SP细胞

摘要： 目的:了解SP细胞在急性白血病发病过程中的意义.方法:利用Hoechst 33342染色分选出急性白血病细胞系的SP及MP细胞,比较SP及MP细胞的生物学特性,研究相关通路的变化.结果:急性白血病细胞系可分选出SP细胞,分选出的侧群细胞相对于主群细胞具有较高的G1期表达,较高的细胞增殖能力及克隆形成能力,并且高表达ABC家族的ABCG2耐药蛋白,并具有较强的化疗药物抵抗能力.结论:急性白血病SP细胞具有肿瘤干细胞的生物学特性,ABCG2也许可以作为急性白血病SP细胞表面标志物.

摘要： 目的探讨二甲双胍(metformin, Metf)对人食管鳞癌侧群(side population, SP)细胞的作用及机制。方法通过流式细胞仪检测食管鳞癌细胞系SP比例及分选SP细胞,CCK-8法、平板克隆及成球实验检测Metf对SP细胞体外增殖的影响,Western blot法检测Metf对SP细胞相关基因蛋白表达的影响。结果本实验中的9种食管鳞癌细胞系的SP比例在0.2%～2%左右。Metf能够降低KYSE 150 SP比例、明显抑制SP细胞的细胞增殖、克隆形成数和成球生长数,其抑制程度与Metf浓度及给药时间呈显著正相关性,差异有统计学意义(P<0.01)。此外,Metf能不同程度地降低SP细胞中相关"干性"基因SOX2与OCT4的表达。结论 Metf能抑制食管癌细胞中SP细胞,可能为食管癌治疗与预防提供新的途径。

摘要： 目的 采用流式细胞仪优化Hoechst33342染料浓度,检测肝细胞癌(HCC) MHCC-97H细胞中侧群(SP)细胞与非侧群(NSP)细胞中微小RNA-21(miRNA-21)的表达情况.方法 常规制备MHCC-97H单细胞悬液,采用不同浓度(5、6、7、8、9、10、11、12 mg/L)的荧光染料Hoechst33342染色,以维拉帕米拮抗组为对照,优化最适合的Hoechst33342染料浓度,通过流式细胞仪分离SP、NSP细胞;采用RT-PCR法检测SP、NSP细胞中miRNA-21的表达情况.结果 优化Hoechst33342浓度为10 mg/L,活细胞比例较高,是最适染色的浓度,此时MHCC-97H中SP细胞比例为(8.4±0.7)％;从SP、NSP细胞中提取的总RNA纯度为1.8～2.0,其中没有DNA和蛋白质混杂;SP细胞的miRNA-21表达水平是NSP细胞的(7.30±0.78)倍,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 优化的Hoechst33342浓度可以提高SP细胞的纯度,同时miRNA-21表达可能与HCC干细胞分化有关.

摘要： 目的 肺癌干细胞是肺癌治疗的潜在靶点,从A549肺腺癌细胞株分离出肺癌干细胞SP细胞,并对其干细胞特性进行鉴定.方法 接种肺癌A549细胞,利用流式细胞仪、免疫磁珠分离出SP细胞、NON-SP细胞,并鉴定其干细胞的特性,例如细胞的增殖能力和体外致瘤能力.结果 经过流式细胞仪和免疫磁珠的方法成功分离出SP细胞,相比于NON-SP细胞,其增殖、克隆形成和体外致瘤能力较高.结论 在肺癌中成功分选出高表达的CD133+肺癌干细胞,其可能与肺癌的发生和发展密切相关.

摘要： Recently, stem cell like side population (SP) cells have been found in many normal organizations and malig⁃nant tumors, which have the proficiency of differentiation and self-renewal. These cells play an important role in cancer stem cell research, though they occupy a low proportion in total cells. Here, we reviewed the foundation of SP cells, and their rela⁃tionship with stem cells, and the clinical application in the future.%干细胞样SP细胞是近年来在很多正常组织和恶性肿瘤组织及细胞系中发现的一种具有不同程度分化潜能和自我更新能力的细胞群体。虽然SP细胞在总体细胞中所占比例很低，但这部分具有干细胞特性的细胞在干细胞以及肿瘤干细胞研究方面起着越来越重要的作用。本文综述了SP细胞的发现、生物学特性、与肿瘤干细胞之间的关系以及SP细胞的未来临床应用等。最后对SP细胞的发展进行了展望。

摘要： [目的]通过动物实验了解姜黄提取物-姜黄素抗肿瘤血管生成的具体作用机制。[方法]将40只BALB/C雄性裸小鼠分为4组,每组10只。分别为A组(SP亚群细胞姜黄素组)、B组(SP亚群细胞荷瘤对照组)、C组(NONSP亚群细胞姜黄素组)、D组(NON-SP亚群细胞荷瘤对照组)。A、B两组于实验前建立肺腺癌A549 SP细胞亚群荷瘤模型,C、D两组建立肺腺癌A549 NON-SP细胞亚群荷瘤模型,建立模型后观察16 d,于A组、C组小鼠腹腔注射姜黄素,隔天1次,B、D两组注射生理盐水。16 d后将小鼠称重后处死,剥离瘤块组织,比较各组瘤质量;免疫组化法检测肿瘤组织中血管生长因子(VEGF)、核因子-κB(NF-κB)的表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Notch1 m RNA含量。[结果]肺腺癌A549 SP细胞亚群荷瘤模型组小鼠瘤体与NON-SP细胞亚群荷瘤模型组小鼠相比体积较大;SP亚群细胞姜黄素组抑瘤作用及抗肿瘤血管生成优于NON-SP亚群细胞姜黄素组,两组相比差异具有统计学意义。[结论]姜黄素可以抑制肿瘤生长,考虑可能与其抑制NF-k B的表达,下调Notch1 m RNA含量,阻断Notch信号通路,抑制肿瘤组织中VEGF的表达有关。

摘要： 目的 比较乳腺癌组织和MCF-7细胞株中SP细胞的含量和生物学特性.方法 采用Altra流式细胞仪分选出乳腺癌组织原代培养6代细胞和MCF-7细胞株中SP细胞,检测2种来源SP细胞的表面标记和细胞周期增殖状况.结果 乳腺癌组织和MCF-7细胞株中SP水平分别为4.68％和12.43％,MCF-7细胞株中SP水平显著高于乳腺癌组织.2种来源的SP细胞的生物学标记(ABCG2、CD133、CD43、CD24、Ki-67、MDR表达率)及细胞周期时相分布(G0/G1期、S期、G2/M期、凋亡率、坏死率),细胞生物学特性差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 乳腺癌实体组织中存在SP细胞,但低于MCF-7细胞株中SP细胞水平,不论是乳腺癌实体组织或MCF-7,其SP细胞都具有肿瘤干细胞的生物学特性.为乳腺癌组织干细胞的分选提供了一定的实验基础和理论依据.

摘要： 胆囊癌是临床上十分常见的胆道系统肿瘤，其恶性程度很高，早期通常无特殊临床症状，术前确诊率较低，预后较差。目前，胆囊癌的发病机制尚不明确。近年来，肿瘤干细胞的研究不断深入，最新研究证实胆囊癌GBC-SD细胞系中可分离出SP细胞，同时胆囊癌中存在CD133+、CD44+及CD133+CD44+细胞，具有增生、分化、克隆形成和成瘤等多方面能力。本文就胆囊癌与肿瘤干细胞的研究进展综述如下。

摘要： 目的：优化人肺癌A549细胞系分选SP细胞的条件.方法：将人肺癌A549细胞分为两组:Hoechst33342组和抑制组(Hoechst33342+Verapamil),流式细胞仪分选SP细胞.设置Hoechst33342浓度分别为2.5μg/ml、5μg/ml、7.5μg/ml,Verapamil浓度为50μM、l00μM、150μM,探讨人肺癌A549细胞系分选SP细胞中Hoechst33342和Verapamil的最佳浓度.结果：150uM Verapamil和7.5ug/ml Hoechst33342,细胞染色充分,SP细胞亚群与Non-SP细胞亚群分群非常明显,分选后细胞可进一步培养. 结论：Hoechst和Verapamil的浓度影响人肺癌A549细胞SP细胞分选的效率.

摘要： 目的：优化人肺癌A549细胞系分选SP细胞的条件.方法：将人肺癌A549细胞分为两组:Hoechst33342组和抑制组(Hoechst33342+Verapamil),流式细胞仪分选SP细胞.设置Hoechst33342浓度分别为2.5μg/ml、5μg/ml、7.5μg/ml,Verapamil浓度为50μM、l00μM、150μM,探讨人肺癌A549细胞系分选SP细胞中Hoechst33342和Verapamil的最佳浓度.结果：150uM Verapamil和7.5ug/ml Hoechst33342,细胞染色充分,SP细胞亚群与Non-SP细胞亚群分群非常明显,分选后细胞可进一步培养. 结论：Hoechst和Verapamil的浓度影响人肺癌A549细胞SP细胞分选的效率.

摘要： 目的：优化人肺癌A549细胞系分选SP细胞的条件.方法：将人肺癌A549细胞分为两组:Hoechst33342组和抑制组(Hoechst33342+Verapamil),流式细胞仪分选SP细胞.设置Hoechst33342浓度分别为2.5μg/ml、5μg/ml、7.5μg/ml,Verapamil浓度为50μM、l00μM、150μM,探讨人肺癌A549细胞系分选SP细胞中Hoechst33342和Verapamil的最佳浓度.结果：150uM Verapamil和7.5ug/ml Hoechst33342,细胞染色充分,SP细胞亚群与Non-SP细胞亚群分群非常明显,分选后细胞可进一步培养. 结论：Hoechst和Verapamil的浓度影响人肺癌A549细胞SP细胞分选的效率.

摘要： 目的：优化人肺癌A549细胞系分选SP细胞的条件.方法：将人肺癌A549细胞分为两组:Hoechst33342组和抑制组(Hoechst33342+Verapamil),流式细胞仪分选SP细胞.设置Hoechst33342浓度分别为2.5μg/ml、5μg/ml、7.5μg/ml,Verapamil浓度为50μM、l00μM、150μM,探讨人肺癌A549细胞系分选SP细胞中Hoechst33342和Verapamil的最佳浓度.结果：150uM Verapamil和7.5ug/ml Hoechst33342,细胞染色充分,SP细胞亚群与Non-SP细胞亚群分群非常明显,分选后细胞可进一步培养. 结论：Hoechst和Verapamil的浓度影响人肺癌A549细胞SP细胞分选的效率.

摘要： 目的：优化人肺癌A549细胞系分选SP细胞的条件.方法：将人肺癌A549细胞分为两组:Hoechst33342组和抑制组(Hoechst33342+Verapamil),流式细胞仪分选SP细胞.设置Hoechst33342浓度分别为2.5μg/ml、5μg/ml、7.5μg/ml,Verapamil浓度为50μM、l00μM、150μM,探讨人肺癌A549细胞系分选SP细胞中Hoechst33342和Verapamil的最佳浓度.结果：150uM Verapamil和7.5ug/ml Hoechst33342,细胞染色充分,SP细胞亚群与Non-SP细胞亚群分群非常明显,分选后细胞可进一步培养. 结论：Hoechst和Verapamil的浓度影响人肺癌A549细胞SP细胞分选的效率.

摘要： 目的：探讨肿瘤细胞放射敏感性与SP细胞的关系。方法：使用60Coγ射线对人食管鳞癌细胞系EC9706、人喉鳞癌细胞系Hep-2、人鼻咽鳞癌细胞系CNE-2三种细胞株进行照射，采用克隆形成实验拟合细胞存活曲线，根据Do值、Dq值等放射生物学参数，比较肿瘤细胞的放射敏感性。流式细胞仪检测肿瘤细胞的SP细胞，分析3种肿瘤细胞的SP细胞与放射敏感性的关系。结论：三种细胞株均存在SP细胞，表明这三株鳞癌细胞中均有肿瘤干细胞的存在。肿瘤细胞的放射敏感性与SP细胞存在密切相关性，SP细胞越低，肿瘤细胞的放射敏感性越高，进一步说明肿瘤细胞的放射敏感性与干细胞有密切的关系。

摘要： 目的：探讨肿瘤细胞放射敏感性与SP细胞的关系。方法：使用60Coγ射线对人食管鳞癌细胞系EC9706、人喉鳞癌细胞系Hep-2、人鼻咽鳞癌细胞系CNE-2三种细胞株进行照射，采用克隆形成实验拟合细胞存活曲线，根据Do值、Dq值等放射生物学参数，比较肿瘤细胞的放射敏感性。流式细胞仪检测肿瘤细胞的SP细胞，分析3种肿瘤细胞的SP细胞与放射敏感性的关系。结论：三种细胞株均存在SP细胞，表明这三株鳞癌细胞中均有肿瘤干细胞的存在。肿瘤细胞的放射敏感性与SP细胞存在密切相关性，SP细胞越低，肿瘤细胞的放射敏感性越高，进一步说明肿瘤细胞的放射敏感性与干细胞有密切的关系。

摘要： 目的：探讨肿瘤细胞放射敏感性与SP细胞的关系。方法：使用60Coγ射线对人食管鳞癌细胞系EC9706、人喉鳞癌细胞系Hep-2、人鼻咽鳞癌细胞系CNE-2三种细胞株进行照射，采用克隆形成实验拟合细胞存活曲线，根据Do值、Dq值等放射生物学参数，比较肿瘤细胞的放射敏感性。流式细胞仪检测肿瘤细胞的SP细胞，分析3种肿瘤细胞的SP细胞与放射敏感性的关系。结论：三种细胞株均存在SP细胞，表明这三株鳞癌细胞中均有肿瘤干细胞的存在。肿瘤细胞的放射敏感性与SP细胞存在密切相关性，SP细胞越低，肿瘤细胞的放射敏感性越高，进一步说明肿瘤细胞的放射敏感性与干细胞有密切的关系。

摘要： 目的：探讨肿瘤细胞放射敏感性与SP细胞的关系。方法：使用60Coγ射线对人食管鳞癌细胞系EC9706、人喉鳞癌细胞系Hep-2、人鼻咽鳞癌细胞系CNE-2三种细胞株进行照射，采用克隆形成实验拟合细胞存活曲线，根据Do值、Dq值等放射生物学参数，比较肿瘤细胞的放射敏感性。流式细胞仪检测肿瘤细胞的SP细胞，分析3种肿瘤细胞的SP细胞与放射敏感性的关系。结论：三种细胞株均存在SP细胞，表明这三株鳞癌细胞中均有肿瘤干细胞的存在。肿瘤细胞的放射敏感性与SP细胞存在密切相关性，SP细胞越低，肿瘤细胞的放射敏感性越高，进一步说明肿瘤细胞的放射敏感性与干细胞有密切的关系。

摘要： 目的：探讨肿瘤细胞放射敏感性与SP细胞的关系。方法：使用60Coγ射线对人食管鳞癌细胞系EC9706、人喉鳞癌细胞系Hep-2、人鼻咽鳞癌细胞系CNE-2三种细胞株进行照射，采用克隆形成实验拟合细胞存活曲线，根据Do值、Dq值等放射生物学参数，比较肿瘤细胞的放射敏感性。流式细胞仪检测肿瘤细胞的SP细胞，分析3种肿瘤细胞的SP细胞与放射敏感性的关系。结论：三种细胞株均存在SP细胞，表明这三株鳞癌细胞中均有肿瘤干细胞的存在。肿瘤细胞的放射敏感性与SP细胞存在密切相关性，SP细胞越低，肿瘤细胞的放射敏感性越高，进一步说明肿瘤细胞的放射敏感性与干细胞有密切的关系。

摘要： 本发明公开了一种基于TALEN介导的Sp110巨噬细胞特异打靶载体及重组细胞，对牛胎儿成纤维细胞进行基因打靶获得的M‑S位点定点敲入Sp110基因的牛胎儿成纤维细胞。利用打靶载体中的MSR1启动子，使得定点敲入的Sp110在且仅在牛的外周血巨噬细胞中正常转录和表达。本发明利用电穿孔的方法将打靶载体和TALEN位点特异性核酸切割酶表达载体共转染牛胎儿成纤维细胞，通过PCR和Southern Blotting筛选和验证获得了打靶的阳性克隆细胞。以该阳性克隆细胞为核供体移入牛去核卵母细胞，获得转基因克隆胚胎。将转基因克隆胚胎移植到发情的受体牛子宫中，最终生产成活的转基因克隆牛。

摘要： 本发明提供了SP8蛋白及其应用、SP8蛋白抗体的制备方法、应用及杂交瘤细胞，属于基因工程技术领域。SP8蛋白作为标志物在制备男性不育检测试剂盒中的应用，以SP8蛋白作为检测靶点，具有很好的灵敏性和特异性；SP8蛋白抗体在制备男性不育检测试剂盒中的应用，该试剂盒包括胶体金试剂盒或酶联免疫试剂盒，SP8蛋白抗体与SP8蛋白具有抗原抗体反应，反应灵敏，特异性强；一种SP8蛋白抗体的制备方法，包括蛋白表达步骤、细胞融合步骤、抗体制备步骤，这种方法能通过简单易行的操作、普通的条件就能大量获得SP8蛋白抗体；同时获得杂交瘤细胞能大量的分泌SP8蛋白抗体。

摘要： 本发明属于中药技术领域，具体涉及一种九味獐牙菜片的制备方法及应用。本发明的九味獐牙菜片的制备方法，由獐牙菜53.6g、金腰草17.9g、榜嘎35.7g、木香35.7g、兔耳草35.7g、苦荬菜42.9g、角茴香35.7g、小檗皮28.6g、波棱瓜子14.2g作为原料药制成，采用超临界萃取、微波萃取和大孔树脂吸附制备而成，使得盐酸小檗碱含量有很大提高。本发明还提供了九味獐牙菜片在制备抑制小鼠骨髓瘤细胞SP2/0细胞增殖药物中的应用。

摘要： 本发明属于中药技术领域，具体涉及一种黄萱益肝片的制备方法及应用。本发明的黄萱益肝片的制备方法，由土大黄291g、萱草103g、千里光92g、猕猴桃92g、红土茯苓92g、野蔷薇62g、獐芽菜62g、骚羊古62g、南五味子62g作为原料药制成，采用超临界萃取、微波萃取和大孔树脂吸附制备而成，使得大黄素含量有很大提高。本发明还提供了黄萱益肝片在制备抑制小鼠骨髓瘤细胞SP2/0细胞增殖药物中的应用。

摘要： 本发明属于中药技术领域，具体涉及一种阿里红咳喘片的制备方法及应用。本发明的阿里红咳喘片的制备方法，由阿里红20g、洋李100g、芦根80g、甘草60g、麻黄50g、木香30g、洋茴香120g、香附30g、豆蔻20g作为原料药制成，采用超临界萃取和微波萃取制备而成，使得甘草酸含量有很大提高。本发明还提供了阿里红咳喘片在制备抑制小鼠骨髓瘤细胞SP2/0细胞增殖药物中的应用。

摘要： 本发明公开了一种基于TALEN介导的Sp110巨噬细胞特异打靶载体及重组细胞，对牛胎儿成纤维细胞进行基因打靶获得的M-S位点定点敲入Sp110基因的牛胎儿成纤维细胞。利用打靶载体中的MSR1启动子，使得定点敲入的Sp110在且仅在牛的外周血巨噬细胞中正常转录和表达。本发明利用电穿孔的方法将打靶载体和TALEN位点特异性核酸切割酶表达载体共转染牛胎儿成纤维细胞，通过PCR和Southern Blotting筛选和验证获得了打靶的阳性克隆细胞。以该阳性克隆细胞为核供体移入牛去核卵母细胞，获得转基因克隆胚胎。将转基因克隆胚胎移植到发情的受体牛子宫中，最终生产成活的转基因克隆牛。

摘要： 本发明公开了DC细胞、靶向性免疫细胞群及其制备方法和用途，其中制备DC细胞的方法包括：将单核细胞进行第一诱导分化培养，以便获得未成熟的DC细胞；利用SP17抗原mRNA转染所述未成熟的DC细胞，以便获得经过转染的未成熟DC细胞；以及将所述经过转染的未成熟DC细胞进行第二诱导分化培养，以便获得成熟的DC细胞，其中，所述单核细胞是从样本的外周血单个核细胞中分离获得的。利用该发明能够安全高效地制备DC细胞，且本发明的方法成本低、效率高、且能够有效地解决细胞毒性问题，能够有效用于免疫细胞治疗或用于刺激同样患者来源的淋巴细胞产生富含大量CTL细胞的靶向性免疫细胞群，进而用于肿瘤免疫治疗后效果更好。

摘要： 本发明属于中药技术领域，具体涉及一种双姜胃痛片的制备方法及应用。本发明的双姜胃痛片的制备方法，由姜黄200g、紫色姜200g、地不容200g、石菖蒲200g、苦菜子200g作为原料药制成，采用微波萃取和大孔树脂吸附制备而成，使得姜黄素含量有很大提高。本发明还提供了双姜胃痛片在制备抑制小鼠骨髓瘤细胞SP2/0细胞增殖药物中的应用。

摘要： 本发明属于中药技术领域，具体涉及一种青梅感冒片的制备方法及应用。本发明的青梅感冒片的制备方法，由青蒿200g、五指柑267g、香薷134g、狗肝菜200g、甘草134g、积雪草134g、岗梅267g作为原料药制成，采用超临界萃取和微波萃取制备而成，使得甘草酸含量有很大提高。本发明还提供了青梅感冒片在制备抑制小鼠骨髓瘤细胞SP2/0细胞增殖药物中的应用。

摘要： 本发明属于中药技术领域，具体涉及一种胆石通利片的制备方法及应用。本发明的胆石通利片的制备方法，由金钱草225g、茵陈225g、郁金90g、陈皮150g、黄芩45g、乳香35g、芒硝80g、白矾35g、大黄45g、三棱45g、栀子45g、甘草25g、没药35g作为原料药制成，采用超微粉碎、超临界萃取、微波萃取和大孔树脂吸附制备而成，使得橙皮苷含量有很大提高。本发明还提供了胆石通利片在制备抑制小鼠骨髓瘤细胞SP2/0细胞增殖药物中的应用。