多年生黑麦草

摘要： 以多年生黑麦草(Lolium perenne L.)品种麦迪(Mathilde)和绅士(Esquire)为供试材料,采用0、25、50、100和200mmol/L NaCl共5个处理,研究不同浓度NaCl处理对多年生黑麦草生理特性以及耐盐基因表达模式的影响。结果显示:两个黑麦草品种地上生物量、根重、株高、PSⅡ最大光化学量子产量(Fv/Fm)在不同浓度NaCl处理下均受到不同程度抑制;两个品种黑麦草地上部和根部K^(+)含量在盐胁迫下均持续下降,Na^(+)含量显著升高,但与绅士相比,麦迪能够在轻度盐胁迫(25和50mmol/L)下维持其地上部K^(+)含量的相对稳定和较高的K^(+)/Na^(+)比率;两个品种黑麦草可溶性糖含量均随着NaCl处理浓度的升高呈现出上升趋势;耐盐候选基因LpNHX1、LpSKOR、LpHKT1;5的表达量在两个品种黑麦草中均能受到外界盐胁迫显著诱导而上调。

摘要： 为研究微生物肥料(MF)与化肥(CF)在多年生黑麦草上的最佳施用配比,通过盆栽试验探究了化肥减量20%和40%后分别与60、90、120、150、180 kg·hm^(-2)微生物肥料配施对多年生黑麦草农艺性状、根系形态、营养品质和抗氧化酶活性的影响。结果显示:80%CF配施90 kg·hm^(-2)MF,多年生黑麦草株高、分枝数和交叉数较对照分别提高12.35%、60.40%和85.10%,差异显著(P<0.05)。80%CF配施120 kg·hm^(-2)MF,茎粗、地上生物量、地下生物量、总根长、总根表面积、总根体积、根尖数、粗蛋白含量和粗脂肪含量分别较对照提高29.41%、16.84%、45.54%、21.15%、14.59%、166.67%、47.35%、5.71%和37.98%,差异显著(P<0.05);80%CF配施120 kg·hm^(-2)MF,抗坏血酸过氧化物酶、超氧化物歧化酶、过氧化物酶活性分别较对照下降33.12%、10.66%和19.51%,丙二醛含量较对照降低14.54%(P<0.05)。研究结果表明,化肥减量20%配施90~120 kg·hm^(-2)微生物肥料后对促进多年生黑麦草生长效果最佳。

摘要： 为评价并筛选具有优异特性的多年生黑麦草(Lolium perenne)种质资源,本研究选取99份多年生黑麦草种质资源,对其物候期及8个形态性状进行观测和分析,并依据各形态指标开展主成分分析和聚类分析。结果表明:供试种质的全生育期为252.0~310.0 d,形态性状均表现出了丰富的变异,其变异系数为22.63%~44.11%。根据主成分分析,将8个形态性状抽取成可代表原有指标87.2%信息量的4个成分,构建评价函数模型并对所有种质进行评分。其中种质W620468得分最高(1.334),而自主选育的R2-12得分最低(0.140)。基于8个形态性状的聚类分析将多年生黑麦草种质分为4大类群,各类群间形态差异明显,其中第Ⅰ类群和第Ⅳ类群可依据牧草和草坪草的不同育种目标进一步考察作为亲本育种材料或新品种推广。综上所述,本研究中多年生黑麦草种质间的形态性状变异丰富,其中第Ⅰ和第Ⅳ类群种质可作为优良亲本以选育牧草型和草坪草型新品种。

摘要： 镉(Cd)是矿区重金属污染的主要元素之一,严重限制了植物的生长、发育。细胞分裂素(CTK)能够缓解镉对植物的毒害,但具体机制尚不清楚。本研究克隆了多年生黑麦草CTK信号通路基因LpARR10,该基因具有6个外显子,编码598个氨基酸。进化分析表明,LpARR10与拟南芥B类ARR转录因子(B-ARRs)聚为一组,其中与AtARR10和AtARR12的亲缘关系较近。氨基酸序列分析结果显示,LpARR10具有B-ARRs典型的磷酸受体结构域、磷酸化和金属离子结合位点。表达模式分析表明,CTK(25μmol·L^(-1)6-BA)和Cd(200μmol·L^(-1) CdCl_(2))处理0.5、2、6、12、24和48 h均显著提高了黑麦草根部LpARR10的表达;而在叶片中,LpARR10的表达仅在CTK和Cd处理2和6 h后显著升高。过量表达LpARR10转基因和野生型拟南芥在无Cd的MS培养基上生长10 d后,根长和鲜重没有显著差异;而在含有Cd(180μmol·L^(-1) CdCl_(2))的MS培养基中,过量表达转基因株系的根长和鲜重显著高于野生型对照。综上,LpARR10在细胞分裂素调控的植物耐镉机理中发挥重要作用。

摘要： 为探讨不同浓度氧化石墨烯(GO)对多年生黑麦草生长、生理及光合特征的影响,该文采用盆栽试验,在土壤中添加0、10、20、30、40、50 mg·g^(-1) GO进行多年生黑麦草培养,并测定植物生长指标、光合色素含量、保护酶活性、丙二醛(MDA)含量、叶片质膜透性、可溶性蛋白含量和光合参数。结果表明:(1)10、20 mg·g^(-1) GO处理对多年生黑麦草生长无显著影响;30~50 mg·g^(-1) GO处理对多年生黑麦草生长具有抑制作用,在50 mg·g^(-1) GO浓度下多年生黑麦草株高和生物量均最小,较对照分别降低了16.8%和27.1%。(2)当GO浓度达到30 mg·g^(-1)时,总叶绿素和类胡萝卜素的含量显著降低,在50 mg·g^(-1) GO处理时达到最低。(3)高浓度的GO处理(40、50 mg·g^(-1))虽降低了多年生黑麦草的叶片净光合速率(P_(n))、气孔导度(G_(s))和蒸腾速率(T_(r)),但增加了胞间CO_(2)浓度(C_(i))。(4)低浓度的GO处理(10、20 mg·g^(-1))对保护酶活性、丙二醛含量、叶片质膜透性和可溶性蛋白含量无显著影响,而高浓度的GO处理(40、50 mg·g^(-1))使多年生黑麦草的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性、MDA含量和叶片质膜透性显著升高,而可溶性蛋白含量则下降,植物叶片受到损伤。综上认为,高浓度的GO处理(40、50 mg·g^(-1))会对多年生黑麦草产生氧化胁迫,从而抑制了植物的生长。

摘要： 多年生黑麦草(Lolium perenne)是广泛栽培利用的优质牧草、草坪草。为研究多年生黑麦草种质资源的遗传多样性,选用简单重复序列(SSR)分子标记技术对10份多年生黑麦草自主选育品系和75份来自于23个不同国家的种质资源进行了分析。结果表明,26对引物扩增出的多态性条带有91条,占总条带数的69.5%。每个SSR位点的多态性信息含量(PIC)为0.156~0.722,平均为0.455。85份供试材料的遗传相似性指数为0.700~0.900,NTSYS聚类分析结果显示,在遗传相似系数(GS)为0.738时,85份材料被划分为五大类;同时,综合聚类分析及Structure群体遗传结构分析表明,供试材料的遗传关系与其地理来源无明显的关联性。研究结果将为多年生黑麦草种质资源评价利用及育种提供理论基础。

摘要： 【目的】研究不同多年生黑麦草(Lolium perenne L.)品种对土壤镉(Cd)和砷(As)的富集能力,筛选积累能力高的多年生黑麦草品种,以期为Cd和As污染土壤的恢复治理提供参考依据。【方法】采用盆栽试验,研究31个多年生黑麦草品种在Cd和As污染土壤中的生长指标、对重金属Cd和As的积累特性及品种间差异;采用聚类分析和隶属函数法对Cd和As富集特性进行综合评价。【结果】31个多年生黑麦草在Cd和As污染土壤中均能正常生长,但品种间存在差异,利达(Lida)、雅晴(Yatsyn)和海湾(Bay)生长状况较好,闪电(Flash Green)、金牌(Turfgold)和绿拓(Turfsun)生长状况较差;31个品种的根部Cd和As含量均高于地上部;除少数品种外,多年生黑麦草对Cd的富集和转运系数均高于As;综合评价中排名前3的为海湾(Bay)、大瀑布(Nicaragua)和墨绿(Holly Green)。【结论】多年生黑麦草对土壤中Cd和As主要富集于根部,对Cd的富集能力更强。海湾、大瀑布和墨绿具有较强的Cd和As富集能力,可优先考虑作为Cd和As复合污染土壤修复的植物材料。

摘要： 本试验以滇西北人工草地建设中常用的白三叶(Trifolium repens L.)、多年生黑麦草(Lolium perenne L.)、鸭茅(Dactylis glomerata L.)为试验材料,研究了舟叶橐吾(Ligularia cymbulifera(W.W.Smith)Hand.-Mazz.)地上部和根部的水浸提液对种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明,不同部位、不同浓度的舟叶橐吾植株浸提液对3种供试牧草种子的发芽势、发芽率和发芽指数都有抑制作用,其中根部浸提液的抑制作用比地上部更为明显,且具有很强的浓度效应。另外,高、中浓度的提取液进一步抑制了供试牧草苗高和根的生长(P鸭茅>多年生黑麦草。对舟叶橐吾叶片开展的非靶向分析一共发现了283种成分,主要是有机酸、酰胺类。由于舟叶橐吾有较强的化感作用,在人工草地建设中应尽可能去除舟叶橐吾,避免给生产带来损失。

摘要： 凉山州畜牧兽医科学研究所与昭觉县农业农村局动物卫生监督所在昭觉县日哈乡洼取村进行了光叶紫花苕单播、50%光叶紫花苕+50%多年生黑麦草同行条播、50%光叶紫花苕+50%多年生黑麦草间作条播以及多年生黑麦草单播试验,发现50%光叶紫花苕+50%多年生黑麦草同行条播的鲜草和干草产量在4种处理中最高,是可以在凉山州高海拔地区推广利用的良好种植模式。

摘要： 以多年生黑麦草(Lolium perenne)品种绿宝石为供试材料,通过水培试验探究干旱胁迫下氮素形态及其浓度对多年生黑麦草生长、叶片生理和草坪质量的影响。试验设4个干旱水平,3种氮素形态(尿素、硝酸钙、硫酸铵),3种氮素形态分别设5个浓度0、0.4、0.8、1.2、1.6g/L。结果表明:在干旱胁迫下3种不同形态的氮素均能增加多年生黑麦草的叶片表面积、叶长、叶片相对含水量和叶绿素含量,减小其根冠比和叶片相对电导率。在重度干旱胁迫下,3种氮素形态中,硝酸钙在增大多年生黑麦草地上部分表现最好,1.6 g/L硝酸钙处理的叶表面积和叶片长度较无氮素处理增加了31.04%和53.87%;硫酸铵在降低多年生黑麦草叶片相对电导率和增加叶绿素含量中表现最好,与无氮处理相比分别降低了54.65%和增加了26.51%;而在提高多年生黑麦草叶片相对含水量方面,尿素表现最好,1.6 g/L尿素处理的叶片相对含水量较无氮素处理增加了31.04%。

摘要： 在长江中下游气候过渡带地区,暖季型草坪交播冷季型草坪草是延长草坪的全年绿色的技术保障.本研究以建植3年天堂328[C.dactylonx C.transvaa lensis)]为基础草坪,在秋季交播多年生黑麦草[Lolium perenne L cv.pinnacle],测定了春季返青演替阶段修剪频率对交播草坪演替的影响.试验结果表明,天堂328草坪交播多年生黑麦草春季采用的修剪频率会促进天堂328的生长而加速了草种演替.

摘要： 多年生黑麦草是一种优良的冷季型草坪草.本文对近几年来黑麦草抗逆性研究的进展进行了综述,主要包括干旱、高温、低温、盐碱、重金属等对黑麦草的危害及植物体的抗逆性应答反应,提出了提高黑麦草抗逆性的措施.同时,总结了黑麦草抗逆性研究中存在的一些问题,为进一步的研究提供思路.提高黑麦草抗逆性可以培育和选用抗逆性品种。对植物进行前期逆境处理，可诱导某些与胁迫相关基因的表达，提高植物应对胁迫的能力，抗逆锻炼是提高黑麦草抗逆性的一种有效的方法。亦可施用植物生长调节剂、优化栽培条件。黑麦草的转基因育种固然弥补了传统育种不足，但也并非是解决问题的最理想的方法。通过转基因技术获得的植株，并不能马上大规模应用于生产，必须与常规育种相结合，经过粮食安全和生态环境的保护等指标的考验。其次，由于抗逆性通常是由多基因控制的一种数量性状，而且不同基因对抗逆性的影响有差异，转入单个的功能基因，通常对提高其抗逆性比较有限。进一步深入了解黑麦草抵抗不同逆境的内在机理，选择关键的一个或多个抗逆基因，然后转入黑麦草，可能有利于更好地提高其抗逆性。

摘要： 将来自同一粒种子的多年生黑麦草品种‘德比’(Lolium perenne L.‘Derby’)的胚性愈伤组织利用“神舟七号”飞船搭载进行空间诱变处理后,采用相同的诱导培养方式获得搭载及未搭载再生植株群体.通过测定再生植株的叶片SPAD值、叶片相对含水量、叶宽、单位叶面积鲜重及单位叶面积干重等生长指标,比较了两再生植株群体的生长性状差异及变异频率.结果表明,搭载再生植株群体内各生长性状的变异系数均大于未搭载群体.与未搭载再生植株群体相比,航天搭载再生植株群体叶片宽度变小(P＜0.01),而单位叶面积干重则显著增加(P＜0.01).本研究结果说明,植物组织培养与航天育种相结合,能有效地增大诱变的频率;空间诱变可诱发多年生黑麦草产生一定的变异,这些变异对获得有价值的多年生黑麦草新种质具有重要意义.

摘要： 木糖被认为是生物安全的选择试剂。为探讨木糖异构酶基因能否作为筛选标记在多年生黑麦草遗传转化中运用，本论文以成熟种子诱导出的愈伤组织作为外植体，研究了木糖作为碳源对多年生黑麦草愈伤组织生长的影响，培养5周后观察分析结果。研究显示，在愈伤组织继代培养基(SM)中分别添加蔗糖、木糖以及不同配比蔗糖/木糖的条件下，愈伤组织生长状况不同。结果表明：I)糖浓度在0~30g／L的同等糖含量条件下，愈伤组织和生长量随着糖浓度的增加而增加，且在添加蔗糖的培养基中生长明显优于在木糖中：2)在混合糖培养中(糖总量为30g/L)，愈伤组织的生长量高于对照，但随着蔗糖量减少、木糖量增加，愈伤组织生长量下降。研究表明，木糖能显著影响多年生黑麦草愈伤组织的生长，使其生长受到较大程度地限制。在SM+5g/L蔗糖+25g/L木精和只含有30g/L木糖的培养基中，愈伤组织生长量最低。推测可用以上两种木糖浓度的培养基作为以多年生黑麦草愈伤组织为外植体的木糖筛选体系的筛选压。

摘要： 研究了外源一氧化氮(nitric oxide,NO)对盐胁迫下多年生黑麦草幼苗根生长和氧化损伤的影响.结果表明,5～100 μmol·L-1的NO供体硝善钠(sodium nitroprusside,SNP)处理显著减轻100 mmol·L-1NaCl胁迫对多年生黑麦草幼苗根生长的抑制效应,其中50μmol·L-1的SNP效果明显,150μmol·L-1以上的SNP处理则抑制根的生长.50 μmol·L-1SNP处理提高了100 mmol·L-1NaCl胁迫下多年生黑麦草幼苗根组织中超氧化物歧化酶（SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)及液泡膜上H+-ATP酶(H+-ATPase)和H+-焦磷酸酶(H+-PPase)的活性,使谷胱甘肽(GSH)、抗坏血酸(ASA)和脯氨酸含量及K-/Na-、(Spd+Spm)/Put比值和根干物质积累量增加,超氧阴离子(O2-)、H2O2和丙二醛(MDA)含量降低,而1 mmol·L-1NO清除剂PTIO和1 μmol·L-1NaNO2处理(对照)的效果则不明显.由此推断.NO通过提高根组织的抗氧化和渗透调节能力,促进根系对K+的选择性吸收及Put和Spm的转化,降低Na+的吸收并加强在液泡中的区隔化解盐胁迫对多年生黑麦草幼苗根生长的抑制和膜脂过氧化损伤.

摘要： 多年生黑麦草(Lolium perenne L.)是优良的牧草和草坪草，由于自交不亲和，传统遗传改良困难而复杂。生物技术尤其是转基因技术给其遗传改良带来希望。本研究通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导，对多年生黑麦草进行遗传转化。材料选用多年生黑麦草品种爱神特、超级德比、德比、金牌美达丽、神枪手、多福和绿宝石成熟种子。用从成熟胚诱导的愈伤组织进行转化。农杆菌菌株EHAl05，携双元载体质粒pCAMBIA2301。经农杆菌侵染、巴龙霉素筛选，获得抗性植株。经PCR、GUS组织染色和Southern bloting验证，结果表明从金牌美达丽、神枪手和多福中获得了稳定表达的转基因多年生黑麦草植株。并应用接头盒连接巢式PCR技术进行T-DNA侧翼序列的扩增和分析，获得2个整合T-DNA左边界侧翼序列。序列分析显示，T-DNA插入到宿主基因组中.左边界序列发生了不同程度的缺失，这种现象与转基因拟南芥、水稻、大麦中一致。转化系统的建立，为定向进行分子设计改良黑麦草品种，打下基础.

摘要： 本文针对多年生黑麦草萌发和幼苗时期对盐分最敏感的特点,对25个多年生黑麦草品种在不同盐浓度胁迫下的萌发特性进行研究,测定其发芽率、发芽势、相对盐害率和幼苗高度等的变化情况,结果显示草坪星、APM、球道、旋风、百尼牡、首相和凯牧等品种用1﹪NaCl胁迫时的发芽率都在75﹪以上,即这些品种萌发期的耐盐胁迫能力较强。

摘要： 试验以碳化稻壳、棉籽壳、锯木屑,蘑菇渣为基质原料,混配不同比例的基质并种植多年生黑麦草,测试垂直生长速度、覆盖度、叶片宽度、地上部分干物质重量和根系长度等指标,研究不同基质配比对草坪草生长的促进效果.结果表明:以蘑菇渣∶碳化稻壳=1∶4、锯木屑∶碳化稻壳=1∶2、棉籽壳∶碳化稻壳=1∶4的基质对黑麦草的综合生长有比较好的促进效果.

摘要： 为了弄清狼毒(Stellera clamaejasme L.)对两种优质牧草——麦草 Psathyrostachys juncea(Fisch)Nevski和无芒雀麦(Bromus inermis Leyss)的化感作用强弱，在恢复狼毒侵占严重的草地时，对草种能够进行合理的选择，采用室内生物测定方法，研究了狼毒根、茎叶粉碎物在土壤里腐解过程中对草木樨和多年生黑麦草幼苗生长的影响。 结果表明：狼毒对新麦草的化感综合效应(SE)随狼毒根、茎叶量的增加而增大，最大值分别为34.8％和17.0％。狼毒根对无芒雀麦的SE也随狼毒根量的增加而增大，最大值为9.5％。狼毒茎叶对无芒雀麦幼苗的生长表现出促进作用，当茎叶量为5g/盆时，促进作用最大，SE为-16.1％。说明对同一受试植物而言，狼毒根对其抑制作用强于茎叶，狼毒对他种植物的化感抑制作用主要是通过根起作用。新麦草受狼毒化感抑制作用的影响大于无芒雀麦，在人工建植植被恢复狼毒侵占严重的草地时，多年生黑麦草可作为选择草种。

摘要： 利用不同浓度PEG-6000溶液模拟干旱胁迫，比较研究4个多年生黑麦草品种叶片生理生化指标响应。结果表明：不同PBG胁迫处理下，品种“欧必克”叶片相对含水量均最高且降幅最小，叶片电导率均最低，MDA含量增幅较小，叶片细胞膜系统有较强的忍耐干旱的能力;而品种“凤凰”忍耐干旱的性能相对较弱。胁迫下各品种叶片游离脯氨酸含量显著增加，随渗透胁迫加剧，品种“欧必克”脯氨酸含量急剧上升。低浓度胁迫下(5%PEG)，各品种叶片SOD活性均提高，胁迫加剧时SOD活性则下降。PBG渗透胁迫导致4个多年生黑麦草品种叶片相对含水量下降、细胞膜透性增大、MDA含量增加、脯氨酸含量上升而sOD酶活性下降，但4个品种对应指标的变化幅度存在差异，品种“欧必克”的抗旱性最强，而“凤凰”的抗旱性最弱。

摘要： 一年生黑麦草与多年生牧草混播方法，适用于南方人工草地的建植方法，具体涉及在多年生人工草地中引入一年生黑麦草建植人工草地的方法。按一定的比例，将一年生黑麦草与多年生牧草混播，利用一年生牧草早期生长迅速的优点，适时刈割，提高当季牧草的产量，并通过刈割控制其高度，保证多年生牧草的生长，而杂草因光照不足，生长受到抑制，逐渐从草地中消失。本发明较好的解决了南方多年生人工草地建植当年草产量低、杂草严重的问题，对在南方大力推广种植人工草地、促进南方草地畜牧业的发展具有重要意义。

摘要： 一年生黑麦草与多年生牧草混播方法，适用于南方人工草地的建植方法，具体涉及在多年生人工草地中引入一年生黑麦草建植人工草地的方法。按一定的比例，将一年生黑麦草与多年生牧草混播，利用一年生牧草早期生长迅速的优点，适时刈割，提高当季牧草的产量，并通过刈割控制其高度，保证多年生牧草的生长，而杂草因光照不足，生长受到抑制，逐渐从草地中消失。本发明较好的解决了南方多年生人工草地建植当年草产量低、杂草严重的问题，对在南方大力推广种植人工草地、促进南方草地畜牧业的发展具有重要意义。

摘要： 本发明公开了一种获得非转基因多年生黑麦草突变体的方法。本发明提供了一种培育目标非转基因黑麦草突变体的方法，包括如下步骤：1)通过CRISPR/Cas9系统抑制多年生黑麦草中黑麦草减数分裂蛋白编码基因LpDMC1的表达，得到转化后黑麦草植株；2)将所述转化后黑麦草植株进行PCR/RE实验，选取酶切过程中未切开条带且测序为有效突变的单株为突变后黑麦草植株；3)选取所述突变后黑麦草植株中不含有Cas9基因的单株，为目标非转基因黑麦草突变体；本发明CRISPR/Cas核酸酶技术得到DMC1的敲除突变体，同源染色体之间不能正常配对组装形成二价体,这样就能够获得不育的植株的单价体，子代杂交就能形成单倍体，能够快速的缩短育种年限，在作物育种改良上起到显著的作用。

摘要： 本发明涉及实验用具，具体公开了一种多年生黑麦草表皮细胞切片的制备方法，所述方法包括：(1)选取多年生黑麦草叶片，投入FPA固定液中固定至少24小时，取出进行徒手切片，获得待观察多年生黑麦草叶片；(2)冲洗叶片表面残留的固定液，刮去叶片一侧表皮及部分叶肉后，投入浓度为0.9～1.1％的混合酶液中，在26～28°C条件下解离1～3h后，清洗去除混合酶液；(3)刮去残存组织，直至叶片表皮呈现透明状，即得多年生黑麦草表皮细胞切片；其中，所述混合酶液中含有等质量比的果胶酶、纤维素酶和半纤维素酶。通过本发明方法可以获得完整且视野清晰的多年生黑麦草叶片表皮细胞切片，可以在显微镜下观察到清晰的气孔、表皮细胞结构、表皮毛等附属器官。

摘要： 本发明涉及一种多年生黑麦草愈伤组织的诱导方法，包括以下步骤：将多年生黑麦草种子消毒处理并脱种皮，再在3‑5°C的无菌水中浸泡7‑9小时后接种于诱导培养基中进行愈伤诱导；其中，所述诱导培养基是添加有植物生长调节剂的MS培养基，在所述诱导培养基中含有按质量体积比计3.8‑6.2mg/L的2,4D、0.18‑0.22mg/L的6‑BA和0‑0.12g/L酸水解酪蛋白。利用本发明所提供的方法，可以通过简单的操作步骤对多年生黑麦草愈伤组织进行诱导，不需要对种子进行划开处理，而且具有显著提高的出愈率和胚性愈伤率。

摘要： 本发明涉及一种快速区别一年生黑麦草和多年生黑麦草种子的鉴定方法。本方法是在培养皿中铺设双层滤纸作为发芽床；用0.15‑0.25％的KNO

摘要： 本发明公开了一种获得非转基因多年生黑麦草突变体的方法。本发明提供了一种培育目标非转基因黑麦草突变体的方法，包括如下步骤：1)通过CRISPR/Cas9系统抑制多年生黑麦草中黑麦草减数分裂蛋白编码基因LpDMC1的表达，得到转化后黑麦草植株；2)将所述转化后黑麦草植株进行PCR/RE实验，选取酶切过程中未切开条带且测序为有效突变的单株为突变后黑麦草植株；3)选取所述突变后黑麦草植株中不含有Cas9基因的单株，为目标非转基因黑麦草突变体；本发明CRISPR/Cas核酸酶技术得到DMC1的敲除突变体，同源染色体之间不能正常配对组装形成二价体,这样就能够获得不育的植株的单价体，子代杂交就能形成单倍体，能够快速的缩短育种年限，在作物育种改良上起到显著的作用。

摘要： 本实用新型公开一种多年生黑麦草田间花粉隔离装置，包括隔离网，所述隔离网的第一端连接转轴，所述隔离网的第二端连接柱管；所述转轴的顶端装配有转动把手，所述转轴的顶端以下设置为轴管，所述轴管中装配有第一扦插杆；所述柱管中装配有第二扦插杆。通过设置隔离网将不同行间中的品种进行隔离，避免花粉串粉。通过设置转轴，可以将隔离网卷收在转轴上，方便收纳。通过设置扦插杆，方便将隔离装置固定在地面上，并且便于调整隔离装置的高度。

摘要： 本实用新型解决的技术问题是提供一种在浸泡过程中可以使叶片浸泡完全的、便于水浴加热、测定结果更准确、同时进行多组实验的多年生黑麦草叶片电导率测定浸泡装置。该装置包括水浴盆，水浴盆的内腔分割成多个子腔体，每个子腔体内均设置有水加热装置和水温传感器，每个子腔体的上方均设置有固定架，每个固定架上均设置有多个浸泡组件。该装置使用时，先将管盖取下并将过滤板拿出，然后将样品分别装入多个浸泡管内，然后加入适量的去离子水，再将过滤板放入浸泡内且位于液面以下，然后进行沸水浴加热，通过水温传感器监测水温并实时传递给控制器来控制水加热装置的启停实现自动控温。操作简单，适合在植物测定技术领域推广应用。

摘要： 本实用新型所要解决的技术问题是提供一种夹取、切割功能都兼备的多年生黑麦草种子剖切夹取装置。该装置包括第一夹板、第二夹板，第一夹板的前端与第二夹板的前端通过合页结构相连，第一夹板与第二夹板相对设置，合页结构的转轴上套设有扭簧，第一夹板与第二夹板之间设置有导轨，导轨上套设有第一套筒和第二套筒，第二套筒的末端固定有刀片，该装置在使用时，先对准种子然后使种子位于第一夹板和第二夹板的末端之间，只需用力使第一夹板和第二夹板的末端同时靠近种子并将其夹紧即可，如需切割种子，只需同时按压第一按压板和第二按压板，从而推动动刀片朝向种子运动直至将其切割开为止，操作方便适合在实验室器材领域推广。