U937

摘要： 目的 探讨雪峰虫草不同提取部位对诱导NB4和U937细胞凋亡的影响机制.方法 将对数期2种细胞随机分为正常组、DMSO组、水提取物组、乙酸乙酯提取物组和醇提取物组,采用流式细胞仪检测雪峰虫草不同提取物诱导NB4、U937细胞凋亡作用,采用Western blot法检测NB4、U937细胞内Bcl-2、Cyt C、Bax、caspase-9蛋白表达.结果 正常组与DMSO组无统计学差异(P＞0.05),与DMSO组比较,水提取物组、乙酸乙酯提取物组和醇提取物组NB4、U937细胞凋亡增加(P＜0.05,P＜0.01);相较水提取物组和醇提取物组,乙酸乙酯提取物组诱导细胞凋亡作用更为明显(P＜0.05,P＜0.01);NB4、U937细胞内Cyt C、Bax和caspase-9蛋白表达增加(P＜0.05,P＜0.01),Bcl-2蛋白表达降低(P＜0.05,P＜0.01).结论 雪峰虫草不同提取物皆能诱导NB4、U937细胞凋亡,且乙酸乙酯提取物效果最佳,其作用机制可能与线粒体凋亡途径中细胞内Bax/Bcl-2蛋白表达比例失调,胞质中Cyt C分泌增多,caspase-9蛋白表达增加有关.

摘要： 目的:探讨小分子干扰RNA(siRNA)抑制人同源异型盒基因(H2.0-like homeobox,HLX1)表达对急性髓系白血病细胞系U937细胞增殖与侵袭能力的影响。方法:利用HLX1特异的siRNA瞬时转染U937细胞,通过实时定量(RTPCR)与蛋白印迹法(Western blot)分别测定HLX1的mRNA及蛋白质的表达水平,应用细胞体外增殖实验法(MTT)与体外侵袭实验观察siRNA抑制HLX1表达后的U937细胞增殖与侵袭变化。结果:相对于空白对照组,HLX1特异的siRNA转染24 h后可抑制U937细胞HLX1 mRNA表达,抑制率为(70.0±2.7)%(P<0.01);转染48 h后可有效抑制HLX1蛋白质表达,抑制率为(81.0±3.1)%(P<0.01);转染组U937细胞增殖能力显著下降(P<0.01),转染组穿过基质胶的U937细胞数(22.0±2.3)显著低于空白对照组(66.0±5.0)(P<0.01),p-21活化激酶1(PAK1)蛋白表达水平显著下降(P<0.01)。结论:siRNA下调HLX1表达水平可显著抑制急性髓系白血病细胞的增殖与侵袭能力。

摘要： 目的 探讨熊果酸对人急性髓系白血病细胞株U937细胞的作用及机制.方法 用不同浓度的熊果酸处理对数生长期的U937细胞48 h后,采用四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测其对细胞增殖的影响;Annexin V/PI染色和流式细胞仪检测细胞凋亡;免疫印迹法(Western blot)检测Wnt、β-catenin、p53、Bcl-2、Bax表达,以及细胞浆凋亡诱导因子(AIF)和细胞色素蛋白C(CytC)蛋白表达.结果 熊果酸呈浓度依赖性诱导U937细胞增殖抑制和凋亡,上调Bax和细胞浆AIF、CytC表达,下调Wnt、β-catenin、p53及Bcl-2表达.结论 熊果酸对U937白血病细胞有显著的增殖抑制和诱导凋亡作用,其机制可能为抑制Wnt/β-catenin/p53信号途径促发白血病细胞死亡.

摘要： 为了观察中华卷柏、鹿角卷柏、卷柏等三种卷柏属植物的甲醇总提物、乙酸乙酯部位、石油醚部位样品对体外培养的人单核细胞白血病细胞U937细胞的增殖抑制作用.通过常规传代培养人单核白血病U937细胞,再用噻唑兰比色法(MTT)检测不同浓度样品作用于U937细胞12、24h和48 h后的细胞增殖情况.中华卷柏和卷柏对U937细胞的增值抑制呈时间和剂量依赖性.鹿角卷柏对U937细胞的增值抑制呈剂量依赖性.药物作用24h时,三种卷柏属植物对U937细胞均有显著抑制作用,其半数抑制浓度(IC50)分别为中华卷柏甲醇总提物102.54 μg/mL、乙酸乙酯部位87.95 μg/mL、石油醚部位91.63 g/mL;鹿角卷柏甲醇总提物118.69μg/mL、乙酸乙酯部位126.03 μg/mL、石油醚部位135.8 μg/mL;卷柏甲醇总提物103.92μg/mL、乙酸乙酯174.75μg/mL、石油醚102.64 μg/mL.证明了三种卷柏均能有效抑制U937细胞的增殖,为后续对卷柏属植物抗癌机制的研究提供了方向.

摘要： 目的：通过检测ASK1和PRKCD在单核细胞分化过程中的表达变化，探索其在门静脉高压症(PH)脾亢脾脏巨噬细胞（MΦ）功能变化中所起的作用。方法采用佛波酯诱导U937分化成为巨噬细胞样细胞，q-PCR检测不同分化阶段ASK1和PRKCD mRNA的表达，Western Blot检测诱导前后ASK1和PRKCD蛋白表达水平变化，ELISA法检测细胞分化过程中与吞噬功能相关的细胞因子IL-10和TNF-α的分泌情况，鸡红细胞吞噬试验鉴定诱导后细胞功能。结果随着PMA诱导U937细胞时间延长，ASK1和PRKCD基因表达水平下降，TNF-α的分泌量逐渐增加，而IL-10在诱导后24 h达到最大分泌量，随后又呈下降趋势；Western Blot结果显示，ASK1及p-ASK1蛋白表达水平较诱导前均显著上升，PRKCD及p-PRKCD蛋白表达水平显著下降；吞噬实验结果显示，诱导后的细胞具有一定的吞噬功能。结论在PMA诱导的U937细胞向单核细胞分化过程中，ASK1蛋白表达上调，PRKCD蛋白表达下调，与脾亢脾MΦ一致，并导致MΦ活性增强。%Objective To investigate the expression of ASK1 and PRKCD in the process of monocyte differentiation, and explore their role in functional changes of hypersplenism spleen macrophages (MΦ) in portal hypertension (PH). Methods U937 cells were stimulated to differentiate into monocyte/macrophage-like cells by cultivation in PMA and the mRNA expressions of ASK1 and PRKCD were detected by q-PCR and the changes of protein expression were identified by western blot analysis. The secretion of phagocytose related cytokines such as IL-10 and TNF-a were tested by ELISA, and the function of the macrophage-like cells were studied by chicken red blood cell phagocytose test. Results The expressions of PRKCD and ASK1 mRNA were gradually decreased along with the cell differentiation, while the secretion of TNF-αwas increased, IL-10 secretion reached a maximum at 24 h after PAM stimulation, and then gradually fell. The expression of ASK1 and p-ASK1 were rapidly increased compared with the non-stimulated U937 cells, while the expression of PRKCD and p-PRKCD were sightly declined. The phagocytose test show that U937 cells induced with PMA were able to swallow the chicken red blood cell.Conclusion Up-regulated protein expression of ASK1 and p-ASK1 and down-regulated protein expression of PRKCD and p-PRKCD in the process of PMA induced monocyte differentiation, are consist with the expression changes of splenic macrophage phagocytosis in hypersplenism, which leads to increased activity of MΦ.

摘要： 目的 探讨急性单核细胞样细胞系U937的还原叶酸载体基因(RFC1)启动子甲基化表达及其转录状态,并观察甲基化水平的改变对甲氨蝶呤(MTX)诱导的细胞凋亡和周期的影响.方法 运用定量甲基化特异性PCR和实时荧光定量PCR检测U937细胞系经5-杂氮胞苷作用后的启动子甲基化状态及其RFC1基因转录表达水平.通过流式细胞术验证RFC1基因表达变化对MTX诱导的U937细胞凋亡和细胞周期的影响.结果 U937细胞RFC1启动子的非甲基化率为(8.09±0.87)％,处于高甲基化状态;经1、2、4 μmol/L的5-杂氮胞苷作用72 h后,非甲基化率分别为(9.44±2.01)％、(13.51±2.19)％、(15.76±1.65)％;2、4μmol/L的5-杂氮胞苷作用后,RFC1的非甲基化率较对照组明显升高(P =0.005,P=0.001).2、4μmol/L的5-杂氮胞苷处理后,RFC1 mRNA表达量上升,差异有统计学意义(P=0.003,P=0.000).2μmol/L 5-杂氮胞苷可抑制细胞S期,同时G1期细胞增加;5 nmol/L的MTX引起细胞凋亡,并特异性作用于S期;两者联用可显著增加细胞凋亡,增强S期的抑制作用.结论 U937细胞系中RFC1基因启动子存在异常高甲基化,5-杂氮胞苷可引起去甲基化作用,并引起RFC1表达增加,从而增加MTX引起的细胞凋亡,特异性抑制细胞周期S期.

摘要： The effect of BCG infection on protein acetylation level in U937 cell lines was studied. U937 macrophage model was constructed,and then total cellular protein was extracted after infected with BCG. Western blot was used to detect the changes of total protein acetylation level. The results showed that the BCG infection upregulated the protein acetylation level in matured differentiated U937 cells,and caused in epigenetic changes.%研究卡介苗（ BCG）感染对U937细胞系蛋白质乙酰化水平的影响。构建U937巨噬细胞模型，感染BCG后提取细胞总蛋白，western blot方法检测细胞总蛋白乙酰化水平的改变。结果表明，在分化成熟的U937细胞系中，BCG感染能够上调蛋白质乙酰化水平，引起表观遗传学的改变。

摘要： Degradation of oxidized or oxidatively modified proteins is an essential part of the cellular antioxidant defense system. 4-Hydroxy-2-nonenal (HNE), a major reactive aldehyde formed by lipid peroxidation, causes many types of cellular damage. HNE-modified proteins are degraded by the ubiquitin-proteasome pathway or the lysosomal pathway. However, our previous studies using U937 cells showed that HNE-modified glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) is degraded by cathepsin G. In the present study, we examined whether GAPDH in U937 cells treated with HNE in culture is degraded similarly to that incubated with HNE and U937 cell extract. Treatment with HNE for 10 min in culture decreased GAPDH activity in a concentration dependent manner, but did not affect GAPDH degradation. The proteasome activities were not affected by HNE, but culturing with HNE decreased cathepsin G activity and protein level in a concentration dependent manner. These results suggest that HNE-induced oxidative stress leads to decreased cathepsin G activity and results in the loss of GAPDH degradation. Taken together, our findings indicate that cathepsin G has an important role in the degradation of oxidatively modified GAPDH in U937 cells.

摘要： 目的 探讨不同浓度IL-1β或IL-6对人单核细胞细胞株U937 CD68 mRNA表达的影响及其机制.方法 用不同浓度的人IL-1β或IL-6分别与U937细胞共培养6、12和24 h.应用RT-PCR分别检测各实验组清道夫受体CD68 mRNA的表达变化.结果 在IL-6干预组中,不同浓度水平的IL-6刺激下的表达均较对照组增加,且随IL-6浓度的增加逐级递增;在IL-1β干预组中,不同浓度水平的IL-1β刺激下的表达亦均较对照组增加,但未呈现浓度依从性,高浓度组U937细胞清道夫受体CD68的表达有所下降.结论 IL-1β或IL-6可以诱导U937细胞中CD68的表达,IL-1β或IL-6水平升高可能是动脉粥样硬化发生、发展的重要机制之一.

摘要： 本发明涉及植物天然产物制备技术领域，具体涉及一种同时提取三七皂苷、三七黄酮和三七多糖的方法及其应用。提取方法包括以下依次进行的步骤：使用体积分数为70‑90％的乙醇溶液对药粉进行热浸提取；接下来使用蜡样芽胞杆菌发酵处理药渣，获得发酵终体系；再使用微波辅助对发酵体系中的功效成分进行提取，获得提取液Ⅱ和药渣Ⅱ；最后使用微波辅助对药渣Ⅱ进行提取，获得提取液Ⅲ。其中，提取液Ⅰ、提取液Ⅱ和提取液Ⅲ中分别含有三七总皂苷、三七总黄酮和三七总多糖，上述活性成分均具有较好的抗氧化活性。本方案的制备方法可以应用于抗氧化剂的制备的实践操作用，为相关药品和化妆品等的制备和研发提供性质优良的原材料。

摘要： 一种从三七生粉提取分离三七皂甙R1、人参皂甙Re、三七素的方法，它包括以下步骤：三七生粉以甲醇浸提，得甲醇提取液和残渣，将甲醇提取液浓缩干燥，获得甲醇提取物，甲醇提取物加水，并以石油醚萃取，取水相，以正丁醇萃取，得正丁醇相，蒸干后，得三七皂甙粗提取物，该皂甙粗提取物分离得三七皂甙R1和人参皂甙Re；甲醇提取后三七生粉残渣以水提取，得到水提取物，水提取物以正丁醇萃取，将水层冷冻干燥得三七素粗提取物，三七素粗提物进一步分离纯化得三七，本方法操作简单、新颖。

摘要： 本发明涉及分子技术领域，具体涉及三七SSR标记在三七皂苷R1含量确定上的用途，三七皂苷R1与位点SSR35，SSR43，SSR89，SSR2‑6有关联。本发明对SSR标记与三七皂苷R1的关联性研究，有利于高含量三七皂苷R1三七育种的开展。

摘要： 本发明提供了三七干燥工艺和三七粉制备工艺及其得到的冻干三七和三七粉。三七干燥工艺包括以下步骤：对新鲜三七进行冷冻干燥，得到冻干三七；干燥包括3个阶段：第一干燥阶段的工艺参数包括：加热温度为5‑20°C，加热时间为10‑20h，真空度为25‑35Pa；第二干燥阶段的工艺参数包括：加热温度为20‑40°C，加热时间为3‑12h，真空度为15‑25Pa；第三干燥阶段的工艺参数包括：加热温度为40‑60°C，加热时间为15‑25h，真空度为2‑15Pa。上述三七干燥工艺可减少有效成分流失，保留三七的色泽、气味、形态。三七粉的制备工艺采用超微粉碎方法，工艺操作简单，制得的三七粉有效成分含量高、粒度均一。

摘要： 本发明涉及植物天然产物制备技术领域，具体涉及一种同时提取三七皂苷、三七黄酮和三七多糖的方法及其应用。提取方法包括以下依次进行的步骤：使用体积分数为70‑90％的乙醇溶液对药粉进行热浸提取；接下来使用蜡样芽胞杆菌发酵处理药渣，获得发酵终体系；再使用微波辅助对发酵体系中的功效成分进行提取，获得提取液Ⅱ和药渣Ⅱ；最后使用微波辅助对药渣Ⅱ进行提取，获得提取液Ⅲ。其中，提取液Ⅰ、提取液Ⅱ和提取液Ⅲ中分别含有三七总皂苷、三七总黄酮和三七总多糖，上述活性成分均具有较好的抗氧化活性。本方案的制备方法可以应用于抗氧化剂的制备的实践操作用，为相关药品和化妆品等的制备和研发提供性质优良的原材料。

摘要： 本发明公开了三七二醇、三七三醇皂苷以及三七素的制备方法及其装置，涉及三七素提取技术领域，解决了现有技术中无合适的三七二醇皂苷和三七三醇皂苷工业化生产装置以及方法等技术问题,本发明包括粉碎装置、搅拌釜一、超声波提取装置、过滤装置、搅拌釜二、分液器、反应釜一、反应釜二、减压浓缩器一、干燥器一、减压浓缩器二、真空结晶器、干燥器二、洗脱装置、减压浓缩器三、除杂装置以及葡聚糖凝胶柱；本发明将节省大量的人力、物力，经过特有的技术一次取得三七中含有的三七三醇皂苷、三七二醇皂苷、三七素，从而克服了现有技术的缺陷，节省了大量的资源，其社会效益和经济效益更加清楚，将三七的综合利用的经济效益更加显著。

摘要： 一种以三七、三七根、三七花为原料的饮用酒，其特征在于：将三七、三七根、三七花分别泡入50度的纯粮食酒，浸泡一定时间后取出三七、三七根、三七花，加入50度纯粮食酒进行陈酿，陈酿后进行均质后混合，再根据成品酒的酒精度要求进行调配，过滤后灌装为成品；本发明所提供的饮用酒，具有三七、三七根、三七花苦甘醇和、微苦回甘的复合香味，并保留了三七、三七根、三七花所特有的皂甙、氨基酸、微量元素等成分，在饮用酒的同时，达到了三七、三七根、三七花的药用和食用功效。饮用这种酒，可以健胃生津止渴，滋补肝肾，强壮筋骨，降血压、降血脂、减肥、防癌、抗癌、提神补气，提高心肌供氧能力，增加肌体免疫能力。

摘要： 一种从三七生粉提取分离三七皂甙R1、人参皂甙Re、三七素的方法，它包括以下步骤：三七生粉以甲醇浸提，得甲醇提取液和残渣，将甲醇提取液浓缩干燥，获得甲醇提取物，甲醇提取物加水，并以石油醚萃取，取水相，以正丁醇萃取，得正丁醇相，蒸干后，得三七皂甙粗提取物，该皂甙粗提取物分离得三七皂甙R1和人参皂甙Re；甲醇提取后三七生粉残渣以水提取，得到水提取物，水提取物以正丁醇萃取，将水层冷冻干燥得三七素粗提取物，三七素粗提物进一步分离纯化得三七，本方法操作简单、新颖。

摘要： 本发明公开了一种用于鉴定三七或含三七制品的引物对、探针及方法。本发明的用于鉴定三七或含三七制品的引物对包括序列表中序列1所示的正向引物和序列表中序列2所示的反向引物。本发明的探针为序列表中序列3所示的核酸分子。本发明将实时荧光PCR检测技术应用在三七的鉴别中并找到特异性强的引物来实现简单、快速、准确鉴定三七或含三七制品的方法。

摘要： 本发明涉及中药提取、分离领域，尤其涉及从黑参中提取、分离和鉴定出的一对差向异构体及其提取分离方法。所述的化合物为一对差向异构体，分子式为C