对照组的57.53％±3.25％(F=20.913,P<0.05)、58.48％±3.08％(P=56.592,P<0.05)、71.16％±8.04％(F=18.091,P<0.05)和71.91％±1.12％(F=17.299,P<0.05)。 结论：RAGE特异性siRNA可在细胞内稳定表达,并能有效地抑制HSCs的激活和Ⅰ型胶原的生成。

摘要： 本发明公开了一种用于抑制胶质瘤增殖的干扰TGM2基因的小分子RNA及其制备方法及其应用。该干扰TGM2基因的小分子RNA为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的碱基序列。本发明设计对胶质瘤增殖有促进作用的干扰TGM2基因的小分子RNA，应用胶质瘤细胞(U373细胞)模型研究其对胶质瘤增殖的抑制作用，为胶质瘤的基因治疗提供了一种新分子药物。

摘要： 本发明公开了一种用于抑制胶质瘤增殖的干扰MCM7基因的小分子RNA及其应用。该干扰MCM7基因的小分子RNA为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的碱基序列。本发明设计对胶质瘤增殖有促进作用的干扰MCM7基因的小分子RNA，应用胶质瘤细胞(U373细胞)模型研究其对胶质瘤增殖的抑制作用，为胶质瘤的基因治疗提供了一种新分子药物。

摘要： 本发明公开了一种干扰CDK5和TRPV1结合的小分子多肽及其应用，所述小分子多肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明基于干扰蛋白之间的相互作用而设计，通过文献查阅到TRPV1上和CDK5的结合序列，并根据结合序列确定最终的小分子多肽序列，使之能够与CDK5结合。最终设计的小分子多肽能借助一端的穿膜肽序列进入细胞内部，另一部分则能够与TRPV1竞争结合CDK5，从而减少TRPV1与CDK5的结合。本发明的小分子多肽能够特异性的干扰CDK5和TRPV1之间的相互作用，从而阻碍胞浆中的TRPV1向胞膜上的转移，减轻脑缺血损伤。

摘要： 本发明涉及式(I)化合物。所述化合物能够用于拮抗干扰素基因刺激因子(STING)蛋白且从而可治疗肝纤维化、脂肪肝病、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、肺纤维化、狼疮、败血症、类风湿性关节炎(RA)、I型糖尿病、婴儿期发作型STING相关血管病变(SAVI)、艾卡迪古蒂埃雷斯综合征(AGS)、家族性冻疮状狼疮(FCL)、全身性红斑狼疮(SLE)、视网膜血管病变、神经发炎、全身性发炎反应综合征、胰腺炎、心血管疾病、肾纤维化、中风及老年性黄斑部病变(AMD)。

摘要： 本发明公开了一种干扰体内小分子RNA的蒙药复方制剂，包括以下重量分的原料药制备而成：草乌叶1‑5份、黑云香10‑15份、诃子5‑10份、磨香3‑7份、茜草4‑8份、多叶棘豆10‑15份、天南星2‑4份、苦参2‑4份、银珠0.5‑1份，安息香2‑6份，三颗针1‑4份。本发明能有效能有效抑制端粒酶的活性表达，对干扰体内小分子RNA起到显著作用。

摘要： 本发明涉及小分子RNA干扰端粒酶逆转录酶质粒抑制视网膜、脉络膜新生血管新制剂，主要用于医学领域中，眼科视网膜、脉络膜新生血管的防控与治疗。目前，视网膜新生血管生物药物治疗主要是抗VEGF靶分子治疗，作用时间较短，易复发。因此，有必要从分子和基因水平探寻其它潜在的治疗靶目标，寻找更有效方法治疗和预防视网膜新生血管的发生。1.本发明以端粒酶逆转录酶(TERT)为靶点，以小分子RNA（siRNA）干扰为基础，通过TERT干扰性RNA视网膜、脉络膜新生血管中TERT蛋白质的表达下调，降低视网膜、脉络膜新生血管内皮细胞的端粒酶活性并抑制视网膜、脉络膜新生血管内皮细胞的增殖。2.siRNA 的设计和质粒的构建。根据基因库中TERT基因的mRNA序列设计siRNA作用靶点，化学合成。

摘要： 本发明提供了一种用于敲低CD317的小分子干扰RNA、shRNA、shRNA的编码DNA、重组载体和宿主细胞及其应用，所述小分子干扰RNA具有与CD317的信使RNA互补的核苷酸序列，长度为19～27bp。本发明提供了一种靶向CD317的促进肿瘤细胞凋亡的新方法，主要涉及一种高效沉默人CD317基因的小干扰RNA序列及其抗肿瘤应用，特别涉及CD317siRNA与抗肿瘤血管生成药物或放、化疗等能造成肿瘤细胞营养剥夺的治疗策略的联合应用。

摘要： 本申请“一种DAPK1磷酸化底物的人工小分子干扰肽及其制药用途”，涉及小分子多肽类药物研发领域，所提供的小分子多肽可用于制备预防和治疗缺血性卒中药物，以及基于相同机制的如脑卒中，创伤性脑损伤，脊髓损伤，新生儿缺氧缺血性脑病，抑郁症和自闭症、神经系统退行性疾病如多发性硬化症，阿尔茨海默氏病，肌萎缩侧索硬化，帕金森病，亨廷顿病等。

摘要： 本发明公开了小分子干扰核糖核酸及其重组腺病毒与应用。所述小分子干扰核糖核酸，由正义链、反义链和环状序列共同组成的shRNA，所述正义链和反义链选自以下任一组：1)序列如SEQ ID№.1所示的正义链和序列如SEQ ID№.2所示的反义链；2)序列如SEQ ID№.3所示的正义链和序列如SEQ ID№.4所示的反义链；3)序列如SEQ ID№.5所示的正义链和序列如SEQ ID№.6所示的反义链。环状序列可采用TTCAAGAGA或其他常规间隔序列代替。该小分子干扰核糖核酸可用于制备重组腺病毒，用于抑制猪Rab32基因的表达。

摘要： 本发明提供了一种用于敲低CD317的小分子干扰RNA、shRNA、shRNA的编码DNA、重组载体和宿主细胞及其应用，所述小分子干扰RNA具有与CD317的信使RNA互补的核苷酸序列，长度为19～27bp。本发明提供了一种靶向CD317的促进肿瘤细胞凋亡的新方法，主要涉及一种高效沉默人CD317基因的小干扰RNA序列及其抗肿瘤应用，特别涉及CD317siRNA与抗肿瘤血管生成药物或放、化疗等能造成肿瘤细胞营养剥夺的治疗策略的联合应用。