THP-1细胞

摘要： NLRP3炎症小体在炎症反应中发挥重要作用.为了探讨Kv1.3钾离子通道阻断剂对NLRP3炎症小体活化的抑制作用.通过体外培养THP-1细胞,佛波酯诱导其分化为巨噬细胞,LPS联合ATP刺激,试验组提前加入Kv1.3通道阻断剂ADWX-1和不同浓度的PAP-1干预,ELISA检测上清中炎性细胞因子IL-1β分泌,Western blotting检测IL-1β、caspase-1蛋白表达,免疫荧光检测ASC的表达和斑点的形成等试验进行研究.结果显示:浓度为100 pmol/L ADWX-1和不同浓度的Kv1.3通道阻断剂PAP-1(浓度分别为100 nmol/L,1μmol/L,10μmol/L)能够浓度梯度依赖的抑制THP-1细胞上清中细胞炎性因子IL-1β产生.浓度为100 pmol/L ADWX-1处理能够抑制IL-1β成熟片段p17的分泌,浓度为10μmol/L PAP-1处理能够抑制caspase-1切割片段p10的生成.THP-1细胞中LPS,ATP双刺激能够形成ASC斑点,浓度为10μmol/L PAP-1处理能够抑制ASC的表达和斑点的形成.

摘要： 目的探讨甲基莲心碱对结核分枝杆菌(MTB)诱导的THP-1细胞凋亡、炎性反应的的影响及对miR-3619-5p的调控作用。方法体外培养人单核细胞THP-1、佛波酯(PMA)刺激细胞转化为巨噬细胞,MTB感染巨噬细胞,不同浓度的甲基莲心碱处理细胞,分别将miR-con、miR-3619-5p mimics转染至MTB感染的巨噬细胞,分别将miR-con、miR-3619-5p mimics转染至MTB感染的巨噬细胞后加入甲基莲心碱处理细胞;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、IL-10的水平;采用qRT-PCR法检测miR-3619-5p的表达水平;Western blot法检测Bax、Bcl-2蛋白表达量。结果与NC组比较,MTB组凋亡率、Bax蛋白水平及TNF-α、IL-6、IL-10水平升高(P<0.05),Bcl-2蛋白水平降低(P<0.05),甲基莲心碱可明显逆转上述作用(P<0.05);MTB感染的巨噬细胞中miR-3619-5p的表达水平降低(P<0.05),而甲基莲心碱可明显提高miR-3619-5p的表达水平(P<0.05);转染miR-3619-5p mimics可明显降低MTB感染的巨噬细胞凋亡率(P<0.05),降低Bax蛋白水平及TNF-α、IL-6、IL-10的水平(P<0.05),提高Bcl-2蛋白水平(P<0.05),而转染anti-miR-3619-5p可明显逆转上述作用(P<0.05);转染anti-miR-3619-5p可明显逆转甲基莲心碱对MTB感染的巨噬细胞凋亡及炎性反应的作用。结论甲基莲心碱可通过上调miR-3619-5p的表达而抑制MTB诱导的THP-1源巨噬细胞凋亡及炎性反应,从而缓解结核感染。

摘要： 目的探讨PPARD基因在急性髓系白血病(AML)患者骨髓中的表达和意义并分析PPARD与JAK-STAT信号通路的关系及对AML细胞株THP-1增殖的影响。方法收集我院初诊AML患者和非血液疾病患者的临床资料和骨髓标本,采用RT-qPCR、Western blot分别检测AML患者中PPARD mRNA和蛋白表达,并分析其表达与患者性别、年龄、骨髓幼稚细胞百分比、白细胞数等的关系;培养THP-1细胞至对数生长期,用不同浓度(0、0.1、1、5、10μM)PPARD抑制剂(GSK3787)分别作用THP-1细胞24、48、72 h后,CCK-8法检测THP-1细胞的增殖,确定最佳药物作用浓度及时间;激活及抑制PPARD后分别检测JAK2、STAT3的表达,分析PPARD与JAK2/STAT3信号通路的关系。结果收集AML患者46例,对照组17例,AML患者PPARD在mRNA表达水平上低于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05),且与AML患者的年龄、性别和FBA分型有关,而在蛋白水平上高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.05);抑制PPARD后,JAK2、STAT3表达均明显下降,激活PPARD表达后,JAK2、STAT3蛋白表达均增加,均具有统计学差异(P<0.05)。结论AML患者中PPARD mRNA低于对照组,蛋白高于对照组;PPARD可能通过调控JAK2/STAT3信号通路的表达来影响THP-1细胞的增殖。

摘要： 目的探讨弓形虫Ⅱ型(Me49)ROP16蛋白在急性单核细胞白血病细胞株THP-1中的表达及其对THP-1细胞增殖与凋亡的影响。方法构建过表达ROP16(overExp-ROP16)和空载体(overExp-NC)慢病毒,通过转染THP-1细胞,72 h后观察荧光表达情况,采用PCR与Western blot验证ROP16在THP-1细胞中的表达。免疫荧光技术检测ROP16蛋白在THP-1细胞中的定位。CCK-8与流式细胞术检测细胞增殖及凋亡。采用qRT-PCR检测细胞凋亡相关因子Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA相对表达水平。Western blot检测Bax、Bcl-2、Pro-Caspase-3和Cleaved-Caspase-3蛋白的表达变化。结果构建的过表达ROP16重组慢病毒转染到THP-1细胞后,可观察强荧光信号,ROP16蛋白在THP-1细胞中成功表达。免疫荧光结果表明ROP16蛋白定位于THP-1细胞核。CCK-8与流式细胞术证实ROP16蛋白抑制THP-1细胞的增殖并促进其凋亡(均P<0.05)。与对照组相比,过表达组促凋亡因子Bax、Caspase-3 mRNA高表达(P<0.05),抗凋亡因子Bcl-2 mRNA低表达(P<0.01),Bax与Cleaved-Caspase-3蛋白水平上调(P<0.01),Bcl-2与Pro-Caspase-3蛋白水平下调(P<0.01)。结论构建的慢病毒表达质粒overExp-ROP16可在急性单核细胞白血病细胞株THP-1中表达且通过入核调节凋亡蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3而抑制THP-1细胞增殖,促进其凋亡。

摘要： 目的:观察低极性20(S)-人参皂苷Rg;(S-Rg;)体外抑制人急性单核细胞白血病THP-1细胞迁移和侵袭的作用。方法:将不同浓度(0、20、40和80 mg/L)的S-Rg;加入THP-1细胞培养体系,Transwell小室检测S-Rg;抑制细胞迁移的作用。采用免疫细胞化学、免疫荧光、Western blot和RT-qPCR等多种方法,检测S-Rg;对THP1细胞黏附、迁移和侵袭相关蛋白表达的影响及其相关机制。结果:S-Rg;能有效地抑制THP-1细胞迁移,下调黏附相关蛋白N-cadherin,迁移相关蛋白C-X-C趋化因子受体4(CXCR4)和基质细胞衍生因子1(SDF-1),以及侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶2(MMP2)的表达,但上调抑制迁移侵袭相关蛋白E-cadherin、金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP1)和TIMP3表达,同时下调CXCR4 mRNA表达,上调E-cadherin和TIMP1 mRNA表达,呈剂量依赖性。此外,S-Rg;降低PI3K/AKT信号通路相关蛋白激酶的磷酸化水平。结论:S-Rg;能有效抑制人急性单核细胞白血病THP-1细胞的迁移和侵袭,其机制可能与降低细胞内PI3K/AKT信号通路相关蛋白激酶的磷酸化水平有关。

摘要： 旨在探讨牛分枝杆菌减毒株卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin,BCG)感染人单核巨噬细胞THP-1细胞后PERK/ATF4/CHOP通路对NLRP3炎性小体的调控作用。在BCG单独感染或与PERK小干扰RNA共处理THP-1细胞后,采用qRT-PCR和Western blot方法检测NLRP3炎性小体相关分子和PERK/ATF4/CHOP通路标志性分子在mRNA、蛋白水平的表达;在BCG单独感染或与PERK抑制剂GSK2656157共处理THP-1细胞后,分别采用qRT-PCR和Western blot方法检测NLRP3炎性小体相关分子和PERK/ATF4/CHOP通路标志性分子在mRNA、蛋白水平的表达,采用ELISA方法检测白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)和白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)的释放量,采用CCK-8方法检测THP-1细胞活率,采用免疫荧光检测NLRP3与ASC的共定位。结果表明:在BCG单独感染THP-1细胞不同时间后,PERK、NLRP3、ASC和Caspase-1在蛋白水平的表达均随感染时间延长而升高,且在24 h达到最高(P<0.001),IL-1β和IL-18的释放随时间递增,24 h达到最高(P<0.001)。在BCG单独感染或与PERK小干扰RNA共处理THP-1细胞24 h后,与未感染对照组相比,siNC+BCG感染组NLRP3、ASC、Caspase-1、PERK、ATF4、CHOP分子的mRNA和蛋白表达均显著(P<0.05)或极显著(P<0.001)上调,而siPERK+BCG感染组与siNC+BCG感染组相比,NLRP3等关键分子的mRNA和蛋白表达均显著(P<0.05)或极显著下调(P<0.01,P<0.001);在BCG单独感染或与GSK2656157共同作用THP-1细胞24 h后,与未感染对照组相比,BCG感染组NLRP3、ASC、Caspase-1、PERK、ATF4、CHOP分子的mRNA和蛋白表达均显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)上调,IL-1β和IL-18的释放极显著增加(P<0.001),细胞活率极显著下调(P<0.001),而BCG+GSK2656157感染组与BCG单独感染组相比,上述分子的mRNA和蛋白表达均显著(P<0.05)或极显著下调(P<0.01),IL-1β和IL-18的释放显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)减少,细胞活率显著上调(P<0.05),免疫荧光的结果显示NLRP3与ASC存在共定位,且GSK2656157可以极显著抑制BCG感染引起的NLRP3和ASC的表达上调(P<0.001)。以上研究结果表明,PERK/ATF4/CHOP通路对BCG感染巨噬细胞后NLRP3炎性小体的活化具有调控作用。

摘要： 为了探究弓形虫VEG株ROP16蛋白在THP-1细胞中的表达及对其免疫反应的影响和相关机制,本研究利用慢病毒构建过表达ROP16(overEep-ROP16)载体,空载体(overEep-NC)为对照,通过转染THP-1细胞构建稳转细胞株,对其荧光蛋白表达情况、ROP16在THP-1细胞中的表达及定位进行检测;通过RT-PCR检测炎性因子IL-1β、IL-18、TNF-α、IL-10、IL-12 mRNA相对表达水平;Western-blot方法检测炎性小体NLRP3、Caspase-1蛋白与信号通路蛋白STAT3、pTyr705-STAT3的表达水平。结果显示,构建的过表达ROP16重组慢病毒转染THP-1细胞后可观察到强绿色荧光,在THP-1细胞中rop16基因在mRNA与蛋白水平均成功表达且该蛋白定位于THP-1细胞核;与对照组相比,过表达组促炎细胞因子IL-1β、IL-18、TNF-αmRNA表达水平上调(P0.05)。上述结果表明,构建的过表达ROP16重组慢病毒稳转染至THP-1细胞内并表达蛋白,表达的蛋白定位于THP-1细胞核内,该蛋白能激活NLRP3炎性小体促发炎症的发生并通过磷酸化STAT3 Tyr705调控抗炎作用。

摘要： 目的探讨虎杖苷对急性单核细胞白血病细胞株THP-1增殖及凋亡的影响及可能的作用机制。方法以不同梯度浓度的虎杖苷处理THP-1细胞24 h、48 h,CCK-8法检测细胞增殖活力,并计算半数抑制浓度。取对数生长期的THP-1细胞,分为虎杖苷处理组(处理浓度为半数抑制浓度)和空白对照组(细胞中未施加虎杖苷溶液处理),培养48 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期;Western blot法检测PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR、p70 S6K、p-p70 S6K蛋白的表达。结果虎杖苷可有效抑制THP-1细胞的增殖,48 h的半数抑制浓度为1800μmol/L。经1800μmol/L的虎杖苷溶液作用48 h后,THP-1细胞的凋亡率较空白对照组显著增加(P<0.05);细胞周期出现G0/G1期至S期的阻滞,表现为G0/G1期的细胞比例较空白对照组明显上升,S期的细胞比例较空白对照组显著下降(P<0.05);PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR、p70 S6K、p-p70 S6K蛋白表达较空白对照组显著降低(P<0.05)。结论虎杖苷可有效抑制THP-1细胞的增殖,阻滞细胞周期并诱导细胞凋亡,其作用机制可能与PI3K/AKT/mTOR信号通路的抑制表达有关。

摘要： 目的 分析Rho相关激酶(ROCK1)对巨噬细胞M1极化的影响。方法 巨噬细胞系THP1细胞接种于6孔板中,以每孔100 ng/ml终浓度的佛波酯(PMA)诱导48 h细胞贴壁,分化为M0巨噬细胞。向M0细胞的培养基中添加干扰素-γ(IFN-γ)20 ng/ml、脂多糖(LPS)100 ng/ml继续诱导48 h设为M1组;向M0细胞的培养基中添加IFN-γ20 ng/ml、LPS 100 ng/ml、ROCK1抑制剂Y27632 1μmol/L继续诱导48 h设为M1+Y27632组;添加等量的PBS 48 h设为对照M0组。观察THP1来源巨噬细胞向经典激活的巨噬细胞(M1)极化过程中的形态改变;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单核细胞趋化性蛋白1(MCP1)、CXC趋化因子配体16(CXCL16)和ROCK1 mRNA表达水平;Western blot检测ROCK1蛋白表达量;流式细胞术检测各组细胞表面M1型标志物CD86的表达及抑制ROCK1后各组细胞活性氧(ROS)的水平。结果 THP1巨噬细胞向M1极化过程中,M1组细胞比对照M0组伸出更多伪足。与对照M0组相比,M1组细胞IL-6和CXCL16的mRNA水平均显著增加(P<0.05);M1组细胞中ROCK1的蛋白和mRNA水平均显著增加(P<0.05)。检测添加ROCK1抑制剂Y27632后各组中促炎因子表达水平的变化,结果显示:与对照M0组相比,M1组中促炎因子IL-6、TNF-α、MCP-1、CXCL16的mRNA表达水平显著升高(P<0.05);M1+Y27632组IL-6、TNF-α、MCP-1、CXCL16的mRNA表达水平显著低于M1组(P<0.01)。流式细胞术检测结果显示,M1组中CD86阳性细胞的比例显著高于对照M0组(P<0.01),M1+Y27632组CD86阳性细胞的比例显著低于M1组(P<0.05);M1组细胞内的ROS水平较对照M0组显著上升(P<0.01),M1+Y27632组ROS的水平显著低于M1组(P<0.01)。结论 抑制ROCK1可能通过ROS抑制THP1巨噬细胞向M1的极化。

摘要： 目的:基于核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体通路探讨miR-155对脂多糖(LPS)诱导的THP-1巨噬细胞炎症反应的调控作用。方法:构建LPS诱导的THP-1巨噬细胞炎症模型,将细胞分为空白对照组、LPS组、miR-155过表达组和miR-155阴性对照组,实时荧光定量聚合酶链反应检测白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和NLRP3的表达变化;酶联免疫吸附试验测定IL-1β和TNF-α的分泌水平;蛋白质印迹法检测NLRP3和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)的表达。结果:LPS诱导细胞中炎症因子、NLRP3和miR-155表达;过表达miR-155,进一步促进炎症因子NLRP3和Caspase-1蛋白的表达。结论:miR-155通过激活其潜在作用靶点NLRP3促进LPS诱导的THP-1巨噬细胞炎症反应。

摘要： 目的：以THP-1细胞为载体,观察荆芥挥发油抗炎作用与NLRP3炎症小体激活相关的调控作用机制. 方法：MTS法测定荆芥挥发油对细胞的毒性作用;利用佛波酯(PMA)将THP-1细胞诱导分化为巨噬细胞,然后采用LPS与激活物(ATP、Nigericin、CPPD或CaCl2)进行造模,观察荆芥挥发油对NLRP3炎症小体激活的影响,ELISA法检测细胞上清中IL-1β、IL-18水平;RT-PCR法检测细胞中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-1α、IL-6mRNA的表达. 结果：荆芥挥发油≤0.4mg/mL时对THP-1巨噬细胞无毒;0.2mg/mL浓度荆芥挥发油对4种激活物诱导的THP-1巨噬细胞上清中IL-1β的高分泌具有明显抑制作用(P＜0.05或P＜0.01),且对ATP或Nigericin诱导的THP-1巨噬细胞NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-1α、IL-6mRNA的高表达具有显著下调作用(P＜0.05或P＜0.01). 结论：荆芥挥发油体外能抑制ATP、Nigericin、CPPD或CaCl2诱导的THP-1巨噬细胞上清中IL-1β的高分泌,抑制ATP或Nigericin致THP-1巨噬细胞裂解液中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-1α、IL-6mRNA的高表达,其抗炎作用发挥与干预NLRP3炎症小体的激活有关.

摘要： 目的：以THP-1细胞为载体,观察荆芥挥发油抗炎作用与NLRP3炎症小体激活相关的调控作用机制. 方法：MTS法测定荆芥挥发油对细胞的毒性作用;利用佛波酯(PMA)将THP-1细胞诱导分化为巨噬细胞,然后采用LPS与激活物(ATP、Nigericin、CPPD或CaCl2)进行造模,观察荆芥挥发油对NLRP3炎症小体激活的影响,ELISA法检测细胞上清中IL-1β、IL-18水平;RT-PCR法检测细胞中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-1α、IL-6mRNA的表达. 结果：荆芥挥发油≤0.4mg/mL时对THP-1巨噬细胞无毒;0.2mg/mL浓度荆芥挥发油对4种激活物诱导的THP-1巨噬细胞上清中IL-1β的高分泌具有明显抑制作用(P＜0.05或P＜0.01),且对ATP或Nigericin诱导的THP-1巨噬细胞NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-1α、IL-6mRNA的高表达具有显著下调作用(P＜0.05或P＜0.01). 结论：荆芥挥发油体外能抑制ATP、Nigericin、CPPD或CaCl2诱导的THP-1巨噬细胞上清中IL-1β的高分泌,抑制ATP或Nigericin致THP-1巨噬细胞裂解液中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-1α、IL-6mRNA的高表达,其抗炎作用发挥与干预NLRP3炎症小体的激活有关.

摘要： 目的：以THP-1细胞为载体,观察荆芥挥发油抗炎作用与NLRP3炎症小体激活相关的调控作用机制. 方法：MTS法测定荆芥挥发油对细胞的毒性作用;利用佛波酯(PMA)将THP-1细胞诱导分化为巨噬细胞,然后采用LPS与激活物(ATP、Nigericin、CPPD或CaCl2)进行造模,观察荆芥挥发油对NLRP3炎症小体激活的影响,ELISA法检测细胞上清中IL-1β、IL-18水平;RT-PCR法检测细胞中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-1α、IL-6mRNA的表达. 结果：荆芥挥发油≤0.4mg/mL时对THP-1巨噬细胞无毒;0.2mg/mL浓度荆芥挥发油对4种激活物诱导的THP-1巨噬细胞上清中IL-1β的高分泌具有明显抑制作用(P＜0.05或P＜0.01),且对ATP或Nigericin诱导的THP-1巨噬细胞NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-1α、IL-6mRNA的高表达具有显著下调作用(P＜0.05或P＜0.01). 结论：荆芥挥发油体外能抑制ATP、Nigericin、CPPD或CaCl2诱导的THP-1巨噬细胞上清中IL-1β的高分泌,抑制ATP或Nigericin致THP-1巨噬细胞裂解液中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-1α、IL-6mRNA的高表达,其抗炎作用发挥与干预NLRP3炎症小体的激活有关.

摘要： 目的：以THP-1细胞为载体,观察荆芥挥发油抗炎作用与NLRP3炎症小体激活相关的调控作用机制. 方法：MTS法测定荆芥挥发油对细胞的毒性作用;利用佛波酯(PMA)将THP-1细胞诱导分化为巨噬细胞,然后采用LPS与激活物(ATP、Nigericin、CPPD或CaCl2)进行造模,观察荆芥挥发油对NLRP3炎症小体激活的影响,ELISA法检测细胞上清中IL-1β、IL-18水平;RT-PCR法检测细胞中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-1α、IL-6mRNA的表达. 结果：荆芥挥发油≤0.4mg/mL时对THP-1巨噬细胞无毒;0.2mg/mL浓度荆芥挥发油对4种激活物诱导的THP-1巨噬细胞上清中IL-1β的高分泌具有明显抑制作用(P＜0.05或P＜0.01),且对ATP或Nigericin诱导的THP-1巨噬细胞NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-1α、IL-6mRNA的高表达具有显著下调作用(P＜0.05或P＜0.01). 结论：荆芥挥发油体外能抑制ATP、Nigericin、CPPD或CaCl2诱导的THP-1巨噬细胞上清中IL-1β的高分泌,抑制ATP或Nigericin致THP-1巨噬细胞裂解液中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-1α、IL-6mRNA的高表达,其抗炎作用发挥与干预NLRP3炎症小体的激活有关.

摘要： 目的：以THP-1细胞为载体,观察荆芥挥发油抗炎作用与NLRP3炎症小体激活相关的调控作用机制. 方法：MTS法测定荆芥挥发油对细胞的毒性作用;利用佛波酯(PMA)将THP-1细胞诱导分化为巨噬细胞,然后采用LPS与激活物(ATP、Nigericin、CPPD或CaCl2)进行造模,观察荆芥挥发油对NLRP3炎症小体激活的影响,ELISA法检测细胞上清中IL-1β、IL-18水平;RT-PCR法检测细胞中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-1α、IL-6mRNA的表达. 结果：荆芥挥发油≤0.4mg/mL时对THP-1巨噬细胞无毒;0.2mg/mL浓度荆芥挥发油对4种激活物诱导的THP-1巨噬细胞上清中IL-1β的高分泌具有明显抑制作用(P＜0.05或P＜0.01),且对ATP或Nigericin诱导的THP-1巨噬细胞NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-1α、IL-6mRNA的高表达具有显著下调作用(P＜0.05或P＜0.01). 结论：荆芥挥发油体外能抑制ATP、Nigericin、CPPD或CaCl2诱导的THP-1巨噬细胞上清中IL-1β的高分泌,抑制ATP或Nigericin致THP-1巨噬细胞裂解液中NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-1α、IL-6mRNA的高表达,其抗炎作用发挥与干预NLRP3炎症小体的激活有关.

摘要： 目的:建立类鼻疽伯克霍尔德氏菌(Burkholderia pseudomallei,B.pseudomallei, BP for short)感染人急性单核白血病细胞THP-1的细胞模型,探讨聚乙二醇3350 (PEG 3350)促进细胞融合对细菌侵入细胞及胞内生存的影响,对比类鼻疽伯克霍尔德菌与其减毒株(Burkholderia thailandensis,B.thailandensis,BT for short)的感染特性,为进一步阐明类鼻疽伯克霍尔德菌感染机制奠定基础.rn 方法:通过绘制细菌生长曲线,探讨类鼻疽伯克霍尔德菌及其减毒株的增殖规律;通过投射电镜观察细菌胞内感染状态和宿主细胞的超微病理变化;分析不同时相的细菌入胞率和胞内生存状态探讨细菌与宿主细胞的相互作用;通过检测受感染细胞培养液的上清和病人血清中的细胞因子,评价宿主细胞的反应性和PEG对于细菌侵入细胞及胞内生存的影响,以及对比细胞受类鼻疽伯克霍尔德菌与其减毒株感染后的炎症反应性,从而评价该模型的稳定性.rn 结果:确定了B.pseudomallei和B.thailandensis的生长规律和感染时相特征及超微病理损伤.炎症因子测定中,两种细菌感染细胞后分泌的TNF-a出现感染中期的高峰,受BP感染的细胞的IL-6分泌则呈双峰改变,受BT感染的细胞IL-6的分泌和PEG对细胞分泌炎症因子的影响更为复杂.同时,病人血清中细胞因子的检测则没有出现显示出一定的规律,与其临床转归关系也不明确.rn 结论:本试验成功构建类鼻疽伯克霍尔德菌感染THP-1细胞的模型,初步探讨了类鼻疽伯克霍尔德菌感染宿主细胞机制,为进一步研究该病原菌与宿主细胞的相互作用提供了前提条件.

摘要： 目的:建立类鼻疽伯克霍尔德氏菌(Burkholderia pseudomallei,B.pseudomallei, BP for short)感染人急性单核白血病细胞THP-1的细胞模型,探讨聚乙二醇3350 (PEG 3350)促进细胞融合对细菌侵入细胞及胞内生存的影响,对比类鼻疽伯克霍尔德菌与其减毒株(Burkholderia thailandensis,B.thailandensis,BT for short)的感染特性,为进一步阐明类鼻疽伯克霍尔德菌感染机制奠定基础.rn 方法:通过绘制细菌生长曲线,探讨类鼻疽伯克霍尔德菌及其减毒株的增殖规律;通过投射电镜观察细菌胞内感染状态和宿主细胞的超微病理变化;分析不同时相的细菌入胞率和胞内生存状态探讨细菌与宿主细胞的相互作用;通过检测受感染细胞培养液的上清和病人血清中的细胞因子,评价宿主细胞的反应性和PEG对于细菌侵入细胞及胞内生存的影响,以及对比细胞受类鼻疽伯克霍尔德菌与其减毒株感染后的炎症反应性,从而评价该模型的稳定性.rn 结果:确定了B.pseudomallei和B.thailandensis的生长规律和感染时相特征及超微病理损伤.炎症因子测定中,两种细菌感染细胞后分泌的TNF-a出现感染中期的高峰,受BP感染的细胞的IL-6分泌则呈双峰改变,受BT感染的细胞IL-6的分泌和PEG对细胞分泌炎症因子的影响更为复杂.同时,病人血清中细胞因子的检测则没有出现显示出一定的规律,与其临床转归关系也不明确.rn 结论:本试验成功构建类鼻疽伯克霍尔德菌感染THP-1细胞的模型,初步探讨了类鼻疽伯克霍尔德菌感染宿主细胞机制,为进一步研究该病原菌与宿主细胞的相互作用提供了前提条件.

摘要： 目的:建立类鼻疽伯克霍尔德氏菌(Burkholderia pseudomallei,B.pseudomallei, BP for short)感染人急性单核白血病细胞THP-1的细胞模型,探讨聚乙二醇3350 (PEG 3350)促进细胞融合对细菌侵入细胞及胞内生存的影响,对比类鼻疽伯克霍尔德菌与其减毒株(Burkholderia thailandensis,B.thailandensis,BT for short)的感染特性,为进一步阐明类鼻疽伯克霍尔德菌感染机制奠定基础.rn 方法:通过绘制细菌生长曲线,探讨类鼻疽伯克霍尔德菌及其减毒株的增殖规律;通过投射电镜观察细菌胞内感染状态和宿主细胞的超微病理变化;分析不同时相的细菌入胞率和胞内生存状态探讨细菌与宿主细胞的相互作用;通过检测受感染细胞培养液的上清和病人血清中的细胞因子,评价宿主细胞的反应性和PEG对于细菌侵入细胞及胞内生存的影响,以及对比细胞受类鼻疽伯克霍尔德菌与其减毒株感染后的炎症反应性,从而评价该模型的稳定性.rn 结果:确定了B.pseudomallei和B.thailandensis的生长规律和感染时相特征及超微病理损伤.炎症因子测定中,两种细菌感染细胞后分泌的TNF-a出现感染中期的高峰,受BP感染的细胞的IL-6分泌则呈双峰改变,受BT感染的细胞IL-6的分泌和PEG对细胞分泌炎症因子的影响更为复杂.同时,病人血清中细胞因子的检测则没有出现显示出一定的规律,与其临床转归关系也不明确.rn 结论:本试验成功构建类鼻疽伯克霍尔德菌感染THP-1细胞的模型,初步探讨了类鼻疽伯克霍尔德菌感染宿主细胞机制,为进一步研究该病原菌与宿主细胞的相互作用提供了前提条件.

摘要： 目的:建立类鼻疽伯克霍尔德氏菌(Burkholderia pseudomallei,B.pseudomallei, BP for short)感染人急性单核白血病细胞THP-1的细胞模型,探讨聚乙二醇3350 (PEG 3350)促进细胞融合对细菌侵入细胞及胞内生存的影响,对比类鼻疽伯克霍尔德菌与其减毒株(Burkholderia thailandensis,B.thailandensis,BT for short)的感染特性,为进一步阐明类鼻疽伯克霍尔德菌感染机制奠定基础.rn 方法:通过绘制细菌生长曲线,探讨类鼻疽伯克霍尔德菌及其减毒株的增殖规律;通过投射电镜观察细菌胞内感染状态和宿主细胞的超微病理变化;分析不同时相的细菌入胞率和胞内生存状态探讨细菌与宿主细胞的相互作用;通过检测受感染细胞培养液的上清和病人血清中的细胞因子,评价宿主细胞的反应性和PEG对于细菌侵入细胞及胞内生存的影响,以及对比细胞受类鼻疽伯克霍尔德菌与其减毒株感染后的炎症反应性,从而评价该模型的稳定性.rn 结果:确定了B.pseudomallei和B.thailandensis的生长规律和感染时相特征及超微病理损伤.炎症因子测定中,两种细菌感染细胞后分泌的TNF-a出现感染中期的高峰,受BP感染的细胞的IL-6分泌则呈双峰改变,受BT感染的细胞IL-6的分泌和PEG对细胞分泌炎症因子的影响更为复杂.同时,病人血清中细胞因子的检测则没有出现显示出一定的规律,与其临床转归关系也不明确.rn 结论:本试验成功构建类鼻疽伯克霍尔德菌感染THP-1细胞的模型,初步探讨了类鼻疽伯克霍尔德菌感染宿主细胞机制,为进一步研究该病原菌与宿主细胞的相互作用提供了前提条件.

摘要： 目的:近年来的体外致敏性检测方法研究多以树突状细胞、树突样细胞及角质形成细胞为对象.本研究的目的是建立THP-1细胞核角质形成细胞共培养系统用于评价化学物质的致敏性.rn 方法:分别将THP-1细胞和角质形成细胞培养于插入式培养皿的下室和上室中,24小时后向上室中加入待检的物质(包括致敏物和刺激物),利用流式细胞仪检测THP-1细胞表面CD86和CD54的表达水平变化,同时测定细胞活力的变化.rn 结果:致敏物诱导CD86和CD54表达上调,但刺激物没有类似效应.与THP-1单培养体系相比,致敏物能引起THP-1表面CD86和CD54发生变化的浓度更低,在非毒性浓度即可引起上述分子表达的增加.此外,异丁香酚在共培养体系中判定为致敏物,但单培养系统却判为非致敏物.rn 结论:THP-1细胞与角质形成细胞的共培养体系成功的用于致敏物质的检测,且CD86和CD54是较为理想的检测指标.

摘要： 本发明涉及一种Thp‑1细胞上的膜蛋白Annexin A2在广州管圆线虫(Angiostrongylus Cantonensis，Ac)蛋白Galectin‑1诱导凋亡中的应用。本发明为一种Thp‑1细胞上的膜蛋白Annexin A2在广州管圆线虫蛋白Galectin‑1诱导凋亡中的应用，该应用为研究广州管圆线虫致病机制以及防治的应用，为广州管圆线虫病的治疗提供理论依据，为治疗药物的研制提供潜在作用靶点，即Annexin A2；同时为广州管圆线虫病治疗药物的研发奠定基础，为广州管圆线虫的个性化治疗提供靶标，具相当的市场前景和应用性。

摘要： 本发明公开了一种塑料包装材料中抗氧化剂THP‑24的测定方法，包括以下步骤，步骤一，称取样品，置于回流瓶中；步骤二，加入吡啶溶液，再加入甲苯‑甲醇溶液，甲苯‑甲醇溶液中甲苯和甲醇的体积比为2∶3，称取回流瓶的总重量，煮沸回流，放冷至室温；步骤三，用步骤二中的甲苯‑甲醇溶液补充减少的回流瓶重量，摇匀；步骤四，过滤后作为样品溶液；步骤五，将步骤四制取的样品溶液注入高效液相色谱仪，完成测定。本发明在样品的前处理过程中，将甲苯和甲醇的体积比为2∶3的甲苯‑甲醇溶液作为样品提取液，同时，将吡啶溶液作为稳定剂，保证了本发明可以准确有效的测定塑料包装材料中抗氧剂THP‑24的含量以及其在药品中的迁移情况。

摘要： 本发明公开了一种治疗慢性应激导致的磷脂代谢异常的多肽THP及其应用。一种显著挽救慢性应激导致的磷脂代谢异常的多肽THP，序列如SEQ ID NO.1所示。我们发现ATP5O降低是可能是磷脂代谢异常的重要原因。接下来我们发现去酰化酶HDAC2‑S424磷酸化水平的升高是导致ATP5O巴豆酰化及总蛋白水平显著降低的关键原因。最后我们用竞争性多肽THP下调p‑HDAC2，成功挽救了ATP5O水平并纠正了异常的磷脂代谢，可见多肽THP为治疗慢性应激女性的磷脂代谢异常提供新的方案。

摘要： 本发明公开了一种笼型八氨丙基倍半硅氧烷与THPS的结合鞣法。为了降低皮革中游离甲醛含量，提高皮革的鞣制性能，本发明在有效地提高收缩温度的情况下，先引入POSS‑NH2并使其先填充在皮胶原纤维之间，接着再引入THPS，该方法步骤为：复浸酸——鞣制——提碱。与THPS鞣制相比，通过POSS/THPS结合鞣制得到的皮革，可使坯革的收缩温度达83°C以上，且增厚率可达45%，物理机械性能均满足服装革的要求，且具有良好的加脂染色性能，甲醛含量从1.934ug/mL可有效地降低到1.415ug/mL。

摘要： 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas9系统构建EPB41基因敲除THP‑1细胞系的方法。本发明方法以人EPB41基因第一外显子中的蛋白编码序列，第四外显子和第七外显子中的蛋白编码序列中符合5‘‑G‑N18‑NGG‑3或5‘‑G‑N20‑NGG‑3’或5’‑CCN‑N18‑C‑3’或5’‑CCN‑N20‑C‑3’序列规则排列的片段的“N18或N20”为靶序列；得到随着细胞的分裂、增殖传递到下一代，形成稳定的敲除EPB41基因的THP‑1细胞系。实验证明，本发明所得的敲除EPB41基因的THP‑1细胞系不能正确的表达4.1R蛋白。研究蛋白4.1R缺失对细胞膜功能的影响，也可用于研究蛋白4.1R与一些免疫反应或其它信号通路蛋白分子直接或间接的相互作用。

摘要： 本发明涉及一种Thp‑1细胞上的膜蛋白Annexin A2在广州管圆线虫(Angiostrongylus Cantonensis，Ac)蛋白Galectin‑1诱导凋亡中的应用。本发明为一种Thp‑1细胞上的膜蛋白Annexin A2在广州管圆线虫蛋白Galectin‑1诱导凋亡中的应用，该应用为研究广州管圆线虫致病机制以及防治的应用，为广州管圆线虫病的治疗提供理论依据，为治疗药物的研制提供潜在作用靶点，即Annexin A2；同时为广州管圆线虫病治疗药物的研发奠定基础，为广州管圆线虫的个性化治疗提供靶标，具相当的市场前景和应用性。

摘要： 本发明涉及生物信息技术领域，具体涉及一种高表达miR‑146a‑5p的外泌体抑制THP‑1分化和巨噬细胞M1极化的方法，具体包括以下步骤：S1、高表达miR‑146a‑5p外泌体的制备；S2、外泌体的鉴定；S3、细胞的培养；S4、外泌体miR‑146a‑5p与THP‑1或巨噬细胞共孵育；S5、实验结果的分析，本发明中通过化学转染的方法制备了肝细胞来源的高表达miR‑146a‑5p的外泌体探究其对THP‑1分化和巨噬细胞M1极化的作用，且化学转染的方法获得的外泌体完整性好，肝细胞来源的外泌体携带的遗传信息物质更容易被肝细胞吸收。

摘要： 本发明公开了一种显著挽救慢性应激导致的磷脂代谢异常的多肽THP及其应用。一种显著挽救慢性应激导致的磷脂代谢异常的多肽THP，序列如SEQ ID NO.1所示。我们发现ATP5O降低是可能是磷脂代谢异常的重要原因。接下来我们发现去酰化酶HDAC2‑S424磷酸化水平的升高是导致ATP5O巴豆酰化及总蛋白水平显著降低的关键原因。最后我们用竞争性多肽THP下调p‑HDAC2，成功挽救了ATP5O水平并纠正了异常的磷脂代谢，可见多肽THP为治疗慢性应激女性的磷脂代谢异常提供新的方案。

摘要： 本发明公开了一种THP‑FTN系统时域压缩最优成型波形方法，属于FTN通信领域。本发明将传统的RRC成型脉冲作为基成型脉冲，并经过有限阶滤波器使得成型脉冲为一系列基成型脉冲加权，令THP‑FTN系统接收端信号和噪声信号比值增大，提高了THP‑FTN系统误码性能。给定频谱模板和发射信号平均功率，满足要求的基成型脉冲的经过的有限阶滤波器设计方案是无穷的。本发明准则为最大化THP‑FTN系统传输误码性能，本发明对FTN成型波形进行了重新设计，通过求解优化问题的方法增大了FTN引入的码间串扰频谱分解后所得参数λ0的值，提升了接收端白化滤波后信号的信噪比，从而提高了THP‑FTN系统解调性能。

摘要： 本发明公开了一种单载波THP‑FTN系统相位噪声估计与消除方法，属于FTN通信领域。本发明基于导频辅助实现相位噪声消除，发送端在进行THP预编码时，检测符号编号k是否为导频间隔的整数倍，若是，则基于本发明所设置的导频调整方式配置预编码序列的第k个符号，该导频调整方式为导频符号能量缩减PSER导频调整方式或导频符号相位旋转PSPR导频调整方式；否则，对指定符号进行模处理得到预编码序列的第k个符号。接收端在执行相噪消除处理时，先通过对应的导频调整方式的提取方式获取导频位置的相位噪声，再根据导频位置的相位噪声内插得到信号的相位噪声估计值，最后进行相噪补偿。本发明通过改变导频符号幅度和相位，避免了THP预编码的取模模块破坏导频的幅度和相位。