基因枪

摘要： 为了优化小麦基因枪转化技术体系,提高小麦基因枪转化效率,分别以小麦品种小偃22、千斤早、西农979、扬麦18和扬麦12诱导9 d的幼胚愈伤组织为受体材料,使用基因枪介导BYDV-GPV-CP基因和抗除草剂Bar基因进行小麦幼胚愈伤组织共转化。结果表明:5种基因型小麦幼胚材料愈伤组织诱导效果存在显著差异,在接受基因枪轰击后再生苗率存在显著差异。在基质中添加4 mg·L^(-1)多效唑后再生苗平均分蘖最多,数量达6.47,证实在基质中添加4.0 mg·L^(-1)多效唑,可以有效促进壮苗和增加分蘖。

摘要： 为简化莱茵衣藻叶绿体表达载体构建步骤,将莱茵衣藻叶绿体中表达所需的DNA元件组合,构建入可一步TA克隆插入靶基因的载体pTBNK,可直接用于在莱茵衣藻叶绿体表达靶基因。将EGFP克隆至表达载体pTBNK,经蓝白班筛选获得阳性转化子pTBNK-EGFP,通过基因枪转化衣藻叶绿体并获得阳性克隆。通过PCR鉴定,EGFP成功整合至衣藻叶绿体基因组中。

摘要： 为简化莱茵衣藻叶绿体表达载体构建步骤,将莱茵衣藻叶绿体中表达所需的DNA元件组合,构建入可一步TA克隆插入靶基因的载体pTBNK,可直接用于在莱茵衣藻叶绿体表达靶基因.将EGFP克隆至表达载体pTBNK,经蓝白班筛选获得阳性转化子pTBNK-EGFP,通过基因枪转化衣藻叶绿体并获得阳性克隆.通过PCR鉴定,EGFP成功整合至衣藻叶绿体基因组中.

摘要： GDS-80手持基因枪是美国Wealtec公司2009年推出的基因传递系统,具有操作简便、高效的特点.已报道的橡胶树基因枪转化研究都是使用台式基因枪.本文首先利用考马斯亮蓝轰击滤纸去除明显不适合的参数,接着以绿色荧光蛋白(GFP)基因作为报告基因,轰击巴西橡胶树体细胞胚以及愈伤组织,用荧光显微镜观察绿色荧光,探究适合橡胶树的轰击参数.而且比较了 Image J软件和肉眼统计荧光斑点数及GDS-80手持基因枪与PDS-1000/He台式基因枪的差异.结果表明:对于橡胶树体细胞胚和愈伤组织,仅依靠原厂配件难以获得较好的转化效果.本文设计了直径3 cm(与轰击范围相同),高度2.5 cm,孔径60目的过滤网.同时改进装试验材料的培养皿,用刀片在培养皿的中心割出一个直径3 cm的圆圈,轰击胚状体时,将上述设计的过滤筛网正向卡在圆圈上,胚状体放入过滤网中,轰击时将培养皿用试管架架高,压力就从筛网及底部的空洞分解,微弹完全轰击到试验材料.轰击胚状体最优参数为:轰击压力为60psi,针状调节阀为3圈,目标间隔盘为6 cm.轰击愈伤时将材料放到普通培养皿中心的轰击范围内,反向盖上过滤筛网.最优轰击参数为:轰击压力为50psi,针状调节阀为4圈,目标间隔盘为6 cm.本文采用Image J软件进行荧光斑点计数,准确率与肉眼相当,但较肉眼省时.GDS-80手持基因枪与PDS-1000/He台式基因枪转化效率相当,但GDS-80手持基因枪每打一枪比PDS-1000/He台式基因枪快12 min.研究结果为橡胶树遗传转化提供了高效的基因枪转化体系,为转基因研究提供了一个高效的统计荧光数的软件.

摘要： 目前,植物结构培养技术、DNA体外重组等技术已经被应用于农作物育种.破生殖隔离这项转基因技术可以利用基因库创建新的条件,同时还能提供新的创造变异技术门径.基于此,分析并研究相关技术,以期为广大研究者提供参考借鉴.

摘要： 甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)是参与糖酵解和糖异生途径的关键酶之一,在维持细胞能量供应和植物抗逆性方面具有重要作用。本研究以耐旱型小麦品种长武134及干旱敏感型小麦品种郑引1号为材料,利用基因枪法将 TaGAPDH8基因分别转化这两种小麦的幼胚愈伤组织,经潮霉素筛选和PCR鉴定,最终得到4个下调表达的长武134株系(CW134-3、CW134-6、CW134-12、CW134-13)和8个上调表达的郑引1号株系(ZY1-1、ZY1-3、ZY1-4、ZY1-9、ZY1-10、ZY1-14、ZY1-15、ZY1-17)。对生长于大田的T_2代转基因植株在乳熟期的生长状况进行了测定,获得了与对照相比有明显表型差异的植株。用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术测定了T_3代小麦株系中 TaGAPDH8的表达量,结果表明,4个长武134株系中 TaGAPDH8基因的表达量分别为对照的0.53、0.75、0.21和0.78倍,而8个郑引1号株系中目的基因的表达量分别为对照的3.02、1.22、2.15、1.36、4.02、1.87、1.48和1.97倍。本研究获得了与对照存在明显表型差异的T_2代及稳定遗传目的基因的T_3代小麦株系,为后续的试验提供了研究材料和基础。

摘要： 雷公藤3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(Tripterygium wilfordii 3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme-A reductase,TwHMGR,GenBank:ALU11310.1 3)是MVA途径中的第一个限速酶,是细胞质中萜类代谢途径中的重要调控位点.为探讨TwHMGR对雷公藤甲素和雷公藤红素生物合成的影响,对其进行了过表达研究.利用Gateway技术将TwHMGR的开放阅读框(Open Reading Frame,ORF)构建到过表达载体中,通过基因枪介导过表达载体转入雷公藤悬浮细胞.qRT-PCR结果显示TwHMGR的基因相对表达量在过表达组显著提高,是空载体组基因相对表达量的1.75倍;UPLC结果显示雷公藤甲素及雷公藤红素含量在过表达组中分别提高为空载组的163.93％和190.04％.本实验中TwHMGR在雷公藤悬浮细胞中成功过表达,表现为基因相对表达量的上升和雷公藤甲素及雷公藤红素含量的上调,证明了TwHMGR在雷公藤萜类成分生物合成途径上的正向调节作用,为雷公藤重要活性萜类成分的合成生物学研究奠定了基础.

摘要： 锌指蛋白(ZFP)是一类通过结合锌离子折叠成手指结构域的蛋白,在植物逆境胁迫中起重要作用.ThZFP1需要结合一定的DNA序列来调控基因的表达,为了确定ThZFP1结合的元件序列,利用自己开发的TF-Centered Y1H技术,鉴定了ThZFP1蛋白识别的核心序列,分别为DOF和ARR1AT.并进一步在植物体内验证了ThZFP1蛋白与DOF和ARR1AT元件的互作.结果表明,ThZFP1蛋白能够特异性地识别DOF和ARR1AT顺式作用元件来调控相关基因的表达.

摘要： 本文主要论述了基因枪原理、影响因素、发展历史及其在植物果实中的应用，并展望了基因枪技术未来的发展动向。

摘要： 将小鹅瘟病毒(GPV)VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3)以每只6μg、3μg、1μg三个剂量分别用基因枪轰击免疫三组BALB/c小鼠,通过免疫组织化学法检测pcDNA-GPV-VP3在BALB/c小鼠组织中的动态表达规律。结果:免疫后3h即可在三个基因枪免疫组免疫部位的皮肤细胞细胞核中发现pcDNA-GPV-VP3的表达产物,于1d-1wk表达产物最多,表达可以持续到9wk；1wk-4wk内心、肾、肝细胞细胞核中可以检测到pcDNA-GPV-VP3的表达产物；pcDNA-GPV-VP3表达产物的量与免疫剂量之间较弱的正比关系。研究表明:通过基因枪免疫小鼠后,pcDNA-GPV-VP3可在小鼠体内快速地表达；基因枪免疫小鼠的方法具有高效和可靠的优点。

摘要： 通过基因枪轰击不同剂量(6μg/只、3μg/只和1μg/只)GPV-VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3)免疫BALB/c小鼠,并用萤光定量PCR(FQ-PCR)检测pcDNA-GPV-VP3在小鼠各组织器官中(心、肝、脾、肺、肾、脑、肠和免疫部位皮肤)分布规律。结果表明:①pcDNA-GPV-VP3在各剂量免疫小鼠1h即可在各组织中被检测到,其中在免疲部位皮肤含量最高,在心与肺中含量也较高,在脑中含量最低；②pcDNA-GPV-VP3在组织器官里的含量于3h开始下降31wk仍能在三个剂量免疫组小鼠的各个组织器官中检测到,但多数组织器官中的含量比1h时约少了102,免疫部位皮肤减少了103；③不同剂量免疫组各组织器官中pcDNA-GPV-VP3含量6μg/只组＞3μg/只组＞1μg/只组,但剂量组之间的差异并不显著。研究表明:FQ-PCR是定量检测pcDNA-GPV-VP3在免疫小鼠各组织器官含量的可靠实验手段,pcDNA-GPV-VP3免疫小鼠后lh时可分布至小鼠体内各组织器官中并持续存在31wk以上。

摘要： 将小鹅瘟病毒(GPV)VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3)分别以每只200μg、100μg、50μg肌肉注射和6μg、3 μg、1μg基因枪轰击的方法免疫六组BALB/c小鼠,通过免疫组织化学法检测pcDNA-GPV-VP3在BALB/c小鼠体内的动态表达规律。结果:在肌肉注射三组中,表达产物在心、免疫部位肌肉、肾和肝细胞细胞核中被检测到,基因疫苗的剂量和表达产物的量呈现一定的正相关性；基因枪轰击三组中,表达产物在心,免疫部位皮肤、肾和肝细胞细胞核中被检测到,基因疫苗的剂量和表达产物的量呈现较弱的正相关性。研究表明:肌肉注射和基因枪轰击都是pcDNA-GPV-VP3良好的免疫途径,基因枪轰击基因疫苗剂量很小,但基因疫苗在多种组织中较肌肉注射先检测出表达产物且持续时间长,表达量多,基因枪轰击免疫要优于肌肉注射免疫。

摘要： 将小鹅瘟病毒(GPV)VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3)分别以每只200μg、100μg、50μg肌肉注射和6μg、3μg、1μg基因枪轰击的方法免疫六组BALB/c小鼠；以PBS和空载体pcDNA3.1(+)为对照,于免疫后不同时间采取小鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑、肠和免疫部位肌肉,应用荧光定量PCR检测pcDNA-GPV-VP3在各组织器官中的分布及含量情况。检测结果表明:pcDNA-GPV-VP3免疫小鼠后1-3 h后可分布至小鼠体内各组织器官中且含量达到最大,随后含量下降,但仍能持续存在31 wk以上。在肌肉注射pcDNA-GPV-VP3三组中,基因疫苗的剂量和基因疫苗在组织中的含量呈现正相关性,15wk前差异显著,但15 wk后差异不显著；在基因枪轰击pcDNA43PV-VP3三组中,基因疫苗的剂量和基因疫苗在组织中的含量呈现较弱的正相关性,各剂量之间差异不显著。研究表明:不同剂量pcDNA-GPV-VP3肌注和基因枪轰击免疫小鼠后能迅速分布到机/体个各组织器官并达到最大含量,之后含量下降,但较长时间后(31wk)仍能在组织中检测到有一定含量。

摘要： 为探索鸭α干扰素(IFN-α)真核表达质粒(peDNA-SDIFN-α)对鸭瘟弱毒疫苗免疫鸭的免疫调节作用,本研究将pcDNA-SDIFN-α以1、3和6μg/只3个剂量用基因枪轰击法分别免疫28日龄鸭,以PBS和空载体质粒pcDNA3.1(+)为对照,所有鸭15d后接种鸭瘟(DP)弱毒疫苗,接种后第3、7、14、21、28、35,49、63,84 d采血用淋巴细胞增殖试验(MTT法)测定鸭外周血中T淋巴细胞转化效果和第7、14、21、28、35、49 d采血用流式细胞仪(FACS)测定CD3+T淋巴细胞数量的动态变化。第7、14、21、28、35,49、63、84、105、126、154、182 d采血用间接EL,ISA法检测血清抗体水平。结果发现:不同剂量pcDNA-SDIFN-α免疫组鸭外周血T淋巴细胞转化功能均极显著或显著高于弱毒和空载体对照组。不同剂量pcDNA-SDIFN-α免疫组鸭CD3+T淋巴细胞数量均显著或极显著高于弱毒和空载体对照组。在第7 d时,所有组鸭血清抗体水平都迅速升高,在28 d时达到高峰,其高抗体水平维持一段时间后缓缓下降。不同剂量pcDNA-SDIFN-α免疫组鸭血清抗体IgG于7～154 d高于弱毒对照组和空载体对照组,有显著差异。在诱导细胞免疫和体液免疫方面,弱毒和空载体对照组间无显著差异。研究表明,pcDNA-SDIFN-α提前15 d免疫能显著增强DP弱毒疫苗诱导的鸭细胞免疫和体液免疫能力,以基因枪免疫1μg/只的效果最佳,是一种良好的增强DP弱毒疫苗细胞免疫的分子佐剂。

摘要： 将鸭α干扰素(IFN-α)真核表达质粒(pcDNA-DuIFN-α)以1,3,6μg三个剂量基因枪表皮注射免疫28日龄北京鸭,15天后接种DHV弱毒疫苗,同时设空载体+DVH弱毒疫苗、生理盐水、DVH弱毒疫苗以及pcDNA-DuIFN-α免疫鸭对照组,10只鸭/组,于DVH弱毒疫苗免疫后5、7、14、21、28、42、56、70d采用流式细胞仪(FACS)、淋巴细胞增殖试验(MTT法)和鸡胚中和实验分别对免疫鸭外周血的CD3+淋巴细胞总数、T淋巴细胞转化能力和外周血中和抗体的效价进行动态检测。 结果表明:①CD3+淋巴细胞数量:1、3、6μg的pcDNA-DuIFN-α分别与DVH弱毒疫苗联合免疫后7-56 d极显著高于生理盐水对照鸭,显著高于空载体+DVH弱毒疫苗、DVH弱毒疫苗及其pcDNA-DuIFN-α组；3μg组于28-42 d高于1 μg和6 μg组,1 μg组于28-56 d略高于6 μg组；DVH弱毒疫苗、pcDNA-DuIFN-α和空载体+DVH弱毒疫苗组间差异不显著,于7-56d极显著高于生理盐水对照组。②T淋巴细胞对ConA的反应能力(OD值):1μg、3μg和6μg的pcDNA-DuIFN-α分别与DVH弱毒疫苗联合免疫后5-70 d极显著高于生理盐水对照鸭,21-56 d显著高于空载体+DVH弱毒疫苗、DVH弱毒疫苗及其pcDNA-DuIFN-α组；3 μg组于14-42 d高于1μg和6 μg组,1和6μg无差异；DVH弱毒疫苗、pcDNA-DuIFN-α和空载体+DVH弱毒疫苗组间差异不显著于5-70 d极显著高于生理盐水对照组。③中和抗体效价:7-70d时1、3、6μg三个剂量组高于DHV和空载体+DHV组,3μg组高于1和6μg组。研究表明pcDNA-DuIFN-α是一种优秀的鸭免疫分子免疫增强剂和DVH弱毒疫苗的分子佐剂,以基因枪注射3μg/只的效果最佳.

摘要： 将本实验室构建的鸭α-干扰素基因疫苗(pcDNA-SDIFN-α)分别按每只1、3和6μg三个剂量基因枪轰击免疫北京谷鸭,以PBS、空载体质粒pcDNA 3.1(+)和鸭瘟弱毒疫苗为对照,免疫15 d后分经皮下、滴鼻、口服三个途径人工感染0.5 LD50鸭瘟强毒(含病毒DNA拷贝数为3.524×104),统计发病死亡情况,并于攻毒后2 h、6h、12 h、24h、3d、6d、9d、14d、22d、26d、33d和40d采全血,采用实时荧光定量PCR对鸭瘟病毒在鸭外周血中含量的动态变化进行检测。 结果：pcDNA-SDIFN-α基因枪免疫组鸭外周血鸭瘟病毒DNA含量比PBS和空载体对照组低,差异显著,在3d前都低于弱毒疫苗免疫组,差异不显著.三个剂量pcDNA-SDIFN-α免疫组之间外周血鸭瘟病毒DNA含量差异不显著,攻毒初期(2h),6μg免疫鸭外周血鸭瘟病毒DNA含量最低,3μg次之,1μg最高。基因枪1μg免疫皮下攻毒组有3/9只鸭死亡,滴鼻攻毒组有3/6只鸭死亡；基因枪3μg免疫滴鼻攻毒组有3/6只鸭死亡；PBS和空载体免疫组分别有13/27和10/27只死亡,基因枪6μg免疫鸭以及鸭瘟弱毒疫苗免疫鸭获得100％保护。病死鸭的脾脏、十二指肠、空肠、盲肠和直肠是鸭瘟病毒DNA含量较高的组织器官.研究表明,基因枪轰击pcDNA-SDIFN-α免疫鸭后能产生一定的抗鸭瘟强毒感染的作用,并表现出一定的量效关系。

摘要： 将小鹅瘟病毒(GPV)VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3)以每只6μg、3μg、1μg三个剂量分别用基因枪轰击免疫三组BALB/c小鼠,通过免疫组织化学法检测pcDNA-GPV-VP3在BALB/c小鼠组织中的动态表达规律. 结果：免疫后3h即可在三个基因枪免疫组免疫部位的皮肤细胞细胞核中发现pcDNA-GPV-VP3的表达产物,于1d-1wk表达产物最多,表达可以持续到9wk；1wk-4wk内心、肾、肝细胞细胞核中可以检测到pcDNA-GPV-VP3的表达产物；pcDNA-GPV-VP3表迭产物的量与免疫剂量之间较弱的正比关系。 研究表明:通过基因枪免疫小鼠后,pcDNA-GPV-VP3可在小鼠体内快速地表达；基因枪免疫小鼠的方法具有高效和可靠的优点。

摘要： 本文对鸭α-干扰素基因真核表达质粒(pcDNA-SDIFN-α)的重组大肠杆菌大规模中试生产发酵培养条件、pcDNA-SDIFN-α免疫鸭抗0.5 LD50鸭瘟强毒感染进行系统研究,获如下结果:1.pcDNA-SDIFN-α大规模中试生产发酵培养条件:对pcDNA-SDIFN-α的重组大肠杆菌进行发酵培养条件(温度、pH、溶氧浓度、补料速度、接种量、发酵时间和消泡剂添加量)优化,筛选出了适合DH5α菌株生长的最佳发酵条件为:温度37°C,pH7.4,溶氧含量40%,接种量4%,补料速度80ml/h,发酵时间18h,消泡剂添加量0.02%,此条件下,pcDNA-SDIFN-α质粒含量可达到357mg/L。2.pcDNA-SDIFN-α疫鸭抗0.5LD50鸭瘟强毒感染:将pcDNA-SDIFN-α分别按每1μg、3μg和6μg三个剂量基因枪轰击免疫北京鸭,以PBS、空载体质粒pcDNA 3.1(+)和鸭瘟弱毒疫苗为对照,免疫15 d后分经皮下注射人工感染0.5LD50鸭瘟强毒(含病毒DNA拷贝数为3.524x104),统计发病死亡情况,并于攻毒后2 h、6 h、12 h、24 h、3d、6d、9d、14d,22d,26d、33d和40d采全血,采用实时荧光定量PCR对鸭瘟病毒在鸭外周血中含量的动态变化进行检测。结果:pcDNA.SDIFN-α基因枪免疫组鸭外周血鸭瘟病毒DNA含量比PBS和空载体对照组低,差异显著,在3d前都低于弱毒疫苗免疫组,差异不显著。三个剂量pcDNA-SDIFN-α免疫组之间外周血鸭瘟病毒DNA含量差异不显著,攻毒初期(2h),6μg免疫鸭外周血鸭瘟病毒DNA含量最低,3μg次之,1μg最高.基因枪1 μg免疫皮下攻毒组有3/9只鸭死亡,滴鼻攻毒组有3/9只鸭死亡；基因枪3 μg免疫滴鼻攻毒组有3/9只鸭死亡；PBS和空载体免疫组分别有13/27和10/27只死亡,基因枪6μg免疫鸭以及鸭瘟弱毒疫苗免疫鸭获得100%保护。病死鸭的脾脏、十二指肠、空肠、盲肠和直肠是鸭瘟病毒DNA含量较高的组织器官。研究表明,基因枪轰击和肌肉注射pcDNA-SDIFN-α免疫鸭后能产生一定的抗鸭瘟强毒感染的作用,并表现出一定的量效关系。

摘要： 一种手枪式气体基因枪，压缩气体进气管(12)从枪体(1)的枪把中穿入通过一具有一定容积的缓冲储气仓(2)而与枪体内的气阀(3)相通，气阀(3)与进气盘的气孔相连通；弹仓座(6)上以圆周排列方式设置有多个弹仓孔，各弹仓孔在装填弹仓(7)后至少有一端与对应的进气盘(4)或出气盘(9)的气孔外周以凹凸弧面形式相配合，进气盘(4)、出气盘(9)上分别设置有一锁定拉杆(5)及一定位弹珠(8)，分别与弹仓座(6)的两侧相配合；在所述的弹仓座(6)之下设置有一截面呈半圆形的定位圈(62)，定位圈(62)的开口部设置有一弹性片(61)，其一侧边弯折并通过螺钉固定在定位圈(62)的侧边，弹仓座(6)即搁置在该定位圈(62)之上。本发明的弹仓座定位稳定、弹仓转换操作方便，并且所发射的DNA微粒具有稳定的、较高的初速度。

摘要： 本发明提供一种基因枪介导的日本结缕草高效基因编辑方法，针对日本结缕草中的目标基因ZjSGR设计基于CRISPR/Cas9的sgRNA序列，将含有编码sgRNA序列的DNA片段连接到携带CRISPR/Cas9的载体中，采用基因枪介导转化法转化日本结缕草，或者，将含有编码sgRNA序列的DNA片段的载体、携带CRISPR/Cas9的载体以及含筛选标记基因的载体，采用基因枪介导转化法共同转化日本结缕草，实现对日本结缕草基因ZjSGR的定点突变，进而获得该基因功能缺失的转基因日本结缕草植株。本发明提供基因枪介导的日本结缕草高效基因编辑方法，作为一种定向编辑日本结缕草基因的工具，编辑效率高达37.5％。

摘要： 本发明公开了一种利用基因枪获得转基因小麦的方法及其专用培养基。本发明以小麦幼胚为外植体，不经过预培养直接使用本发明所提供的高渗培养基进行高渗处理后进行基因枪轰击，轰击后再用本发明提供的专用培养基进行高渗处理、愈伤组织诱导、分化和生根培养，且在分化和生根阶段使用筛选剂，在愈伤组织诱导阶段不使用筛选剂，可明显提高小麦的基因转化效率，最高可达36%；且本发明还具有转化周期短（从取幼胚至获得具有根茎叶的再生植株仅需8—10周）、转化稳定性和重复性高的优点。本发明为小麦遗传改良产业化提供了一个有效途径，具有广阔的应用前景。

摘要： 整流加速基因微弹的方法及基因枪，属于生物技术领域。本发明公开了一种整流加速基因微弹的方法，包括如下步骤：利用离心作用将基因微弹均匀地吸附在载片上；将载片放置在加速器喷嘴的入口处；让高压气体进入加速通道，利用所述载片将高压气体整流成在截面上压力分布均匀的气流；所述高压气体吹走基因微弹，并将之加速到所需速度后射击靶细胞。本发明还公开了一种整流气动基因枪，包括脉冲气源装置、加速器、靶面定位器和消音器。利用本发明所述基因枪既可将微弹加速到所需的速度，又可使微弹速度一致且在靶面分布均匀，还可减小冲击波影响，基因微弹制备简单，操作便捷，能满足基因疫苗接种的要求。

摘要： 本发明涉及一种游戏内基因枪建模构建方法及基因枪应用，构建应用真实的扫描方式，引入多种特效显示反馈效果，用逼真的显示效果以达到玩家在游戏里视觉和触觉上震撼的感受，生动形象表现了真实玩家与生物NPC的互动方式，同时玩家在肢体上还要多角度控制基因枪以正确扫描生物获得基因，提高了游戏的可玩性。

摘要： 一种手枪式气体基因枪,枪体(1)内自后向前设置有进气盘(4)、弹仓座(6)、出气盘(9)和发射管(10),弹仓座(6)上以圆周排列方式设置有多个弹仓孔,各弹仓孔在装填弹仓(7)后至少有一端与对应的进气盘(4)或出气盘(9)的气孔外周以凹凸弧面形式相配合,进气盘(4)、出气盘(9)上分别设置有一锁定拉杆(5)及一定位弹珠(8),分别与弹仓座(6)的两侧相配合。本发明的弹仓座(6)定位稳定、弹仓转换操作方便,同时结合在压缩气体进气管(12)与气阀(3)之间设置的缓冲储气仓(2),可使所发射的DNA微粒具有稳定的、较高的初速度。

摘要： 本发明提供一种基因枪介导的日本结缕草高效基因编辑方法，针对日本结缕草中的目标基因ZjSGR设计基于CRISPR/Cas9的sgRNA序列，将含有编码sgRNA序列的DNA片段连接到携带CRISPR/Cas9的载体中，采用基因枪介导转化法转化日本结缕草，或者，将含有编码sgRNA序列的DNA片段的载体、携带CRISPR/Cas9的载体以及含筛选标记基因的载体，采用基因枪介导转化法共同转化日本结缕草，实现对日本结缕草基因ZjSGR的定点突变，进而获得该基因功能缺失的转基因日本结缕草植株。本发明提供基因枪介导的日本结缕草高效基因编辑方法，作为一种定向编辑日本结缕草基因的工具，编辑效率高达37.5％。

摘要： 本发明公开一种基于基因枪介导的棉花基因编辑方法及应用，属于基因工程技术领域。本发明方法通过下胚轴茎段培养获得胚性愈伤组织，利用基因枪将包埋好的基因编辑质粒DNA转化棉花胚性愈伤细胞，经过恢复培养、筛选培养和体细胞胚分化获得基因编辑幼苗。本发明所提供的基因枪转化胚性愈伤再生的方法可以缩短棉花遗传转化周期，提高转化体效率，节约时间和工作量，在棉花基因功能研究和育种实践中具有重要的应用前景。

摘要： 本发明提供了一种基于基因枪的海带转基因育种方法，涉及转基因技术领域，该方法使用由游孢子附着培养而来的海带配子体为受体细胞进行基因枪转化，金粉用量为600μg/枪；外源质粒用量为1.0μg/枪；轰击次数2次；可裂膜规格为1100psi；轰击距离为9cm；真空度26inch Hg。该方法对影响基因枪转化效率的各项参数和细胞培养体系进行了优化，从而获得更适合海带基因枪的转化体系，提高了转化效率。

摘要： 本发明公开了一种利用基因枪获得转基因小麦的方法及其专用培养基。本发明以小麦幼胚为外植体，不经过预培养直接使用本发明所提供的高渗培养基进行高渗处理后进行基因枪轰击，轰击后再用本发明提供的专用培养基进行高渗处理、愈伤组织诱导、分化和生根培养，且在分化和生根阶段使用筛选剂，在愈伤组织诱导阶段不使用筛选剂，可明显提高小麦的基因转化效率，最高可达36%；且本发明还具有转化周期短（从取幼胚至获得具有根茎叶的再生植株仅需8—10周）、转化稳定性和重复性高的优点。本发明为小麦遗传改良产业化提供了一个有效途径，具有广阔的应用前景。