基因工程育种

摘要： 随着时代的发展,白酒的品质成了大众日益关注的话题,这就要求酒既有优质的风味口感,又不对人体造成伤害。高级醇是白酒中最重要的风味物质之一,主要由酿酒酵母生成。适量的高级醇可赋予酒体醇香、柔和的口感,但当高级醇含量超过一定限度时,不但会降低酒体的口感,还会有损饮用者的身体健康。因此,白酒中高级醇种类及含量的调控对改善酒体品质有着重要意义。文章介绍了酿酒酵母中高级醇的形成机制,重点总结了高级醇代谢调控的关键基因以及白酒酿造中适产高级醇酿酒酵母菌株选育研究进展,以期为白酒中高级醇的精细化调控及适产高级醇酿酒酵母菌株的选育提供参考。

摘要： 通过查阅相关文献,概述选择育种、杂交育种、诱变育种、原生质体融合育种、基因工程育种等5种育种技术在平菇上的应用研究现状和存在的优缺点。

摘要： 通过查阅相关文献,概述选择育种、杂交育种、诱变育种、原生质体融合育种、基因工程育种等5种育种技术在平菇上的应用研究现状和存在的优缺点.

摘要： 多氧霉素是一种抑制几丁质生物合成的广谱抗真菌类抗生素,对多种真菌引起的农作物病害具有显著的防治效果,且对人和动植物无害,是一种绿色安全的生物农药,目前仍然是全球应用最广泛的抗真菌农药之一。多氧霉素的主要作用机制在于竞争性抑制真菌细胞壁合成中几丁质合成酶的活性,因此对农作物真菌病害具有显著的防治效果。现代农业的发展对于绿色生物农药的需求日益增长,本研究的目的是构建多氧霉素关键活性成分——多氧霉素B的高产菌株。从一株自土壤环境中分离得到的金色链霉菌(Streptomyces ansochromogenes)出发,首先通过紫外诱变初步筛选多氧霉素B的高产突变菌株;然后利用ExoCET直接克隆技术对多氧霉素基因簇pol进行克隆,并在基因簇第1个基因上游分别添加原始启动子和kasOp*强启动子,通过整合酶phiC31将基因簇整合到突变株染色体上构建pol倍增菌株,HPLC-MS检测比较多氧霉素B的产量。通过紫外诱变育种和筛选获得了链霉菌突变株Pol-12菌株,其产量较野生型菌株提高了1.2倍。为进一步提高多氧霉素产量,利用ExoCET直接克隆技术将pol克隆至p15A载体,并通过接合转移转化Pol-12菌株获得pol倍增菌株S.ansochromogenes Pol-12::Pori-pol(M1)和S.ansochromogenes Pol-12::PkasOp*-pol(M2)。与受体菌Pol-12相比,菌株M1和M2多氧霉素B的产量分别提高了22倍和33倍。因此得出结论:紫外随机诱变育种联合基因工程定向育种可有效应用于多氧霉素高产菌株的构建,增加基因簇的拷贝数以及强启动子插入有效提高了多氧霉素B的产量。

摘要： 多氧霉素是一种抑制几丁质生物合成的广谱抗真菌类抗生素,对多种真菌引起的农作物病害具有显著的防治效果,且对人和动植物无害,是一种绿色安全的生物农药,目前仍然是全球应用最广泛的抗真菌农药之一.多氧霉素的主要作用机制在于竞争性抑制真菌细胞壁合成中几丁质合成酶的活性,因此对农作物真菌病害具有显著的防治效果.现代农业的发展对于绿色生物农药的需求日益增长,本研究的目的是构建多氧霉素关键活性成分——多氧霉素B的高产菌株.从一株自土壤环境中分离得到的金色链霉菌(Streptomyces ansochromogenes)出发,首先通过紫外诱变初步筛选多氧霉素B的高产突变菌株;然后利用ExoCET直接克隆技术对多氧霉素基因簇pol进行克隆,并在基因簇第1个基因上游分别添加原始启动子和kasOp*强启动子,通过整合酶phiC31将基因簇整合到突变株染色体上构建pol倍增菌株,HPLC-MS检测比较多氧霉素B的产量.通过紫外诱变育种和筛选获得了链霉菌突变株Pol-12菌株,其产量较野生型菌株提高了1.2倍.为进一步提高多氧霉素产量,利用ExoCET直接克隆技术将pol克隆至p15A载体,并通过接合转移转化Pol-12菌株获得pol倍增菌株S.ansochromogenes Pol-12::Pori-pol(M1)和S.ansochromogenes Pol-12::PkasOp*-pol(M2).与受体菌Pol-12相比,菌株M1和M2多氧霉素B的产量分别提高了22倍和33倍.因此得出结论:紫外随机诱变育种联合基因工程定向育种可有效应用于多氧霉素高产菌株的构建,增加基因簇的拷贝数以及强启动子插入有效提高了多氧霉素B的产量.

摘要： 该实验室1991年12月组建,从事发酵工程、酶工程、细胞工程、基因工程、食用菌、农业微生物育种和免疫领域的研究与开发,主要研究学科有微生物、植物的基因工程育种、微生物菌种资源学、微生物的基因工程育种、发酵工程、生物防治、微生物肥料学、土壤微生物学、微生物生态学免疫微生物和保健功能食品等。

摘要： 花卉育种是花卉业发展的基础.常规育种作为现在育种中所常用的主要方法,基因工程育种在一定程度上弥补了常规育种中所不能解决的问题.目前的基因工程育种在花卉中的应用主要集中与花色,花香,花期与株型等方面,本文将着重介绍我国在花色、花期与抗性的研究进展,并阐述该技术所存在的问题并提出几点建议.

摘要： 冰草、苜蓿、高羊茅抗旱、耐寒基因工程育种属国家十五重大科技专项-"转基因植物研究与产业化"的课题之一,是我国草业界在生物技术研究领域所获资助最大、参与攻关单位最多的研究项目.课题自2002年11月启动以来,经一年多时间的实施,进展情况良好,完成了受体材料耐盐性筛选、组培再生体系建立、转化载体构建、目的基因转移及转基因植株分子鉴定等研究工作预期的研究目标.本文就课题的基本概况及阶段性成果作一简要的介绍与总结.

摘要： 现代工业微生物分子遗传育种是二十世纪末发展起来的新型的定向育种技术，该文重点概述了基因工程育种中的基因定点突变、DNA重排、基因组重排的基本原理和优点以及代谢工程育种中采取的策略和方法，并对这些方法的研究进展进行了扼要的综述。

摘要： 分子生物学(molecularbiology)在分子水平上研究生物大分子的结构与功能，从而阐明生命现象本质的科学。生物大分子包括核酸、蛋白质、脂肪、多糖等。狭义上讲，分子生物学是指研究核酸的组成、结构与功能的科学。本文主要从狭义上介绍药用真菌的分子生物学研究进展，大体包括五个方面：药用真菌的基因组研究进展；分子生物学技术在药用菌品种鉴别上的应用；分子生物学技术在药用菌产品鉴别上的应用；分子生物学技术在药用菌品种选育上的应用；药用菌的基因工程育种。

摘要： 目前已报道的侵染花生的病毒近20种，其中花生条纹病毒(PStV)流行最广，田间发病率最高，是重要的花生病害，严重影响花生的产量和品质.近年来国内外学者对花生条纹病进行了大量研究，并取得了一定进展.但至今未能发现对PSyV有较强抗性的栽培材料.1994年和1996年Gunasinghe 等和Flasinski等分别获得了PStV cDNA全序列；Cassidy等对PStV-cp基因进行了克隆和序列分析，并在大肠杆菌中获得了该基因不同长度片段的表达；Teychency等人亦于1994年成功构建了PStV-cp基因的植物表达载体，并利用微弹技术在花生组织中获得了有效而稳定的转化.我们在完成中国株系PStV-cp基因克隆和序列分析的基础上，构建了PStV-cp基因的植物表达载体pBI-stv.利用根癌农杆菌LBA4404的介导，通过花生胚轴离体转化体系转化花生，获得转基因再生花生植株，经PCR鉴定部分再生转基因植株扩增出1.1kb大小的目的条带，为花生抗病毒基因工程育种打下了基础。

摘要： 二十二碳六烯酸(DHA)和二十碳五烯酸(EPA)是人及其他动物的重要必需多不饱和脂肪酸.本文探讨了采用基因工程方法研制高产重组二十二碳六烯酸。

摘要： 二十二碳六烯酸(DHA)和二十碳五烯酸(EPA)是人及其他动物的重要必需多不饱和脂肪酸.本文探讨了采用基因工程方法研制高产重组二十二碳六烯酸。

摘要： 二十二碳六烯酸(DHA)和二十碳五烯酸(EPA)是人及其他动物的重要必需多不饱和脂肪酸.本文探讨了采用基因工程方法研制高产重组二十二碳六烯酸。

摘要： 比较基因组学研究发现,同属十字花科植物的拟南芥和油菜的基因组具有很高的同源性.从拟南芥和油菜中分离的FAE1基因的序列分析结果也证实了这一点.植物中脂肪酸合成的途径是相同的,在脂肪酸合成过程中起催化作用的酶也非常的保守.因此,可以利用拟南芥的基因组研究结果,分离其他物种中脂肪酸合成关键酶基因的完整或部分编码序列,通过基因工程的手段对油菜的脂肪酸代谢进行调控,从而达到品种改良的目的.

摘要： 比较基因组学研究发现,同属十字花科植物的拟南芥和油菜的基因组具有很高的同源性.从拟南芥和油菜中分离的FAE1基因的序列分析结果也证实了这一点.植物中脂肪酸合成的途径是相同的,在脂肪酸合成过程中起催化作用的酶也非常的保守.因此,可以利用拟南芥的基因组研究结果,分离其他物种中脂肪酸合成关键酶基因的完整或部分编码序列,通过基因工程的手段对油菜的脂肪酸代谢进行调控,从而达到品种改良的目的.

摘要： 比较基因组学研究发现,同属十字花科植物的拟南芥和油菜的基因组具有很高的同源性.从拟南芥和油菜中分离的FAE1基因的序列分析结果也证实了这一点.植物中脂肪酸合成的途径是相同的,在脂肪酸合成过程中起催化作用的酶也非常的保守.因此,可以利用拟南芥的基因组研究结果,分离其他物种中脂肪酸合成关键酶基因的完整或部分编码序列,通过基因工程的手段对油菜的脂肪酸代谢进行调控,从而达到品种改良的目的.

摘要： 本发明公开了一种利用基因工程环氧合酶‑1和基因工程前列腺素E合成酶‑1制备前列腺素E1的方法，属于生物工程领域。该方法通过原核表达的手段表达出前列腺素E1合成所需要的相关酶，即环氧合酶‑1(COX‑1)和前列腺素E合成酶‑1(mPGES‑1)，利用酶与底物反应，进而合成出前列腺素E1。通过此法可以大量表达前列腺素合成酶并且合成出前列腺素E1，能够避免工业生产中活体上取下的组织酶容易污染的问题。同时原核表达出来的酶种类比较单一，表达的酶的浓度也比较高，而且大肠杆菌系统有机物杂质较少，酶促反应后的产物杂质相对较少，有利于前列腺素E1的纯化和利用，为人工合成前列腺素E1开辟了一条新的路径。

摘要： 本发明公开了一种青霉基因工程菌的制备方法及青霉基因工程菌的应用，所述方法为：获得潮霉素抗性表达盒并克隆到目标质粒上，获得潮霉素抗性的重组质粒；分别克隆青霉脂肪酶基因PEL、扩展青霉甘油醛-3-磷酸脱氢酶启动子PgpdP和构巢曲霉色氨酸合成酶终止子TtrpC，得到有强启动子驱动的PEL基因表达盒；将PEL基因表达盒克隆到潮霉素抗性的重组质粒中，获得含潮霉素筛选标记PEL基因超表达载体；将该超表达载体转化工程农杆菌，利用农杆菌介导转化法将PEL基因表达盒转化到青霉菌株中，得到青霉基因工程菌。本发明获得的青霉工程菌产脂肪酶能力强，青霉工程菌制备的脂肪酶酶活比出发菌青霉野生菌提高了100％～150％。

摘要： 本发明公开了一种基因工程和杂交育种学科的综合实践云系统，主要包括教育系统、访问系统、内容存储、管理系统、实践系统和智能云平台；所述访问系统为多个移动接口，每个移动接口认证给学生，并且每个移动接口包含所述移动接口提供用于访问所述内容对象的显示器；所述内容存储包含多个内容对象，所述内容对象为基因工程和杂交育种两大主题的系列知识点和技术方法的教育内容；所述智能云平台包括云数据中心和云储存中心；本发明的系统作为一个有机整体的系列课程可以根据人数、班级等分不同期连续开展，能够作为教学系列课程在学校以及科普研学活动中推广实施。

摘要： 本发明公开了一种基因工程菌的制备方法、基因工程菌及重组壳聚糖酶。本发明的基因工程菌的制备方法包括：去除壳聚糖酶编码基因csn信号肽编码序列；将芽孢杆菌信号肽编码序列连接csn，插入大肠杆菌‑芽孢杆菌穿梭载体，并转入芽孢杆菌中，即可获得能够大量分泌表达重组壳聚糖酶蛋白的基因工程菌。将基因工程菌在适宜条件下培养后可大量分泌重组壳聚糖酶，通过简单醇沉及亲和层析即可获得高纯度的重组壳聚糖酶。本发明制备壳聚糖酶的工艺简单，适于工业放大，可广泛应用于食品、药品、生物等领域。

摘要： 本发明公开了一种利用基因工程环氧合酶‑1和基因工程前列腺素E合成酶‑1制备前列腺素E1的方法，属于生物工程领域。该方法通过原核表达的手段表达出前列腺素E1合成所需要的相关酶，即环氧合酶‑1(COX‑1)和前列腺素E合成酶‑1(mPGES‑1)，利用酶与底物反应，进而合成出前列腺素E1。通过此法可以大量表达前列腺素合成酶并且合成出前列腺素E1，能够避免工业生产中活体上取下的组织酶容易污染的问题。同时原核表达出来的酶种类比较单一，表达的酶的浓度也比较高，而且大肠杆菌系统有机物杂质较少，酶促反应后的产物杂质相对较少，有利于前列腺素E1的纯化和利用，为人工合成前列腺素E1开辟了一条新的路径。

摘要： 本发明公开了一种L‑天冬氨酸酶基因工程菌发酵培养基及发酵培养L‑天冬氨酸酶基因工程菌方法，其中，培养基包括以下质量浓度的组分：酵母粉2‑10g/L、蛋白胨5‑20g/L、乳糖1‑10g/L、氯化钠1‑10g/L、黄豆饼粉1‑15g/L、玉米浆1‑5g/L、籼米粉0.5‑5g/L、钼酸铵0.5‑2g/L、钴盐0.5‑10mg/L、通过本发明公开的技术方案培养L‑天冬氨酸酶基因工程菌，不仅菌细胞密度大，且L‑天冬氨酸酶基因工程菌增殖快速，细胞浓度较高。

摘要： 本发明公开了一种基因工程菌生产β‑胡萝卜素的方法及其基因工程菌。该基因工程菌是一种含有carRA基因和carB基因的耶罗维解脂酵母(Yarrowia lipotica)基因工程菌。本发明通过基因工程方法向耶罗维解脂酵母引入来源于三孢布拉霉(Blakeslea trispora)carRA基因和carB基因，进一步增强双香儿基焦磷酸合酶(GGS)和3‑羟基3‑甲基乙酰辅酶A还原酶(HMG‑CoAcata reductase)的表达，敲除3‑磷酸甘油脱氢酶(Gut2)与过氧化物酶(Pox2)，获得了异源表达β‑胡萝卜素的耶罗维解脂酵母菌株，发酵条件简单，β‑胡萝卜素产量较高，具有重要的生产价值。

摘要： 本发明提供了一种基因工程菌株、培养方法及该基因工程菌株的用途，该基因工程菌株包括如下两种形式中一种：a、敲除了绿针假单孢菌中DHHA异构酶phzF基因；b、在敲除了绿针假单孢菌中DHHA异构酶phzF基因的基础上进一步敲除了绿针假单胞菌基因组中的pykF基因。该培养方法为无痕敲除绿针假单孢菌中DHHA异构酶phzF基因或绿针假单胞菌基因组中的pykF基因。该基因工程菌株可以用于2,3‑二氢‑3‑羟基邻氨基苯甲酸中的制备。与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：1、用于生产DHHA的菌株为绿针假单胞菌，至今未有致病性的报道，因此其环境友好，安全可靠；2、DHHA为GP72的天然代谢中间体，无需外源基因的引入，因此更加安全可靠。

摘要： 本发明涉及抗肿瘤基因工程二价类抗体及其制备方法及抗肿瘤基因工程药物，该抗肿瘤基因工程二价类抗体包括恒定区以及与恒定区连接的SIRPα和B7。该抗肿瘤基因工程抗体的制备方法包括：获取恒定区基因、SIRPα基因和B7基因；构建包括上述三种基因的表达质粒；将表达质粒转染至表达细胞株中进行培养；分离纯化后得到二价类抗体。本发明的二价类抗体同时具有可分别与肿瘤细胞上的CD47位点和淋巴细胞上的CD28位点特异性结合的SIRPα和B7，特异性结合作用显著增强，可以实现双重抑制机体肿瘤细胞的能力；本发明的制备方法工艺简单、切实可行；具有二价类抗体的抗肿瘤基因工程药物可有效作用于肿瘤细胞，并有效预防和治疗肿瘤疾病。

摘要： 本发明公开了一种青霉基因工程菌的制备方法及青霉基因工程菌的应用，所述方法为：获得潮霉素抗性表达盒并克隆到目标质粒上，获得潮霉素抗性的重组质粒；分别克隆青霉脂肪酶基因PEL、扩展青霉甘油醛-3-磷酸脱氢酶启动子PgpdP和构巢曲霉色氨酸合成酶终止子TtrpC，得到有强启动子驱动的PEL基因表达盒；将PEL基因表达盒克隆到潮霉素抗性的重组质粒中，获得含潮霉素筛选标记PEL基因超表达载体；将该超表达载体转化工程农杆菌，利用农杆菌介导转化法将PEL基因表达盒转化到青霉菌株中，得到青霉基因工程菌。本发明获得的青霉工程菌产脂肪酶能力强，青霉工程菌制备的脂肪酶酶活比出发菌青霉野生菌提高了100％～150％。