SMMC-7721

摘要： 目的:探讨钙敏感受体(calcium-sensing receptor,CaSR)在3,3′-二吲哚甲烷(3,3′-diindolylmethane,DIM)对肝癌细胞增殖、迁移与侵袭影响中的作用。方法:采用不同浓度(0、20、40、60、80μmol/L)DIM分别处理人肝癌HepG2和SMMC-7721细胞24 h,采用MTT法检测肝癌细胞增殖能力,蛋白免疫印迹法检测CaSR蛋白表达,筛选合适的DIM浓度,Transwell法检测DIM对肝癌细胞迁移和侵袭能力的影响。另将HepG2和SMMC-7721细胞分为4组:对照组、60μmol/L DIM组、300μmol/L氯化钆(CaSR激动剂)组及氯化钆+DIM组(用300μmol/L氯化钆预处理细胞0.5 h,再与60μmol/L DIM共处理24 h),评价细胞增殖、CaSR蛋白表达以及细胞迁移和侵袭能力。结果:与对照组相比,60μmol/L和40μmol/L DIM处理后可分别显著抑制HepG2和SMMC-7721细胞增殖能力(P均<0.05),降低两株细胞CaSR蛋白表达量(P均<0.05);DIM抑制两株细胞迁移和侵袭能力呈效应剂量关系;与60μmol/L DIM组相比,300μmol/L氯化钆+60μmol/L DIM组细胞CaSR蛋白表达、增殖、迁移和侵袭能力均明显升高(P<0.05)。结论:激活CaSR可以缓解DIM引起的抗肝癌效应,提示CaSR可能是DIM抗肝癌作用的潜在靶点。

摘要： 目的探讨红花多糖(SPS)对人肝癌细胞凋亡和自噬的影响及潜在机制。方法以人肝癌细胞HepG2、SMMC-7721、Huh-7为研究对象,以SPS为干预药物,筛选敏感细胞、药物干预浓度及干预时间。以所选敏感细胞为对象,以不同浓度的SPS进行干预,观察其凋亡、迁移、克隆形成、形态、自噬发生情况,并检测其凋亡、自噬和磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白的表达情况。结果SPS可抑制人肝癌细胞HepG2等3种细胞的增殖,其对SMMC-7721细胞的半数抑制浓度显著低于其余2种细胞(P<0.05)。经低、中、高浓度(20、40、80μmol/L)SPS干预48 h后,SMMC-7721细胞凋亡较对照组有所增加,24、48 h的细胞迁移率(24 h的SPS低浓度组除外)和24 h的细胞克隆形成率均较对照组显著降低(P<0.05或P<0.01);与对照组比较,SPS各浓度组细胞数量均明显减少,自噬水平均有所提升,细胞中剪切的胱天蛋白酶3、胱天蛋白酶9、Bax、beclin-1蛋白的相对表达量和微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)与LC3Ⅰ的比值均显著升高,Bcl-2、p62、PI3K、mTOR、Akt蛋白的相对表达量均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论SPS可抑制人肝癌SMMC-7721细胞的增殖并诱导其凋亡、自噬,这种作用可能与抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。

摘要： 目的 研究蟾酥注射液对人肝癌SMMC-7721细胞增殖与凋亡的影响.方法 CCK-8法检测SMMC-7721细胞活力;DCFH-DA染色法检测SMMC-7721细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;荧光染色法观察SMMC-7721细胞线粒体膜电位变化;流式细胞术检测SMMC-7721细胞凋亡率.结果 蟾酥注射液明显抑制SMMC-7721细胞增殖,呈时间和浓度依赖性,作用24、48和72h后,半数抑制浓度(IC50)分别为2.60±0.01、2.00±0.10和1.57±0.17μg/L;ROS检测结果 显示不同浓度药物处理组细胞内ROS水平与对照组比较均明显升高(P=0.000);荧光染色观察到药物处理组细胞的绿色荧光随药物浓度增加而变强,红色荧光反而逐渐变弱;流式细胞术检测出SMMC-7721细胞经低、中、高浓度蟾酥注射液处理48h后,总凋亡率分别为17.33％ ±3.20％、25.60％ ±1.05％和35.76％ ±4.72％,与对照组比较,总凋亡率明显增加,呈浓度依赖性,差异有统计学意义(P<0.05).结论 蟾酥注射液能显著抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖,并诱导7721细胞凋亡.该凋亡可能与蟾酥注射液引起SMMC-7721细胞ROS水平增加、线粒体损伤以及膜电位下降有关.

摘要： 目的:研究奥利司他(orlistat)对肝癌SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响并探讨其作用机制.方法:运用CCK-8法检测不同浓度奥利司他对SMMC-7721细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测不同浓度奥利司他(10,20和40 μmol·L-1)对SMMC-7721细胞周期分布与凋亡的影响;运用Western Blot法检测奥利司他对SMMC-7721细胞中p-AKTThr308,p-AKTSer473,特异性周期蛋白-D1(Cyclin D1)及增殖细胞核抗原(PCNA)等增殖相关蛋白表达的影响;在AKT/c-Met过表达SMMC-7721细胞中进一步探讨奥利司他调控AKT信号通路抑制肝癌细胞恶性转化的作用机制.结果:奥利司他对SMMC-7721细胞增殖具有抑制作用且呈剂量依赖性;与对照组比较,不同浓度奥利司他(10,20和40 μmol· L-1)能够阻滞SMMC-7721细胞周期于G0/G1期,同时能够显著诱导SMMC-7721细胞凋亡,细胞凋亡率分别为(26.5±1.1)％,(31.8±1.6)％和(46.8±3.7)％;奥利司他能够显著降低SMMC-7721细胞中p-AKTThr308,p-AKTSer473,Cyclin D1,PCNA等蛋白的表达水平;在AKT/c-Met过表达SMMC-7721细胞中,奥利司他能够降低AKT磷酸化水平以及Cyclin D1,PCNA等增殖相关蛋白表达水平.结论:奥利司他能够抑制SMMC-7721细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与奥利司他抑制AKT及其下游增殖信号活化有关.

摘要： 目的 探讨NRF2PI3K通路介导肝癌细胞SMMC-7721出现索拉非尼耐药的机制研究.方法 建立肝癌细胞系SMMC-7721耐药细胞株SMMC-7721-SR,构建NRF2 siRNA转染肝癌细胞,并给与10μmol/L索拉非尼处理48 h.采用CCK-8法检测细胞活力,采用流式细胞仪检测细胞凋亡,Western blot检测NRF2、Keap1、ARE、p-PI3K和p-Akt蛋白表达水平.Real-Time PCR检测NRF2、Keap1、ARE、p-PI3K和p-Akt基因表达水平.结果 索拉非尼明显抑制肝癌细胞SMMC-7721的存活率,促进肝癌细胞SMMC-7721凋亡发生(P＜0.05).索拉非尼对SMMC-7721细胞促凋亡作用明显强于SMMC-7721-SR细胞(P＜0.05).SMMC-7721-SR细胞中NRF2蛋白水平及mRNA表达明显高于SMMC-7721细胞,Keap1、ARE、PI3K和Akt蛋白水平及mRNA表达明显增加(P＜0.05).索拉非尼明显上调SMMC-7721细胞中NRF2蛋白水平及mRNA表达(P＜0.05).抑制NRF2 mRNA表达并给予索拉非尼处理后,SMMC-7721-SR细胞存活率明显降低,凋亡率显著升高,Keap1、ARE、p-PI3K和p-Akt蛋白水平及mRNA表达明显降低(P＜0.05).结论 索拉非尼激活NRF2后诱导肝癌细胞SMMC-7721出现耐药;抑制NRF2可逆转肝癌细胞SMMC-7721对索拉非尼的耐药情况.

摘要： 目的:揭示miRNA-570在肝细胞癌进程中的作用及其潜在机制.方法:通过定量实时聚合酶链反应测定肝癌组织和细胞系中的miRNA-570水平.通过双重荧光素酶报告基因测定和Spearman相关性试验探索了miRNA-570和KLF9之间的相互作用.结果:肝癌组织和细胞株中miRNA-570表达上调.miRNA-570在HEPG2细胞中的过表达增强了活力、S期细胞比例,而miRNA-570在SMMC7721细胞中的敲低则呈现相反的趋势.证实KLF9是miRNA-570的直接靶标.肝癌组织中miRNA-570和KLF9的表达水平呈负相关.结论:MiRNA-570通过靶向KLF9刺激肝癌增殖.

摘要： 目的：研究Smac过表达联合氯化镉对人肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其相关机制.rn 方法：利用脂质体介导的方法将携带Smac基因的重组质粒pcDNA3.1+-hSmac转染入SMMC-7721,给予氯化镉处理后,采用MTT法检测Smac过表达联合氯化镉对细胞增殖的影响,AO/EB法和Annexin V/PI双荧光标记流式细胞术(flowcytometry,FCM)检测细胞凋亡,Western blot法检测细胞中caspase-3、caspase-9和细胞色素c(cyt c)蛋白的表达.rn 结果：与对照组相比,除空载体pcDNA3.1+组无差异外,其余各组细胞A490值均降低,抑制率均明显增加,差异具有显著性(P<0.01～P<0.001);单纯氯化镉组细胞抑制率随剂量增加而显著上升:分别与相应的单纯氯化镉组和pcDNA3.1+-hSmac组相比,氯化镉和Smac过表达联合组细胞的抑制率明显升高(P<0.001).pcDNA3.1+-hSmac组、30μmol/L氯化镉组及氯化镉和Smac过表达联合组细胞出现凋亡形态学改变,且后者最为明显。FCM结果显示;pcDNA3.1+-hSmac组细胞凋亡增加,分别与对照组和pcDNA3.1+组相比。差异均具有显著性(P<0.001).氯化镉和Smac过表达联合组细胞凋亡率最高,显著高于单纯30μmol/L氯化镉组(P<0.001) 且氯化镉和Smac过表达联合后,SMMC-7721细胞中caspase-3、caspese-9和cyt c明显增加,较单纯Smac过表达或30μmol/L氯化镉组高。rn 结论：氯化镉对SMMC-7721细胞具有毒性,可抑制细胞增殖,呈现剂量-效应关系,诱导细胞凋亡.Smac过表达可抑制SMMC-7721细胞增殖,诱导细胞凋亡,并可增强氯化镉对SMMC-7721细胞的增殖抑制和促凋亡作用,可能与细胞中caspase-3、-9和cytc的表达增加有关.

摘要： 目的：研究Smac过表达联合氯化镉对人肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其相关机制.rn 方法：利用脂质体介导的方法将携带Smac基因的重组质粒pcDNA3.1+-hSmac转染入SMMC-7721,给予氯化镉处理后,采用MTT法检测Smac过表达联合氯化镉对细胞增殖的影响,AO/EB法和Annexin V/PI双荧光标记流式细胞术(flowcytometry,FCM)检测细胞凋亡,Western blot法检测细胞中caspase-3、caspase-9和细胞色素c(cyt c)蛋白的表达.rn 结果：与对照组相比,除空载体pcDNA3.1+组无差异外,其余各组细胞A490值均降低,抑制率均明显增加,差异具有显著性(P<0.01～P<0.001);单纯氯化镉组细胞抑制率随剂量增加而显著上升:分别与相应的单纯氯化镉组和pcDNA3.1+-hSmac组相比,氯化镉和Smac过表达联合组细胞的抑制率明显升高(P<0.001).pcDNA3.1+-hSmac组、30μmol/L氯化镉组及氯化镉和Smac过表达联合组细胞出现凋亡形态学改变,且后者最为明显。FCM结果显示;pcDNA3.1+-hSmac组细胞凋亡增加,分别与对照组和pcDNA3.1+组相比。差异均具有显著性(P<0.001).氯化镉和Smac过表达联合组细胞凋亡率最高,显著高于单纯30μmol/L氯化镉组(P<0.001) 且氯化镉和Smac过表达联合后,SMMC-7721细胞中caspase-3、caspese-9和cyt c明显增加,较单纯Smac过表达或30μmol/L氯化镉组高。rn 结论：氯化镉对SMMC-7721细胞具有毒性,可抑制细胞增殖,呈现剂量-效应关系,诱导细胞凋亡.Smac过表达可抑制SMMC-7721细胞增殖,诱导细胞凋亡,并可增强氯化镉对SMMC-7721细胞的增殖抑制和促凋亡作用,可能与细胞中caspase-3、-9和cytc的表达增加有关.

摘要： 目的：研究Smac过表达联合氯化镉对人肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其相关机制.rn 方法：利用脂质体介导的方法将携带Smac基因的重组质粒pcDNA3.1+-hSmac转染入SMMC-7721,给予氯化镉处理后,采用MTT法检测Smac过表达联合氯化镉对细胞增殖的影响,AO/EB法和Annexin V/PI双荧光标记流式细胞术(flowcytometry,FCM)检测细胞凋亡,Western blot法检测细胞中caspase-3、caspase-9和细胞色素c(cyt c)蛋白的表达.rn 结果：与对照组相比,除空载体pcDNA3.1+组无差异外,其余各组细胞A490值均降低,抑制率均明显增加,差异具有显著性(P<0.01～P<0.001);单纯氯化镉组细胞抑制率随剂量增加而显著上升:分别与相应的单纯氯化镉组和pcDNA3.1+-hSmac组相比,氯化镉和Smac过表达联合组细胞的抑制率明显升高(P<0.001).pcDNA3.1+-hSmac组、30μmol/L氯化镉组及氯化镉和Smac过表达联合组细胞出现凋亡形态学改变,且后者最为明显。FCM结果显示;pcDNA3.1+-hSmac组细胞凋亡增加,分别与对照组和pcDNA3.1+组相比。差异均具有显著性(P<0.001).氯化镉和Smac过表达联合组细胞凋亡率最高,显著高于单纯30μmol/L氯化镉组(P<0.001) 且氯化镉和Smac过表达联合后,SMMC-7721细胞中caspase-3、caspese-9和cyt c明显增加,较单纯Smac过表达或30μmol/L氯化镉组高。rn 结论：氯化镉对SMMC-7721细胞具有毒性,可抑制细胞增殖,呈现剂量-效应关系,诱导细胞凋亡.Smac过表达可抑制SMMC-7721细胞增殖,诱导细胞凋亡,并可增强氯化镉对SMMC-7721细胞的增殖抑制和促凋亡作用,可能与细胞中caspase-3、-9和cytc的表达增加有关.

摘要： 目的：研究Smac过表达联合氯化镉对人肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其相关机制.rn 方法：利用脂质体介导的方法将携带Smac基因的重组质粒pcDNA3.1+-hSmac转染入SMMC-7721,给予氯化镉处理后,采用MTT法检测Smac过表达联合氯化镉对细胞增殖的影响,AO/EB法和Annexin V/PI双荧光标记流式细胞术(flowcytometry,FCM)检测细胞凋亡,Western blot法检测细胞中caspase-3、caspase-9和细胞色素c(cyt c)蛋白的表达.rn 结果：与对照组相比,除空载体pcDNA3.1+组无差异外,其余各组细胞A490值均降低,抑制率均明显增加,差异具有显著性(P<0.01～P<0.001);单纯氯化镉组细胞抑制率随剂量增加而显著上升:分别与相应的单纯氯化镉组和pcDNA3.1+-hSmac组相比,氯化镉和Smac过表达联合组细胞的抑制率明显升高(P<0.001).pcDNA3.1+-hSmac组、30μmol/L氯化镉组及氯化镉和Smac过表达联合组细胞出现凋亡形态学改变,且后者最为明显。FCM结果显示;pcDNA3.1+-hSmac组细胞凋亡增加,分别与对照组和pcDNA3.1+组相比。差异均具有显著性(P<0.001).氯化镉和Smac过表达联合组细胞凋亡率最高,显著高于单纯30μmol/L氯化镉组(P<0.001) 且氯化镉和Smac过表达联合后,SMMC-7721细胞中caspase-3、caspese-9和cyt c明显增加,较单纯Smac过表达或30μmol/L氯化镉组高。rn 结论：氯化镉对SMMC-7721细胞具有毒性,可抑制细胞增殖,呈现剂量-效应关系,诱导细胞凋亡.Smac过表达可抑制SMMC-7721细胞增殖,诱导细胞凋亡,并可增强氯化镉对SMMC-7721细胞的增殖抑制和促凋亡作用,可能与细胞中caspase-3、-9和cytc的表达增加有关.

摘要： 目的：研究Smac过表达联合氯化镉对人肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其相关机制.rn 方法：利用脂质体介导的方法将携带Smac基因的重组质粒pcDNA3.1+-hSmac转染入SMMC-7721,给予氯化镉处理后,采用MTT法检测Smac过表达联合氯化镉对细胞增殖的影响,AO/EB法和Annexin V/PI双荧光标记流式细胞术(flowcytometry,FCM)检测细胞凋亡,Western blot法检测细胞中caspase-3、caspase-9和细胞色素c(cyt c)蛋白的表达.rn 结果：与对照组相比,除空载体pcDNA3.1+组无差异外,其余各组细胞A490值均降低,抑制率均明显增加,差异具有显著性(P<0.01～P<0.001);单纯氯化镉组细胞抑制率随剂量增加而显著上升:分别与相应的单纯氯化镉组和pcDNA3.1+-hSmac组相比,氯化镉和Smac过表达联合组细胞的抑制率明显升高(P<0.001).pcDNA3.1+-hSmac组、30μmol/L氯化镉组及氯化镉和Smac过表达联合组细胞出现凋亡形态学改变,且后者最为明显。FCM结果显示;pcDNA3.1+-hSmac组细胞凋亡增加,分别与对照组和pcDNA3.1+组相比。差异均具有显著性(P<0.001).氯化镉和Smac过表达联合组细胞凋亡率最高,显著高于单纯30μmol/L氯化镉组(P<0.001) 且氯化镉和Smac过表达联合后,SMMC-7721细胞中caspase-3、caspese-9和cyt c明显增加,较单纯Smac过表达或30μmol/L氯化镉组高。rn 结论：氯化镉对SMMC-7721细胞具有毒性,可抑制细胞增殖,呈现剂量-效应关系,诱导细胞凋亡.Smac过表达可抑制SMMC-7721细胞增殖,诱导细胞凋亡,并可增强氯化镉对SMMC-7721细胞的增殖抑制和促凋亡作用,可能与细胞中caspase-3、-9和cytc的表达增加有关.

摘要： 目的：研究Smac过表达联合氯化镉对人肝癌细胞SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其相关机制.rn 方法：利用脂质体介导的方法将携带Smac基因的重组质粒pcDNA3.1+-hSmac转染入SMMC-7721,给予氯化镉处理后,采用MTT法检测Smac过表达联合氯化镉对细胞增殖的影响,AO/EB法和Annexin V/PI双荧光标记流式细胞术(flowcytometry,FCM)检测细胞凋亡,Western blot法检测细胞中caspase-3、caspase-9和细胞色素c(cyt c)蛋白的表达.rn 结果：与对照组相比,除空载体pcDNA3.1+组无差异外,其余各组细胞A490值均降低,抑制率均明显增加,差异具有显著性(P<0.01～P<0.001);单纯氯化镉组细胞抑制率随剂量增加而显著上升:分别与相应的单纯氯化镉组和pcDNA3.1+-hSmac组相比,氯化镉和Smac过表达联合组细胞的抑制率明显升高(P<0.001).pcDNA3.1+-hSmac组、30μmol/L氯化镉组及氯化镉和Smac过表达联合组细胞出现凋亡形态学改变,且后者最为明显。FCM结果显示;pcDNA3.1+-hSmac组细胞凋亡增加,分别与对照组和pcDNA3.1+组相比。差异均具有显著性(P<0.001).氯化镉和Smac过表达联合组细胞凋亡率最高,显著高于单纯30μmol/L氯化镉组(P<0.001) 且氯化镉和Smac过表达联合后,SMMC-7721细胞中caspase-3、caspese-9和cyt c明显增加,较单纯Smac过表达或30μmol/L氯化镉组高。rn 结论：氯化镉对SMMC-7721细胞具有毒性,可抑制细胞增殖,呈现剂量-效应关系,诱导细胞凋亡.Smac过表达可抑制SMMC-7721细胞增殖,诱导细胞凋亡,并可增强氯化镉对SMMC-7721细胞的增殖抑制和促凋亡作用,可能与细胞中caspase-3、-9和cytc的表达增加有关.

摘要： 在长期载人航天中，除失重外，空间辐射尤其是重离子辐射，对人体是一个严重的威胁。利用地面模拟技术和装置进行空间辐射危害及防护研究，能大大提高空间辐射生物效应研究的有效性和成功率。而另一方面，利用重离子辐射治疗肿瘤具有一系列独特的物理学和生物学优势。许多天然抗氧化剂，对各种电离辐射具有一定的防护作用，且大多数毒性小、有效剂量范围广，适合于长期服用。因此，研制和筛选高效低副作用的辐射防护剂，对空间环境下辐射损伤的防护和救治，以及探讨天然抗氧化剂在重离子治癌中的辅助作用，具有重要的实际意义。

摘要： 在长期载人航天中，除失重外，空间辐射尤其是重离子辐射，对人体是一个严重的威胁。利用地面模拟技术和装置进行空间辐射危害及防护研究，能大大提高空间辐射生物效应研究的有效性和成功率。而另一方面，利用重离子辐射治疗肿瘤具有一系列独特的物理学和生物学优势。许多天然抗氧化剂，对各种电离辐射具有一定的防护作用，且大多数毒性小、有效剂量范围广，适合于长期服用。因此，研制和筛选高效低副作用的辐射防护剂，对空间环境下辐射损伤的防护和救治，以及探讨天然抗氧化剂在重离子治癌中的辅助作用，具有重要的实际意义。

摘要： 在长期载人航天中，除失重外，空间辐射尤其是重离子辐射，对人体是一个严重的威胁。利用地面模拟技术和装置进行空间辐射危害及防护研究，能大大提高空间辐射生物效应研究的有效性和成功率。而另一方面，利用重离子辐射治疗肿瘤具有一系列独特的物理学和生物学优势。许多天然抗氧化剂，对各种电离辐射具有一定的防护作用，且大多数毒性小、有效剂量范围广，适合于长期服用。因此，研制和筛选高效低副作用的辐射防护剂，对空间环境下辐射损伤的防护和救治，以及探讨天然抗氧化剂在重离子治癌中的辅助作用，具有重要的实际意义。

摘要： 在长期载人航天中，除失重外，空间辐射尤其是重离子辐射，对人体是一个严重的威胁。利用地面模拟技术和装置进行空间辐射危害及防护研究，能大大提高空间辐射生物效应研究的有效性和成功率。而另一方面，利用重离子辐射治疗肿瘤具有一系列独特的物理学和生物学优势。许多天然抗氧化剂，对各种电离辐射具有一定的防护作用，且大多数毒性小、有效剂量范围广，适合于长期服用。因此，研制和筛选高效低副作用的辐射防护剂，对空间环境下辐射损伤的防护和救治，以及探讨天然抗氧化剂在重离子治癌中的辅助作用，具有重要的实际意义。

摘要： 本发明公开了一种可用于检测人肝癌细胞株SMMC-7721的核酸适体，包括序列1～序列5中所示的DNA片段，还包括该核酸序列的一系列衍生物。本发明核酸适体的筛选方法包括以下步骤：首先合成随机单链DNA文库和引物，然后Cell-SELEX获得人肝癌细胞株SMMC-7721特异核酸适体，PCR扩增文库，制备DNA单链文库，然后经过重复筛选、阴性筛选、多轮筛选等步骤后，得到可用于检测人肝癌细胞株SMMC-7721的核酸适体。本发明的核酸适体可在识别人肝癌细胞株SMMC-7721或者制备检测人肝癌细胞株SMMC-7721的试剂盒中应用，具有特异性强、无免疫原性、分子量小、稳定、易于保存和标记等优点。

摘要： 本发明公开了一种细胞组合物，以及该细胞组合物在癌细胞SMMC‑7721及肝癌上的应用。具体涉及γδT细胞和NK细胞共培养细胞系及PD‑1/PD‑L1单抗和/或双特异性抗体，且细胞组合物中的γδT细胞和NK细胞通过共培养方式获得，先刺激诱导单个核细胞扩增为γδT细胞和NK细胞，后通过活化扩增培养，扩增出具有数量大、扩增倍数高、细胞毒性强等特点的γδT细胞和NK细胞复合细胞物，扩增培养后的γδT‑NK细胞与PD‑1/PD‑L1单抗和/或双特异性抗体混合形成细胞组合物，组合物SMMC‑7721杀伤作用强。且该组合物制备方法提高细胞培养效率，大幅度降低培养成本，也降低了培养技术难度，简化了在临床中治疗过程，也降低了治疗成本，简化了治疗手段。

摘要： 本发明公开了一种青蒿素在制备治疗c‑myc/mTOR激活的人肝癌SMMC7721细胞的药物中的应用，其青蒿素是从复合花序植物黄花蒿茎叶中提取的有过氧基团的倍半萜内酯的一种无色针状晶体。在本发明中，首次发现青蒿素对人肝癌SMMC7721细胞具有增殖抑制作用，并呈现良好的时间和浓度依赖性，青蒿素能够通过抑制c‑myc/mTOR通路的P‑c‑myc、P‑S6的表达，进而诱导人肝癌SMMC7721细胞的凋亡；因此，青蒿素可作为诱导人肝癌SMMC7721细胞凋亡候选药物进行研究和开发。

摘要： 本发明公开一种ALDH18A1低表达的SMMC7721细胞系的构建方法。具体采用shRNA干扰技术构建ALDH18A1稳定低表达的SMMC7721细胞系。经过获得ALDH18A1shRNA重组质粒、包装病毒，然后对病毒感染后的细胞进行嘌呤霉素筛选，传代，建立稳定低表达的SMMC7721‑ALDH18A1KD细胞系，最终获得阳性重组细胞系，能够低表达ALDH18A1。ALDH18A1稳定低表达的SMMC7721细胞系可作为理想的模型来进行ALDH18A1参与的肿瘤发生发展机制的研究。

摘要： 本发明公开了一种可用于检测人肝癌细胞株SMMC-7721的核酸适体，包括序列1～序列5中所示的DNA片段，还包括该核酸序列的一系列衍生物。本发明核酸适体的筛选方法包括以下步骤：首先合成随机单链DNA文库和引物，然后Cell-SELEX获得人肝癌细胞株SMMC-7721特异核酸适体，PCR扩增文库，制备DNA单链文库，然后经过重复筛选、阴性筛选、多轮筛选等步骤后，得到可用于检测人肝癌细胞株SMMC-7721的核酸适体。本发明的核酸适体可在识别人肝癌细胞株SMMC-7721或者制备检测人肝癌细胞株SMMC-7721的试剂盒中应用，具有特异性强、无免疫原性、分子量小、稳定、易于保存和标记等优点。

摘要： 本发明公开了一种ERα36缺陷型SMMC-7721稳定转染细胞株的构建方法，具体是将SEQID NO：1和SEQ ID NO：2的核苷酸序列片段，插入含GFP绿色荧光的pRNAT-U6.1/Neo表达载体，再转入SMMC-7721细胞株，在SMMC-7721细胞中表达shRNA，经阳性细胞克隆筛选后，得到SMMC-7721/Sh36细胞株，使得siRNA靶向沉默了内源性ERα36的表达量30％以上，且95％以上的细胞表达绿色荧光蛋白的稳定转染细胞。这一细胞模型可用于研究ERα36与肝癌的相关性及其机理；也可用于研究雌激素在肝癌细胞中的信号传导通路；及作为研究雌激素的膜受体信号通路的细胞模型。

摘要： 本发明公开一种Cav-1低表达的SMMC-7721KD细胞系的构建方法。具体采用Cav-1SiRNA干扰技术构建Cav-1稳定低表达的SMMC-7721KD细胞系。经过设计引物、扩增目的片段，构建Cav-1SiRNA重组质粒，进行质粒转染，然后对转染后的细胞进行博莱霉素筛选，传代，建立稳定低表达的SMMC-7721KD细胞系，最终获得阳性重组细胞系，能够沉默SMMC-7721细胞中Cav-1的表达80％左右，并且Cav-1稳定低表达。Cav-1稳定低表达的SMMC-7721细胞系可作为模型，进行Cav-1参与的一些肿瘤细胞的研究，Cav-1与肝癌的相关性及其机理研究。

摘要： 本实用新型公开了一种七七五电机用清洁钩，属于商用工具。包括塑料、公魔术粘，其特征是：可以兼容D轴七七五电机，同时，可以兼容各种类型、材质的抹布，还可以兼容各种类型、材质的清洁布，其主体直径大小略小于透明玻璃杯，使其可以用于玻璃杯内部的清洁以及特种餐具的清洁，提升了七七五电机用作餐饮行业人操电动清洁设备的实用性以及性价比，满足人们对于人操电动餐饮清洁设备的实用性以及兼容性需求。本实用新型方便实用、量产成本低、制造简单、耗材兼容性强。