Survivin基因

摘要： 目的 探究水杨梅根乙酸乙酯提取物(Ethyl acetate extraction from the root of Adina rubella Hance,EARH)对人肝癌Bel7402细胞凋亡及增殖的作用.方法 将细胞随机分为4组:对照组、1mg/mL EARH组、2mg/mL EARH组、4mg/mL EARH组.MTT法观察EARH对Bel7402的增殖影响;Hoechst33258染色法检测细胞凋亡率;RT-PCR法检测凋亡相关因子p53、survivin基因表达量.结果 EARH体外能抑制Bel7402细胞增殖,诱导细胞凋亡,并且上调p53和降低survivin表达.结论 EARH可能通过上调p53基因、下调survivin表达,促进Bel7402细胞凋亡,从而体外抑制Bel7402细胞增殖.

摘要： 目的探究水杨梅根乙酸乙酯提取物(Ethyl acetate extraction from the root of Adina rubella Hance,EARH)对人肝癌Bel7402细胞凋亡及增殖的作用。方法将细胞随机分为4组:对照组、1mg/mL EARH组、2mg/mL EARH组、4mg/mL EARH组。MTT法观察EARH对Bel7402的增殖影响;Hoechst33258染色法检测细胞凋亡率;RT-PCR法检测凋亡相关因子p53、survivin基因表达量。结果 EARH体外能抑制Bel7402细胞增殖,诱导细胞凋亡,并且上调p53和降低survivin表达。结论 EARH可能通过上调p53基因、下调survivin表达,促进Bel7402细胞凋亡,从而体外抑制Bel7402细胞增殖。

摘要： 目的 探讨Survivin mRNA在宫颈癌中表达及其调控宫颈癌(Hela)细胞增殖的作用机制研究.方法 收取30例宫颈癌初诊早期患者癌组织及远癌组织,RT-qPCR法检测survivin mRNA在两种组织中的表达水平;制备Sur-vivin基因敲减慢病毒载体并转染Hela细胞,通过MTT法、Transwell实验及流式细胞术分别检测转染后Hela细胞的增殖能力、侵袭能力及凋亡速率.结果 在实验病例中,75％患者癌组织survivn基因表达水平都显著高于远癌组织;经sur-vivin基因敲减慢病毒载体转染后的Hela细胞,其增殖能力及侵袭能力都显著降低,细胞凋亡速率明显增高.结论 sur-vivin基因在宫颈癌组织中呈现高表达,并通过促进Hela细胞增殖、侵袭及降低其凋亡从而促进宫颈癌的发生和发展.

摘要： 目的 研究Survivin基因及蛋白表达与人786-0肾透明癌细胞增殖和凋亡的相关性.方法 人肾癌细胞系786-0作为Survivin转染组,肾小管上皮细胞系HK-2作为阴性对照组,分别用Survivin模拟物转染;转染72 h后测定Survivin基因及蛋白表达;对比两组细胞吸光值、细胞数及凋亡细胞比值;对Survivin基因和蛋白表达水平与细胞吸光值、细胞数和凋亡细胞比值进行Pearson相关性分析.结果 转染后,Survivin转染组Survivin mRNA、Survivin蛋白表达水平显著高于阴性对照组(P＜0.05);吸光值从第1d开始显著低于阴性对照组(P＜0.05);细胞数从第2d开始显著少于阴性对照组(P＜0.05).786-0细胞的凋亡比例从第1d开始显著低于阴性对照组(P＜0.05).Pearson相关性分析结果显示,Survivin基因和蛋白表达水平与吸光值和细胞数呈负相关,与凋亡细胞比值呈正相关.结论 Survivin基因和蛋白表达可以抑制786-0肾透明癌细胞增殖,促进细胞凋亡.

摘要： 目的 探讨膀胱移行细胞癌(BTCC)组织中血管内皮生长因子(VEGF)、增殖细胞核抗原(PCNA)、p53基因及Survivin的阳性表达率,分析其与癌组织的病理分级和临床分期的相关性.方法 选择2015年1月至2017年5月经广东医科大学附属中山医院泌尿外科手术切除并经病理证实的BTCC组织石蜡标本67例(BTCC组)和正常膀胱黏膜组织标本17例(正常膀胱组),采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法检测其VEGF、PCNA、p53及Survivin表达,比较BTCC与正常膀胱组织、不同病理分级及不同临床分期BTCC组织中各检测指标的阳性表达差异.结果 VEGF、PCNA、p53及Survivin在正常膀胱组中的阳性表达率均为0,在BTCC组中的阳性表达率依次为67.16%、68.66%、53.73%及74.63%,差异均有统计学意义(P<0.05);VEGF、PCNA、p53及Survivin在G1组中的阳性表达率依次为30.00%、25.00%、30.00%及55.00%,在G2组中的阳性表达率依次为73.33%、80.00%、53.33%及76.67%,在G3组中的阳性表达率依次为100.00%、100.00%、82.35%及94.12%,不同病理分级组之间比较差异均有统计学意义(P<0.05);VEGF、PCNA、p53及Survivin在Tis~T1组中的阳性表达率依次为55.10%、57.14%、40.82%及67.35%,均低于T2~T4组的100.00%、100.00%、88.89%及94.44%,差异有统计学意义(P<0.05).结论 VEGF、PCNA、p53及Survivin在正常膀胱黏膜组织中无阳性表达,在BTCC组织中的阳性表达率与病理分级、临床分期有关.%Objective To explore the positive expression rate of the vascular endothelial growth factor(VEGF), proliferating cell nuclear antigen(PCNA),p53 gene and Survivin gene in bladder transitional cell carcinoma(BTCC),and analyzed their relationship with the pathological grading and clinical staging of cancerous tissue.Methods A total of 67 BTCC paraffin tissue samples (BTCC group) and 17 normal bladder paraffin tissue samples (normal bladder group) were resected and pathologically confirmed in Department of Urology, the Affiliated Zhongshan Hospital of Guang-dong Medical University from January 2015 to May 2017.Immunohistochemical streptavidin-perosidase(SP)method was used to detect the expression of VEGF, PCNA, p53 and Survivin.The difference of positive expression of each tested index between normal bladder group and BTCC group of different pathological grading and clinical staging were compared.Results The positive expression rates of VEGF,PCNA,p53 and Survivin were all 0 in normal blad-der group, versus 67.16%, 68.66%, 53.73%, 74.63% in BTCC group, respectively (P<0.05). The positive expression rates of VEGF, PCNA, p53 and Survivin were 30.00%, 25.00%, 30.00%, 55.00% in group G1 respectively, 73.33%, 80.00%,53.33%,73.33% in group G2 and 100.00%,100.00%,82.35%,94.12% in group G3,with statistically signifi-cant difference between each two groups (P<0.05). The positive expression rates of VEGF, PCNA, p53, Survivin were 55.10%, 57.14%, 40.82%, 67.35% in group Tis-T1 respectively, which were significantly lower than 100.00%,100.00%,88.89%,94.44% in group T2-T4(P<0.05).Conclusion VEGF,PCNA,p53 and Survivin show no positive expression in normal bladder mucous membrane tissue,while their positive expression rate in BTCC tissue were associ-ated with pathological grading and clinical staging.

摘要： 目的：建立一种特异性检测外周血中 Survivin 基因 mRNA 表达的逆转录双重荧光定量 PCR 方法。方法：设计特异性引物、荧光探针，检测健康人群和癌症患者治疗前后的 Survivin 基因表达量，并利用统计学方法对此基因的临床意义和治疗效果进行评价。结果：建立了 GADPH、Survivin 基因的标准曲线，并有良好的相关性，R2分别为0．9983和0．9960。管家基因 GADPH，在50例健康人群和47例癌症患者（治疗前后）体内表达量（分别为：6．45×105、6．57×105、6．74×105 copies／ml）无统计学差异。Survivin 基因，在健康人群中无表达（Ct 值≥28）；癌症患者（治疗前）检测到91．5％（43／47）表达，表达量为5．35×105 copies／ml；癌症患者（治疗后）检测到46．8％（22／47），表达量为3．18×105 copies／ml。结论：本研究建立了在外周血中检测 Sur-vivin 基因的双重荧光定量 PCR 方法，此方法在健康人群和癌症患者间、对癌症不同治疗方法的评估、对癌症治疗效果的评估等方面均有良好的应用。%Objective:To establish a specific detection of retroviral Survivin mRNA expression in peripheral blood of double FQ -PCR method.Methods:To design specific primers,fluorescent probes,Survivin gene expression before and after testing in healthy people and cancer patients was tested.Results:Established the standard curve of GADPH, Survivin gene,and there was a good correlation R2 were 0.998 3 and 0.996 0.The housekeeping gene GADPH,50 healthy people and 47 patients with cancer(after treatment)in vivo expression(respectively:6.45 ×105 ,6.57 × 105 ,6.74 ×105 copies/ml)was not statistically different.Survivin gene,was not expressed in healthy people(Ct val-ues≥28)in cancer patients(before treatment)detected in 9 1 .5 %(43 /47 )expression,the expression level of 5.35 ×105 copies/ml,cancer patients(after treatment)detected 46.8%(22 /47),the expression level of 3.18 × 105 copies/ml.Conclusion:This study was established to detect survivin dual fluorescence quantitative polymerase chain reaction(PCR)in peripheral blood,this method in healthy people and patients with cancer and evaluation of different methods for treating cancer,on the effectiveness of cancer treatment evaluation has a good application.

摘要： 目的 探讨Survivin基因调控Notch1信号通路对骨髓瘤细胞增殖及侵袭的影响.方法 RT-PCR检测42例骨髓瘤组织及正常骨髓组织中Survivin基因的mRNA表达;NC-siRNA和Survivin-siRNA转染人骨髓瘤细胞株RPMI8226,Western blot检测48 h后各组细胞中Survivin蛋白的表达;台盼蓝拒染法和Transwell小室分别检测细胞活率及侵袭能力;Western blot检测MMP-2、MMP-9、Notch1、Hes1蛋白的表达.结果 Survivin基因在骨髓瘤组织中的mRNA表达显著高于正常骨髓组织(P﹤0.01);转染siRNA后RPMI8226细胞中Survivin蛋白的表达显著降低(P﹤0.01);与对照组及NC-siRNA组的比较,Survivin-siRNA组细胞活率、细胞侵袭数及MMP-2、MMP-9、Notch1、Hes1蛋白表达均显著降低(P﹤0.01).结论 RNA干扰Survivin基因的表达可降低RPMI8226细胞活率及侵袭能力,其机制与抑制Notch1信号通路有关.%Objective To investigate the effect of Survivin gene on the proliferation and invasion of myeloma cells by Notch1 signaling pathway. Method The mRNA expression of Survivin gene in 42 cases of bone marrow tumor tissue and normal bone marrow was detected by RT-PCR;NC-siRNA and Survivin-siRNA were transfected to human myeloma cell line RPMI8226, the expression of Survivin protein was detected by Western blot after 48 h;cell activity and invasion ability were detected by trypan blue exclusion and Transwell assay;the expression of MMP-2, MMP-9, Notch1, Hes1 pro-tein were detected by Western blot. Result The mRNA expression of Survivin gene in bone marrow tumor tissues was significantly higher than in normal bone marrow (P<0.01);the expression of Survivin protein after transfection of siRNA in RPMI8226 cells decreased significantly (P<0.01);compared with the control group and NC-siRNA group, the cell ac-tivity, cell invasion and MMP-2, MMP-9, Notch1 and Hes1 protein expression in Survivin-siRNA group were significant-ly reduced (P<0.01). Conclusion The interference of Survivin gene expression by RNA can decrease the proliferation and invasion of RPMI8226 cells, and its mechanism is related to the inhibition of Notch1 signaling pathway.

摘要： 目的 采用基因沉默手段沉默人头颈鳞癌细胞中Survivin基因的表达,进而探讨Survivin基因沉默对人头颈鳞癌细胞凋亡的影响.方法 采集人头颈鳞癌PCI-37B细胞作为观察对象,根据细胞处理方式的差异将其分为观察组、阴性对照组、空白对照组.其中观察组采用基因沉默手段对PCI-37B细胞进行处理,将Sruvivin-SiRNA进行细胞转到入PCI-37B.阴性对照组选用FAM-SiRNA-Mate复合物.空白对照组则应用未进行转染处理的正常细胞.采用流式细胞仪检测PCI-37B细胞凋亡情况,观察细胞周期的变化,并与阴性对照组、空白对照组进行比较.结果 Survivin基因沉默处理后,人头颈鳞癌细胞PCI-37B细胞凋亡率明显升高,与阴性对照组、空白对照组比较差异存在显著,并且阴性对照组与空白对照组比较无显著差异(P>0.05);细胞周期变化观察结果显示,Survivin基因沉默能够对肿瘤细胞周期产生影响,降低鳞癌细胞在S期的比率,与阴性对照组、空白对照组比较,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 应用基因沉默手段沉默Survivin基因的表达可有效诱导人头颈鳞癌细胞PCI-37B细胞的凋亡活动,对抑制肿瘤细胞的生长以及浸润具有重要作用,临床可以此作为切入点研究、制定人头颈鳞癌的靶向治疗方案.%Objective Expression of Survivin gene silencing of human head and neck squamous cell carcinoma gene silencing,and to explore the effect of Survivin gene silencing on apoptosis of human head and neck squamous cell carcinoma.Methods The acquisition of head and neck squamous cell carcinoma cell line PCI-37B cells were selected as the observation object,by means of gene silence treated PCI-37B cells,Sruvivin-SiRNA cells go into PCI-37B,after the detection of PCI-37B cell apoptosis by flow cytometry,the changes of cell cycle were observed,and compared with the negative control group,Su analysis Effect of rvivin gene silencing on human head and neck squamous cell carcinoma PCI-37B cell apoptosis.Results Survivin gene silencing after treatment,apoptosis rate of head and neck squamous cell carcinoma PCI-37B cell increased,there was significant difference,and the difference with the negative control group was statistically significant (P<0.05).The change of cell cycle observation showed that Survivin gene silencing could affect the tumor cell cycle,decrease squamous cell percentage in S phase,there were significant differences (P<0.05).Conclusion Survivin gene has an important effect on the apoptosis of human head and neck squamous cell carcinoma.The apoptosis activity by gene expression silencing Survivin gene silencing can effectively induce human head and neck squamous cell carcinoma cell line PCI-37B cells,it plays an important role in inhibiting tumor cell growth and invasion,which can be used as clinical research starting point,and to develop head and neck squamous cell carcinoma targeting treatment plan.

摘要： 目的 探讨Survivin基因影响肾癌侵袭能力的机制.方法 利用RNA干扰转染技术靶向沉默肾癌786-O细胞Survivin基因表达,通过RT-PCR及Western blot技术检测Survivin mRNA及蛋白表达水平变化,并检测MMP-2蛋白表达情况.结果 成功制备转染Survivin siRNA质粒的低Survivin表达的786-O/low-Survivin细胞系,细胞表达绿色荧光,转染效率超过90%.RT-PCR电泳条带灰度值显示,Survivin siRNA/786-O组的Survivin mRNA表达水平(0.233±0.044)明显低于Control siRNA/786-O组(0.628±0.093)以及Non-siRNA/786-O组(0.657±0.079)(P0.05).Survivin siRNA转染786-O细胞后,抑制了Survivin基因的转录活性.Western Blot实验显示:Survivin siRNA/786-O组的Survivin蛋白表达水平(2.424±0.303)明显低于Control siRNA/786-O组(15.483±0.343)以及Non-siR-NA/786-O组(15.513±0.407)(P0.05).Survivin siRNA转染786-O细胞后,显著下调了Survivin蛋白水平,并下调了MMP-2蛋白表达水平.结论 靶向沉默Survivin基因能显著下调肾癌786-O的SurvivinmRNA和蛋白分子表达,并干扰了MMP-2蛋白的表达,揭示出Survivin基因参与调控肾癌侵袭转移的潜在调控机制.%Objective To investigate the mechanism of targeted silencing Survivin gene expression in human renal carcinoma cell line-786-O cells to reduce invasion ability of renal carcinoma .Methods The RNA inteference transfection technique was used to silence Survivin gene expression in human renal carcinoma 786-O cells.The expression levels of Survivin mRNA and protein as well as MMP-2 protein were detected by reverse transcription-polymerase chain reaction ( RT-PCR) and Western Blot,respectively.Results The 786-O/low-Survivin was established successfully .As compared with control siRNA/786-O and non-siRNA/786-O,and the Survivin siRNA/786-O showed obvious reduction of expression levels of Survivin mRNA and protein (P0.05).After Survivin siRNA was transfected into 786-O cells,which inhibited the transcription activity of Survivin gene .Western Blot assay showed that the expression levels of Survivin protein (2.424 ±0.303)in Survivin siRNA /786-O group were significantly lower than those (15.483 ±0.343) in siRNA/786-O control group as well as those (15.513 ±0.407) in non-siRNA/786-O group (P 0.05).After Survivin siRNA was transfected into 786-O cells, which obviously down -regulated the expression levels of Survivin protein and MMP-2 protein.Conclusion The targeted silencing of Survivin gene can obviously down -regulate the expression levels of Survivin mRNA and protein in human renal carcinoma cell line -786-O cells,and can interfere the expression of MMP-2 protein,which suggests that Survivin gene may participate in the regulation mechanism of invasion and metastasis of renal cancer .

摘要： 目的：本实验主要研究NCTD作用于体外急性淋巴细胞白血病细胞株Jurkat后survivin及p53基因表达的变化,进而明确去甲斑蝥素抗肿瘤的主要机制,促进去甲斑蝥素（NCTD）有效应用于急性淋巴细胞白血病的临床治疗,为急性淋巴细胞白血病的治疗开辟崭新途径.方法:1、体外培养Jurkat细胞株:应用常规悬浮细胞培养方法进行培养，备10%FBS的RPM11640培养液，将选中细胞置于其中，密切观察其生长情况，3-4日传代一次，使用对数生长期细胞进行试验。2.Jurkat细胞系在NTCD作用下的体外研究:实验分成两组:①对照组，培养液中不添加任何药物。ONCTD组，配制20mg/L浓度的NTCD作用于Jurkat细胞系.3、两组细胞共同培养72h(己经有实验得出20mg/L浓度的NCTD作用于Jurkat细胞系72h时抑制作用最强)4、运用实时荧光定量RTPCR技术分别对NTCD作用前后的Jurkat细胞株中的p53基因及survivin基因进行定量检测。5、统计分析。结果:应用实时荧光定量RT-PCR技术定量表达p53及survivin基因，结果显示NCTD组p53基因表达较对照组细胞株上升3%，相反survivin基因较对照组下降20%，应用统计学方法t检验得出二者均P<0.01，具有统计学意义。结论:1、上调p53基因途径可能是NCTD诱导Jurkat细胞凋亡，抑制白血病进展的机制之一。2、下调survivin基因途径是NCTD抗白血病作用的的基因途径之一。3、综上所述，由于NCTD能够上调抑癌基因，下调癌基因，因此可以说明该药具有抗白血病作用，且survivin基因及p53基因表达变化可提示NCTD治疗效果，为今后该药物应用于急性淋巴细胞白血病的临床治疗提供重要理论依据。

摘要： 目的：探讨针对survivin基因的siRNA对肿瘤细胞的效应,筛选有效的siRNA序列,为进一步研制具有自主知识产权的RNAi药物奠定实验基础.方法：设计3条针对survivn基因的siRNA,用脂质体转染试剂HiperFect将其转染至人类肺腺癌A549细胞、宫颈癌Hela S3细胞、急性髓系白血病K562细胞.采用SYBR Green 1荧光染料的实时定量PCR研究survivin siRNA对肿瘤细胞survivin基因表达的影响,采用WST-8细胞计数试剂盒(水溶性四唑盐)研究siRNA对肿瘤细胞增殖的影响.结果用统计学软件PASW statistics 18,进行单因素方差分析和LSD法两两比较,检验水准以P＜0.05为具有统计学差异.结果：本研究设计的3条survivin siRNA序列对肿瘤细胞A549、Hela S3和K562中survivin基因表达的抑制率达57％-95％,对三种肿瘤细胞增殖的抑制率达27％-57％.其中序列1的效应最为显著:对survivin基因的抑制率48h达到75％以上、72h达到90％以上;对细胞增殖抑制率48h可达40％以上、72h可达50％以上,并且在3个肿瘤细胞系中效应大致相同.结论：siRNA能有效沉默survivin基因在多种肿瘤细胞中的表达,抑制肿瘤细胞的增殖,所设计的三种survivin siRNA序列均有活性以序列1作用最强.

摘要： 目的：探讨茅莓总皂苷(TSRP)调控K562/A02细胞NF-κB信号通路对mdr-1和survivin基因表达的影响,为逆转耐药提供依据. 方法：MTT法观察不同浓度TSRP对K562/A02细胞的抑制增殖作用;Annexin V-FITC/PI法检测不同浓度TSRP诱导K562/A02细胞凋亡;RT-PCR法检测不同浓度TSRP对mdr-1和survivin基因mRNA表达的影响;Western blot法检测不同浓度TSRP处理K562/A02细胞后NF-κB/P65、NF-κB/P50、IκBα、PgP和survivin的表达. 结果：MTT显示TSRP在浓度200、400和800μg/ml范围内对K562/A02细胞生长抑制呈剂量依赖性,浓度400和800μg/ml时吸光度分别为0.57±0.03和0.37±0.01,与空白对照组0.83±0.05比较,P均＜0.05;Annexin V-FITC/PI细胞凋亡显示经不同浓度TSRP处理后,细胞的早期凋亡率明显增加;RT-PCR法检测到TSRP显著抑制细胞mdr-1和survivinmRNA表达,呈剂量依赖性;Western blot法显示TSRP显著抑制NF-κB/P65、NF-κB/P50和IκBα的活性,并且抑制P-gp和survivin表达,均呈剂量依赖性. 结论：TSRP通过NF-κB信号通路调控白血病K562/AO2细胞mdr-1和survivin基因表达,针对NF-κB信号途径研究开发抗白血病中药有效成分是中医药发展的一个方向.

摘要： 为了解鼻咽癌组织中survivin的表达情况，探讨其表达程度与鼻咽癌的分期、转移的关系。分别在体内外实验应用RNA干扰技术选择性沉默鼻咽癌cNE-2细胞survivin基因，观察其对肿瘤细胞的抑制作用。研究结果表明：l.Survivin基因在鼻咽癌组织中呈高表达，表达程度与鼻咽癌的分期相关，与鼻咽癌的淋巴结转移相关。2.特异性shRNA可以有效干扰鼻咽癌细胞内survivin mRNA和蛋白的表达，改变细胞周期分布，诱导细胞的凋亡和抑制细胞的增殖。3.利用靶向survivin基因的特异性shRNA转染鼻咽癌移植瘤干扰技术能有效抑制鼻咽癌移植瘤survivin的表达。RNAi作为一种治疗鼻咽癌的新手段值得进一步深入研究。

摘要： 目的:构建靶向Survivin基因及CDK1基因的短发夹样RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体并研究其对鼻咽癌细胞CNE-2的干扰效应.rn 方法:根据Genbank报道的Survivin序列及CDK1序列,遵循shRNA设计原则设计并合成各自靶向的Survivin、CDK1基因的shRNA寡核苷酸序列,构建pU6-Survivin、pU6-CDK1及pU6-Survivin-CDK1重组载体,经酶切及测序鉴定,用脂质体Lipofectamine 2000方法将其转染入CNE-2细胞株中,逆转录实时荧光定量PCR(Rr-qPCR)检测Survivin、CDK1 mRNA的基因表达水平.rn 结果:经酶切及测序结果分析,pU6-Survivin、pU6-CDK1及pU6-Survivin-CDK1重组载体均成功构建,经Graphpad Prism5统计分析RT-qPCR的结果:Survivin+CDK1 shRNAs组中Survivin mRNA下调为66％,与空白组、阴性对照组有显著差异(p＜0.01,n=3),与Survivin-shRNA组差异无统计学意义;Survivin+CDK1 shRNAs组中CDK1 mRNA下调为72％,与空白组、阴性对照组有显著差异(p＜0.01,n=3),与CDK1-shRNA组差异有显著性(p＜0.05,n=3).rn 结论:成功构建对鼻咽癌细胞CNE-2具有干扰效应的Survivin及CDK1双基因联合靶向shRNA重组载体,从基因水平分析其协同作用中Survivin基因与单基因干扰差异无统计学意义,CDK1基因比单基因干扰作用较强.

摘要： 目的:构建靶向Survivin基因及CDK1基因的短发夹样RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体并研究其对鼻咽癌细胞CNE-2的干扰效应.rn 方法:根据Genbank报道的Survivin序列及CDK1序列,遵循shRNA设计原则设计并合成各自靶向的Survivin、CDK1基因的shRNA寡核苷酸序列,构建pU6-Survivin、pU6-CDK1及pU6-Survivin-CDK1重组载体,经酶切及测序鉴定,用脂质体Lipofectamine 2000方法将其转染入CNE-2细胞株中,逆转录实时荧光定量PCR(Rr-qPCR)检测Survivin、CDK1 mRNA的基因表达水平.rn 结果:经酶切及测序结果分析,pU6-Survivin、pU6-CDK1及pU6-Survivin-CDK1重组载体均成功构建,经Graphpad Prism5统计分析RT-qPCR的结果:Survivin+CDK1 shRNAs组中Survivin mRNA下调为66％,与空白组、阴性对照组有显著差异(p＜0.01,n=3),与Survivin-shRNA组差异无统计学意义;Survivin+CDK1 shRNAs组中CDK1 mRNA下调为72％,与空白组、阴性对照组有显著差异(p＜0.01,n=3),与CDK1-shRNA组差异有显著性(p＜0.05,n=3).rn 结论:成功构建对鼻咽癌细胞CNE-2具有干扰效应的Survivin及CDK1双基因联合靶向shRNA重组载体,从基因水平分析其协同作用中Survivin基因与单基因干扰差异无统计学意义,CDK1基因比单基因干扰作用较强.

摘要： 目的:构建靶向Survivin基因及CDK1基因的短发夹样RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体并研究其对鼻咽癌细胞CNE-2的干扰效应.rn 方法:根据Genbank报道的Survivin序列及CDK1序列,遵循shRNA设计原则设计并合成各自靶向的Survivin、CDK1基因的shRNA寡核苷酸序列,构建pU6-Survivin、pU6-CDK1及pU6-Survivin-CDK1重组载体,经酶切及测序鉴定,用脂质体Lipofectamine 2000方法将其转染入CNE-2细胞株中,逆转录实时荧光定量PCR(Rr-qPCR)检测Survivin、CDK1 mRNA的基因表达水平.rn 结果:经酶切及测序结果分析,pU6-Survivin、pU6-CDK1及pU6-Survivin-CDK1重组载体均成功构建,经Graphpad Prism5统计分析RT-qPCR的结果:Survivin+CDK1 shRNAs组中Survivin mRNA下调为66％,与空白组、阴性对照组有显著差异(p＜0.01,n=3),与Survivin-shRNA组差异无统计学意义;Survivin+CDK1 shRNAs组中CDK1 mRNA下调为72％,与空白组、阴性对照组有显著差异(p＜0.01,n=3),与CDK1-shRNA组差异有显著性(p＜0.05,n=3).rn 结论:成功构建对鼻咽癌细胞CNE-2具有干扰效应的Survivin及CDK1双基因联合靶向shRNA重组载体,从基因水平分析其协同作用中Survivin基因与单基因干扰差异无统计学意义,CDK1基因比单基因干扰作用较强.

摘要： 目的:构建靶向Survivin基因及CDK1基因的短发夹样RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体并研究其对鼻咽癌细胞CNE-2的干扰效应.rn 方法:根据Genbank报道的Survivin序列及CDK1序列,遵循shRNA设计原则设计并合成各自靶向的Survivin、CDK1基因的shRNA寡核苷酸序列,构建pU6-Survivin、pU6-CDK1及pU6-Survivin-CDK1重组载体,经酶切及测序鉴定,用脂质体Lipofectamine 2000方法将其转染入CNE-2细胞株中,逆转录实时荧光定量PCR(Rr-qPCR)检测Survivin、CDK1 mRNA的基因表达水平.rn 结果:经酶切及测序结果分析,pU6-Survivin、pU6-CDK1及pU6-Survivin-CDK1重组载体均成功构建,经Graphpad Prism5统计分析RT-qPCR的结果:Survivin+CDK1 shRNAs组中Survivin mRNA下调为66％,与空白组、阴性对照组有显著差异(p＜0.01,n=3),与Survivin-shRNA组差异无统计学意义;Survivin+CDK1 shRNAs组中CDK1 mRNA下调为72％,与空白组、阴性对照组有显著差异(p＜0.01,n=3),与CDK1-shRNA组差异有显著性(p＜0.05,n=3).rn 结论:成功构建对鼻咽癌细胞CNE-2具有干扰效应的Survivin及CDK1双基因联合靶向shRNA重组载体,从基因水平分析其协同作用中Survivin基因与单基因干扰差异无统计学意义,CDK1基因比单基因干扰作用较强.

摘要： 目的:构建靶向Survivin基因及CDK1基因的短发夹样RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体并研究其对鼻咽癌细胞CNE-2的干扰效应.rn 方法:根据Genbank报道的Survivin序列及CDK1序列,遵循shRNA设计原则设计并合成各自靶向的Survivin、CDK1基因的shRNA寡核苷酸序列,构建pU6-Survivin、pU6-CDK1及pU6-Survivin-CDK1重组载体,经酶切及测序鉴定,用脂质体Lipofectamine 2000方法将其转染入CNE-2细胞株中,逆转录实时荧光定量PCR(Rr-qPCR)检测Survivin、CDK1 mRNA的基因表达水平.rn 结果:经酶切及测序结果分析,pU6-Survivin、pU6-CDK1及pU6-Survivin-CDK1重组载体均成功构建,经Graphpad Prism5统计分析RT-qPCR的结果:Survivin+CDK1 shRNAs组中Survivin mRNA下调为66％,与空白组、阴性对照组有显著差异(p＜0.01,n=3),与Survivin-shRNA组差异无统计学意义;Survivin+CDK1 shRNAs组中CDK1 mRNA下调为72％,与空白组、阴性对照组有显著差异(p＜0.01,n=3),与CDK1-shRNA组差异有显著性(p＜0.05,n=3).rn 结论:成功构建对鼻咽癌细胞CNE-2具有干扰效应的Survivin及CDK1双基因联合靶向shRNA重组载体,从基因水平分析其协同作用中Survivin基因与单基因干扰差异无统计学意义,CDK1基因比单基因干扰作用较强.

摘要： 目的:构建靶向Survivin基因及CDK1基因的短发夹样RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体并研究其对鼻咽癌细胞CNE-2的干扰效应.rn 方法:根据Genbank报道的Survivin序列及CDK1序列,遵循shRNA设计原则设计并合成各自靶向的Survivin、CDK1基因的shRNA寡核苷酸序列,构建pU6-Survivin、pU6-CDK1及pU6-Survivin-CDK1重组载体,经酶切及测序鉴定,用脂质体Lipofectamine 2000方法将其转染入CNE-2细胞株中,逆转录实时荧光定量PCR(Rr-qPCR)检测Survivin、CDK1 mRNA的基因表达水平.rn 结果:经酶切及测序结果分析,pU6-Survivin、pU6-CDK1及pU6-Survivin-CDK1重组载体均成功构建,经Graphpad Prism5统计分析RT-qPCR的结果:Survivin+CDK1 shRNAs组中Survivin mRNA下调为66％,与空白组、阴性对照组有显著差异(p＜0.01,n=3),与Survivin-shRNA组差异无统计学意义;Survivin+CDK1 shRNAs组中CDK1 mRNA下调为72％,与空白组、阴性对照组有显著差异(p＜0.01,n=3),与CDK1-shRNA组差异有显著性(p＜0.05,n=3).rn 结论:成功构建对鼻咽癌细胞CNE-2具有干扰效应的Survivin及CDK1双基因联合靶向shRNA重组载体,从基因水平分析其协同作用中Survivin基因与单基因干扰差异无统计学意义,CDK1基因比单基因干扰作用较强.

摘要： 本发明公开了一种Survivin启动子控制的自杀基因

摘要： 本发明公开了一种携带生存素(Survivin，又称存活素)抗原基因的重组腺相关病毒载体及其构建方法与其应用。该rAAV载体是将腺相关病毒载体中的腺相关病毒的结构基因替换为Survivin抗原基因得到。本发明的rAAV的病毒载体可将其携带的Survivin抗原基因输送入单核细胞‑树突状细胞系中，被用于刺激免疫系统的效应细胞。实验证明，被本发明的rAAV的病毒载体感染的DC所诱导的CTL在体外或患者体内可有效地抑制Survivin抗原阳性的恶性肿瘤细胞的生长或者杀灭肿瘤细胞。本发明的重组腺相关病毒载体或其相关产品可被用于制备治疗多种Survivin抗原阳性肿瘤的药物。

摘要： 本发明公开了一种生物素（Survivin）和粘蛋白（MUC1）的融合蛋白及其编码基因与应用。本发明所提供的融合蛋白的氨基酸序列如序列表中序列1所示。本发明还同时提供了编码所述融合蛋白的核酸分子，以及含有所述核酸分子的重组载体、表达盒、重组细胞、重组菌或重组病毒；所述核酸分子的核苷酸序列如序列表中序列2所示。实验证明，将本发明所提供的Survivin-MUC1融合蛋白以及经所述Survivin-MUC1融合蛋白致敏的DC免疫小鼠后，能够显著的提高小鼠血清中Survivin和/或MUC1蛋白特异性IgG抗体的水平。

摘要： 本发明提供一种重组腺病毒，这种重组腺病毒包含了胞嘧啶脱氨酶基因（CD基因），所述的CD基因受本发明设计的一种Survivin启动子控制。更具需要进一步的公开了这种重组腺病毒的制备方法，并将重组腺病毒应用于治疗癌症的药物。本发明提供的重组腺病毒，对肿瘤细胞有很好的特异性，在启动肿瘤细胞的自杀程序的同时，并不影响正常细胞的存活。

摘要： 本发明公开了一种Survivin启动子控制的自杀基因

摘要： 本发明公开了一种新型的siRNA递送系统的构建方法，还公开了该递送系统在制备加载抗肿瘤基因治疗药物中的应用。本发明通过方法探索合成了一种具有抗肿瘤活性的双亲性化合物S‑β‑咔啉‑3‑酰基‑RGDV，简称为CRV。本发明将合成的目标化合物作为一种膜材代替磷脂与胆固醇共同形成脂质体外膜，后加载抗肿瘤基因治疗药物形成一种新型的siRNA递送系统，其中加载抗肿瘤基因治疗药物的新型siRNA递送系统可以特异性沉默SURVIVIN mRNA的表达，下调SURVIVIN蛋白的表达，抑制肿瘤细胞生长。

摘要： 本发明公开一种基于石墨烯金复合材料电化学DNA生物传感器检测survivin基因的方法，包括如下步骤：根据待测基因片段设计特异性的探针，捕获探针通过金-硫键自组装在G- 3D Au/GCE表面，在目标DNA存在的情况下，捕获探针及末端标记有生物素的信号探针分别与目标DNA结合形成“三明治”结构模型。亲和素标记的辣根过氧化物酶可通过与信号探针标记的生物素结合，从而使HRP固定在电极表面。将此电极置于含3，3’，5，5’—四甲基联苯胺和H

摘要： 本发明公开了一种抑制survivin基因表达的siRNA序列，具有广谱的siRNA抗肿瘤作用，对乳腺癌、肺癌、肠癌、肝癌、白血病、胃癌、宫颈癌、口腔上皮癌等在体外都有良好的抑制作用，尤其是对乳腺癌、肺癌、宫颈癌细胞。该siRNA双链序列通过某种方式进入到生物体内时，能够高效、特异的抑制疾病相关蛋白的表达，使有关疾病基因发生沉默，能对靶基因的表达进行有效敲除，达到治疗目的。

摘要： 本发明公开了一种涉及抑制survivin基因表达的siRNA序列，其是由具有下述核苷酸序列的正义链和反义链组成：正义链5＇-GGCCCUUGUCUAAGUGCAA-3＇，反义链5＇-UUGCACUUAGACAAGGGCC-3＇。具有广谱的siRNA抗肿瘤作用，对乳腺癌、肺癌、前列腺癌、肠癌、肝癌、白血病、胃癌、宫颈癌、口腔上皮癌等在体外都有良好的抑制作用，尤其是对肺癌、前列腺癌细胞。

摘要： 本发明涉及一种抑制survivin基因表达的双链siRNA分子，其由正义链和反义链组成，其中，所述正义链的序列为：5’-GGACCACCGCAUCUCUACAdTdT-3’；所述反义链的序列为：5’-UGUAGAGAUGCGGUGGUCCdTdT-3’。由于survivin是一种凋亡抑制蛋白，与肿瘤细胞的凋亡有关，当该siRNA双链序列进入到生物体内时，能够高效抑制survivin基因的表达，诱导癌细胞的凋亡，达到治疗癌症的目的。双链siRNA分子能够用于制备治疗肺癌和乳腺癌的药物。