多向分化潜能

摘要： 干细胞,英文名词为StemCell,也称为起源细胞,具有多向分化潜能和自我复制能力的原始的未分化细胞。干细胞可基本分为胚胎干细胞和成体干细胞。自从研究发现干细胞能够体外培植,许多相关研究陆续出现,并且证实干细胞能够横向分化成其他类型的细胞和组织,这为医学界带来很大的帮助。叶系干细胞也属于干细胞的成员之一。它具有多向分化潜能、免疫调控、自我复制、造血支持和促进干细胞植入等特点。

摘要： 软骨肥大分化是应用间充质干细胞(bone mesenchymal stem,MSCs)治疗软骨损伤修复的面临的一个难题。软骨肥大分化在骨关节炎中也经常会出现。如何抑制软骨肥大是应用MSCs进行软骨修复以及治疗骨关节炎亟待解决的问题。MSCs是一种具有多向分化潜能的细胞,能够在体内或体外分化成多种细胞,包括骨细胞、软骨细胞、肌细胞和脂肪细胞等多种功能性细胞。

摘要： 过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferators-activated receptors,PPARs)是全氟辛烷磺酸(perflurooctane sulfon-ate,PFOS)的首要分子靶标,但PPARs各亚型在PFOS毒性效应中可能产生不同调控作用,相关机理并不清楚.本研究采用人骨髓间充质干细胞体外分化模型,研究PFOS暴露对PPARs亚型的干扰,及其与细胞分化之间的关联.结果显示,PFOS在0.1、1和10 μmol·L-1浓度下诱导PPARα、PPARβ和PPARγ的mRNA表达水平上调,在1 μmol·L-1浓度下分别最高上调至对照组的631倍、6.44倍和15.4倍.与PPARγ激活一致,PFOS促进细胞成脂分化,脂质形成升高.同时,PFOS暴露抑制细胞成骨分化,钙结节形成下降,成骨分化早期标志物基因Runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2,Runx2)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)表达下调.此外,PFOS作用下,细胞基因表达谱中差异表达基因的富集分析显示,受干扰的通路主要涉及细胞分化、骨代谢和脂质代谢相关通路.相反,PFOS暴露使骨保护素的mRNA水平升高,与PPARβ上调一致.研究结果提示,PFOS对PPARs各亚型的激活在对干细胞分化的干扰效应中可能产生不同的作用,有必要进一步研究,以深入理解全氟多氟烷基化合物的毒性机制.

摘要： 聚乳酸羟基乙酸(poly(lactic-coglycoli cacid),PLGA)支架是组织工程中较常用的三维支架材料。间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是一类具有自我更新、多向分化潜能的成体干细胞,可向神经谱系细胞分化并能朝受损部位迁移,在治疗脑创伤方面具有良好效果。本实验拟探讨PLGA支架联合MSCs移植在脑创伤模型中对神经功能修复及受损区域突触可塑性的影响。实验分组如下:假手术组、对照组、PLGA组、PLGA+MSCs组。

摘要： 经血源性间充质干细胞(MenSCs)由于其易获得性、无伦理学问题及具有多向分化潜能等优点成为近些年研究热点,课题组前期探究了MenSCs与脱细胞异种神经桥接体(ANX)共培养体系的相容性良好,并且能分泌与周围神经损伤修复相关的神经生长因子和营养因子。

摘要： 目的 研究冻存对犬脂肪干细胞(ADSC)生物学特征及体外诱导分化能力的影响.方法 2017年2月至5月,取自上海市第六人民医院动物实验室雄性6月龄比格犬腹股沟处脂肪组织,采用胶原酶消化法分离培养ADSC,设置冻存组和非冻存组,其中冻存组,将犬ADSC传至第2代,予以-196°C液氮冻存.3个月后细胞复苏,倒置显微镜观察细胞形态,细胞计数试剂盒(CCK-8)绘制生长曲线,流式细胞仪检测干细胞标志CD45、CD90、CD105表达,体外经成骨成脂及成肌等多向诱导分化.比较两组犬ADSC上述生物学特性指标差异,组间均数比较采用t检验,细胞生长曲线分析采用重复测量方差分析.结果 犬ADSC原代培养4～5d便可达95％细胞融合,细胞贴壁生长,呈长梭形.与非冻存组比较,冻存组犬ADSC形态相似,CCK-8检测两组细胞增殖能力差异无统计意义(F= 1.233,P＞0.05);冻存组犬ADSC表面标志CD45、CD90、CD105表达分别为(1.53±0.11)％、(97.52±1.61)％和(96.86±1.88)％,非冻存组犬ADSC表面标志CD45、CD90、CD105表达分别为(1.44±0.12)％、(96.31±1.76)％和(97.90±1.25)％,组间比较差异无统计意义(tCD45 =0.958,tcD90=0.877,tcD105 =0.798,均P＞0.05).与非冻存组比较,冻存组犬ADSC同样具有强大的多向分化能力,包括成肌、成脂和成骨分化.结论 冻存后犬ADSC一般生物学特性及多向分化潜能无明显改变,能作为犬ADSC长期储存和运输的保存条件.

摘要： 【视频简介】衰老是机体随年龄增长而呈现渐进性结构退行性变和机能减退的过程和现象。人口老龄化已经成为严重的政治、社会、经济和健康问题,寻找有效提高老年人的生活质量、逆转或延缓衰老的技术是目前迫在眉睫的问题。干细胞具有自我更新、多向分化潜能,在理论上具有参与和促进组织细胞再生、损伤修复、逆转人体衰老的可行性,但涉及临床应用必须解决干细胞来源和疗效、机制、安全等关键问题。

摘要： 目的:分离纯化大鼠纤维环干细胞并观察其集落形成能力及多向分化潜能.方法:运用单克隆培养法分离纯化纤维环干细胞,倒置显微镜下观察干细胞集落,结晶紫染色显示细胞集落形态,成骨、成软骨及成脂肪诱导鉴定其纤维环干细胞的多向分化潜能.结果:单克隆培养法可以纯化分离出活性较好的纤维环干细胞.经过8~10 d培养,倒置显微镜下可观察到单克隆细胞集落,结晶紫染色后可肉眼见广泛细胞集落,经过体外三系诱导分化后,证实纤维环干细胞具有较强的三系分化潜能.结论:大鼠纤维环组织存在典型的大鼠纤维环干细胞.

摘要： 骨髓基质干细胞(BMSCs)具有取材简单、增殖速度快、抗原性小和培养过程中始终保持多向分化的潜能等特点,已经成为干细胞研究领域的热点,是最好的组织工程种子细胞之一.近年研究发现这类细胞具有高度分化的潜能,能分化为神经细胞,为脊髓损伤(SCI)的修复提供了一条新的途径,具有广阔的临床应用前景.

摘要： 背景：目前作为骨组织工程的种子细胞主要是骨髓间充质干细胞,但其在骨髓中的含量极低,只有0.001%-0.01%,同时分离纯化难度大。目的：探讨人胎盘来源间充质干细胞的生物学性能及与三维多孔羟基磷灰石陶瓷支架的生物相容性。方法：人胎盘来源间充质干细胞进行形态学观察和流式细胞仪鉴定;将人胎盘来源间充质干细胞经成骨、成脂、成软骨诱导分化培养3周,进行茜素红S、油红O、甲苯胺蓝染色,鉴定其多向分化潜能。将人胎盘来源间充质干细胞接种于三维多孔羟基磷灰石陶瓷支架,通过DAPI染色、扫描电镜观察人胎盘来源间充质干细胞在支架表面的黏附情况。结果与结论：（1）人胎盘来源间充质干细胞呈长梭形,大小均匀一致;（2）人胎盘来源间充质干细胞高表达CD29,CD90等干细胞表面标志,不表达CD45,CD106等造血细胞表面标志;（3）诱导培养3周后,茜素红S染色可以看到红色的矿化结节,油红O染色观察到红色的脂滴,甲苯胺蓝染色可以看到软骨细胞染成蓝色;（4）DAPI染色、扫描电镜均观察到人胎盘来源间充质干细胞在支架表面能很好地黏附,可以作为组织工程良好的种子细胞。

摘要： 干细胞是一种还未完全发育成熟的细胞，自身具有超强的优势和特点，可以进行单独的分化、分裂，可以分化成人体需要的各种功能的细胞，也还能分化成为人类的各种器官，干细胞的特点就是具有可塑能力。干细胞具有强大的自我修复和多向分化潜能，能够及时根据人体需要增殖，分化出年轻的细胞，及时更新替换掉衰老的细胞提高全身细胞更新换代的能力和活性，全面改善人体各项生理机能从而保持全身心的年轻，彻底延缓衰老延长生命。

摘要： 精原干细胞(spematogoniaI stem cells,SScs)是具有高度自我更新能力和多向分化潜能等特性的多能干细胞,可在自身基因或外来信号调节下最终分化为精子。精原干细胞的生物学特性、增殖、分化及体外培养,在医学、生物工程学、遗传、转基因研究等方面有着广阔的应用前景。本文就精原干细胞的研究进行综述。

摘要： 本发明属于生物组织工程技术领域，公开了一种人脂肪干细胞原代培养及无血清多向诱导分化方法，采用胶原酶分离法获得皮下和网膜组织来源的人脂肪间充质干细胞，原代培养至80％融合，再进行传代培养，并进行脂肪间充质干细胞的鉴定。选用生长良好的第三代细胞，加入无血清诱导培养基进行成脂、成骨诱导分化，最后进行油红O染色及茜素红染色鉴定分化效果及Real‑time RCR检测成脂、成骨基因表达情况。人脂肪组织易于获得，经原代培养所得的脂肪间充质干细胞足够存活量和存活期，且可诱导分化为成熟的成脂细胞和成骨细胞，为糖尿病、肥胖、骨质疏松症等代谢性疾病细胞治疗提供理想的种子细胞，为组织工程生物化骨、生物化脂肪提供新途径，有广阔的临床应用前景。

摘要： 本发明公开了一种用于扩增并维持造血干细胞(hematopoietic stem cells,HSCs)自我更新能力和分化潜能的培养基组合物、细胞群体及其应用。所述培养基组合物包括造血干细胞培养基和PDGFR靶点的小分子抑制剂。申请人首次证明了PDGFR的抑制剂能够在体外培养过程中显著扩增HSCs，同时保持HSCs高比例的自我更新能力。申请人发现的PDGFR抑制剂扩增LT‑HSCs的效果显著优于已报道的化学小分子。这是首次证明并报道了PDGF/PDGFR信号通路在造血干细胞扩增并维持自我更新能力方面发挥重要作用。申请人的研究结果可以实现HSCs的体外扩增的同时维持细胞较高比例的干性，在此基础上进行HSCs移植的临床应用，可广泛治疗一系列血液系统疾病。

摘要： 本发明为MAPK信号通路抑制剂VX‑702在提高hESCs造血分化潜能的应用，属于生物技术领域领域。一种高效便捷促进造血祖细胞产生的方法，包括以下步骤：在人类多能干细胞培维持培养阶段，向培养皿中加入MAPK信号通路抑制剂VX‑702，在维持培养阶段持续处理，将持续处理后的细胞进行体外造血分化，相比未处理细胞，其血液祖细胞的产量显著提高，并最终导致末端分化血细胞产量的相应提升。该MAPK信号通路抑制剂VX‑702能促进hESCs在体外造血分化体系内造血分化效率。

摘要： 本发明提供了一种具备B谱系分化潜能的人造血祖细胞的制备方法及其应用，所述制备方法包括：将RUNX1、HOXA9和LHX2三个转录因子同时或者分别导入人多能干细胞诱导分化体系的细胞，并进行诱导表达与诱导分化，得到所述具备B谱系分化潜能的人造血祖细胞；所述人多能干细胞诱导分化体系的细胞包括人多能干细胞、中胚层细胞、生血内皮细胞或造血祖细胞中的任意一种或至少两种的组合；所述诱导分化的方法包括基于基质细胞共培养的单层培养诱导分化方法或类器官三维培养诱导分化方法。所述制备方法具有良好的诱导及分化效率，制备得到的细胞的活性好、分化能力高，具有重要的应用价值。

摘要： 本发明涉及一种具有人视网膜分化潜能的红色荧光标记细胞及其构建方法，包括将红色荧光蛋白表达框插入到人干细胞基因组中的步骤。本发明通过设计打靶载体和相关的分子遗传操作，构建了一种红色荧光标记的胚胎干细胞系,该细胞系可经3D培养诱导分化为表达tdTomato红色荧光的视网膜类器官。得到的视网膜类器官同人类正常视网膜的神经细胞组成一致且发育的时间和空间顺序接近于正常的人类视网膜。该细胞系是一种强大的工具，可帮助实现人类视网膜发育和疾病产生的相关研究,并促进致盲疾病治疗方法的开发。

摘要： 本发明提供一种从儿童包皮培养获得具备多向分化潜能和免疫调节功能间充质干细胞的方法，包括如下步骤：将经过包皮环切术切割下来的包皮用无菌PBS清洗后，放置于培养皿中；对上述包皮进行纵向切片以扩散组织，分离表皮和真皮，然后将该真皮切成小块形成组织匀浆；将该组织匀浆均匀接种于培养瓶中，平置培养瓶使组织块尽量均匀分布于整个底面，加入培养基进行原代培养；最后传代培养至第3代建立间充质干细胞库。该培养方法速度高、产率高、原料来源丰富，且培养得到的间充质干细胞纯度高、具备多向分化潜能和免疫调控功能、能够表达更多的免疫抑制相关基因和趋化基因，可以用于抑制炎症反应各种类型脓毒症(感染性(细菌和病毒)和免疫性)的治疗。

摘要： 本发明涉及用于纯化富集真皮内多向分化潜能细胞的标志膜蛋白，其采用以下步骤获得：真皮来源细胞经体外培养、扩增，并经稀释和96孔板培养，获取若干单克隆细胞；对上述所得的单克隆细胞进行成脂肪、成骨及成神经体外诱导，并鉴定其分化能力；分别对双向克隆细胞和三向克隆细胞分离提纯，获得相应的膜蛋白组分；通过双向电泳分析，找出三向克隆和双向克隆的差异蛋白点；进行LTQ质谱分析，获得匹配的蛋白质；通过Western-Blot检测，找出标志膜蛋白。本发明还涉及所述的标志膜蛋白的用途，经上述方法初步筛选出的随着分化能力的变化而出现较明显上调或下调的标志膜蛋白，可用于具有多向分化潜能细胞的分选纯化。

摘要： 本发明提供一种从儿童包皮培养获得具备多向分化潜能和免疫调节功能间充质干细胞的方法，包括如下步骤：将经过包皮环切术切割下来的包皮用无菌PBS清洗后，放置于培养皿中；对上述包皮进行纵向切片以扩散组织，分离表皮和真皮，然后将该真皮切成小块形成组织匀浆；将该组织匀浆均匀接种于培养瓶中，平置培养瓶使组织块尽量均匀分布于整个底面，加入培养基进行原代培养；最后传代培养至第3代建立间充质干细胞库。该培养方法速度高、产率高、原料来源丰富，且培养得到的间充质干细胞纯度高、具备多向分化潜能和免疫调控功能、能够表达更多的免疫抑制相关基因和趋化基因，可以用于抑制炎症反应各种类型脓毒症(感染性(细菌和病毒)和免疫性)的治疗。

摘要： 本发明公开了一种梓醇用于体外高效扩增脐带间充质干细胞的用途、维持其多向分化潜能的培养基。在本发明的具体实施例中，研究数据显示，梓醇可以有效促进人脐带间充质干细胞的增殖，并且呈现明显的剂量依赖性和时间依赖性，且梓醇干预培养不会影响人脐带间充质干细胞的多向分化能力，因此可以在人脐带间充质干细胞培养基中添加有效浓度的梓醇制成提高人脐带间充质干细胞增殖效率的培养基。

摘要： 本发明涉及用于纯化富集真皮内多向分化潜能细胞的标志膜蛋白，其采用以下步骤获得：真皮来源细胞经体外培养、扩增，并经稀释和96孔板培养，获取若干单克隆细胞；对上述所得的单克隆细胞进行成脂肪、成骨及成神经体外诱导，并鉴定其分化能力；分别对双向克隆细胞和三向克隆细胞分离提纯，获得相应的膜蛋白组分；通过双向电泳分析，找出三向克隆和双向克隆的差异蛋白点；进行LTQ质谱分析，获得匹配的蛋白质；通过Western-Blot检测，找出标志膜蛋白。本发明还涉及所述的标志膜蛋白的用途，经上述方法初步筛选出的随着分化能力的变化而出现较明显上调或下调的标志膜蛋白，可用于具有多向分化潜能细胞的分选纯化。