Shh信号通路

摘要： 背景:神经病理性疼痛的发病机制复杂,病理过程繁多,miR-132在神经病理性疼痛传导通路中异常表达,影响疼痛的发生、发展过程。目的:探讨miR-132-3p在慢性压迫性神经损伤小鼠神经性疼痛中所发挥的作用及机制。方法:①小鼠小胶质细胞BV2经100μg/L脂多糖刺激建立活化模型,采用Western blot检测小胶质细胞激活标记物IBA1的表达,RT-qPCR检测miR-132-3p的表达。将miR-132-3p mimic或inhibitor分别转染至BV2细胞,采用Western blot检测IBA1以及P2X4R的表达。预测并验证miR-132-3p的靶向调节作用,将Ptch1表达载体pcDNA-Ptch1或si-Ptch1转染BV2细胞24 h后用脂多糖刺激培养24 h,采用Western blot检测IBA1、P2X4R以及Shh信号通路标记蛋白的表达。BV2细胞共转染miR-132-3p-mimic和pcDNA-Ptch124 h后用脂多糖刺激培养24 h,采用Western blot检测上述蛋白的表达。②30只C57BL/6小鼠随机分为对照组(n=6),假手术组(n=6),模型组(n=6),NC-mimic组(n=6),miR-132-3p-mimic组(n=6),后两组经鞘内注射NC-mimic和miR-132-3p-mimic,检测各组小鼠机械缩足反射阈值和热阈值,行为学检测后取背根神经节,采用RT-qPCR检测miR-132-3p的表达,Western blot检测Ptch1、P2X4R和Shh通路标记蛋白的表达,进一步验证miR-132-3p在慢性压迫性神经损伤小鼠神经性疼痛中发挥的作用及机制。结果与结论:①与对照组比较,脂多糖刺激促进BV2细胞的激活(P<0.05),下调miR-132-3p的表达(P<0.05);②miR-132-3p通过靶向调节Ptch1抑制Shh信号通路的激活,并进一步抑制BV2细胞的激活以及P2X4R的表达,过表达Ptch1可以逆转miR-132-3p-mimic的作用(P<0.05);③成功建立慢性压迫性神经损伤模型,与注射NC-mimic组相比,鞘内注射miR-132-3p-mimic下调Ptch1的表达(P<0.05),抑制Shh信号通路的激活(P<0.05),减少P2X4R的表达(P<0.05),并显著提高慢性压迫性神经损伤小鼠的机械缩足反射阈值和热阈值(P<0.01);④结果表明,miR-132-3p通过靶向调节Ptch1抑制Shh信号通路的激活,减轻慢性压迫性神经损伤小鼠的神经性疼痛。

摘要： 神经元进行性丢失和退化,以及神经前体细胞产生新神经元不足是多种神经退行性疾病的共同病理特征。Sonic hedgehog(Shh)信号可调控神经干细胞增殖分化,促进神经前体细胞分化、神经元再生,引导神经元自我修复。该文通过综述Shh信号在阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)、帕金森病(Parkinson’s disease, PD)、亨廷顿病(Huntington’s disease, HD)中参与神经元分化与再生的作用机制,探讨有效激活Shh信号促进神经元分化与再生的可能途径,提出防治神经退行性疾病的新思路。

摘要： 肺发育过程中的信号通路主要有Wingless/Integrated(WNT)、转化生长因子-β、SonicHedgehog(SHH)信号通路等。WNT信号传导通路调节胎肺上皮和间质细胞的发育,可通过自分泌、旁分泌机制被调控。TGF-β家族均在胎肺中表达,它们在肺发育过程抑制肺芽分支、上皮细胞分化以及表面活性物质合成从而影响肺发育。SHH则在肺芽远端上皮表达,它诱导胎肺成纤维质细胞的增殖,参与调控胚胎细支气管的形成及细化。而FGF10是肺发育调控网络的核心,可与胎儿呼吸道上皮细胞中的受体FGF2RⅢb结合,启动FGF相关的信号传导通路,调控肺泡细胞的增殖、分化;FGF10还可通过自分泌调控肺间充质细胞的分化。哮喘、慢性阻塞性肺疾病(COPD)和肺纤维化等发育源性肺疾病的发病可能与肺发育密切相关。孕期不良环境暴露,如尼古丁可导致出生后儿童体内炎症介质基因、TGF-β等肺发育相关调控基因异常甲基化,气道出现慢性炎症,气道反应性增高,导致子代肺间质增厚、胶原沉积增加,从而促使成年后哮喘、COPD和肺纤维化的易感或发生发展。

摘要： 目的探讨半夏泻心汤对胃癌细胞来源外泌体诱导骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖、迁移、侵袭的影响。方法荧光染料1,1′-双十八烷基-3,3,3′,3′-四甲基吲哚羰花青高氯酸盐(Dil)标记胃癌细胞来源外泌体,制备半夏泻心汤含药血清。实验分为空白组,模型组,半夏泻心汤低、中、高剂量组及Shh阻断剂组,各组上室加入BMSCs细胞悬液,下室加入无外泌体血清的培养基,除空白组外其他各组下室加入胃癌细胞来源外泌体,模型组及空白组上室加入含10%正常对照血清,半夏泻心汤低、中、高剂量组上室内加入含10%半夏泻心汤低、中、高剂量含药血清,Shh阻断剂组上室加入含20μmol/L GANT61(Shh信号通路阻断剂)的10%空白血清。激光共聚焦显微镜观察BMSCs对胃癌细胞来源外泌体的摄取,MTT法检测各组BMSCs增殖率,Transwell小室检测BMSCs迁移、侵袭能力,Western blot检测Shh、Ptch1、Smo、Gli1、c-Myc蛋白表达。结果与空白组比较,模型组BMSCs内红色荧光标记平均光密度值(MOD)、细胞增殖率、细胞迁移、侵袭能力及Shh、Ptch1、Smo、Gli1、c-Myc蛋白表达升高(P<0.05),半夏泻心汤各剂量组各指标均下降,以高剂量组更明显(P<0.05)。结论半夏泻心汤可干预BMSCs对胃癌细胞来源外泌体的摄取,下调c-Myc蛋白及Shh信号通路Shh、Ptch1、Smo、Gli1蛋白表达,抑制胃癌细胞来源外泌体诱导的BMSCs增殖、迁移、侵袭。

摘要： 初级纤毛是以微管为基础的细胞器,可感知细胞外机械和化学信号变化,并通过介导多种分子信号通路将信息传导至细胞内,在发育、细胞迁移和细胞分化过程中,扮演着重要角色。近年来有研究发现,小鼠胚胎腭突上皮和间充质细胞上存在初级纤毛,并且,初级纤毛自身及其传递的信号因子与腭发育密切相关。因此本文将近年来针对初级纤毛及相关信号通路导致腭发育异常机制的研究进展作一综述,以期为唇腭裂这一领域的研究者提供新的思考。

摘要： 目的 探讨SHH信号通路激活对大鼠心脏微血管内皮细胞(CMECs)缺血再灌注损伤后促血管再生的作用及其潜在机制.方法 2016年7月—2017年2月于青岛大学附属烟台毓璜顶医院进行实验.原代培养SD雄性大鼠CMECs,建立氧糖剥夺/复氧(OGD/R)模拟体外缺血再灌注损伤模型,给予外源性重组人SHH蛋白、Cyclopamine(CYC)处理,应用MTT法检测CMECs细胞活力,应用ELISA和RT-PCR方法检测血管新生因子(VEGF、FGF、Ang-1)水平和mRNA表达水平;应用Western-blot方法分别检测SHH信号通路靶分子(SHH、SMO、Patched-1、Gli-1、Gli-2)蛋白表达水平.结果 (1)与C组比较,正常氧糖条件下C+SHH组活力增加(P<0.05),但C+CYC组消减(P<0.05);当细胞在OGD/R条件下,OGD组CMECs活力与C组比较减弱(P<0.05),而OGD+SHH组与OGD组比较细胞活力增加(P<0.05);但OGD+CYC显著消减(P<0.05).(2)与C组比较,正常氧糖条件下C+SHH组血管新生因子VEGF、FGF、Ang-1水平和mRNA表达增加(P<0.01),但C+CYC组上述指标水平和mRNA表达下降(P<0.01);与C组比较,OGD组VEGF、FGF、Ang-1血清水平和mRNA表达显著降低(P<0.01);OGD+SHH组VEGF、FGF、Ang-1血清水平和mRNA表达显著增加(P<0.01),OGD+CYC组上述指标水平和mRNA表达下降(P<0.05).(3)与OGD组比较,OGD+SHH组在OGD/R条件下,SHH信号通路中靶分子SHH、SMO、Patched-1、Gli-1和Gli-2蛋白表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),但OGD+CYC组SHH信号通路靶分子蛋白表达水平下降(P<0.01).结论 SHH信号通路激活可增强细胞活力,上调血管新生因子VEGF、FGF和Ang-1的表达,在缺血再灌注损伤后血管再生过程中发挥重要作用.

摘要： 目的 观察半夏泻心汤对骨髓间充质干细胞(BMSCs)外泌体诱导的人胃癌细胞BGC-823增殖的影响,探讨其相关作用机制.方法 利用Transwell小室将BMSCs外泌体与BGC-823细胞进行非接触共培养,实验分为空白组、模型组、阳性对照组和半夏泻心汤高、中、低剂量组,荧光染料Dil标记BMSCs外泌体,激光共聚焦显微镜观察BGC-823细胞对BMSCs外泌体的摄取,计算平均光密度(MOD);实时无标记细胞分析技术检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞周期;RT-qPCR检测Shh、Ptch1、Smo、Gli1及C-myc mRNA的表达.结果 与空白组比较,模型组细胞内可见大量红色荧光标记,MOD值显著增加(P<0.05);模型组20～50 h细胞指数(CI)显著增加(P<0.05),G1、G2期细胞比例降低,S期细胞比例升高(P<0.05),Shh、Smo、Ptch1、Gli1及C-myc mRNA表达显著升高(P<0.05);与模型组比较,半夏泻心汤各剂量组红色荧光标记减弱,其中半夏泻心汤高、中剂量组MOD值明显减少(P<0.05),半夏泻心汤各剂量组20～50 h CI显著减少(P<0.05),G1、G2期细胞比例升高,S期细胞比例降低(P<0.05),Shh、Smo、Ptch1、Gli1及C-myc mRNA表达显著降低(P<0.05).结论 半夏泻心汤可抑制BMSCs外泌体诱导的BGC-823细胞增殖,其机制可能与下调Shh、Smo、Ptch1、Gli1及C-myc mRNA表达,抑制Shh信号通路有关.

摘要： 目的:观察"百会"透"曲鬓"针刺法对脑出血大鼠出血半暗带神经细胞凋亡的影响及Shh信号通路在此过程发挥的作用.方法:健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、模型+针刺组(针刺组)、模型+激动剂组(激动剂组)、模型+非经非穴组(非经非穴组),每组各15只.将50 μL自体血注入右脑尾状核复制脑出血模型(假手术组以同剂量生理盐水代替),随后每日1次"百会"透"曲鬓"针刺治疗.连续干预5 d后,Bederson神经功能评分观察大鼠神经功能恢复,HE染色观察出血半暗带病理损伤,TUNEL检测凋亡神经细胞,Western blot检测Shh通路Smo、Gli1蛋白表达.结果:针刺可明显促进脑出血大鼠神经功能恢复,改善出血半暗带病理损伤,下调该区凋亡细胞率,并促进Smo、Gli1蛋白表达.结论:"百会"透"曲鬓"针刺法可明显促进脑出血大鼠神经功能恢复,这可能与其激活Shh通路,继而抑制脑出血半暗带区神经细胞凋亡有关.

摘要： 如今空气污染问题仍广泛存在,其中苯并芘(Benzo(a)pyrene,BaP)是一种常见的空气污染物,对人和动物的健康具有严重影响.据报道,BaP可以显著降低卵母细胞IVM(卵母细胞体外成熟)能力,但机制尚不清楚.因此,本研究在猪卵母细胞IVM培养液中添加不同浓度BaP(50μM、100μM、200μM)检测其对卵母细胞IVM能力的影响,并检测此过程SHH信号通路相关基因和蛋白的表达.结果显示50μM BaP处理组卵母细胞IVM能力显著低于对照组(76.5 vs 68.1,P<0.05),并随着BaP浓度增加进一步下降.同时,qPCR和免疫荧光染色检测发现,50μM BaP处理组卵母细胞中SHH信号通路相关基因mRNA和蛋白表达量,均显著低于对照组(P<0.05).因此,本研究初步证明BaP可能通过破坏SHH信号通路降低猪卵母细胞IVM能力.

摘要： 目的:研究苦参素对胰腺癌增殖和侵袭能力的影响及机制.方法:在体外培养胰腺癌细胞株,不同浓度的苦参素在不同时间点干预胰腺癌细胞,在现象层面,应用MTT法检测胰腺癌细胞的增殖能力;应用Transwell小室检测细胞的侵袭能力.在机制层面,应用Real time PCR和Western blot在转录水平和蛋白水平检测程度,并通过基因转染技术构建高表达 sHH 的胰腺癌细胞株,进一步验证苦参素对胰腺癌增殖和侵袭能力的影响及 sHH 通路的作用.结果:高浓度组(40 μmol/L)苦参素与低浓度组(20 μmol/L)相比,明显抑制胰腺癌细胞的增殖和侵袭能力.在mRNA和蛋白水平,苦参素可明显抑制肿瘤细胞sHH 信号通路,降低sHH(P＜0.05)和 GLI-1 的表达水平(P＜0.05).构建高表达 sHH 的胰腺癌细胞株Panc-1-sh-sHH,苦参素对胰腺癌细胞增殖和侵袭能力的抑制程度明显强于高表达 sHH 的胰腺癌细胞Panc-1-sh-sHH.结论:苦参素通过抑制 sHH 信号通路,减弱胰腺癌细胞增殖和侵袭能力.

摘要： 拟探讨通过激活及抑制Sonic Hedgehog信号通路,观察对坐骨神经分支选择性损伤(spared nerve injury,SNI)大鼠的痛敏改变及检测Shh信号通路相关蛋白改变及脊髓水平炎性因子IL-1β及TNF-α变化,并探讨三者之间关联及可能机制.

摘要： 拟探讨通过激活及抑制Sonic Hedgehog信号通路,观察对坐骨神经分支选择性损伤(spared nerve injury,SNI)大鼠的痛敏改变及检测Shh信号通路相关蛋白改变及脊髓水平炎性因子IL-1β及TNF-α变化,并探讨三者之间关联及可能机制.

摘要： 拟探讨通过激活及抑制Sonic Hedgehog信号通路,观察对坐骨神经分支选择性损伤(spared nerve injury,SNI)大鼠的痛敏改变及检测Shh信号通路相关蛋白改变及脊髓水平炎性因子IL-1β及TNF-α变化,并探讨三者之间关联及可能机制.

摘要： 拟探讨通过激活及抑制Sonic Hedgehog信号通路,观察对坐骨神经分支选择性损伤(spared nerve injury,SNI)大鼠的痛敏改变及检测Shh信号通路相关蛋白改变及脊髓水平炎性因子IL-1β及TNF-α变化,并探讨三者之间关联及可能机制.

摘要： 拟探讨通过激活及抑制Sonic Hedgehog信号通路,观察对坐骨神经分支选择性损伤(spared nerve injury,SNI)大鼠的痛敏改变及检测Shh信号通路相关蛋白改变及脊髓水平炎性因子IL-1β及TNF-α变化,并探讨三者之间关联及可能机制.

摘要： 拟探讨通过激活及抑制Sonic Hedgehog信号通路,观察对坐骨神经分支选择性损伤(spared nerve injury,SNI)大鼠的痛敏改变及检测Shh信号通路相关蛋白改变及脊髓水平炎性因子IL-1β及TNF-α变化,并探讨三者之间关联及可能机制.

摘要： 颌面部的形态发生是一个复杂的发育过程，正常的颌面发育常常是多种机制精准的时空表达和相互作用的综合结果。过去的研究表明，TGFβ信号通路和Sonic hedgehog（Shh）信号通路在胚胎颌面部的发育、肿瘤的发生过程中均起到了重要作用。胚胎发育过程中，TGFβ、Shh信号通路中相关因子的异常可导致包括唇腭裂在内的多种颌面发育异常。两通路在肿瘤的发生发展过程中的相互作用已得到证实和广泛研究，但是它们在腭部发育过程中的相互作用关系仍不明确。本研究拟探讨TGFβ和Shh信号通路在小鼠腭部发育过程中，各相关基因表达的相互作用，讨论TGFβ和Shh信号通路在腭部发育和腭裂发生中的作用机制，从而为腭裂的产前诊断和预防提供线索。

摘要： 颌面部的形态发生是一个复杂的发育过程，正常的颌面发育常常是多种机制精准的时空表达和相互作用的综合结果。过去的研究表明，TGFβ信号通路和Sonic hedgehog（Shh）信号通路在胚胎颌面部的发育、肿瘤的发生过程中均起到了重要作用。胚胎发育过程中，TGFβ、Shh信号通路中相关因子的异常可导致包括唇腭裂在内的多种颌面发育异常。两通路在肿瘤的发生发展过程中的相互作用已得到证实和广泛研究，但是它们在腭部发育过程中的相互作用关系仍不明确。本研究拟探讨TGFβ和Shh信号通路在小鼠腭部发育过程中，各相关基因表达的相互作用，讨论TGFβ和Shh信号通路在腭部发育和腭裂发生中的作用机制，从而为腭裂的产前诊断和预防提供线索。

摘要： 颌面部的形态发生是一个复杂的发育过程，正常的颌面发育常常是多种机制精准的时空表达和相互作用的综合结果。过去的研究表明，TGFβ信号通路和Sonic hedgehog（Shh）信号通路在胚胎颌面部的发育、肿瘤的发生过程中均起到了重要作用。胚胎发育过程中，TGFβ、Shh信号通路中相关因子的异常可导致包括唇腭裂在内的多种颌面发育异常。两通路在肿瘤的发生发展过程中的相互作用已得到证实和广泛研究，但是它们在腭部发育过程中的相互作用关系仍不明确。本研究拟探讨TGFβ和Shh信号通路在小鼠腭部发育过程中，各相关基因表达的相互作用，讨论TGFβ和Shh信号通路在腭部发育和腭裂发生中的作用机制，从而为腭裂的产前诊断和预防提供线索。

摘要： 颌面部的形态发生是一个复杂的发育过程，正常的颌面发育常常是多种机制精准的时空表达和相互作用的综合结果。过去的研究表明，TGFβ信号通路和Sonic hedgehog（Shh）信号通路在胚胎颌面部的发育、肿瘤的发生过程中均起到了重要作用。胚胎发育过程中，TGFβ、Shh信号通路中相关因子的异常可导致包括唇腭裂在内的多种颌面发育异常。两通路在肿瘤的发生发展过程中的相互作用已得到证实和广泛研究，但是它们在腭部发育过程中的相互作用关系仍不明确。本研究拟探讨TGFβ和Shh信号通路在小鼠腭部发育过程中，各相关基因表达的相互作用，讨论TGFβ和Shh信号通路在腭部发育和腭裂发生中的作用机制，从而为腭裂的产前诊断和预防提供线索。

摘要： 本发明公开了一种Shh信号通路抑制剂的新用途。本发明所提供的Shh信号通路抑制剂的新用途具体为Shh信号通路抑制剂在制备治疗常染色体显性遗传性多囊肾(ADPKD)的产品中的应用；所述Shh信号通路抑制剂具体为Vismodegib。本发明以Vil‑Cre:Pkd2

摘要： SHH/Lmx1a信号通路调控NTN修饰的rASCs分化多巴胺能神经元的方法，属于生物医学方法。本发明通过PCR分别获得Lmx1a基因和嵌合NTN基因的编码序列，经同源重组在HEK-293细胞中分别包装重组腺病毒Ad-Lmx1a和Ad-NTN。再将Ad-Lmx1a感染rASCs，用SHH/FGF-8等细胞因子将rASCs诱导至待命状态，再感染Ad-NTN，加入B27，N2 supplement，bFGF等诱导剂。本发明显著提高rASCs向神经元细胞分化的潜能，相关转录因子能应用于帕金森氏病的未来细胞替代治疗中。

摘要： 本发明公开了双通路立体声模拟5.1通路环绕声的信号处理方法，它首先输入原始的双通路左、右立体声信号L0、R0，产生5.1通路环绕声的前方三通路信号L、R、C，并从中提取出环境声学信息S，经延时、带通滤波和六个子带的随机延时处理后，得到去相关的一对环绕声信号LS，RS，并馈给5.1通路环绕声系统重发。在倾听者双耳处产生相关性低的双耳声压，从而产生良好、自然的主观包围感效果，达到将双通路立体声信号转换为5.1环绕声信号的目的。本发明的信号处理简单可行，适用于DVD等环绕声节目的制作、家用放声系统的应用等。

摘要： 本发明公开了一种通过调控Shh信号通路抑制白血病干细胞更新和增殖的一种药物，属于抗癌药物技术领域。本发明的技术方案要点为：通过调控Shh信号通路抑制白血病干细胞更新和增殖的一种药物，该药物的功能成分为莱菔硫烷，白血病干细胞为急性白血病干细胞KG1a。本发明首次探讨了SFN对急性白血病干细胞KG1a的自我更新和增殖的作用，结果表明SFN通过调控Shh信号通路抑制急性白血病干细胞的自我更新和增殖，这不仅是理论上的突破，而且具有潜在的临床意义，SFN可以作为一种治疗白血病的潜在候选药物，为急性白血病的治疗提供了新的思路。

摘要： 本发明公开了一种Shh信号通路抑制剂的新用途。本发明所提供的Shh信号通路抑制剂的新用途具体为Shh信号通路抑制剂在制备治疗常染色体显性遗传性多囊肾(ADPKD)的产品中的应用；所述Shh信号通路抑制剂具体为Vismodegib。本发明以Vil-Cre:Pkd2

摘要： 本发明涉及SHH信号通路特异性抑制剂的应用。首次揭示了SHH信号通路和神经网络兴奋性有着密切的关系，参与了癫痫的形成与发展，从而可以作为药物靶点，用于开发改善或治疗癫痫的药物。还揭示了可起到延缓癫痫发生的SHH信号通路的特异性抑制剂，可以作为改善或治疗癫痫的药物。

摘要： SHH/Lmx1a信号通路调控NTN修饰的rASCs分化多巴胺能神经元的方法，属于生物医学方法。本发明通过PCR分别获得Lmx1a基因和嵌合NTN基因的编码序列，经同源重组在HEK-293细胞中分别包装重组腺病毒Ad-Lmx1a和Ad-NTN。再将Ad-Lmx1a感染rASCs，用SHH/FGF-8等细胞因子将rASCs诱导至待命状态，再感染Ad-NTN，加入B27，N2supplement，bFGF等诱导剂。本发明显著提高rASCs向神经元细胞分化的潜能，相关转录因子能应用于帕金森氏病的未来细胞替代治疗中。

摘要： 本发明涉及生物技术领域，具体涉及Shh通路调控生物节律及其相关应用。具体地，本发明提供了Hedgehog通路抑制剂、SMO抑制剂在调节生物节律、治疗生物节律相关疾病中的应用；优选地，所述Hedgehog通路抑制剂包括PF‑5274857、Mebendazole、HPI‑4、SANT‑1、Taladegib、Glasdegib、Cyclopamine、Itraconazole、GANT61、JK184、Robotnikinin、Vismodegib、Purmorphamine、Sonidegib Phoshate。

摘要： 本发明涉及生物技术领域，具体涉及Shh通路调控生物节律及其相关应用。具体地，本发明提供了Hedgehog通路抑制剂、SMO抑制剂在调节生物节律、治疗生物节律相关疾病中的应用；优选地，所述Hedgehog通路抑制剂包括PF‑5274857、Mebendazole、HPI‑4、SANT‑1、Taladegib、Glasdegib、Cyclopamine、Itraconazole、GANT61、JK184、Robotnikinin、Vismodegib、Purmorphamine、Sonidegib Phoshate。

摘要： 本发明公开了一种上调MLLT3基因表达的信号通路抑制剂、药物，及该信号通路抑制剂的应用。本发明将JNK信号通路抑制剂以及任选的mTOR信号通路抑制剂和芳烃受体抑制剂作用于造血干细胞，可以有效地上调MLLT3基因表达，为MLLT3基因调控提供了可靠的研究手段，为通过MLLT3调控造血干细胞功能的研究和临床应用奠定了基础，具有重要的科研和临床转化价值。