头孢菌素C

摘要： 以头孢菌素C产生菌顶头孢霉(Cephalosporium acremonium)B-1822-S-04为出发菌株,经过紫外线和丙二酸复合诱变,筛选得到了4株头孢菌素C高产菌株D-G-017、D-G-083、D-G-096和D-G-133,其中菌株D-G-096的效价高达6816 mg·L-1,较出发菌株提高了50.80％,且高产特性稳定;50 L发酵罐小试结果显示,菌株D-G-096的效价达到了29270 m g·L-1,较出发菌株提高了111.06％,可作为优良高产菌株保存使用.该实验筛选出的高产菌株及其在小试中的应用,可为后期工业化生产提供优质菌种资源,为发酵工艺提供指导.

摘要： 基于头孢菌素C来源的头孢类抗生素是临床上广泛使用的抗感染药物.头孢菌素C由丝状真菌-顶头孢霉所产生.经过几十年的传统诱变育种,工业上头孢菌素C的产量已经有了大幅度的提高,然而人们对顶头孢霉形态分化、生理特性以及头孢菌素生物合成与调控的认识还相当有限.随着分子生物学以及组学技术的出现,人们对顶头孢霉的了解也逐渐深入,目前已基本阐明头孢菌素C的生物合成途径,并对其调控机制有了初步了解.就顶头孢霉中头孢菌素C的生物合成途径、分子调控机制以及生产菌株的理性改造等方面进行综述,希望能够帮助读者加深对本领域研究的了解,并对未来工作进行了展望.

摘要： 为探究头孢菌素菌渣无害化处置与肥料化利用过程中残留的头孢菌素C对蔬菜生长的毒理效应,通过恒温保湿培养法,采用生菜(Lactuca sativa Linn.var.ramosa Hort.)、油麦菜(Lactuca sativa var.longifoliaf.Lam)、白菜(Brassica pekinensis(Lour.)Rupr.)及油菜(Brassica campestris L.)4种蔬菜种子为研究对象,以种子发芽率、幼苗的鲜质量、胚轴长、胚根长为毒性敏感指标,研究了7种浓度头孢菌素C溶液胁迫下4种蔬菜毒性的剂量-效应关系,比较了不同蔬菜在头孢菌素C毒害下的生态毒性差异和相对敏感的指标.结果表明:头孢菌素C溶液对4种蔬菜种子毒性敏感指标的影响程度依次为胚根>鲜质量>胚轴>发芽率;头孢菌素C溶液浓度与4种蔬菜胚根生长率呈显著的线性关系(P油麦菜>白菜>生菜,其中油菜IC50值为1538.36 mg·L-1.研究表明,与油麦菜、白菜和生菜相比,油菜更适合作为后续实验的生态毒性指示植物.

摘要： 头孢菌素酰化酶(Cephalosporin acylase)能够一步催化头孢菌素C(Cephalosporin C,简称CPC)生成7-氨基头孢烷酸(7-Aminocephalosporanic acid,简称7-ACA),后者是重要的医药中间体.但头孢菌素酰化酶对CPC的一步催化活性低,远未达到工业生产的要求.研究以来源于Pseudomonas sp.SE83头孢菌素酰化酶(CPCase)蛋白序列为模板,对其基因进行全局优化设计,人工合成目的 基因,并克隆至表达载体pET28a,实现了CPCase的高效表达,命名为WT.将其与来自Pseudomonas SY-77、Pseudomonas N176等菌株的头孢菌素酰化酶氨基酸序列进行相似性比较,在保守氨基酸附近选择了25个突变位点,采用定点突变的方法分别突变为Ala,获得了25个突变酶.结果 表明,突变体蛋白F311A对CPC的催化活性上升50％,kcat/Km提高到原来的1.7倍,比酶活达到4.302 U/mg,其他突变体对CPC催化活性均有不同程度的下降.结构分析显示,第311的Phe突变为Ala,能够使结合口袋变大,减少空间位阻,使酶与底物CPC的结合更加牢固,提高催化效率.

摘要： 该研究用稻草秸秆代替标准发酵培养基中的碳源,利用顶头孢霉(Cephalosporium acremonium)发酵产头孢菌素C,并通过响应面法优化培养基组分.结果 表明,头孢霉发酵产头孢菌素C的最佳发酵培养基成分为水解葡萄糖35 g/L、棕纤维素46 g/L、玉米浆38g/L、纤维素酶0.8％、豆油25 g/L、硫酸铵10g/L.在此优化培养基下,头孢霉发酵所产头孢菌素C的效价达298.34 U/mL,为标准发酵培养基效价的96.69％.由此可知,秸秆棕纤维素作为原料丰富且廉价的碳源替代物,可完全应用于头孢菌素C的发酵生产.

摘要： 目的 研究顶头孢霉发酵制备头孢菌素C的过程,确定关键影响因素,优化发酵条件,提高发酵水平.方法 采用Plackett-Burman方法对影响头孢菌素C发酵水平的11个因素进行考察,评估各因素的影响程度,筛查影响发酵水平的关键因素,再采用响应面方法建立这些因素与发酵水平间的数学模型,为发酵条件的优化提供指导.结果 Plackett-Burman实验发现,金枪鱼浸膏浓度和蛋氨酸浓度是对头孢菌素C发酵产量影响最显著的2个因素,经响应面方法优化后头孢菌素C的产量从32.59g/L提高到了35.99g/L,提高了10.4％.结论 合适浓度的金枪鱼浸膏和蛋氨酸可提高头孢菌素C发酵产量,通过统计优化方法,可有效提高头孢菌素C发酵水平.

摘要： The by-products of tuna were used as raw materials to study the effects of the hydrolysates on the fermentation products of Cephalosporium acremonium. Firstly, based on the yield of cephalosporin C (CPC), the effects of different amounts of hydrolysates on the production of antibiotics by C. acremonium were studied by orthogonal experiment and response surface method. The results showed that in the fermentation medium with the amount of hydrolysates being 30.86 mL?L-1, the production of CPC reached a maximum of 8.106 g?L-1. It was 67.82% higher than that without the hydrolysates. Further, the effect of the hydrolysates on the metabolites of C. acremonium was qualitatively and quantitatively analyzed by GC-MS. It was found that the addition of the hydrolysates significantly changed the species and content of the metabolites of C. acremonium. It was of great significance to improve the production of CPC and the comprehensive economic and environmental benefits of tuna processing that uses the resources of tuna processing by-products to develop fermentation industrial medium.%以金枪鱼加工副产物为原料, 研究其酶解液对顶头孢霉菌(Cephalosporium acremonium)发酵产物的影响. 以头孢菌素 C (CPC)的产量为指标, 通过正交实验和响应面方法, 研究不同添加量的酶解液对顶头孢霉菌发酵产抗生素的作用, 再利用气相-质谱联用仪(GC-MS)分析酶解液对顶头孢霉菌代谢物的影响. 研究结果显示: 在顶头孢霉菌的发酵培养基中, 酶解液的添加量为30.86 mL?L-1时, CPC产量最高, 为8.106 g?L-1, 比未添加酶解液增加67.82%; 酶解液的加入显著改变了顶头孢霉菌代谢物的种类和含量.

摘要： 目的 获得顶头孢霉sorA和sorB双缺失菌株,以阻断sorbicillinoids的合成,并研究其与头孢菌素C(CPC)产量的关系.方法 通过根癌农杆菌转化法,依据同源双交换的原理,同时敲除合成sorbicillinoids骨架结构的两个聚酮合酶基因sorA和sorB,并通过摇瓶发酵实验检测缺失菌和野生菌的产量.结果 筛选并验证了6株A.chrysogenum-Apks菌株,遗传稳定,转化效率约为20％.通过发酵实验测定发现,缺失菌株产CPC能力比野生菌提高了70％.结论 农杆菌转化法是一个高效的顶头孢霉遗传操作系统,并且顶头孢霉中sorbicillinoids的缺失可以提高CPC产量.

摘要： 目的 将低温酰化工艺应用于7-氨基头孢烷酸的生产,提高7-氨基头孢烷酸质量.方法 降低7-氨基头孢烷酸生产过程中,酰化步骤的反应温度,由(13±1)°C改为(10±1)°C.结果 D-7-ACA和单杂两项杂质,分别由0.30％和0.15％降低至0.25％和0.10％.结论 该工艺改进简单可行,可有效提高7-氨基头孢烷酸质量,适用于产业化生产.

摘要： 本文主要考察了发酵培养基中氧化淀粉替代普通淀粉对头孢菌素C发酵特性的影响。实验结果表明:在摇瓶发酵过程中,氧化淀粉100％含量替代普通淀粉的效果最好,其效价由普通淀粉的2291.5g/L提高至3765.4g/L,为培养基优化提供了一定的参考价值。

摘要： 本文主要考察了发酵培养基中氧化淀粉替代普通淀粉对头孢菌素C发酵特性的影响。实验结果表明:在摇瓶发酵过程中,氧化淀粉100％含量替代普通淀粉的效果最好,其效价由普通淀粉的2291.5g/L提高至3765.4g/L,为培养基优化提供了一定的参考价值。

摘要： 本文主要考察了发酵培养基中氧化淀粉替代普通淀粉对头孢菌素C发酵特性的影响。实验结果表明:在摇瓶发酵过程中,氧化淀粉100％含量替代普通淀粉的效果最好,其效价由普通淀粉的2291.5g/L提高至3765.4g/L,为培养基优化提供了一定的参考价值。

摘要： 本文主要考察了发酵培养基中氧化淀粉替代普通淀粉对头孢菌素C发酵特性的影响。实验结果表明:在摇瓶发酵过程中,氧化淀粉100％含量替代普通淀粉的效果最好,其效价由普通淀粉的2291.5g/L提高至3765.4g/L,为培养基优化提供了一定的参考价值。

摘要： RNAi是近年来新兴的一种通过抑制基因转录水平来实现特定基因表达沉默的技术。在头孢菌素C的生物合成途径中，cefG基因编码DAC-乙酰转移酶，催化DAC乙酰化生成头孢菌素C。本文构建了一个含可形成cefG双链RNA转录单元的RNAi载体，并将其导入头孢菌素C工业生产菌株中。定量PCR分析转化子cefG的转录水平，检测到其中两个转化子的RNA转录水平在发酵第四天较出发菌株降低了80％以上。HPLC分析它们的头孢菌素C发酵水平较出发菌株分别降低34.6％和28.8％。

摘要： RNAi是近年来新兴的一种通过抑制基因转录水平来实现特定基因表达沉默的技术。在头孢菌素C的生物合成途径中，cefG基因编码DAC-乙酰转移酶，催化DAC乙酰化生成头孢菌素C。本文构建了一个含可形成cefG双链RNA转录单元的RNAi载体，并将其导入头孢菌素C工业生产菌株中。定量PCR分析转化子cefG的转录水平，检测到其中两个转化子的RNA转录水平在发酵第四天较出发菌株降低了80％以上。HPLC分析它们的头孢菌素C发酵水平较出发菌株分别降低34.6％和28.8％。

摘要： RNAi是近年来新兴的一种通过抑制基因转录水平来实现特定基因表达沉默的技术。在头孢菌素C的生物合成途径中，cefG基因编码DAC-乙酰转移酶，催化DAC乙酰化生成头孢菌素C。本文构建了一个含可形成cefG双链RNA转录单元的RNAi载体，并将其导入头孢菌素C工业生产菌株中。定量PCR分析转化子cefG的转录水平，检测到其中两个转化子的RNA转录水平在发酵第四天较出发菌株降低了80％以上。HPLC分析它们的头孢菌素C发酵水平较出发菌株分别降低34.6％和28.8％。

摘要： RNAi是近年来新兴的一种通过抑制基因转录水平来实现特定基因表达沉默的技术。在头孢菌素C的生物合成途径中，cefG基因编码DAC-乙酰转移酶，催化DAC乙酰化生成头孢菌素C。本文构建了一个含可形成cefG双链RNA转录单元的RNAi载体，并将其导入头孢菌素C工业生产菌株中。定量PCR分析转化子cefG的转录水平，检测到其中两个转化子的RNA转录水平在发酵第四天较出发菌株降低了80％以上。HPLC分析它们的头孢菌素C发酵水平较出发菌株分别降低34.6％和28.8％。

摘要： RNAi是近年来新兴的一种通过抑制基因转录水平来实现特定基因表达沉默的技术。在头孢菌素C的生物合成途径中，cefG基因编码DAC-乙酰转移酶，催化DAC乙酰化生成头孢菌素C。本文构建了一个含可形成cefG双链RNA转录单元的RNAi载体，并将其导入头孢菌素C工业生产菌株中。定量PCR分析转化子cefG的转录水平，检测到其中两个转化子的RNA转录水平在发酵第四天较出发菌株降低了80％以上。HPLC分析它们的头孢菌素C发酵水平较出发菌株分别降低34.6％和28.8％。

摘要： RNAi是近年来新兴的一种通过抑制基因转录水平来实现特定基因表达沉默的技术。在头孢菌素C的生物合成途径中，cefG基因编码DAC-乙酰转移酶，催化DAC乙酰化生成头孢菌素C。本文构建了一个含可形成cefG双链RNA转录单元的RNAi载体，并将其导入头孢菌素C工业生产菌株中。定量PCR分析转化子cefG的转录水平，检测到其中两个转化子的RNA转录水平在发酵第四天较出发菌株降低了80％以上。HPLC分析它们的头孢菌素C发酵水平较出发菌株分别降低34.6％和28.8％。

摘要： 本发明公开了一种从头孢菌素C发酵液中分离纯化脱乙酰氧基头孢菌素C的方法。该方法包括以下步骤：1)取头孢菌素C发酵液进行浓缩，得头孢菌素C浓缩液；2)将头孢菌素C浓缩液进行液相色谱制备柱分离，得脱乙酰氧基头孢菌素C。本发明首次从头孢菌素C发酵液中分离出DOCPC，并且本发明分离纯化得到的DOCPC的纯度在97％以上，这说明本发明能够有效地从头孢菌素C发酵液中分离纯化得到高纯度的DOCPC，这不仅为DOCPC的药理研究提供了可靠的基础，同时也为进一步得到高纯度的DOCPC奠定了基础，具有非常重要的现实意义。

摘要： 本发明提供一种从头孢菌素C发酵液中分离纯化脱乙酰头孢菌素C的方法，所述方法包括：发酵结束后，采用常规的固液分离手段分离发酵液，收集滤液，该滤液1)先经过大孔苯乙烯型非极性吸附树脂，2)再经过凝胶型强碱II型阴离子交换树脂。使用本发明方法分离纯化后的DCPC的纯度可达92％左右。

摘要： 本发明涉及一种新的用于生物转化法生产制备脱乙酰头孢菌素C(DCPC)的红酵母菌(Rhodotorula.sp)以及利用该菌株制备脱乙酰基头孢菌素C的方法。一种微生物菌株，其特征是：该菌株分类为红酵母属，命名为Rhodotorula R-92，此菌株在保藏中心登记入册编号为CGMCC NO.1277；该转换方法将菌株作为生物转化剂；在以头孢菌素C盐的水溶液作为生物转化底物；将转化剂加入到底物进行转化或混合发酵，再经树脂处理、浓缩、溶媒结晶，得到类白色或微黄色的脱乙酰头孢菌素C粉末。本发明的目的在于解决生产脱乙酰头孢菌素C(DCPC)中存在收率低、成本高、不适于工业规模生产等方面存在的问题。

摘要： 本发明涉及编码脱乙酸基头孢菌素C合成酶(DAOCS)和脱乙酰头孢菌素C合成酶(DACS)活性的DNA化合物和表达载体。该化合物可用来构建用于多种宿主细胞包括大肠杆菌、青霉和头孢霉的重组DNA表达载体。本发明也涉及顶头孢霉DACS/DAOCS基因的调控成分。还提供了选择青霉转化体的方法，包括那些因DACS/DAOCS编码DNA的存在而能够合成头孢菌素抗生素的转化体。本转化系统利用乙酰胺酶基因来选择转化体。

摘要： 本发明公开了一种从头孢菌素C发酵液中分离纯化脱乙酰氧基头孢菌素C的方法。该方法包括以下步骤：1)取头孢菌素C发酵液进行浓缩，得头孢菌素C浓缩液；2)将头孢菌素C浓缩液进行液相色谱制备柱分离，得脱乙酰氧基头孢菌素C。本发明首次从头孢菌素C发酵液中分离出DOCPC，并且本发明分离纯化得到的DOCPC的纯度在97％以上，这说明本发明能够有效地从头孢菌素C发酵液中分离纯化得到高纯度的DOCPC，这不仅为DOCPC的药理研究提供了可靠的基础，同时也为进一步得到高纯度的DOCPC奠定了基础，具有非常重要的现实意义。

摘要： 本发明提供一种从头孢菌素C发酵液中分离纯化脱乙酰头孢菌素C的方法，所述方法包括：发酵结束后，采用常规的固液分离手段分离发酵液，收集滤液，该滤液1)先经过大孔苯乙烯型非极性吸附树脂，2)再经过凝胶型强碱II型阴离子交换树脂。使用本发明方法分离纯化后的DCPC的纯度可达92％左右。

摘要： 本发明涉及一种新的用于生物转化法生产制备脱乙酰头孢菌素C(DCPC)的红酵母菌(Rhodotorula.sp)以及利用该菌株制备脱乙酰基头孢菌素C的方法。一种微生物菌株，其特征是：该菌株分类为红酵母属，命名为Rhodotorula R－92，此菌株在保藏中心登记入册编号为CGMCC NO.1277；该转换方法将菌株作为生物转化剂；在以头孢菌素C盐的水溶液作为生物转化底物；将转化剂加入到底物进行转化或混合发酵，再经树脂处理、浓缩、溶媒结晶，得到类白色或微黄色的脱乙酰头孢菌素C粉末。本发明的目的在于解决生产脱乙酰头孢菌素C(DCPC)中存在收率低、成本高、不适于工业规模生产等方面存在的问题。

摘要： 通式(1)、通式(2)以及通式(3)表示的、有抗菌活性的头孢菌素衍生物，它们的医药上允许的盐以及其制备方法和含通式(1)、(2)或(3)的头孢菌素衍生物的抗菌组合物。各通式中符号的意义如说明书所述。

摘要： 描述了可由干燥以头孢菌素衍生物作为活性化合物，以乳糖、葡萄糖、蔗糖或半乳糖作稳定剂的共同溶液而得到的头孢菌素衍生物的稳定组合物，以及稳定头孢菌素衍生物的方法。

摘要： 本发明涉及编码脱乙酸基头孢菌素C合成酶(DAOCS)和脱乙酰头孢菌素C合成酶(DACS)活性的DNA化合物和表达载体。该化合物可用来构建用于多种宿主细胞包括大肠杆菌、青霉和头孢霉的重组DNA表达载体。本发明也涉及顶头孢霉DACS/DAOCS基因的调控成分。还提供了选择青霉转化体的方法，包括那些因DACS/DAOCS编码DNA的存在而能够合成头孢菌素抗生素的转化体。本转化系统利用乙酰胺酶基因来选择转化体。