SDS-PAGE电泳

摘要： 本文选用驴乳清蛋白为原材料,以DPPH自由基清除率为指标,利用计算机模拟酶解驴乳清蛋白,筛选出能够产生抗氧化活性肽的最适蛋白水解酶,以pH、酶解温度、酶底比(质量比)为自变量,采用Design-Expert V8.0.6设计响应面试验,确定以α-胰凝乳蛋白酶酶解驴乳清蛋白制备抗氧化肽的最佳工艺条件。结果表明在底物浓度4%,酶解时间4 h的条件下,当温度达到39°C,pH 8,酶底比4%时得到的酶解肽抗氧化活性最强,10 mg/mL驴乳清蛋白酶解肽的DPPH自由基清除率最高可达46.23%。

摘要： 本研究以3种楸树的花粉为试材,采用不同的蛋白质提取方法,利用考马斯亮蓝染色法测定了3个树种花粉蛋白质的含量,并通过SDS-PAGE电泳对花粉蛋白质组分进行了分析.结果表明:采用TCA/丙酮沉淀法提取蛋白质,南京老山楸树花粉蛋白质提取率最高;采用不同pH值(6.8、8.8、9.5)的Tris-HCl提取液提取蛋白质,随着pH值不断增大,其蛋白质提取率显著提高,当pH值达9.5时,蛋白质含量最大,SDS-PAGE电泳结果也显示此时蛋白质带明显增加;采用不同pH值(6.8、8.8、9.5)的Tris-HCl提取液提取花粉蛋白质,发现花粉蛋白质分离纯化效果存在明显差异,究其原因可能是pH值不同的影响或浸提样品浓度的差异性造成的.

摘要： 以大黄花鱼为实验材料,利用酶法水解大黄花鱼肉蛋白制备抗氧化肽.以还原力为响应值,通过单因素结合响应面法对中性蛋白酶酶解大黄花鱼肉蛋白的酶用量、酶解温度、底物浓度以及酶解时间进行了优化,结果表明:四种酶中,中性蛋白酶酶解的酶解液水解度(DH)和还原能力最高.最优酶解工艺条件为酶用量为0.4％、酶解温度45°C、底物浓度25.0％、酶解时间7h、体系pH7.0时,还原力为0.951.酶解液DH为37.51％,超氧阴离子自由基清除力(O2-·)为82.42％.SDS-PAGE(聚丙烯酰氨凝胶电泳)结果显示,酶解7h大黄花鱼肉蛋白肌动蛋白完全消失,水解形成肌球蛋白轻链分子量为27、15和6 kDa.

摘要： 以霍山铁皮石斛枫斗为试验材料,经脱脂脱色、0.3 mol/L盐溶液浸提、Sevage法脱蛋白、硫酸铵分级沉淀、透析、聚乙二醇10000浓缩、冷冻干燥得到粗品;经SDS PAGE电泳、DEAE 52离子柱和Sephadex G 100凝胶柱分离纯化得到糖蛋白并测定其抗氧化活性.SDS PAGE电泳显示硫酸铵饱和度越大,盐析作用越强,糖蛋白条带越明显,糖蛋白分子量在6.62×104附近;DEAE 52离子柱和Sephadex G 100凝胶柱逐步分离纯化得到2个组分的糖蛋白GP1和GP2;分光光度法测定GP1和GP2中糖蛋白含量分别约为95％和87％;抗氧化结果表明,霍山铁皮石斛糖蛋白具有较强的还原能力且可有效地清除自由基·DPPH、·OH和·O-2.

摘要： 为系统研究重金属离子(镉和锌)诱导的金属硫蛋白在中华小长臂虾(Palaemonetes sinensis)不同组织(肝胰脏、肌肉)中的表达,采用水相暴露法对中华小长臂虾进行镉(0,0.05,0.08,0.10和0.15mg?L-1)与锌(0,5,8,15和18mg?L-1)的急性染毒试验.通过十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法分析不同浓度的镉、锌离子在不同染毒时间下(0,24,48和96h),诱导金属硫蛋白(metallothionein,MT)在中华小长臂虾不同组织中的表达差异.结果表明:镉和锌诱导中华小长臂虾MT的表达存在组织差异性和时间效应关系.在肌肉中镉离子和锌离子不能诱导MT的表达.在肝胰脏中,0.05mg?L-1的镉离子可诱导MT的表达,而5mg?L-1的锌离子才能达到相同的效果.两种离子相比较,镉对中华小长臂虾的MT诱导能力更强.时间效应表现为染毒48h肝胰脏中MT表达量最高,诱导表达量随暴露时间的增加而加大,但达到一定程度后即呈下降至稳定趋势.两种重金属对中华小长臂虾肝胰脏MT的诱导能力:Cd2+>Zn2+;MT在中华小长臂虾不同组织中的分布顺序为:肝胰脏>肌肉.染毒后中华小长臂虾肝胰脏中MT的表达有一定的时间效应关系,48h的表达量最高.%In order to systematically study the expression of metallothionein induced by heavy metal ions (cadmium, zinc) in different tissues (hepatopancreas, muscles) of Palaemonetes sinensis, the water phase exposure method was used to treat the Chinese grass shrimps. The shrimps were exposed to cadmium (0, 0.05, 0.08, 0.10 and 0.15 mg?L-1) and zinc (0, 5, 8, 15 and 18 mg?L -1) at different times (0, 24, 48 and 96h). By SDS -polyacrylamide gel electrophoresis (SDS -PAGE) method, the expression of metallothionein (MT) in different tissues of Palaemonetes sinensis was investigated under different concentrations of cadmium and zinc. The results showed that there were tissue differencea and time effects on the expression of MT in Palaemonetes sinensis induced by cadmium and zinc. Cadmium and zinc could not induce MT expression in muscle. In the hepatopancreas, 0.05 mg?L -1 cadmium ion induced MT expression, and 5 mg?L -1 zinc achieved the same effect. Compared between the two kinds of ions, cadmium had stronger ability of inducing MT on Palaemonetes sinensis. The time effect showed that the expression of MT in hepatopancreas was the highest at 48 h after exposure, the expression level increased with the increase of exposure time, and decreased to a stable trend after reaching a certain level. This study showed that the ability of MT inducing hepatopancreas of Palaemonetes sinensis was determined by two heavy metals: Cd2+>Zn2+; the distribution of MT in Palaemonetes sinensis was hepatopancreas > muscle. The expression of MT in the hepatopancreas of Palaemonetes sinensis had a certain time-effect relationship after exposure, and the expression was highest at 48 h.

摘要： [目的]优选人参蛋白质提取的最佳方法,并比较不同生长年份对人参蛋白质含量的影响.[方法]比较丙酮沉淀法、聚乙二醇6000沉淀法、聚乙二醇20000沉淀法、酚提取法、Trizol提取法5种人参蛋白质的提取方法,及不同生长年份的人参蛋白质,采用Bradford方法测定蛋白质含量,SDS-PAGE电泳鉴定蛋白.[结果]丙酮提取法得到的蛋白质纯度最高,电泳条带最清晰完整,且人参蛋白质的含量随生长年份增加而升高.[结论]丙酮沉淀法是一种较好的适用于人参蛋白质提取的方法,5年生人参蛋白质含量最高.%[Objective]The best method of extraction of ginseng protein was optimized,and the effect of different growth years on protein con-tent was compared.[Method]The extraction method of five kinds of ginseng protein was studied by acetone precipitation method,polyethylene glycol 6000 precipitation method,polyethylene glycol 20000 precipitation method,phenol extraction method and Trizol extraction method,and different growth years of ginseng protein.The protein content was determined by Bradford method,SDS-PAGE identification of proteins.[Re-sult]The purity of the protein was the highest in the acetone extraction method, and the electrophoretic bands were the most clear and com-plete, and the content of ginseng protein increased with the growth year.[Conclusion]Acetone precipitation method was a better method for the extraction of ginseng proteins.The protein content of ginseng was the highest in 5 years.

摘要： In order to explore the feasibility of intense pulse light(IPL) technology used in microbial mutant breeding and obtain mutant strains with high yield of polysaccharides,the wild strain of L.bulgaricus IMAU40160 was mutated by IPL.Fourier transform infrared and scanning electron microscopy were used to analyze the primary structure of polysaccharides.Based on superoxide polysaccharide(O2-)and hydroxyl radical(· OH)scavenging ability,the antioxidant capacity of polysaccharides was studied.The mutagenic mechanism of IPL was explored using SDS-PAGE.Results showed that mutant strain L27 could be obtained by IPL mutant breeding and the yield of polysaccharide was (490.98 ± 12.26) mg/L,which increased by 98％ compared with that of the wild strain.IPL treatment would not influence the chemical bonds of polysaccharides.After the mutagenesis,polysaccharides showed irregular porous surface morphology and exhibited stronger antioxidant activities.IPL could cause the change of strain protein expression.This result would provide a theoretical basis for further research on the application of IPL in breeding superior strains.In conclusion,IPL could be applied in mutant breeding of mutants with high yield polysaccharide of L.bulgaricus IMAU40160.%为了研究脉冲光技术应用于微生物诱变育种的可行性以及获得多糖高产突变株,以产糖菌保加利亚乳杆菌L.bulgaricus IMAU40160为出发菌株,进行脉冲强光诱变处理.通过红外光谱、扫描电镜以及超氧阴离子(O2-)和羟基自由基(·OH)清除能力的测定,对比分析诱变前后菌株多糖的简单结构和抗氧化能力.SDS-PAGE电泳对脉冲强光的诱变机理进行初探.结果表明,利用脉冲强光诱变技术可选育得到多糖高产突变株L27,其多糖产量高达(490.98±12.26) mg/L,较原始菌株提高了98％.结果表明,脉冲强光诱变不会对菌株多糖官能团产生影响;诱变处理后菌株多糖表面呈现不规则多孔状;脉冲光处理提高了菌株多糖的抗氧化活性,引发了突变株差异蛋白的表达,为脉冲强光应用于优良菌株选育的进一步研究提供了理论依据.综上,脉冲强光技术可应用于L.bulgaricus IMAU40160多糖高产突变株的诱变选育.

摘要： 在本研究中,我们构建了PAL基因家族在9种陆地植物中的系统发育树,发现小麦PAL基因家族发生了明显的基因扩张:在这9种陆地植物中,小麦PAL基因家族成员数量最多,达到26个。基因表达模式热图显示,相对于成熟组织,小麦PAL基因在幼嫩组织中的表达量较高。高纯度的小麦PAL蛋白从小麦嫩叶中提取和纯化,并对其进行了活性测定。本研究为小麦PAL基因家族的进一步研究提供了技术支持。

摘要： 从有机磷降解菌侏YC-1中克隆出了有机磷水解酶基因mpd，成功构建了融合蛋白MPH的表达载体pETM，并构建了大肠杆菌基因工程菌，在1μM的IPTG，25°C诱导，能够高效表达MPH，经SDS-PAGE凝胶电泳验证为有机磷水解酶MPH。进行了酶活性的测定，表明该蛋白具有较高活性。对MPH进行了分离纯化，SDS-PAGE电泳和酶活性的测定验证了MPH纯蛋白，比活力为5525.9/g蛋白。MPH纯蛋白广泛用于日常食用瓜果蔬菜的预处理中，并为生物传感器的应用奠定了基础。

摘要： 从有机磷降解菌侏YC-1中克隆出了有机磷水解酶基因mpd，成功构建了融合蛋白MPH的表达载体pETM，并构建了大肠杆菌基因工程菌，在1μM的IPTG，25°C诱导，能够高效表达MPH，经SDS-PAGE凝胶电泳验证为有机磷水解酶MPH。进行了酶活性的测定，表明该蛋白具有较高活性。对MPH进行了分离纯化，SDS-PAGE电泳和酶活性的测定验证了MPH纯蛋白，比活力为5525.9/g蛋白。MPH纯蛋白广泛用于日常食用瓜果蔬菜的预处理中，并为生物传感器的应用奠定了基础。

摘要： 从有机磷降解菌侏YC-1中克隆出了有机磷水解酶基因mpd，成功构建了融合蛋白MPH的表达载体pETM，并构建了大肠杆菌基因工程菌，在1μM的IPTG，25°C诱导，能够高效表达MPH，经SDS-PAGE凝胶电泳验证为有机磷水解酶MPH。进行了酶活性的测定，表明该蛋白具有较高活性。对MPH进行了分离纯化，SDS-PAGE电泳和酶活性的测定验证了MPH纯蛋白，比活力为5525.9/g蛋白。MPH纯蛋白广泛用于日常食用瓜果蔬菜的预处理中，并为生物传感器的应用奠定了基础。

摘要： 以枇杷花药胚为材料,研究了不同蛋白提取方法,不同丙酮干粉处理方法,不同上样量,不同考马斯亮蓝R-250染色液及脱色液组合对SDS-PAGE电泳的影响,对枇杷仡药胚SDS-PAGE蛋白质电泳体系进行了优化。试验表明：用改良丙酮沉淀法提取蛋白,丙酮干粉溶于上样缓冲液后先煮沸再离心,上样量为25ul,采用过滤后的0．1%考马斯亮蓝R-250震荡染色和含5%乙醇,10%醋酸的脱色液脱色最终SDS-PAGE电泳效果最好,所得条带清楚。

摘要： 以枇杷花药胚为材料,研究了不同蛋白提取方法,不同丙酮干粉处理方法,不同上样量,不同考马斯亮蓝R-250染色液及脱色液组合对SDS-PAGE电泳的影响,对枇杷仡药胚SDS-PAGE蛋白质电泳体系进行了优化。试验表明：用改良丙酮沉淀法提取蛋白,丙酮干粉溶于上样缓冲液后先煮沸再离心,上样量为25ul,采用过滤后的0．1%考马斯亮蓝R-250震荡染色和含5%乙醇,10%醋酸的脱色液脱色最终SDS-PAGE电泳效果最好,所得条带清楚。

摘要： 以枇杷花药胚为材料,研究了不同蛋白提取方法,不同丙酮干粉处理方法,不同上样量,不同考马斯亮蓝R-250染色液及脱色液组合对SDS-PAGE电泳的影响,对枇杷仡药胚SDS-PAGE蛋白质电泳体系进行了优化。试验表明：用改良丙酮沉淀法提取蛋白,丙酮干粉溶于上样缓冲液后先煮沸再离心,上样量为25ul,采用过滤后的0．1%考马斯亮蓝R-250震荡染色和含5%乙醇,10%醋酸的脱色液脱色最终SDS-PAGE电泳效果最好,所得条带清楚。

摘要： 以枇杷花药胚为材料,研究了不同蛋白提取方法,不同丙酮干粉处理方法,不同上样量,不同考马斯亮蓝R-250染色液及脱色液组合对SDS-PAGE电泳的影响,对枇杷仡药胚SDS-PAGE蛋白质电泳体系进行了优化。试验表明：用改良丙酮沉淀法提取蛋白,丙酮干粉溶于上样缓冲液后先煮沸再离心,上样量为25ul,采用过滤后的0．1%考马斯亮蓝R-250震荡染色和含5%乙醇,10%醋酸的脱色液脱色最终SDS-PAGE电泳效果最好,所得条带清楚。

摘要： 利用SDS-PAGE与MALDI-TOF-MS质谱联用的方法对家蚕胚胎发育过程的差异蛋白进行分析。提取蚕卵浸酸处理后直至胚胎发育为蚁蚕的易溶性蛋白及难溶性蛋白，通过SDS-PAGE电泳，分析比较了蛋白组分的差异与变化，选取部分差异蛋白进行MALDI-TOF质谱分析。

摘要： 利用SDS-PAGE与MALDI-TOF-MS质谱联用的方法对家蚕胚胎发育过程的差异蛋白进行分析。提取蚕卵浸酸处理后直至胚胎发育为蚁蚕的易溶性蛋白及难溶性蛋白，通过SDS-PAGE电泳，分析比较了蛋白组分的差异与变化，选取部分差异蛋白进行MALDI-TOF质谱分析。

摘要： 利用SDS-PAGE与MALDI-TOF-MS质谱联用的方法对家蚕胚胎发育过程的差异蛋白进行分析。提取蚕卵浸酸处理后直至胚胎发育为蚁蚕的易溶性蛋白及难溶性蛋白，通过SDS-PAGE电泳，分析比较了蛋白组分的差异与变化，选取部分差异蛋白进行MALDI-TOF质谱分析。

摘要： 本发明提供电泳粒子的制造方法、电泳粒子、电泳分散液、电泳片、电泳装置及电子设备。本发明为包含母粒子和嵌段共聚物的电泳粒子的制造方法，其具有下述工序：通过活性聚合，使具有有助于分散性的部位的单体(M1)、具有与第1官能团具有反应性的第2官能团的单体(M2)、和带电的单体(M3)在单体(M1)与单体(M2)不共聚的情况下进行聚合来获得嵌段共聚物的工序；以及通过第1官能团和第2官能团的反应使结合部与母粒子结合而使嵌段共聚物与母粒子连接的工序。

摘要： 本发明的电泳粒子，含有粒子和被覆层，被覆层具有分散性和带电性中的至少一方，含有与粒子连接的聚合物，聚合物具有第1官能团，聚合物介由连接体与粒子连接，连接体的分子量为500以下，连接体具有第2官能团与第3官能团，介由第1官能团与第2官能团反应形成的化学键和羟基与第3官能团反应形成的化学键，粒子和连接体和聚合物连接在一起。

摘要： 本发明涉及电泳粒子、电泳粒子的制造方法、电泳分散液、电泳片、电泳装置及电子设备。本发明的电泳粒子具有：具有第1官能团的母粒子(粒子)，以及与母粒子结合的第1化合物和第2化合物。第1化合物为具有来源于有助于分散性的第1单体的分散部、和来源于具备与第1官能团具有反应性的第2官能团的第2单体的结合部的聚合物，其在结合部与母粒子连接。第2化合物为分子量比第1化合物小，具有非极性基团和第2官能团的化合物，其在第2官能团与母粒子连接。

摘要： 本发明提供电泳粒子、电泳粒子的制造方法、电泳分散液、电泳片、电泳装置以及电子设备。提供在电泳分散液中具备均匀分散能力并且带电量设定为适当范围的电泳粒子，可制造该电泳粒子的电泳粒子的制造方法，使用该电泳粒子的可靠性高的电泳分散液、电泳片、电泳装置和电子设备。本发明电泳粒子(1)具有母粒子(粒子)(2)、与母粒子(2)结合的第1化合物(39)、第2化合物(37)和第3化合物(35)。第1化合物(39)是具有来源于第1单体的分散部(32)和来源于第2单体的结合部(31)的聚合物，在结合部(31)与母粒子(2)连接。第2化合物(37)具有非极性基团和第2官能团，在第2官能团与母粒子(2)连接。第3化合物(35)具有带电性基团和第2官能团，在第2官能团与母粒子(2)连接。

摘要： 本发明是一种电泳粒子的制造方法，所述电泳粒子包含在表面中露出第一官能团的母粒子、和结合在母粒子上的嵌段共聚物，所述制造方法具有以下工序：通过活性聚合获得将分散部和结合部连接起来的多个嵌段共聚物的工序，所述分散部是具有有助于在分散介质中显示分散性的侧链的单体聚合而成的，所述结合部是具有与第一官能团具有反应性的第二官能团的单体M2聚合而成的；以及通过使第一官能团与第二官能团反应而使结合部与母粒子结合从而使嵌段共聚物与母粒子连接的工序。

摘要： 本发明的电泳粒子，具有母粒和被覆层，被覆层含有多个聚合物，聚合物具备与母粒的表面结合的具有聚合开始基的聚合引发剂部、和以聚合开始基作为起点、单体通过活性自由基聚合而聚合成的聚合部，聚合物包含聚合引发剂部、第1聚合部和第2聚合部，第1聚合部由与聚合引发剂部连接的包含具有交联基团的单体的第1单体聚合成，第2聚合部由不含具有交联基团的单体的第2单体聚合成，聚合物彼此在第1聚合部的交联基团部分介由交联剂连接起来。

摘要： 本发明的电泳粒子，其特征在于，具有母粒和覆盖该母粒的至少一部分的被覆层，该被覆层含有由有机聚合物构成的、以胞囊状将母粒包入的壳体，和与该壳体的表面结合的聚合物，聚合物是单体以聚合开始基作为起点，通过活性自由基聚合得到的。

摘要： 本发明提供电泳粒子、电泳粒子的制造方法、电泳分散液、电泳片、电泳装置以及电子设备。提供在电泳分散液中具备均匀分散能力并且带电量设定为适当范围的电泳粒子，可制造该电泳粒子的电泳粒子的制造方法，使用该电泳粒子的可靠性高的电泳分散液、电泳片、电泳装置和电子设备。本发明电泳粒子(1)具有母粒子(粒子)(2)、与母粒子(2)结合的第1化合物(39)、第2化合物(37)和第3化合物(35)。第1化合物(39)是具有来源于第1单体的分散部(32)和来源于第2单体的结合部(31)的聚合物，在结合部(31)与母粒子(2)连接。第2化合物(37)具有非极性基团和第2官能团，在第2官能团与母粒子(2)连接。第3化合物(35)具有带电性基团和第2官能团，在第2官能团与母粒子(2)连接。

摘要： 本发明的电泳粒子，含有粒子和被覆层，被覆层具有分散性和带电性中的至少一方，含有与粒子连接的聚合物，聚合物具有第1官能团，聚合物介由连接体与粒子连接，连接体的分子量为500以下，连接体具有第2官能团与第3官能团，介由第1官能团与第2官能团反应形成的化学键和羟基与第3官能团反应形成的化学键，粒子和连接体和聚合物连接在一起。

摘要： 本发明涉及电泳粒子、电泳粒子的制造方法、电泳分散液、电泳片、电泳装置及电子设备。本发明的电泳粒子具有：具有第1官能团的母粒子(粒子)，以及与母粒子结合的第1化合物和第2化合物。第1化合物为具有来源于有助于分散性的第1单体的分散部、和来源于具备与第1官能团具有反应性的第2官能团的第2单体的结合部的聚合物，其在结合部与母粒子连接。第2化合物为分子量比第1化合物小，具有非极性基团和第2官能团的化合物，其在第2官能团与母粒子连接。