实时荧光RT-PCR
实时荧光RT-PCR的相关文献在2003年到2022年内共计151篇,主要集中在畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂、内科学、植物保护
等领域,其中期刊论文148篇、会议论文3篇、专利文献142244篇;相关期刊92种,包括检验检疫学刊、微生物学通报、疾病监测等;
相关会议3种,包括中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会、第三次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会、第三届全国检验检测检疫学术报告会等;实时荧光RT-PCR的相关文献由659位作者贡献,包括闻伟刚、谭钟、张颖等。
实时荧光RT-PCR—发文量
专利文献>
论文:142244篇
占比:99.89%
总计:142395篇
实时荧光RT-PCR
-研究学者
- 闻伟刚
- 谭钟
- 张颖
- 张舒亚
- 朱水芳
- 卢钟山
- 吕建强
- 吕蓉
- 师永霞
- 张吉红
- 张平
- 张彩虹
- 曹琛福
- 李小波
- 潘良文
- 王芸华
- 花群义
- 贺志昊
- 郑夔
- 马惠琴
- 高琴
- 黄吉城
- 龙冬梅
- 于翠
- 何雅青
- 刘华雷
- 刘月明
- 唐连飞
- 姚相杰
- 娄国强
- 孟芳
- 幸芦琴
- 张永乐
- 张海龙
- 朱中武
- 李想
- 杨廷军
- 杨洪
- 洪烨
- 相大鹏
- 赵晨燕
- 邓丛良
- 郭波旋
- 阮周曦
- 陈红运
- 魏海燕
- 伏晓庆
- 傅俊范
- 元英进
- 冼钰茵
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许玉玲;
王海霞;
李金月;
夏向群;
黄学勇
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摘要:
目的 对比分析新型冠状病毒抗原检测胶体金法与核酸检测实时荧光RT-PCR方法的检测结果,验证抗原检测胶体金法能否快速辅助诊断新型冠状病毒感染。方法 从河南省疾病预防控制中心生物资源库挑选2021年7-8月收集的新冠阳性和新冠阴性鼻拭子各60份,口咽拭子各30份,所有样本用实时荧光RT-PCR方法检测新冠核酸ORF1ab和N基因,用抗原检测胶体金法检测抗原,选择13份阳性样本进行10倍和100倍稀释,两种方法检测,分析胶体金法与核酸检测RT-PCR法检测结果的阳性和阴性一致率,进行统计学Kappa分析。结果 180份样本抗原检测胶体金法与核酸检测RT-PCR法的阳性符合率为98.89%,阴性符合率为100.00%,Kappa=0.989,13个样本10倍和100稀释后胶体金法阳性符合率分别为100%、84.61%。结论 新型冠状病毒抗原检测胶体金法可作为早期辅助确诊新型冠状病毒感染的快速方法。
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王静静;
于晓慧;
克军宏;
彭真奇;
邢安琪;
刘华雷
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摘要:
鸽新城疫是严重危害鸽业健康发展的主要疫病之一,近年来流行呈上升趋势。为满足开展基因Ⅵ型鸽源新城疫病毒快速检测的迫切需求,针对国内流行的基因Ⅵ型新城疫病毒F基因保守区域设计特异性引物和探针,建立了一种可特异检测基因Ⅵ型新城疫病毒的实时荧光RT-PCR方法,并对该方法的特异性、敏感性进行了评估。结果显示,该方法与其他基因型新城疫病毒和常见禽病病毒无交叉反应,检测下限为5 copies/μL。利用该方法对临床采集的120份鸽口咽/泄殖腔拭子样品进行检测,检测结果与病毒分离结果完全一致。结果表明,本研究建立的实时荧光RT-PCR方法特异性强、敏感性高、准确性好,可用于基因Ⅵ型新城疫病毒的快速检测。
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刘建青;
王韬远;
李小宇;
张春雨;
苏颖;
魏健;
张金花;
王永志
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摘要:
洋葱黄矮病毒(Onion yellow dwarf virus,OYDV)是危害葱属植物的主要病毒之一。本试验根据OYDV外壳蛋白(coat protein,CP)基因保守序列设计特异性引物,建立并优化了OYDV实时荧光RT-PCR检测方法,并对其特异性、敏感性和重复性进行了验证。结果显示:标准曲线Ct值与模板拷贝数的对数呈良好的线性关系,相关系数R^(2)为0.996,扩增效率为95.921%;与青葱X病毒(Shallot virus X,SVX)、葱潜隐病毒(Shallot latent virus,SLV)均无交叉反应;最低检出限为2.0×10^(2) copies·μL^(-1),比常规RT-PCR大约高1000倍;组内和组间变异系数均小于2%,具有良好的重复性。利用该方法对分别采集的各45份疑似OYDV感染的分蘖洋葱(珠葱)和大蒜样品进行检测,检出率较常规RT-PCR分别高40.00、6.67百分点,能更加客观地反映样品带毒情况。本试验建立的OYDV实时荧光RT-PCR方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,可用于田间样品OYDV检测,为OYDV的有效防控提供技术支持。
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苑建军;
杨德全;
鞠厚斌;
庄建萍;
葛菲菲;
杨显超;
李鑫;
沈海潇
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摘要:
为灵敏、快速检测猪δ冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV),根据PDCoVM基因保守区域设计引物和探针,建立了一种PDCoV实时荧光RT-PCR检测方法,并评价了该方法的特异性、灵敏性和重复性。结果显示,该方法的拷贝数对数值与Ct值在1.3×10^(3)-1.3×10^(7) copies/μL拷贝数浓度范围内呈现良好的线性关系,R^(2)=0.994;最低检出限为13 copies/μL,且无非特异性扩增;批内和批间重复性试验变异系数(CV)为0.24%~2.15%,均小于3%。利用该方法和普通RT-PCR对42份临床样品同时进行检测,发现本方法比普通RT-PCR灵敏性更高,二者符合率为95.2%。以上结果表明,本试验建立的实时荧光RT-PCR方法灵敏、特异、可靠,可用于PDCoV的临床检测和流行病学调查。
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杜珊珊;
李建东;
李阿茜;
黄晓霞;
刘洋;
王芹;
李川;
梁米芳;
李德新;
王世文
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摘要:
目的 建立可以检测阿瓦朗病毒(Avalon virus,AVAV)和休斯病毒(Hughes virus,HUGV)两种内罗病毒的实时荧光定量RT-PCR检测方法,并进行初步的评价.方法 收集、整理、比对、分析在公共数据库发布的两种病毒基因组核苷酸序列,确定检测靶标,设计特异性引物、探针,优化检测程序,建立实时荧光定量RT-PCR检测方法.利用体外转录技术制备的模拟样本、其他病毒感染标本、病毒株和正常人血标本比较评价所建方法的检测限、特异性、重复性特征.结果 所建实时荧光定量RT-PCR检测方法可有效扩增检测AVAV和HUGA靶标RNA,检测限分别约为20拷贝/μl和70拷贝/μl,检测科萨努尔森林病毒、乙型流感病毒BV和BY型、甲型流感病毒H3N2、黄热病毒、乙型脑炎病毒、克里米亚-冈刚果出血热病毒、发热伴血小板减少综合征、内罗毕羊病毒和塔西那病毒样本无非特异性扩增,两种内罗病毒相互间无交叉反应,重复性比较分析显示变异系数小于2%.结论 本研究建立的检测AVAV和HUGV的实时荧光定量RT-PCR方法,可用于临床样本检测和媒介生物、宿主动物标本筛查,便于病原的快速识别和疾病诊断.
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张蕾;
张秀娟;
张云帆
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摘要:
目的 研究实时荧光依赖解旋酶恒温扩增技术和实时荧光RT-PCR在手足口病中的应用价值.方法 回顾性分析106例疑似手足口病患儿的临床资料.所有患儿均进行实时荧光RT-PCR检测、实时荧光依赖解旋酶恒温扩增技术检测,以临床表现、实验室检查、血清和病原学的综合诊断结果为临床诊断金标准,比较不同检测方法的诊断结果及效能.结果 实时荧光依赖解旋酶恒温扩增技术检测EV通用型、EV71、CoxA16的窗口期及平均用时均短于实时荧光RT-PCR检测,诊断效能均优于实时荧光RT-PCR检测,阳性综合诊断率高于实时荧光RT-PCR检测(P<0.05).结论 实时荧光依赖解旋酶恒温扩增技术在检测手足口病中具有快速、高效、诊断效能高等优势,临床推广应用价值高.
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张体银;
黄嫦娇;
田国宁;
林素洁;
王武军;
张志灯
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摘要:
[背景]蜜蜂急性麻痹病毒(Acute Bee Paralysis Virus,ABPV)是一种高毒力的蜜蜂病毒,可以引起蜜蜂的大批死亡和蜂群衰竭.[目的]建立一种快速、灵敏的ABPV实时荧光RT-PCR检测方法.[方法]根据ABPV衣壳蛋白基因保守序列设计引物和探针,通过对引物、探针浓度和退火温度等反应条件进行优化,建立基于TaqMan探针检测ABPV的实时荧光RT-PCR方法,并对方法的灵敏性、特异性和稳定性进行验证.[结果]ABPV实时荧光RT-PCR检测方法在9.8× 101-9.8× 108 copies/μL之间呈现良好的线性关系,线性相关系数R2为0.998,扩增效率为103.8%.该方法的检测灵敏度为9.8 copies/μL;对其他蜜蜂病毒不发生交叉反应,具有良好的特异性;重复性试验结果显示组内和组间的变异系数分别为0.19%-0.80%和0.57%-1.07%,重复性良好.对2018年-2019年在福建地区采集的70份蜜蜂样品进行ABPV检测,阳性率为2.86%.[结论]建立的ABPV实时荧光RT-PCR检测方法能用于该病的实验室检测、流行病学调查和疫情监测.
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邓志士;
刘佩佩;
雷锦辉;
刘师文;
龚甜;
熊英
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摘要:
目的比较荧光RT-PCR法、酶联免疫吸附测定(ELISA)、胶体金方法在肾综合征出血热早期病例诊断中的价值。方法收集肾综合征出血热疑似病例急性期血清标本,采用双重实时荧光RT-PCR法检测汉坦病毒核酸,采用ELISA法和胶体金法检测汉坦病毒IgM抗体。对不同方法的结果进行统计学分析。结果收集93例肾综合征出血热疑似病例血清93份,病毒核酸阳性数、ELISA法IgM抗体阳性数、胶体金法IgM抗体阳性数分别为43份、33份、32份,阳性率分别为:46.24%、35.48%、34.41%。核酸检测和ELISA法、胶体金法阳性率差异均有统计学意义。ELISA法灵敏度76.74%,特异度100%,准确度89.25%。胶体金法灵敏度74.41%,特异度100%,准确度88.17%。病毒基因型均为汉滩新汉坦病毒。结论实时荧光RT-PCR法灵敏、准确、可对病毒分型,在肾综合征出血热早期验室诊断中有广泛的运用前景。
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LYU Jian-qiang;
吕建强;
杨俊兴;
YANG Jun-xing;
ZONG Hui;
宗卉;
ZHANG Cai-hong;
张彩虹;
HUA Qun-yi;
花群义;
CAO Chen-fu;
曹琛福;
TAO Hong;
陶虹;
何云蔚;
HE Yun-wei;
RUAN Zhou-xi;
阮周曦
- 《第三届全国检验检测检疫学术报告会》
| 2015年
-
摘要:
为了建立鉴别检测小反刍兽疫疫苗毒与野毒的快速分子生物学检测方法,通过对自行测序的疫苗毒基因组序列及GenBank中登录的野毒基因组序列进行比对分析,设计了2套引物和TaqMan荧光探针,对实时荧光RT-PCR反应条件进行优化,建立了小反刍兽疫疫苗毒与野毒实时荧光RT-PCR鉴别检测方法.特异性试验证实.该检测方法只能检测到目的病毒核酸,表明其具有良好的特异性.灵敏性试验发现,检测疫苗株的最低检测限可达1.38mg/L的总RNA,检测野毒株的最低检测限为0.16mg/L的核酸.对同一样品进行重复性检测,检测的荧光扩增曲线阈值完全重合,证明其重复性极好.从180份临床样品中,检测出2份疫苗病毒株阳性样品,其余均为阴性.结果表明,本研究所建立的实时荧光RT-PCR方法能时小反刍兽疫疫苗毒及野毒进行鉴别检测,具有特异性好、灵敏度高、重复性极好的优点,是开展小反刍兽疫疫情监测的有力工具.
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LYU Jian-qiang;
吕建强;
杨俊兴;
YANG Jun-xing;
ZONG Hui;
宗卉;
ZHANG Cai-hong;
张彩虹;
HUA Qun-yi;
花群义;
CAO Chen-fu;
曹琛福;
TAO Hong;
陶虹;
何云蔚;
HE Yun-wei;
RUAN Zhou-xi;
阮周曦
- 《第三届全国检验检测检疫学术报告会》
| 2015年
-
摘要:
为了建立鉴别检测小反刍兽疫疫苗毒与野毒的快速分子生物学检测方法,通过对自行测序的疫苗毒基因组序列及GenBank中登录的野毒基因组序列进行比对分析,设计了2套引物和TaqMan荧光探针,对实时荧光RT-PCR反应条件进行优化,建立了小反刍兽疫疫苗毒与野毒实时荧光RT-PCR鉴别检测方法.特异性试验证实.该检测方法只能检测到目的病毒核酸,表明其具有良好的特异性.灵敏性试验发现,检测疫苗株的最低检测限可达1.38mg/L的总RNA,检测野毒株的最低检测限为0.16mg/L的核酸.对同一样品进行重复性检测,检测的荧光扩增曲线阈值完全重合,证明其重复性极好.从180份临床样品中,检测出2份疫苗病毒株阳性样品,其余均为阴性.结果表明,本研究所建立的实时荧光RT-PCR方法能时小反刍兽疫疫苗毒及野毒进行鉴别检测,具有特异性好、灵敏度高、重复性极好的优点,是开展小反刍兽疫疫情监测的有力工具.
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LYU Jian-qiang;
吕建强;
杨俊兴;
YANG Jun-xing;
ZONG Hui;
宗卉;
ZHANG Cai-hong;
张彩虹;
HUA Qun-yi;
花群义;
CAO Chen-fu;
曹琛福;
TAO Hong;
陶虹;
何云蔚;
HE Yun-wei;
RUAN Zhou-xi;
阮周曦
- 《第三届全国检验检测检疫学术报告会》
| 2015年
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摘要:
为了建立鉴别检测小反刍兽疫疫苗毒与野毒的快速分子生物学检测方法,通过对自行测序的疫苗毒基因组序列及GenBank中登录的野毒基因组序列进行比对分析,设计了2套引物和TaqMan荧光探针,对实时荧光RT-PCR反应条件进行优化,建立了小反刍兽疫疫苗毒与野毒实时荧光RT-PCR鉴别检测方法.特异性试验证实.该检测方法只能检测到目的病毒核酸,表明其具有良好的特异性.灵敏性试验发现,检测疫苗株的最低检测限可达1.38mg/L的总RNA,检测野毒株的最低检测限为0.16mg/L的核酸.对同一样品进行重复性检测,检测的荧光扩增曲线阈值完全重合,证明其重复性极好.从180份临床样品中,检测出2份疫苗病毒株阳性样品,其余均为阴性.结果表明,本研究所建立的实时荧光RT-PCR方法能时小反刍兽疫疫苗毒及野毒进行鉴别检测,具有特异性好、灵敏度高、重复性极好的优点,是开展小反刍兽疫疫情监测的有力工具.
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LYU Jian-qiang;
吕建强;
杨俊兴;
YANG Jun-xing;
ZONG Hui;
宗卉;
ZHANG Cai-hong;
张彩虹;
HUA Qun-yi;
花群义;
CAO Chen-fu;
曹琛福;
TAO Hong;
陶虹;
何云蔚;
HE Yun-wei;
RUAN Zhou-xi;
阮周曦
- 《第三届全国检验检测检疫学术报告会》
| 2015年
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摘要:
为了建立鉴别检测小反刍兽疫疫苗毒与野毒的快速分子生物学检测方法,通过对自行测序的疫苗毒基因组序列及GenBank中登录的野毒基因组序列进行比对分析,设计了2套引物和TaqMan荧光探针,对实时荧光RT-PCR反应条件进行优化,建立了小反刍兽疫疫苗毒与野毒实时荧光RT-PCR鉴别检测方法.特异性试验证实.该检测方法只能检测到目的病毒核酸,表明其具有良好的特异性.灵敏性试验发现,检测疫苗株的最低检测限可达1.38mg/L的总RNA,检测野毒株的最低检测限为0.16mg/L的核酸.对同一样品进行重复性检测,检测的荧光扩增曲线阈值完全重合,证明其重复性极好.从180份临床样品中,检测出2份疫苗病毒株阳性样品,其余均为阴性.结果表明,本研究所建立的实时荧光RT-PCR方法能时小反刍兽疫疫苗毒及野毒进行鉴别检测,具有特异性好、灵敏度高、重复性极好的优点,是开展小反刍兽疫疫情监测的有力工具.
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赵晨燕;
李卓;
阎宝山;
张峰;
郝娃;
张春涛;
王佑春
- 《第三次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会》
| 2007年
-
摘要:
目的:分析戊型肝炎病毒各生物志物之间关系以及各标志物在早期诊断中的作用。方法从临床收集急性散发性肝炎患者的血清,用酶联免疫试剂检测戊肝病毒IgG抗体、IgM抗体和抗原,用实时荧光RT-PCR方法检测核酸,比较其相关关系。结果 在121例急性散发性肝炎中,HEV IgM抗体阴性者为51例,其中抗原或/和核酸阳性者占45.1﹪;IgM抗体阳性者70份,其中抗原或/和核酸阳性者占67.1﹪。HEV IgG抗体在IgM抗体、抗原和核酸均阴性的患者中阳性率为53.6﹪;在IgM阴性、而抗原或/和核酸阳性者中阳性率为73.9﹪;在IgM阳性的HEV感染者中阳性率为92.9﹪。HEV抗原与核酸的符合率为81.8﹪,抗原与IgM抗体的符合率为58.7﹪,而IgM抗体与核酸的符合率为53.7﹪。结论 在HEV感染的早期诊断中增加抗原和核酸的检测有助于提高检出率。
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赵晨燕;
李卓;
阎宝山;
张峰;
郝娃;
张春涛;
王佑春
- 《第三次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会》
| 2007年
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摘要:
目的:分析戊型肝炎病毒各生物志物之间关系以及各标志物在早期诊断中的作用。方法从临床收集急性散发性肝炎患者的血清,用酶联免疫试剂检测戊肝病毒IgG抗体、IgM抗体和抗原,用实时荧光RT-PCR方法检测核酸,比较其相关关系。结果 在121例急性散发性肝炎中,HEV IgM抗体阴性者为51例,其中抗原或/和核酸阳性者占45.1﹪;IgM抗体阳性者70份,其中抗原或/和核酸阳性者占67.1﹪。HEV IgG抗体在IgM抗体、抗原和核酸均阴性的患者中阳性率为53.6﹪;在IgM阴性、而抗原或/和核酸阳性者中阳性率为73.9﹪;在IgM阳性的HEV感染者中阳性率为92.9﹪。HEV抗原与核酸的符合率为81.8﹪,抗原与IgM抗体的符合率为58.7﹪,而IgM抗体与核酸的符合率为53.7﹪。结论 在HEV感染的早期诊断中增加抗原和核酸的检测有助于提高检出率。