寨卡病毒

摘要： 本研究通过高通量测序技术检测了寨卡病毒(ZIKV)感染组、血餐对照组和糖水对照组埃及伊蚊中肠组织小RNA的丰度,并筛选出差异表达的6个黄病毒NIRVS和9个棒状病毒NIRVS。针对筛选出的6个NIRVS设计引物用两步法逆转录荧光定量PCR(RT-qPCR)方法验证了ZIKV感染第4、7和10天中肠组织中黄病毒NIRVS片段的表达。结果显示,黄病毒NIRVS AeFlavi53在感染第4、7天均上调,结果与小RNA测序一致,AeFlavi34B和AeFlavi4A在感染第4天上调,第10天下调,但在第7天表达无变化,与小RNA测序结果不一致,其余片段表达量在感染组与对照组间无统计学差异。RT-qPCR与高通量测序的结果一致性差,其原因可能是因为细胞中长链piRNA前体受上游转录和下游酶切多个程序的调节,针对其设计引物进行定量检测的结果不稳定。

摘要： 目的建立针对登革病毒(DENV)、黄热病毒(YFV)、基孔肯雅病毒(CHIKV)、寨卡病毒(ZIKV)的四重逆转录重组酶聚合酶扩增(RT-RPA)技术,用于同时快速检测上述4种病毒。方法通过正交设计建立检测4种蚊媒病毒(DENV、YFV、CHIKV、ZIKV)的四重RT-RPA反应体系。通过质粒标准品、体外转录RNA和临床血清验证单重RT-RPA和四重RT-RPA的检测灵敏度、特异度、重复性和临床应用符合率。结果单重RT-RPA对DENV、YFV、CHIKV、ZIKV质粒DNA的检出限分别为1×10^(2)、1×10^(2)、1×10^(2)、0.05)。结论本研究建立的针对DENV、YFV、CHIKV和ZIKV的单重RT-RPA和四重RT-RPA检测方法特异度好、灵敏度高、重复性好,对蚊媒传染病的早期诊断及鉴别诊断具有重要作用,同时也为其他新发再发传染病的快速诊断方法建立提供研究方向。

摘要： 目的 对一种无需核酸提取纯化的寨卡病毒实时荧光定量反转录PCR检测方法的性能进行评价。方法 该检测方法基于实时荧光定量反转录PCR技术,样本处理采用病毒富集法:取100~200μL待测样本,加入112~224μL样本处理液Ⅰ,5~10μL样本处理液Ⅱ,混匀后进行离心富集(12 000 r/min,离心半径8.6 cm,离心5 min)。离心后弃上清液,加入20μL复溶缓冲液重悬沉淀;取10μL重悬液,加入50μL PCR反应液上机检测。从定量检测下限、交叉反应、抗干扰性、精密度方面评价该检测方法的性能。收集北京协和医院检验科临床样本(血清、尿液、唾液样本),随机选取约1/5构建寨卡病毒感染模拟临床样本,进一步评定该检测方法的性能。结果 该检测方法对MR766、ZKC2/2016毒株的检测下限均为10;半数组织培养感染剂量(50%tissue culture infective dose, TCID50)/mL;对17种常见虫媒病原体检测结果均为阴性,无交叉反应发生;潜在干扰物质胆红素(15 mg/L)、血红蛋白(100 mg/L)、甘油三酯(2000 mg/L)、IgG(37.5 g/L)和EDTA-Na;(2.5 g/L)对其检测结果无干扰;检测低、中、高浓度寨卡病毒的批次内和批次间Ct值变异系数均<10%,精密度良好。共收集344份北京协和医院检验科临床样本,其中构建寨卡病毒感染模拟临床样本73份。采用该检测方法对344份样本进行检测,结果均与实际相符,无假阳性和假阴性。结论 寨卡病毒简单富集后再检测的方法特异性高、重复性好,检测结果不受干扰物质的影响,检测下限满足临床需求,且操作简便,但应用效果仍需在真实临床样本中进一步验证。

摘要： 夏天来临,讨厌的蚊子也来了,冷不防叮你一口,让人无法安眠,也可能“中招”某些疾病,如疟疾、登革热和登革出血热、乙脑等。也有人担心蚊子会成为传播新冠病毒的新隐患。[真相]南方医科大学公共卫生学院副院长陈晓光认为,这种可能性微乎其微。陈晓光表示,病毒对宿主特异性的要求很高。目前,通过蚊媒传播的病毒包括乙脑病毒、登革病毒、寨卡病毒、基孔肯雅病毒等,但没有证据表明,冠状病毒可以感染蚊子,并通过蚊子传播。即使可通过蚊子传播的病毒,也不是所有种类的蚊子都能传播,比如登革病毒主要通过伊蚊传播,而库蚊却不会传播登革热。

摘要： 2019年底新型冠状病毒肺炎(下文简称新冠肺炎)爆发,给全球人民的身心健康和经济带来巨大打击,截止目前,全球累计确诊感染新冠肺炎人数已超过1.7亿人,死亡病例380多万人,且至今仍肆虐蔓延。2003年的SARS-CoV、2009年的H1N1甲型流感病毒、2012年的MERS-CoV、2013年的H7N9、2014年的埃博拉病毒、2016年的寨卡病毒,以及当今仍在肆虐的新冠肺炎,各类传染病爆发事件,给医疗机构和各级防疫部门带来了巨大的挑战。公共卫生事件的应急管理中,医院扮演着重要的角色,其意识理念、工作规划和资源布置等直接影响应急管理的实践工作[1],疫情防控过程中,首当其冲就是防疫物资的供给保障工作,直接影响防控工作的顺利开展和有效性。

摘要： 目的:鉴定以乙脑病毒(JEV)疫苗株SA14-14-2为骨架的乙脑/寨卡(ZIKV)嵌合病毒,分析其作为疫苗候选株的可行性。方法:通过对嵌合病毒的噬斑形态鉴定和生长特性鉴定,初步判断嵌合病毒的毒力,并用嵌合病毒接种昆明鼠,检测其脑内、皮下及腹腔神经毒力,使用噬斑减少中和试验(PRNT)及免疫攻击试验分析嵌合病毒的免疫原性及免疫保护作用。结果:嵌合病毒比乙脑疫苗株SA14-14-2具有更小的噬斑;用不同的感染复数(0.1、0.01、0.001)感染BHK21细胞,可得到相似的生长曲线,复制速度较SA14-14-2慢,峰值出现较SA14-14-2晚;对昆明鼠有较强的神经毒力但无明显神经侵袭力;可诱导小鼠产生较高的中和抗体效价;能保护小鼠免受病毒自身脑内攻击并呈现典型的剂量效应;能与SA14-14-2产生一定程度的交叉反应。结论:嵌合病毒JE/ZIKA免疫原性良好,但对小鼠有较强的脑内神经毒力,嵌合病毒和乙脑疫苗株也有一定的交叉免疫。

摘要： 为探索包膜蛋白T120A突变对乙脑/寨卡嵌合病毒JEV/ZIKV小鼠脑内神经毒力的影响,应用重叠延伸PCR和分子克隆技术构建含T120A突变的乙脑/寨卡嵌合病毒全长cDNA质粒,经酶切、测序鉴定后,以其为模板体外转录制备RNA,电转染导入BHK21细胞,收获培养液上清获得突变病毒株JEV/ZIKV (T120A).分别用JEV/ZIKV和JEV/ZIKV (T120A)感染BHK21细胞,绘制病毒增殖曲线,比较蚀斑大小;脑内接种昆明鼠,比较病毒小鼠脑内神经毒力差异.突变病毒感染性克隆经酶切鉴定表明成功构建,增殖曲线发现:突变病毒高峰滴度为5.59 log10pfu/mL,低于JEV/ZIKV的峰值(6.8 log10pfu/mL),JEV/ZIKV (T120A)的小鼠脑内神经毒力LD50为1.38 PFU(0.03 mL),JEV/ZIKV病毒LD50为2.21 PFU(0.03 mL).研究表明寨卡病毒包膜蛋白T120A突变降低了乙脑/寨卡嵌合病毒的复制能力,但却轻微增强了病毒小鼠脑内神经毒力.

摘要： 寨卡病毒(Zika virus)是属于黄病毒科黄病毒属的一种虫媒病毒,可经过埃及伊蚊和白纹伊蚊叮咬传播,也可通过血液、泪液传播,以及性传播和母婴垂直传播.寨卡病毒一旦感染孕妇,就会有导致胎儿感染的可能.成人多出现一些较轻的临床症状,但胎儿更容易受到中枢神经系统的伤害,继而诱发小头畸形,重症脑部发育缺陷以及一些神经系统性炎症,因此,阻断寨卡病毒的传播及感染迫在眉睫.为了能够对寨卡病毒母婴传播途径有更全面的认识,研究其致病机理,并且找到有效的预防、检测和治疗方法,建立成功的动物模型极为关键.文章将对目前已有的寨卡病毒母婴传播在各种动物模型上的研究进展进行综合整理.

摘要： 为建立一种针对寨卡病毒的快速诊断方法,本研究根据寨卡病毒的3'端保守基因序列,设计合成1对引物,建立了检测寨卡病毒的荧光定量PCR方法.结果显示:所建立的检测方法的Ct值与标准品在1.41×101～1.41×1010 copies/μL具有良好的线性关系,相关性为1,斜率为-3.502;灵敏性结果显示,该方法的检测限度为1.41×101 copies/μL,是普通PCR的10000倍;特异性结果显示,对CHIKV、DENV和JEV无特异性扩增,特异性强;重复性试验结果显示,组内和组间变异系数均小于1％,重复性好.本研究建立的SYBR Green Ⅰ real-time PCR检测方法,可用于寨卡病毒感染的快速诊断.

摘要： 我国疫情审计方面的探索和研究主要集中在非典疫情审计,经验较为欠缺,文章从GAO寨卡病毒疫情审计案例研究出发,以GAO的寨卡病毒疫情审计项目为研究对象,系统搜集了其从2016年至2019年完成的四个阶段的审计工作报告,总结出疫情审计模式的特点,并进一步提出了我国疫情审计的建议,以为我国的疫情审计提供参考.

摘要： 寨卡病毒属于黄热病毒,其主要的传播途径为蚊媒传播,目前该病毒在非洲、美洲以及东南亚地区爆发,目前中国也有输入性寨卡病毒感染的病例.为了防止寨卡病毒的进一步传播,本文对寨卡病毒的生物学特性、流行病学特点、临床诊断的方法，并且阐述如何在肉制品生产加工过程中寨卡病毒的控制以及在人群中的防治，为保障食品安全提供参考。

摘要： 本发明涉及ZP10在制备以寨卡病毒蛋白酶为靶点的抗寨卡病毒药物中的应用，本发明通过构建基于荧光的筛选模型，研究发现化合物ZP10具有抑制寨卡病毒蛋白酶活性的功能。本发明进一步对ZP10的细胞毒性，与寨卡病毒蛋白酶的亲和力进行研究发现，ZP10具有较高的抗寨卡病毒活性，其IC50为2.3μM，EC50为7.65μM，同时ZP10自身细胞毒性较低，与寨卡病毒蛋白酶有较高的亲和力以及在转录和翻译水平抑制寨卡病毒的复制进而具备显著的抗寨卡病毒效果，这使得ZP10有较好的抗寨卡病毒研发前景，可用于制备预防或治疗寨卡病毒的药物。

摘要： 本发明属于抗寨卡病毒抗体的免疫检测领域，具体涉及一种寨卡病毒E抗原及其在检测抗寨卡病毒抗体中的应用。本发明对Zika病毒基因组及其表达蛋白进行分析，找到了能够特异性检测抗ZIKV抗体的E抗原，基于所发现的E抗原可以实现特异性检测人血中抗ZIKV抗体，可以制备检测抗ZIKV抗体的试剂盒。本发明检测抗ZIKV抗体的方法有效地避免了在检测过程中使用具有强传染能力的zika病毒，降低了整个实验的危险性。本发明的技术方案还具有简单、易操作、重复性好等特点，容易得到推广和应用。

摘要： 本发明属于生物技术及生物医药技术领域，涉及病毒抑制剂，具体涉及多肽包括Z155及其在制备ZIKV、DENV及YFV单独感染或共感染的多肽抑制剂中的用途。经试验表明，所述多肽Z155能与寨卡病毒颗粒结合，进一步通过与病毒融膜肽结合抑制病毒感染细胞。所述多肽对黄病毒科病毒有广谱抗病毒效果，且多肽细胞毒性极低。本发明的多肽抑制剂可以制备作为治疗ZIKV感染的药物，有利于ZIKV、DENV及YFV单独感染或者共感染的治疗，尤其对于寨卡感染者尤其是孕妇感染的治疗尤为重要。

摘要： 本发明涉及病毒检测技术领域，具体涉及一种利用三重实时荧光定量RT‑PCR检测寨卡病毒、基孔肯雅病毒和马雅罗病毒的方法。本发明结合相关蚊媒病原体出现的几率、流行的风险和实验室检测过程的可操作性，采用马雅罗病毒替代现有常用组合检测方案中的登革病毒，形成以寨卡病毒、基孔肯雅病毒和马雅罗病毒为检测靶标的新的检测方案。本发明提供了可同时鉴别经伊蚊传播、引发疾病临床症状相似的病毒性病原体寨卡病毒、基孔肯雅病毒和马雅罗病毒的特异性引物、探针以及三重实时荧光定量RT‑PCR检测方法，该方法具有较高的特异性和灵敏性，可重复性好，检测简便快速、节约成本，可与传统检测方案互补，具有较高的应用价值。

摘要： 本发明属于病毒检测技术领域，公开了一种用于检测寨卡病毒的融合蛋白，所述融合蛋白由寨卡E蛋白、寨卡NS5蛋白连接形成，所述寨卡E蛋白的编码序列如SEQ ID NO:1所示，所述寨卡NS5蛋白的编码序列如SEQ ID NO:3所示；利用该融合蛋白进行免疫分析检测，能够很好的区分寨卡病毒感染病人和健康人，检测特异性强，表现出了极好的临床应用效果，将该融合蛋白制成免疫分析检测试剂盒，方便大规模生产应用，能其检测规程简便，检测结果特异性强，灵敏度高，可为诊断病情提供依据。

摘要： 本发明涉及ZP10在制备以寨卡病毒蛋白酶为靶点的抗寨卡病毒药物中的应用，本发明通过构建基于荧光的筛选模型，研究发现化合物ZP10具有抑制寨卡病毒蛋白酶活性的功能。本发明进一步对ZP10的细胞毒性，与寨卡病毒蛋白酶的亲和力进行研究发现，ZP10具有较高的抗寨卡病毒活性，其IC

摘要： 本发明属于化学医药技术领域，尤其涉及一种防治寨卡病毒感染的药物及石蒜碱在制备防治寨卡病毒感染的药物中的应用。所述药物的主效药包括石蒜碱或其水合物，或石蒜碱在药学上可接受的衍生物，或石蒜碱在药学上可接受的盐中的至少一种。在本发明研究发现石蒜碱具有在体内和体外具有多种作用，如抑制寨卡病毒在Vero细胞上的感染；抑制寨卡病毒RNA和病毒蛋白的合成；体内减少小鼠的病毒血症，延长小鼠的存活时间，减轻脑组织和肝组织的病变。

摘要： 本文公开了包含编码针对寨卡病毒抗原的抗体及其功能片段的重组核酸序列的组合物。本发明还涉及包含第一组合物和第二组合物的组合的组合物，所述第一组合物引发哺乳动物的对抗寨卡病毒的免疫应答，所述第二组合物包含编码抗体、其片段、其变体或其组合的重组核酸序列。在一些情况下，所述核酸分子包含编码抗ZIKV‑包膜(抗ZIKV E)蛋白抗体的核苷酸序列。

摘要： 本发明属于抗寨卡病毒抗体的免疫检测领域，具体涉及一种寨卡病毒E抗原及其在检测抗寨卡病毒抗体中的应用。本发明对Zika病毒基因组及其表达蛋白进行分析，找到了能够特异性检测抗ZIKV抗体的E抗原，基于所发现的E抗原可以实现特异性检测人血中抗ZIKV抗体，可以制备检测抗ZIKV抗体的试剂盒。本发明检测抗ZIKV抗体的方法有效地避免了在检测过程中使用具有强传染能力的zika病毒，降低了整个实验的危险性。本发明的技术方案还具有简单、易操作、重复性好等特点，容易得到推广和应用。

摘要： 公开了同时检测、区分和/或定量样品中基孔肯雅病毒(CHIKV)、登革病毒血清型‑1(DENV1)、登革病毒血清型‑2(DENV2)、登革病毒血清型‑3(DENV3)、登革病毒血清型‑4(DENV4)和寨卡病毒(ZIKV)的方法。在一些示例中，该方法包括确定选自下组的靶区域或其片段的存在的步骤：寨卡病毒的非结构蛋白5(NS5)、DENV1的NS5、DENV2的NS5、DENV3的NS5、DENV4的衣壳和CHIKV的E1糖蛋白。还公开了用于该方法的分离的寡核苷酸、用于检测和/或区分和/或定量如本文所述的病毒的方法，以及用于该方法的试剂盒。