外壳蛋白

摘要： 茉莉H病毒(JaVH)是一种天竺葵黄斑病毒属病毒,可引起严重的茉莉病毒病害.该病毒基因组含有5个开放阅读框,分别编码2个复制相关蛋白、2个运动蛋白和1个外壳蛋白(CP),其中,CP可能是一个RNA沉默抑制子,并且与致病性密切相关.构建JaVH CP瞬时表达重组质粒pXT-CP,将其与pGDG混合浸润本生烟,浸润第5天利用紫外灯照射,观察到浸润区域仍具强烈荧光,表明CP是一个较强的沉默抑制子.为进一步鉴定CP的关键功能位点,将JaVH外壳蛋白与同属其他病毒进行比对后构建了18个pXT-CP突变体,利用农杆菌共浸润瞬时表达系统和Western blot明确了13个影响JaVH的CP功能的关键氨基酸位点,包括Trp 28、Arg 40、Arg 58、Gly 75、Ile 83、Thr 84、Val 108、Phe 111、Ser 115、Lys 123、Tyr 124、Arg132和Lys 200.

摘要： 采用RT-PCR方法克隆了侵染安康魔芋的芋花叶病毒(Dasheen mosaic virus, DsMV)cp完整基因序列,结果表明:DsMV魔芋分离物cp基因大小为903 bp,推导编码的外壳蛋白由301个氨基酸组成。Blast比对结果显示,覆盖度仅有72%~80%,一致性为80.30%~87.98%;系统发育分析显示DsMV安康魔芋分离物独立于组III中,具有较大的分子变异,且不同寄主分离物和不同地理位置来源的DsMV在进化树中没有明显相关性。

摘要： 目的制备肠道病毒71型(EV71)外壳蛋白表位肽多克隆抗血清。方法利用5种B细胞表位预测软件对EV71外壳蛋白进行分析,设计针对病毒蛋白(VP)的4种表位肽,即VP1(aa.204-223)、VP2(aa.133-163)、VP3(aa.139-148+aa.173-191)和VP4(aa.1-23),化学合成后与钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)偶联得到相应肽。然后,分别联合MF59/CpGC274佐剂皮下免疫BALB/c小鼠6次,间隔2周,采集血清,用ELISA和Western blot对其抗体活性进行分析。结果4种抗血清均可有效结合EV71病毒和其变性病毒,VP2抗血清与变性病毒的结合活性较高,其余3种与病毒及变性病毒的结合力相当;而且4种抗血清均可与病毒样颗粒(VLP)及变性VLP结合。VP1和VP2抗血清分别与EV71 VLP中的组成蛋白VP1和VP0(VP2和VP4前体蛋白)结合,其中VP2抗血清的结合活性最好,VP1抗血清次之;同时,VP1和VP2抗血清还可与EV71病毒特异性高效结合,且VP2抗血清可同时结合EV71病毒的空心颗粒的VP0及实心颗粒的VP2。VP3和VP4抗血清与VLP和病毒未显示明显的结合活性。结论成功制备了4种EV71表位肽多克隆抗血清,为ELISA和Western blot提供检测工具,并可用于EV71疫苗质控(QC)研究。

摘要： 【目的】柑橘褪绿矮缩病毒(Citrus chlorotic dwarf-associated virus,CCDaV)是一种新的柑橘病毒,为给我国柑橘脱毒苗木质量控制和田间监测提供技术支撑,建立了一种灵敏度高、特异性强的快速检测方法。【方法】通过序列分析和相似性比对,明确抗原靶标;构建CCDaV-CP的原核表达载体,诱导目的蛋白表达后作为抗原用于注射兔子,制备抗血清。运用Western blot检测效价。通过优化抗体浓度,建立CCDaV的dot-ELISA检测方法,明确其灵敏度,并用于田间疑似样品检测。【结果】以外壳蛋白(CP)的保守区域为靶标,成功构建了表达载体pET28a-CCDaV-CP,其在18°C,IPTG浓度0.5 mmol·L^(-1)时,诱导12 h,目的蛋白的表达量高。制备的特异性抗血清效价为1:3000。由此建立的dotELISA检测方法在提取液被稀释640倍时,仍能检测出CCDaV。应用该方法对42份田间疑似样品的检测结果与PCR法的符合率为94.73%。【结论】首次获得了CCDaV的抗血清,并以此建立了快捷、灵敏、准确的dot-ELISA检测方法,为CCDaV的快速检测和防控提供了技术支撑。

摘要： 采用小RNA测序技术对甘肃省榆中县疑似感染病毒病的当归[Angelica sinensis(Oliv.)Diels]样品进行测序鉴定,发现样品中含有魔芋花叶病毒(Konjac mosaic virus,KoMV),通过反转录PCR(RT-PCR)扩增KoMV衣壳蛋白(capsid protein,CP)的cp基因,克隆的KoMV cp基因连接原核表达载体pET-28a(+),导入E.coli Rosetta ^(TM)(DE3)诱导表达蛋白,在Ni-NTA重力柱层析作用下纯化CP融合蛋白,并以此作为抗原免疫新西兰大耳白兔制备多克隆抗体。序列分析表明:KoMV cp基因片段大小为840 bp,编码280个氨基酸的外壳蛋白;与GenBank已注册同源性较高的KoMV分离物相比,核苷酸序列相似性为85.58%~99.41%,氨基酸序列相似性为89.32%~99.29%;KoMV的病毒种群分布存在明显的区域性和寄主差异。SDS-PAGE显示,不同温度诱导下KoMV CP融合蛋白在E.coli Rosetta ^(TM)(DE3)中均以包涵体的形式大量表达,融合蛋白分子量为36 ku。间接ELISA和Western blot检测结果显示,制备的多克隆抗体效价达到32000,能够与感染KoMV的当归叶片和纯化蛋白特异性结合,具有良好的特异性。本研究成功制备了当归KoMV CP融合蛋白的多克隆抗体IgG,为开发KoMV的血清学检测技术及CP蛋白的功能研究奠定了基础。

摘要： 利用生物信息学技术对草莓轻型黄边病毒(SMYEV)、草莓斑驳病毒(SMV)及草莓皱缩病毒(SCV)等5种病毒抗原表位进行预测,将预测的抗原肽段及串联表位肽段的DNA片段在大肠埃希氏菌(Escherichia) BL21 (DE3)进行原核表达,并将纯化后的抗原表位肽免疫京红一号产蛋鸡.从免疫蛋鸡卵黄中分离卵黄抗体(IgY),并对其进行抗体活性、效价及灵敏度的分析.结果 表明,预测到的优势抗原表位肽段分别位于5种草莓病毒外壳蛋白氨基酸序列的27-38、49-82、288-314、62-75、218-238位.5种优势抗原表位肽及其串联抗原表位肽(5S)均能在Escherichia BL21 (DE3)中成功表达.5S免疫蛋鸡产生的IgY对于5种草莓病毒均具有较强的免疫活性,抗体滴度为1:1600,检测灵敏度为10 ng.本研究制备的串联抗原表位重组蛋白能诱导蛋鸡产生具有较强免疫活性的IgY抗体,可用于SMYEV、SMV及SCV等5种草莓病毒的同时检测.

摘要： 对桑花叶卷叶病相关病毒外壳蛋白抗原性较好的核心结构域进行克隆和序列多样性分析,结果表明50个克隆中有19个克隆株,CP16为优势株.构建重组表达载体pET-28a-SUMO-CP16,成功在大肠杆菌Rosetta中诱导表达该蛋白,利用亲和层析纯化重组蛋白并制备多克隆抗体.经Western杂交和ID-ELISA检测合格的抗体偶联Tosylactivated磁珠,用于桑花叶卷叶病相关病毒的纯化.经qPCR技术检测显示,纯化后的病毒样本中的背景RNA得到极大的减少,获得了高纯度的病毒样品.

摘要： 苹果褪绿叶斑病毒Apple chlorotic leaf spot virus (ACLSV)是侵染苹果的主要潜隐性病毒之一,在我国苹果植株上发生普遍,严重威胁我国苹果的品质与产量.本研究从山西省12个苹果主产区随机采集360份表现褪绿和斑驳等症状的苹果叶片作为研究样本,通过RT-PCR检测,360份样本中有209份样本为ACLSV阳性,对209份阳性样本的外壳蛋白(coat protein,CP)基因进行分离、测序、克隆,得到12个新的ACLSV分离物(分别命名为Shanxi1～Shanxi12).选择17个来自不同国家的分离物与12个新的ACLSV分离物在核苷酸和氨基酸层面上进行序列一致性和系统发育分析.结果 显示,29个ACLSV分离物被划分为2个不同进化群体.进一步对2个不同ACLSV群体进行选择压分析和中性检验,结果表明,组工与组Ⅱ的ACLSV群体之间存在明显的遗传差异,其中负向选择可能是ACLSV遗传变异的原因之一.本研究较全面地分析了ACLSV的发生、危害,并对山西苹果的ACLSV分离物进行了遗传结构分析,为山西苹果褪绿叶斑病毒病的防治提供了理论指导.

摘要： 目的:检测安徽省太和县板蓝根花叶病病原.方法:采用反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)方法,使用黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus,CMV)、蚕豆萎蔫病毒2号(broad bean mosaic virus 2,BBWV2)和马铃薯Y病毒属(Potyvirus)引物对5个板蓝根花叶样品进行分子鉴定.选取2个样品(AH-BLG3和AH-BLG4)的扩增产物进行测序,BLAST分析病原种类及分子特征,根据CMV外壳蛋白(coat protein,CP)氨基酸序列构建系统发育进化树,明确病原的分类地位.结果:5个板蓝根样品均被CMV侵染,未检测到BBWV2和马铃薯Y病毒属病毒.BLASTn分析发现,该CMV板蓝根分离物与我国白术中ZJAm分离物相似度最高,核苷酸相似度分别为98.93％和99.54％,氨基酸相似度均为100％.系统进化分析发现,该CMV板蓝根分离物与ZJAm和Anhui分离物亲缘关系最近,同属CMV IB亚组.结论:明确了安徽省太和县板蓝根花叶病的病原为CMV.

摘要： 甘蔗黄叶病毒(Sugarcane yellow leaf virus,SCYLV)引起的甘蔗黄叶病是一种新的全球性病毒病害.本文以YLSCPFl和YLSCPR591为引物,采用RT-PCR方法克隆了甘蔗黄叶病毒福建分离物(CHN-FJl)外壳蛋白(CP)基因,编码196个氨基酸.分析不同地理来源的SCYLV病毒分离物cp基因核苷酸及其推导编码的氨基酸序列,同源性达95％以上.根据cp基因的保守序列,设计l对特异性引物和TaqMan探针,建立了SCYLV的TaqMan实时荧光RT-PCR方法.结果表明,检测下限为初始质粒模板DNA 1000拷贝/μL(约3.61fg/μL),比常规PCR方法的灵敏度提高100倍.检测什蔗花叶病毒、宿根矮化病菌和黑穗病菌,没有典型的扩增曲线和无Ct值.应用实时荧光RT-PCR、常规RT-PCR和组织印迹免疫杂交(TBIA)对田间甘蔗叶片样品进行检测,阳性检出率分别为100％、61.5％和69.2％,表明该方法比常规RT-PCR和TBIA具有更高的灵敏度,适合于对SCYLV的检测.

摘要： 高粱花叶病毒(Sorghum mosaic virus,SrMV)是世界上分布最广的侵染甘蔗的病毒之一,引起甘蔗花叶病,对甘蔗产业危害很大.本研究根据SrMV外壳蛋白(coatprotein,CP)基因序列合成一对引物,以海南(SrMV-HN)染病植株总RNA为材料,采用RT-PCR方法克隆了长约987bp的目的片段.将CP基因与质粒pET32a(+)连接,构建了含SrMV CP基因的融合蛋白原核表达载体pET32a-SrMVCP.然后用正确的重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3),经IPTG诱导后,SDS-PAGE检测出一条约36kD的特异融合蛋白表达谱带.融合蛋白主要以可溶性蛋白形式稳定表达.通过优化诱导条件,确立了CP基因表达的最佳条件:IPTG终浓度为0.1mmol/L,诱导时间为4h,诱导温度为30°C.用Ni2+-NTA琼脂糖亲和层析纯化融合蛋白,免疫家兔制备出抗血清.通过酶联法(ID-ELISA)测定本实验制备的SrMV CP抗血清工作浓度为1:1000,Western blotting检测结果表明,抗血清与SrMV-HN诱导表达的CP蛋白发生特异性反应.对田间25个甘蔗样品进行检测,结果表明该抗血清的效价高、灵敏度高、特异性强,可以应用于田间样品的检测.

摘要： 利用双生病毒简并引物PA/PB,对山东寿光保护地疑似感染番茄黄化曲叶病毒(Tomato Yellow Leaf Curl Virus,TYLCV)的番茄植株进行PCR检测,结果表明,番茄病叶由TYLCV侵染所致.从提取的病叶总DNA扩增到长约770bp的TYLCV外壳蛋白(Coat Protein,CP)基因片段,克隆至pEASY-T1Simple载体,Xho I和EcoR I切下并插入到pET-32a,构建了TYLCV外壳蛋白基因原核表达载体,转入大肠杆菌BL21 (DE3),经IPTG诱导获得了50kD重组蛋白,Ni2-NTA亲和层析纯化和Western印迹分析证明目的蛋白为TYLCV外壳蛋白,且具有良好的抗原活性.

摘要： 草莓轻型黄边病毒(Strawberry mild yellow edge virus,SMYEV)是草莓生产中危害严重的一种病毒.本文探索在原核细胞中表达SMYEV的外壳蛋白(CP),并以其为抗原制备SMYEV抗血清的方法,建立利用ELISA检测SMYEV的技术体系.结果表明,SMYEV的CP基因在大肠杆菌中表达分子质量为52ku的融合蛋白.以纯化的重组蛋白为抗原,免疫新西兰兔,制备出针对SMYEV的抗血清,该抗血清稀释800倍后仍能有效检测草莓植株中的SMYEV.

摘要： 利用PCR方法从本实验室保存的番木瓜环斑病毒(papaya ringspot virus,PRSV)、番木瓜畸形花叶病毒(papaya leaf distortion mosaic virus,PLDMV)和番木瓜花叶病(papaya mosaic virus,PaMV)的全长基因组的质粒上分别扩增了三种病毒的外壳蛋白(coat protein,CP)基因,并连接到原核表达载体pET-28a上,将获得的重组质粒pET28-PRSV CP、pET28-PLDMV CP和pET28-PaMV CP分别转化到大肠BL21(DE3),IPTG诱导后,SDS-PAGE分析显示这三种CP蛋白在大肠杆菌中高效表达,其中PRSV CP蛋白和PLDMVCP以包涵体形式存在,PaMV CP以融合蛋白形式存在.利用Ni+-NTA琼脂糖亲和层析获取了三种病毒的重组CP蛋白,并免疫大白兔获得高效价的抗体.Western blot检测结果表明,这三种抗血清与对应的诱导表达蛋白发生特异反应.采用上述抗血清建立了一种快捷、简便和低成本的ID-ELISA技术(Indirect enzyme-linked immunosorbent assay),并利用此技术对海南岛283个疑似感病番木瓜样品进行了检测鉴别,初步掌握了海南岛三种主要番木瓜病毒的分布及感病情况,这为下一步采取针对性的有效防治策略提供了科学依据.

摘要： 为提高甘蔗抗病性,本研究根据甘蔗黄叶病毒海南分离物ScYLV-CHN-HN1全基因组序列(GenBank no.HQ342888),利用病毒CP蛋白介导的RNAi技术,针对病毒外壳蛋白CP,设计两对含有酶切位点的特异性引物,CPsf1/CPsr1和CPasf1/CPasr1,以构建好的pMD19-T/CP质粒为模板,pRNAi1017为中间载体,分别合成构建干扰载体的正反向片段pRNAi-CP-F-R,将CP正反向片段分别插入表达载体pCAMBIA2300的相应位置,构建含有发卡结构的RNAi 载体p2300-CP-F-R,经过PstⅠ酶切鉴定,证明载体构建成功.通过农杆菌介导的方法,以干扰表达载体p2300-CP-F-R转化烟草,经过PCR检测,得到12株阳性转基因植株,Southern blot杂交和半定量RT-PCR对其检测,证明干扰片段已经整合烟草基因组中并进行了转录,该结果为RNAi介导抗病毒甘蔗育种研究奠定基础.

摘要： 构建了用于苹果褪绿叶斑病毒(Apple chlorot(i)c leaf spot virus,ACLSV)外壳蛋白(coat protein,CP)酵母双杂交试验的诱饵载体,并进行了自激活及毒性验证.以含有ACLSV CP特异性序列的重组质粒为模板,经PCR扩增获得合有NdeⅠ/PstⅠ双酶切位点的CP特异性序列,连接到pMD18-T simple载体,测序鉴定正确后,NdeⅠ/PstⅠ双酶切获得的CP目的基因与同样双酶切的酵母质粒载体pGBKT7连接,转化酵母菌株Y2H gold,并进行自激活与毒性试验.结果表明重组质粒pGBKT7-CP序列正确,转化酵母菌株无自激活、无毒性.

摘要： 近些年,植物病毒编码的蛋白与寄主相关因子的相互作用在植物病毒学上已经成为一个重要的研究热点,与病毒互作的新的寄主因子不断的被发现,本文初步综述了近年来发现的与病毒外壳蛋白、运动蛋白和复制酶互作的部分寄主因子及其互作效应，其涉及了病毒侵染的整个过程，包括在寄主细胞中的复制和翻译、局部运输和长距离运动、以及寄主抗性的抑制。在病毒与寄主的相互作用的过程中，蛋白与蛋白的相互作用是主要部件，它不仅包含直接结合的蛋白质分子的相互作用，还包含大范围的交互作用。蛋白与蛋白的相互作用是任何一个活细胞的相互作用组学全部系统的核心。对于病毒侵染的大部分过程，病毒蛋白与某些特定的植物蛋白的相互作用是关键的研究内容。因此，研究病毒与寄主的直接相互作用阐明植物病毒影响植物光合作用、引起症状表达的机制，为重要经济作物的病毒病的控制提供思路和依据。

摘要： 为研究水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)外壳蛋白(coat protein,CP)与病害特异蛋白(disease-special protein,SP)的亚细胞定位及两个蛋白间的互作关系,分别构建了融合GFP和RFP的表达结构,并在本氏烟上进行瞬时表达.激光共聚焦观察结果表明,pCHF3-GFP-CP与pCHF3-RFP-SP单独浸润时均定位于细胞核和细胞壁.两者共浸润后,CP和SP的亚细胞定位均发生改变,CP主要定位于细胞壁,并呈缺刻状分布,SP则定位在细胞壁上,且与CP存在共定位现象.CP与SP共定位表明两者间可能存在互作.

摘要： 目的:利用大肠杆菌原核表达系统表达并纯化肠道病毒71型(EV71)VP1蛋白,并对重组蛋白功能进行初步鉴定。方法：PCR扩增EV71 VP1全长基因,在测序正确的基础上将其插入表达载体pEI30a(+),构建表达质粒pET30a(+)/VP1,转化表达菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,利用Ni2+素和层析柱对重组蛋白进行纯化,经ELISA和Western Blot验证EV71 VP1的抗原性。结果：成功构建pET30a(+)/VP1重组质粒,经大肠杆菌表达、纯化获得分子量约为38kDa的融合蛋白,经ELISA和Western Blot结果显示该蛋白有良好的抗原性。结论：实现了肠道病毒71型VP1蛋白的原核高效表达,为肠道病毒71型诊断试剂和疫苗的研究奠定了基础。

摘要： 本发明属于生物工程中的DNA重组技术领域，具体涉及具体涉及杂合蛋白及其应用。本发明合成编码白色念珠菌分泌型天冬氨酸蛋白酶(Sap2)的表位序列，并与噬菌粒载体连接。连接产物的序列分析，其编码的蛋白序列长88个氨基酸，蛋白质分子量为6.5kDa。利用连接后的载体在大肠杆菌细胞中表达杂合型蛋白，该蛋白在系统性白色念珠菌感染检测和系统性白色念珠菌感染预防中具有重要的应用价值。

摘要： 一种白色念珠菌热休克蛋白90表位与噬菌体外壳蛋白的杂合蛋白及其用途；本专利属于生物工程中的DNA重组技术领域。利用基因工程技术，将白色念珠菌热休克蛋白90表位基因片段(LKVIRK)插入到整合有丝状噬菌体主要外壳蛋白基因的载体中，构建成新的重组载体。在宿主菌中，表位基因产物被分泌到细胞外，并组装于噬菌体外壳蛋白中，形成杂合蛋白。1〕杂合蛋白可以作为一种抗原与患系统性白色念珠菌感染者血清中的抗体产生免疫应答。2〕杂合蛋白在小鼠体产生了较好的体液免疫和细胞免疫。3〕杂合蛋白在白色念珠菌感染模型鼠的免疫保护和预防实验中表现出保护作用。所以，这种杂合蛋白可以用来制备诊断、预防和治疗系统性白色念珠菌感染的药品。

摘要： 本发明公开了增加蛋白质产量的方法。一种方法包括通过将编码遍在蛋白的基因插入编码相应蛋白的基因的前面而制备一种载体，并将所述载体插入细胞。由此，一种融合蛋白将被表达，其包括遍在蛋白加上相应蛋白。遍在蛋白C端水解酶可裂解所述融合蛋白，使所需蛋白呈游离态。这一方法与不包含遍在蛋白基因作为载体的一部分的方法相比，使相应蛋白质的产量增加。遍在蛋白启动子对于获得这种增加的产量不是必需的并因此未使用。第二种方法非常类似，只是用编码黄瓜花叶病毒外壳蛋白的14个氨基酸的基因代替遍在蛋白基因插入相应蛋白质的前面。这一方法导致一种融合蛋白的表达，该融合蛋白包含与相应蛋白质结合的所述外壳蛋白的14个氨基酸残基。该融合蛋白的产量比当该外壳蛋白基因片段不存在于所述载体中时的蛋白质产量高。在两种方法中，基因可置于异源启动子如35S启动子的控制之下。

摘要： 本发明的芜菁花叶病毒外壳蛋白基因和黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因双价抗病载体pCam－TuMVCP－CMVCP是由潮霉素、NoS终止子NoSter、黄瓜花叶病毒CP基因(CMVCP)、35S启动子CaMV35Spro、35S启动子CaMV35Spro、芜菁花叶病毒CP基因(TuMVCP)、NoS终止子NoSter依次连接而成。把芜菁花叶病毒CP基因和黄瓜花叶病毒CP基因共同构建在同一个植物表达载体上，由于CP封闭了病毒基因组的脱壳过程，当入侵病毒的裸露核酸进入植物细胞后，它们立即被细胞中的自由CP所重新包裹，阻止了核酸的复制；CP限制了病毒粒体的扩展与转运，从而提高转基因植物的抗性。

摘要： 一种使用包含多个融合蛋白分子的病毒颗粒或病毒样颗粒纯化目的蛋白质的方法，所述融合蛋白包含下述融合蛋白结构域：(i)植物病毒外壳蛋白，(ii)重组蛋白，和(iii)任选地，连接所述植物病毒外壳蛋白和所述重组蛋白的肽接头，其中所述病毒颗粒的形成不需要游离的病毒外壳蛋白。

摘要： 本发明属于生物工程中的DNA重组技术领域。利用基因工程技术，将白色念珠菌热休克蛋白90表位基因片段(LKVIRK)插入到整合有丝状噬菌体主要外壳蛋白基因的载体中，构建成新的重组载体。在宿主菌中，表位基因产物被分泌到细胞外，并组装于噬菌体外壳蛋白中，形成杂合蛋白。1〕杂合蛋白可以作为一种抗原与患系统性白色念珠菌感染者血清中的抗体产生免疫应答。2〕杂合蛋白在小鼠体产生了较好的体液免疫和细胞免疫。3〕杂合蛋白在白色念珠菌感染模型鼠的免疫保护和预防实验中表现出保护作用。所以，这种杂合蛋白可以用来制备诊断、预防和治疗系统性白色念珠菌感染的药品。

摘要： 本发明公开了增加蛋白质产量的方法。一种方法包括通过将编码遍在蛋白的基因插入编码相应蛋白的基因的前面而制备一种载体,并将所述载体插入细胞。由此,一种融合蛋白将被表达,其包括遍在蛋白加上相应蛋白。遍在蛋白C端水解酶可裂解所述融合蛋白,使所需蛋白呈游离态。这一方法与不包含遍在蛋白基因作为载体的一部分的方法相比,使相应蛋白质的产量增加。遍在蛋白启动子对于获得这种增加的产量不是必需的并因此未使用。第二种方法非常类似,只是用编码黄瓜花叶病毒外壳蛋白的14个氨基酸的基因代替遍在蛋白基因插入相应蛋白质的前面。这一方法导致一种融合蛋白的表达,该融合蛋白包含与相应蛋白质结合的所述外壳蛋白的14个氨基酸残基。该融合蛋白的产量比当该外壳蛋白基因片段不存在于所述载体中时的蛋白质产量高。在两种方法中,基因可置于异源启动子如35S启动子的控制之下。

摘要： 本发明涉及植物基因工程与病毒诊断技术领域，具体涉及一种编码西瓜病毒A的外壳蛋白CP的核苷酸序列，具体如序列表中SEQ ID NO.20所示的核苷酸序列。并将该核苷酸序列克隆到原核表达载体上，转化大肠杆菌，经过蛋白表达纯化可得到WVA外壳蛋白CP；再以该蛋白为免疫原对模式动物进行免疫，得到效价高的抗体。本发明提供的抗体在西瓜病毒A检测中，可快速准确的检测西瓜、葫芦等感病样品中的病毒，从而建立快速、高效和高灵敏度的瓜类作物中西瓜病毒A检测鉴定体系，对于植物病毒病的早期监测、诊断和综合防治具有重要应用价值，也为后续西瓜病毒A致病机制研究奠定基础。

摘要： 本发明提供了一种建兰花叶病毒(CymMV)外壳蛋白基因原核表达蛋白及其制备和应用，所述原核表达蛋白具有SEQ ID No.1所示的氨基酸序列。该表达蛋白可直接作为抗原免疫动物进行抗血清制备，为CymMV检测提供制备特异抗体的原料，利用该原核表达蛋白作为抗原可以得到特异性强的抗血清，为进一步研制CymMV的快速检测试剂盒提供了基础。

摘要： 本发明提供了一种齿兰环斑病毒(ORSV)外壳蛋白基因原核表达蛋白及其制备和应用，所述原核表达蛋白具有SEQ ID No.1所示的氨基酸序列。该表达蛋白可直接作为抗原免疫动物进行抗血清制备，为ORSV检测提供制备特异抗体的原料，利用该原核表达蛋白作为抗原可以得到特异性强的抗血清，为进一步研制ORSV的快速检测试剂盒提供了基础。