子叶节

摘要： 以草原4号紫花苜蓿无菌苗为材料,选择直接和间接两种再生途径进行再生。结果表明:以下胚轴和子叶为外植体建立的间接再生体系,最优愈伤培养基为1mg/L 2,4-D+0.2mg/L KT,14d诱导率分别为100%和72.41%;最佳分化培养基为0.5mg/L 6-BA+0.9mg/L KT,60d后的分化率分别为88.89%和80.00%;不定芽接种到生根培养基(1/2 MS+0.1mg/L NAA+20g蔗糖+5.5g/L琼脂)40d后生根率可达73.30%;下胚轴为外植体的再生体系诱导愈伤和分化效果均优于以子叶为外植体。以子叶节为外植体建立直接再生体系,通过基础培养基就可获得再生植株,经55d培养就可炼苗移栽且生根率为84.44%。两种方法中,直接分化途径的再生体系更为高效省时,为后续遗传转化奠定了技术基础。

摘要： 目的:建立黄瓜高效、稳定离体再生和转化体系。方法:选用10个黄瓜品种,研究基因型、外植体及植物生长调节剂对黄瓜不定芽诱导和生根影响,正交试验优化转化条件,Gus化学组织染色法鉴定。结果:只有子叶节能直接诱导出不定芽,而子叶远轴端、下胚轴和胚根只膨大、愈伤化,但难以再分化;华北型两个品种的子叶节诱导能力较差,其它8个基因型无明显差异;6-BA比TDZ和KT更适合‘EC5’和‘Chipper’子叶节不定芽诱导;优化培养基分别为MS+1.0~1.5 mg/L 6-BA+0~0.3 mg/L ABA+2 mg/L AgNO_(3)、MS+1.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L ABA+1.0 mg/L AgNO_(3);1/2MS生根效果最好,生根率达100%,平均根数为5.70;抑制‘EC5’和‘Chipper’芽分化的Hyg临界浓度分别为5~8 mg/L、8~10 mg/L;抑菌剂为200 mg/L Carb,‘Chipper’子叶节农杆菌介导的遗传转化条件为:预培养1 d,EHA105浓度OD_(600)值为0.6~0.8,侵染时间为12~16 min,共培养3 d,添加50~75μmol/L乙酰丁香酮(AS)条件下转化率最高。结论:本研究为黄瓜遗传转化提供技术参考。

摘要： 以冬瓜子叶节为外植体,研究不同激素配比和暗培养天数对子叶节愈伤诱导再生芽的影响,不同浓度激素组合对冬瓜芽继代扩繁的影响,以及再生苗的生根与驯化移栽,建立了完整的冬瓜子叶节再生体系.根据正交试验结果,诱导不定芽分化的最优配比组合为MS+2,4-D 0.1 mg·L-1+IBA 0.10 mg·L-1+6-BA 0.8 mg·L-1暗培养7 d,暗培养天数和2,4-D浓度对诱导再生影响较大;冬瓜芽继代扩繁最佳培养基为MS+NAA 0.05 mg·L-1+6-BA 0.2 mg·L-1,平均增殖系数为2.487;在生根培养基1/2MS+NAA 0.2 mg·L-1上再生苗生根率为100％,其驯化移栽的成活率达到80％以上.

摘要： 油用亚麻(俗称胡麻)是我国重要的油料作物之一,也是干旱和半干旱地区的主要经济作物.近年来随着国家经济的发展和人们生活质量的提高,人们对油用亚麻的需求逐渐提升.建立一种快速高效便捷的油用亚麻遗传转化体系对油用亚麻分子育种具有重要意义.本实验以油用亚麻子叶节作为遗传转化的外植体,以草铵膦作为转基因植株筛选剂,通过农杆菌介导法转化油用亚麻,通过对各生长时期生长调节剂的配比筛选,优化出一套转化体系.该体系与传统的以下胚轴为外植体的转化方法相比,成苗时间能缩短至两个月,且阳性植株鉴定方法简便高效.该体系的开发为加快油用亚麻的分子育种与基因相关研究提供了有利条件.

摘要： 为探究芍药种胚启动培养、丛生芽诱导及增殖过程中的主要影响因素,以芍药种胚为外植体,研究不同发育阶段的种胚(授粉后65,75,85,95d)、暗培养时间(0,4,8d)以及3种激素(1.0mg·L-16-BA、0.5mg·L-1GA3、0.2mg·L-1NAA)对芍药种胚启动培养的影响;同时研究6-BA(0.5mg·L-1和1.0mg·L-1)与GA3(0.5mg·L-1和1.0mg·L-1)的激素组合对种胚丛生芽初步诱导的影响;也探究不同浓度的6-BA(1.0,2.0,3.0,4.0mg·L-1)与1.0mg·L-1GA3组合对种胚丛生芽二次诱导以及不同浓度的CH(0,0.3,0.5g·L-1)对种胚丛生芽增殖成苗的影响;本试验还以子叶节为外植体,接种在种胚丛生芽最适的诱导及增殖的培养基中,对种胚丛生芽及子叶节丛生芽形态特征的差异进行初步探究.结果表明:芍药种胚启动培养的最佳胚龄为授粉后的75d;胚苗最佳的培养方式为暗培养4d后置于正常光照条件下培养;启动培养最适激素组合为0.5mg·L-1GA3+1.0mg·L-16-BA;丛生芽初步诱导及二次诱导最适培养基分别为MS+1.0mg·L-1GA3+1.0mg·L-16-BA及MS+1.0mg·L-1GA3+2.0mg·L-16-BA;丛生芽增殖的最适培养基为1.0mg·L-1MS+GA3+3.0mg·L-16-BA+0.3g·L-1CH+0.1mg·L-1NAA+1.0g·L-1PVP,适宜浓度的CH可显著提高丛生芽的增殖系数,也可以使丛生芽苗更健壮.丛生芽初步诱导过程中,子叶节的诱导效果及生长状态优于种胚直接诱导,但种胚具有更高的萌发潜质.种胚丛生芽的增殖效果优于子叶节丛生芽.

摘要： 以绿豆(Vigna radiata(L.)Wilczek)幼嫩健康的子叶节为外植体,对影响其再生的2个关键因素——绿豆基因型和培养基植物生长调节剂配比开展筛选试验,建立绿豆子叶节离体再生体系.在筛选的100份种质资源中,8份材料再生效果好,同时发现适宜不定芽分化的培养基配方为B5+1.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L KT+0.1 mg/L IBA,适宜不定根诱导的培养基配方为1/2MS+1 mg/L IBA.通过此次试验,初步建立起了适合国内应用的绿豆子叶节外植体离体再生体系.

摘要： 选用宁镇1号大豆子叶节作为外植体进行离体再生,研究外植体消毒时间、不同激素浓度对大豆子叶节再生的影响.结果表明:宁镇1号大豆用0.1％HgCl2消毒最适时间为12～16min,不定芽诱导最适的6-BA和TDZ浓度分别为2.0mg/L和0.1mg/L,最适的6-BA和TDZ组合浓度为6-BA 1.00mg/L和TDZ 0.05mg/L,最适合生根的IBA浓度为0.4mg/L.

摘要： [目的]本文旨在揭示黄瓜亚硝酸还原酶基因(CsNiR)的表达特征及其在黄瓜再生体系中的功能。[方法]以黄瓜自交系CCMC为试验材料,克隆CsNiR的编码区序列全长,对其进行生物信息学分析;利用本氏烟草表皮细胞瞬时表达系统对CsNiR蛋白进行亚细胞定位,并采用RT-qPCR技术分析CsNiR基因在不同组织中的表达量。对不同基因型黄瓜子叶节外植体的NiR活性与外植体分化率进行相关性分析,测定在不同培养条件下不同基因型黄瓜子叶节外植体CsNiR基因表达量,并统计在不同NH+4/NO-3比例(1∶5、1∶2、1∶1、2∶1)培养条件下外植体分化率情况。[结果]CsNiR基因ORF全长为1752 bp,编码583个氨基酸,具有含血红素蛋白β-化合物区域和4Fe-4S区域的完整NiR蛋白结构。系统进化树分析发现植物中CsNiR高度保守,黄瓜与甜瓜氨基酸序列相似性高达96%。RT-qPCR结果表明,CsNiR基因在黄瓜成熟叶表达量最高,雄花中次之,在茎尖和侧芽等分化组织中表达量最低,具有组织特异性。亚细胞定位结果表明CsNiR主要在细胞膜和叶绿体中表达。对不同基因型黄瓜子叶节的NiR活性与再生率的测定发现,NiR活性与黄瓜外植体分化率显著负相关。在不同基因型黄瓜外植体诱导分化过程中,CsNiR基因的表达在含有诱导激素培养基上的表达量显著低于无诱导激素的培养基,当NH+4/NO-3为1∶5时,黄瓜子叶节外植体分化率最高。[结论]植物中NiR高度保守,CsNiR基因的表达具有特异性,在茎尖等分生组织表达含量最低,NiR活性与外植体分化率呈负相关关系,降低NH+4/NO-3比例有助于提高黄瓜外植体分化率。

摘要： 以薄皮甜瓜"M15"和"M43"子叶节为外植体,研究激素浓度、卡那霉素浓度和消毒时间等对甜瓜子叶节再生及农杆菌介导遗传转化的影响.结果表明,诱导甜瓜子叶节不定芽分化最佳激素组合为0.5 mg·L-16-BA+0.05 mg·L-1IAA,芽伸长激素为0.05 mg·L-16-BA,生根激素为0.1 mg·L-1IAA.农杆菌介导甜瓜转化最佳条件为预培养48 h,OD600=0.6农杆菌菌液侵染15 min,黑暗条件下共培养48～72 h,头孢抑菌浓度500 mg·L-1,卡那霉素浓度75 mg·L-1.PCR检测卡那霉素抗性苗,验证外源基因已整合进入甜瓜基因组,"M15"和"M43"抗性植株阳性率分别为84.2％和77.4％.%Using cotyledon nodes of muskmelon "M15" and "M43" as explants, the factors that affected melon cotyledon regeneration and the efficiency of genetic transformation were studied, such as hormone concentration, kanamycin concentration, and disinfect time. The results showed that the best hormone combination of adventitious bud differentiation in cotyledons of muskmelon was 0.5 mg· L-16-BA+0.05 mg· L-1 IAA, shoot elongation hormone was 0.05 mg· L-16-BA and rooting hormone was 0.1 mg· L-1 IAA. The best condition for Agrobacterium mediated transformation of muskmelon was pre-culture for48 h, OD600=0.6 Agrobacterium microbial infection for 15 min, co-cultivate for 48-72 h in the dark, cephalosporins bacteriostatic concentration of 500 mg· L-1, kanamycin concentration of 75 mg· L-1. It was originally proved by PCR that expression cassettes had been transferred into the genome, the positive rate of "M15" and "M43" were 84.2％ and 77.4％, respectively.

摘要： 随着植物基因工程技术的迅速发展，运用生物技术进行种质创新，改良南瓜品种已经成为南瓜遗传育种研究的新途径。为建立南瓜子叶节再生体系,试验以上桔、金栗、银栗、贝栗灰、永安2号和永安5号等6种南瓜的子叶节为材料,以MS为基本培养基,通过设置9种芽分化培养基,研究6-BA和IBA组合、KT对南瓜的子叶节诱导芽的影响.结果表明,1.0mg·L-t6-BA和0.02mg.L-1IBA浓度组合是6-BA与IBA浓度组合中不定芽诱导率最高的.在培养基中添加KT可以显著提高不定芽的诱导率;基因型不同的南瓜在子叶节诱导出芽方面有差异,南瓜品种银栗最易诱导出芽,诱导率为93.75％.试验得出南瓜的子叶节诱导芽最佳诱导培养基为:MS+3mg·L-1KT+1.0mg·L-16-BA+0.02mg·L-1IBA,平均诱导率为83.33％.

摘要： 本研究以黄瓜子叶节为外植体,采用农杆菌介导法将菜豆几丁质酶基因导入黄瓜(Cucumis sativus L.).系统探讨了影响遗传转化效率的主要因素.结果表明:子叶节预培养2 d,真空侵染5 min,在添加0.5 mg/L 6-BA、pH5.2的共培养基上培养4～5 d,遗传转化效率最高.根癌农杆菌菌株为EHA105,质粒pBch带有一个npt-Ⅱ基因和一个菜豆几丁质酶基因(chi).抗卡那霉素(kanr)的再生小植株经PCR和Southern检测,证明外源菜豆几丁质酶基因已整合到黄瓜基因组中.

摘要： 提供了用于操作风力涡轮机的转子叶片(16)的升降机(2)与方法。此外，提供了用于风力发电机的转子叶片(16)与用于制造转子叶片(16)的方法以及包括转子叶片(16)与升降机(2)的系统。升降机(2)包括至少一个抓握卡爪(81，82)，该至少一个卡爪(81，82)具有携带用于在预定抓握区域(20)中与转子叶片(16)的外表面接触的衬垫(10)的一对臂(81a，81b，82a，82b)。此外，升降机(2)包括用于在转子叶片(16)的表面(18)上的不可见标记的视觉检测的探测器(14)。至少一个标记指示至少一个抓握区域(20)的位置。

摘要： 一种用于接合转子叶片的转子叶片节段的方法包括形成具有带有腔的接纳部分和结构部分的母结构部件。此外，该方法包括将母结构部件固定在第一叶片节段内。该方法还包括形成具有突出部分和结构部分的公结构部件。而且，该方法包括将公结构部件的结构部分固定在第二叶片节段内。此外，该方法包括将突出部分插入到腔中。因而，当插入时，突出部分和腔的对接部形成一个或多个内部通道。因此，该方法进一步包括将粘合剂注入到一个或多个内部通道中，使得将第一叶片节段和第二叶片节段固定在一起。

摘要： 用于转子叶片或转子叶片节段的测试台、具有该测试台的装置和测试方法。用于风力发电机转子叶片(10)或转子叶片节段(20)的测试台具有：其上可固定转子叶片(10)或转子叶片节段(20)的轴向端部的支撑结构(15)，及可与转子叶片(10)或转子叶片节段(20)连接以激励转子叶片(10)或转子叶片节段(20)的振动的至少一激励机组，其中负载装置(31)固定在铰接部位(14)并可连接到用于测试过程的转子叶片(10)或转子叶片节段(20)使得可对转子叶片(10)或转子叶片节段(20)施加静态预应力，其力方向上具有与转子叶片(10)或转子叶片节段(20)垂直的至少一分力。其特征在于，负载装置(31)和转子叶片(10)或转子叶片节段(20)间设有弹性元件(13)使得可通过弹性元件(13)对转子叶片(10)或转子叶片节段(20)施加弹力以影响振动行为。

摘要： 本发明公开一种高效藜麦子叶节离体再生方法。以藜麦子叶节作为起始材料，经诱导可获得大量不定芽和再生植株，为藜麦转基因提供技术支撑。本发明建立的藜麦子叶节离体再生方法为藜麦新品种创制、分子机理研究等提供技术保障，促进藜麦产业发展。

摘要： 本发明公开一种以子叶节为外植体的柠条锦鸡儿高效再生方法。利用子叶节为起始外植体，通过直接器官发生途径建立一种快速有效的再生体系，不经由愈伤组织的诱导及分化，简化了培养流程，在短时间内便可获得柠条锦鸡儿再生植株，此种方法培养的组培苗植株表型一致性高，稳定地保持母体的优良特性。通过建立以子叶节为起始外植体的离体再生体系，为柠条锦鸡儿快繁体系、遗传转化体系的扩大和发展提供有力的技术保障，进而可以顺利开展以柠条为代表的转基因育种工作。

摘要： 本发明涉及植物组织培养技术领域，具体涉及一种通过芍药子叶节直接诱导丛生芽进行增殖的方法，以芍药子叶节直接诱导丛生芽，调整诱导激素的配方和浓度，依次经历芍药种胚启动培养、子叶节丛生芽的初步诱导、子叶节丛生芽的二次诱导和子叶节丛生芽的增殖四个阶段，使得丛生芽的初步诱导率达到64.28％，平均增殖系数达到2.67。本发明可以有效解决以芍药子叶节为外植体进行丛生芽诱导时丛生芽诱导率过低且出现丛生芽苗纤细枯黄，以及丛生芽基部畸形生长或是产生瘤状根等问题，提高丛生芽的诱导率及增殖率，增强丛生芽的长势，以便于分切丛生芽苗，诱导生根。

摘要： 本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种利用黄麻子叶节作为外植体的黄麻组织培养方法。本发明首先将黄麻的种子消毒后接种于MS培养基中，待培养10天后切下无菌苗的子叶节，将其转接至生芽培养基中诱导生芽，将获得的不定芽切下移入生根培养基中诱导生根，再经炼苗与移栽得到再生植株。本发明所建立的黄麻子叶节再生植株的方法为黄麻遗传转化、新品种的创制提供了技术支撑。

摘要： 本发明公开了一种诱导蓖麻子叶节丛芽高频发生组培体系的建立方法，属于植物组织培养快繁技术领域，是将蓖麻无菌苗的子叶节培养在加有0.2‑1.0mg/L 6‑BA的MS培养基进行暗培养后，转入光下继续培养，发现随着6‑BA浓度的提高，可以促进蓖麻子叶节丛芽的发生。将再生苗带有腋芽的茎段再次转入6‑BA的上述培养基之后，可以促进茎段芽的高频发生。将诱导出的幼苗转接入含有0.3mg/L IBA的1/2MS培养基，可以诱导出根，完成植株的再生。本发明无需特殊的培养设备，处理步骤简单，较短时间就可以获得大量无菌苗，为蓖麻遗传转化体系的建立提供了前提技术。

摘要： 本发明公开了一种绿豆子叶节再生培养方法。一种绿豆子叶节再生培养方法，依次包括：将萌发后的绿豆无菌苗去掉子叶、上胚轴和胚根，保留2～4cm下胚轴，并在两片子叶结合处制造微小伤口，然后转移到不定芽诱导培养基中诱导10～15天出芽；将步骤(2)得到的外植体转入不定芽伸长培养基中培养20～25天，至不定芽伸长到3～4cm；待芽苗伸长至3～4cm左右后，转入生根培养基10～15天，生根3条以上，每条长度3cm左右后，移栽得到再生植株。本发明方法产生的不定芽数目多，芽伸长较快，再生周期短，适用于各绿豆品种的组织培养。

摘要： 本实用新型公开了一种用于黄瓜子叶节离体培养的外植体切割工具，包括设计的两条长、宽、厚度相同的镊臂，所述镊臂分别为切割镊臂和固定镊臂，两条镊臂由镊臂固定端相连接，所述镊臂各包含一个镊臂自由端，所述切割镊臂自由端内侧设计有靠前端的锯齿状锋利切割面结构，所述固定镊臂自由端内侧设计有靠近前端的光滑固定槽结构，所述两镊臂自由端在自然状态下处于张开状态，所述镊臂均为不锈钢材质。利用该工具切割黄瓜子叶节外植体，能极大程度的保留子叶节中的分生组织细胞，同时充分切除已分化叶原基组织，可以极大提高黄瓜子叶节离体培养时的外植体切割效率，并减少复杂操作带来的污染。