地衣芽胞杆菌

摘要： L-酪氨酸是多种有价值的次级代谢产物的通用前体。地衣芽胞杆菌中芳香族氨基酸合成是通过莽草酸途径进行,但代谢调控的潜在机制仍不清楚。该研究对地衣芽胞杆菌合成酪氨酸过程中莽草酸途径代谢节点进行挖掘。通过发酵优化、提升细胞摄氧能力、荧光定量PCR检测途径基因转录水平、多个节点基因的不同组合方式过表达以及莽草酸补加等策略,对莽草酸途径代谢节点进行挖掘。在最优发酵条件下,重组菌HGPA合成酪氨酸单位菌体产量可以达到71 mg/L。荧光定量PCR结果表明,vgb基因的过表达后aroC和aroD基因转录水平分别是原始菌的2.57和2.91倍,酪氨酸单位菌体产量从71 mg/L提升至100 mg/L,提升了40.8%。在HGPA的基础上分别过表达基因aroC,aroD和aroK,其中HGPAD与HGPAK重组菌酪氨酸合成量可以达到1200 mg/L。发酵过程中补加5 g/L莽草酸时,HGPA与HGPAK的酪氨酸合成分别可以达到1311和1490 mg/L。aroD和aroK是地衣芽胞杆菌合成酪氨酸过程中莽草酸途径的重要代谢节点。aroD和aroK的过表达可以提升L-酪氨酸的合成但是不能彻底解除节点代谢流的限制。该研究为进一步实现地衣芽胞杆菌工业生产L-酪氨酸及其高价值衍生物的应用潜能奠定了基础。

摘要： 地衣芽胞杆菌(Bacillus licheniformis)DW2生长和杆菌肽合成代谢在能量及前体利用方面存在竞争关系,为了提高杆菌肽的合成效率,在20 L发酵罐水平研究了ccpN基因敲除对杆菌肽合成与细胞生长的调控效应。结果显示:菌株DW2ΔccpN杆菌肽峰值效价(1337 U/mL)比菌株DW2峰值效价(1024 U/mL)提高30.6%。但是,其峰值生物量(3.39×10^(10) CFU/mL)仅为菌株DW2峰值生物量(5.56×10^(10) CFU/mL)的61%。另外,DW2ΔccpN胞外氨基酸浓度在36 h时、溢流有机酸总量在22~27 h时分别比DW2提高43.8%和24.7%~37.6%。同时,细胞对数期能量代谢(citZ、icd、zwf、cydA)、氨基酸转运(relA、brnQ、vpr、yvbW)以及丙酮酸转化(pycA、pckA、pyk)和hprK等13个基因的转录组表达(TPM值)也上调2.0~18.4倍,说明菌株DW2ΔccpN的溢流代谢增强,为对数后期提供了更多的碳源和能源分子;细胞严谨响应增强使CodY的调控活性下降,降低了细胞的生长速率,提高了氨基酸转运能力,增加了ATP和NADPH的供应,最终提高了杆菌肽的合成效率,为杆菌肽发酵生产提供了重要参考。

摘要： 杆菌肽是一种主要由芽胞杆菌产生的广谱性抗生素,目前作为兽药广泛应用于畜禽养殖领域.前体氨基酸供应不足可能是限制微生物发酵高产杆菌肽的重要因素.文中以杆菌肽工业生产菌株——地衣芽胞杆菌Bacillus licheniformis DW2为出发菌株,研究L-半胱氨酸供给模块强化对杆菌肽合成的影响.首先,构建了L-半胱氨酸合成酶基因cysK强化表达菌株,杆菌肽效价相比于对照菌株提高了9.47％.接着,为提高L-半胱氨酸合成前体供给,对L-丝氨酸乙酰转移酶基因cysE和硫代硫酸盐/硫酸盐胞内转运蛋白基因cysP进行强化,杆菌肽产量分别提高了7.23％和8.52％.随后,结果表明转运蛋白TcyP负责从胞外向胞内转运胱氨酸,强化表达TcyP后胞内L-半胱氨酸浓度和杆菌肽效价分别提高了29.19％和7.79％.通过组合代谢工程育种,在整合表达了基因cysK基础上,利用强启动子PbacA分别替换基因cysP、cysE和tcyP原始启动子,得到工程菌株CYS4 (DW2∷cysK-PbacA(cysP)-PbacA(cysE)-PbacA(tcyP)),杆菌肽效价达到910.02 U/mL,相比于出发菌株DW2 (747.71 U/mL)提高了21.10％.最后,通过3L发酵罐小试实验,进一步证实了强化L-半胱氨酸有利于杆菌肽合成.研究表明,强化胞内L-半胱氨酸供给水平是提高地衣芽胞杆菌中杆菌肽产量的有效策略,为杆菌肽工业生产提供了一株具有良好应用前景的菌株.

摘要： 分别利用糖基转移酶Yj iC、YdhE、Yoj K的过表达载体电转化地衣芽胞杆菌DW2,相应获得重组菌株ID02、ID03和ID04,并借助pgcA和gtaB基因强化菌株ID02中的UDP-葡萄糖代谢途径来获得重组菌株ID05,研究了基因改造及发酵条件对淫羊藿次苷D2产量的影响.结果表明,Yj iC、YdhE、Yoj K均可糖基化酪醇合成淫羊藿次苷D2,且三者酶催化活性依次减弱;强化UDP-葡萄糖代谢途径并不能促进淫羊藿次苷D2的合成;经正交试验优化后的发酵培养基中NH4 Cl为3 g/L、磷酸缓冲盐为75 mmol/L,菌株ID02在此条件下发酵48 h时相应的淫羊藿次苷D2的产量可达到4010 mg/L.

摘要： 杆菌肽是一种主要由芽胞杆菌产生的广谱性环肽类抗生素,目前广泛应用于兽药领域.能量代谢在微生物高效合成目的代谢产物中具有重要作用.文中以杆菌肽工业生产菌株地衣芽胞杆菌Bacillus licheniformis DW2为出发菌株,首先构建了呼吸链分支途径细胞色素bd泛醇氧化酶基因cydB缺失菌株,发现cydB缺失后杆菌肽效价和胞内ATP浓度相比于对照菌株分别提高了10.97％和22.96％.接着,证实了强化表达另外一条呼吸链分支途径——细胞色素aa3氧化酶基因qoxA能够提高杆菌肽合成水平,其杆菌肽效价和胞内ATP浓度相比于对照菌株分别提高了18.27％和34.00％.强化ADP合成供给也是促进胞内ATP积累的有效策略,结果表明强化表达腺苷激酶DcK和腺苷酸激酶AdK均可以提高杆菌肽效价和胞内ATP浓度,其中强化表达DcK效果较好,其杆菌肽效价相比对照提高16.78％.最后,通过组合代谢工程育种,在基因cydB缺失菌DW2△cydB基础上整合表达了qoxA和dck,得到工程菌株DW2-CQD (DW2△cydB∷qoxA∷dck),发酵结果表明,DW2-CQD杆菌肽效价达到954.25 U/mL,相比于对照菌株提高了21.66％,单位菌体杆菌肽效价为2.11 U/CFU,相比对照提高了11.05％.此外,DW2-CQD胞内ATP浓度为39.54 nmol/L,相比于对照提高了49.32％.结果 证实能量代谢工程是提高杆菌肽发酵水平的有效策略,提供了一株具有工业化应用前景的杆菌肽生产菌株.

摘要： 目的:中西医结合治疗腹泻型肠易激综合征(IBS-D)的疗效.方法:随机选取湛江中心人民医院及广东燕岭医院收治的IBS-D患者,每组各36例.中药组给予乌梅丸治疗;西药组给予马来酸曲美布汀和地衣芽胞杆菌活菌治疗.3组连续治疗4周.观察3组患者临床症状,并进行疗效评价.结果:中药组总有效率为86.67％,西医组总有效率为63.89％,中西药组总有效率为94.44％,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗后,差异有统计学意义(P＜0.05),3组患者SF-36比较,差异有统计学意义(P＜0.05),中西药组SF-36均明显高于中药组和西药组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:中西医结合治疗能够显著改善IBS-D患者的临床症状和生活质量,效果优于单纯中药或西药治疗.

摘要： 细菌在其发酵过程中会产生大量的活性氧(reactive oxygen species,ROS),包括超氧阴离子(O2-)、过氧化氢(H2O2)和羟基自由基(·OH).当细胞体内氧化与抗氧化作用失衡,细胞产生过多的ROS,对细胞造成巨大损伤,并最终造成细胞衰老和死亡,这种现象叫氧化应激(oxidative stress,OS).文章总结了近年来国内外对细菌氧化应激反应的研究进展,希望能为未来地衣芽孢杆菌工业菌株的改造提供思路.

摘要： 地衣芽胞杆菌发酵产杆菌肽的过程中,菌体前期生长和代谢的强度会影响杆菌肽的合成.为了提高效价,在20 L发酵罐水平研究变温控制策略对效价合成的影响,发现:37°C发酵温度(对照)下的效价在21 h到达最高点(962 U/mL),平均效价合成速率为45.33 U/(mL·h).通过降低发酵培养温度(35.5°C、34°C、32.5°C和31°C),可以降低菌体生长速率和糖耗速率,虽然会降低平均效价合成速率,但延长了效价合成时间.在34°C发酵温度下以37.66 U/(mL·h)的平均效价合成速率至29 h到达效价最高点(1092 U/mL),比37°C条件下提高了13.5％.基于降温控制策略进行18 h前后分别34°C和37°C的变温策略研究,其平均效价合成速率为41.14 U/(mL·h),效价在29 h到达最高点(1193 U/mL),比对照(37°C培养)合成周期延长了8h,效价提高了24％,也比全程34°C培养提高了9.2％.该策略增产效果显著,便于工艺控制.

摘要： 本研究发现地衣芽胞杆菌dlt操纵子缺失后，纳豆激酶的表达量提高，其中dltA,dltB,dltC和dltD的缺失菌中纳豆激酶酶活分别提高了12.8%，27.2%，32%和40%。通过测定缺失菌株结合阳离子能力发现，dlt操纵子缺失使得菌株结合阳离子的能力增加，由此说明细胞表面净负电荷的增加有利于外源蛋白的分泌。本研究从改变细胞壁带电性的角度出发，研究细胞壁表面净负电荷的增加与外源蛋白表达的关系，并通过敲除dlt操纵子提高了外源蛋白的分泌水平。本研究获得了一株可以高效分泌外源蛋白的宿主菌，并为提高外源蛋白的表达提供一个新策略。

摘要： 聚γ谷氨酸和2,3-丁二醇是两种重要的化合物,广泛运用于能源、医药、农业等领域.地衣芽胞杆菌WX-02具有同时合成聚γ谷氨酸和2,3-丁二醇的能力.优化了地衣芽胞杆菌WX-02联产聚γ谷氨酸和2,3-丁二醇的发酵培养基,并进行了50L发酵罐小试放大.分批发酵结果显示,采用优化后的培养基,聚γ谷氨酸和2,3-丁二醇的产量分别为42.5g/L和76.13g/L,比优化前分别提高了26.5％和188％.在联产发酵中聚γ谷氨酸和2,3-丁二醇的产量能够分别达到单独合成这两种物质的水平,为工业化联产聚γ谷氨酸和2,3-丁二醇奠定了基础.

摘要： 本研究在体外是将饲用芽胞杆菌和大肠杆菌共培养检测其对大肠杆菌的抑制作用,并用牛津杯法检测其抑菌效果.在体内将芽胞杆菌饲喂黄羽肉鸡,后检测其抗氧化力和肠道细菌数量来确定其对大肠杆菌的抵制作用.结果表明在共培养阶段24h后,芽胞杆菌会显著地降低大肠杆菌的数量,由对照组的109CFU/mL降低到105CFU/mL,至48h后,培养液中的大肠杆菌数量降低到103CFU/mL,至72h后培养液中检测不出大肠杆菌数.牛津杯法检测抑菌效果表明在伊红美兰琼脂培养基中,在添加芽胞杆菌的周围会出现明显的抑菌圈,直径达15.54mm.在体内试验得出黄羽肉鸡按1%的添加量饲喂芽胞杆菌后,其机体的抗氧化力明显增强,肠道的微生物区系得到明显的改善,盲肠菌群中大肠杆菌数量显著下降.芽胞杆菌会明显抑制鸡源大肠杆菌.

摘要： 本研究以Basillus.licheniformis WX-02为研究对象,研究了甲酸钠处理对B.licheniformis WX-02生物合成γ—聚谷氨酸(γ-PGA)的影响.结果表明,在培养基添加0.5％的甲酸钠时,其γ-PGA产量相比对照提高了106％,单位菌体的产量提高了326％,谷氨酸钠表观转化率提高了208％,γ-PGA分子量明显增大.另外，添加甲酸钠后胞内的ATP,ADP和AMP的含量明显增加，说明甲酸钠可能促进了B.licheniformis WX-02的腺普酸代谢，用于提供细胞代谢所需的能量。添加甲酸钠后B.licheniformis WX-02胞内的G6P,F6P、柠檬酸、a-酮戊二酸和谷氨酸的含量增加，苹果酸的含量基本不变，而未检测到谷氨酞胺，这说明甲酸钠可能增强了葡萄糖向细胞内的转运，促进了柠檬酸循环向合成谷氨酸途径的转化，减弱了谷氨酸向谷氨酞胺的转化，从而增强了B.licheniformis WX-02合成γ-PGA的能力。

摘要： 针对微囊化细胞三维培养研究背景,以壳聚糖、海藻酸钠为微载体制备材料,采用脉冲电场液滴工艺制备壳聚糖/海藻酸钙微胶囊。以地衣芽孢杆菌为细胞模型，系统考察了制备条件对载细胞壳聚糖/海藻酸钙微胶囊培养特性的影响。结果表明:地衣芽孢杆菌在微胶囊内正常生长；微生物细胞微囊化培养时存在一个最适初始细胞接种密度；成膜壳聚糖分子量和浓度对于微囊化细胞培养的影响表现在初次培养的开始阶段,当培养进入稳定期和批次培养后,影响不再显著；减小微胶囊的体积有利于微囊化细胞培养。

摘要： 本文以地衣芽孢杆菌为细胞模型，将AC微胶囊体系用于地衣芽孢杆菌的固定化培养，考察了微胶囊粒径、初始接种密度、壳聚糖分子量和溶液浓度等制备条件对囊内细胞生长特性的影响。结果表明:地衣芽孢杆菌在微胶囊内正常生长;微生物细胞微囊化培养时存在一个最适初始细胞接种密度;成膜壳聚糖分子量和浓度对于微囊化细胞培养的影响表现在初次培养的开始阶段，当培养进入稳定期和批次培养后，影响不再显著;减小微胶囊的体积有利于微囊化细胞培养。

摘要： 角蛋白酶是可以特异性降解角蛋白的一种蛋白酶,其在饲料以及织物处理行业具有巨大的潜在用途.本文介绍了两株具有降解角蛋白活力的菌种所产角蛋白酶的酶学性质和30-L发酵罐条件下的发酵优化.首先将来源于Bacillus licheniformis BBE11-1的角蛋白酶基因ker成功的实现了在枯草芽孢杆菌WB600中的克隆表达,对重组角蛋白酶进行了纯化,获得分子量大小约32 kDa的重组角蛋白酶.酶学性质研究表明,该重组角蛋白酶最适温度为40°C,最适pH值为10.5,属于丝氨酸蛋白酶,金属离子Mg2+、Co2+、DMSO和DTT对酶活力有促进作用,而Mn2+对其有抑制作用.对重组菌在30-L罐条件下进行了发酵培养,酶活最高达到1425 U/mL.对另外一株Stenotrophomonas maltophilia BBE11-1所产角蛋白酶的研究发现,该菌的角蛋白降解活性由三种酶共同作用,其中两种(K1:48kDa;K2:36 kDa)具有降解角蛋白的活力,另一种酶蛋白(K3:16 kDa)具有二硫键还原能力,可能参与协助降解角蛋白的过程.K1角蛋白酶最适温度为50°C,最适pH值为9,属于金属丝氨酸双重蛋白酶,Zn2+和Mn2+对该酶具有显著抑制作用.应用两阶段溶氧控制策略及温度变化策略进行了30-L发酵罐条件下的角蛋白酶发酵培养.结果表明,30°C发酵6h后调整至23°C能够显著提高角蛋白酶发酵水平,最高酶活可达1800 U/mL.

摘要： 角蛋白酶是可以特异性降解角蛋白的一种蛋白酶,其在饲料以及织物处理行业具有巨大的潜在用途.本文介绍了两株具有降解角蛋白活力的菌种所产角蛋白酶的酶学性质和30-L发酵罐条件下的发酵优化.首先将来源于Bacillus licheniformis BBE11-1的角蛋白酶基因ker成功的实现了在枯草芽孢杆菌WB600中的克隆表达,对重组角蛋白酶进行了纯化,获得分子量大小约32 kDa的重组角蛋白酶.酶学性质研究表明,该重组角蛋白酶最适温度为40°C,最适pH值为10.5,属于丝氨酸蛋白酶,金属离子Mg2+、Co2+、DMSO和DTT对酶活力有促进作用,而Mn2+对其有抑制作用.对重组菌在30-L罐条件下进行了发酵培养,酶活最高达到1425 U/mL.对另外一株Stenotrophomonas maltophilia BBE11-1所产角蛋白酶的研究发现,该菌的角蛋白降解活性由三种酶共同作用,其中两种(K1:48kDa;K2:36 kDa)具有降解角蛋白的活力,另一种酶蛋白(K3:16 kDa)具有二硫键还原能力,可能参与协助降解角蛋白的过程.K1角蛋白酶最适温度为50°C,最适pH值为9,属于金属丝氨酸双重蛋白酶,Zn2+和Mn2+对该酶具有显著抑制作用.应用两阶段溶氧控制策略及温度变化策略进行了30-L发酵罐条件下的角蛋白酶发酵培养.结果表明,30°C发酵6h后调整至23°C能够显著提高角蛋白酶发酵水平,最高酶活可达1800 U/mL.

摘要： 角蛋白酶是可以特异性降解角蛋白的一种蛋白酶,其在饲料以及织物处理行业具有巨大的潜在用途.本文介绍了两株具有降解角蛋白活力的菌种所产角蛋白酶的酶学性质和30-L发酵罐条件下的发酵优化.首先将来源于Bacillus licheniformis BBE11-1的角蛋白酶基因ker成功的实现了在枯草芽孢杆菌WB600中的克隆表达,对重组角蛋白酶进行了纯化,获得分子量大小约32 kDa的重组角蛋白酶.酶学性质研究表明,该重组角蛋白酶最适温度为40°C,最适pH值为10.5,属于丝氨酸蛋白酶,金属离子Mg2+、Co2+、DMSO和DTT对酶活力有促进作用,而Mn2+对其有抑制作用.对重组菌在30-L罐条件下进行了发酵培养,酶活最高达到1425 U/mL.对另外一株Stenotrophomonas maltophilia BBE11-1所产角蛋白酶的研究发现,该菌的角蛋白降解活性由三种酶共同作用,其中两种(K1:48kDa;K2:36 kDa)具有降解角蛋白的活力,另一种酶蛋白(K3:16 kDa)具有二硫键还原能力,可能参与协助降解角蛋白的过程.K1角蛋白酶最适温度为50°C,最适pH值为9,属于金属丝氨酸双重蛋白酶,Zn2+和Mn2+对该酶具有显著抑制作用.应用两阶段溶氧控制策略及温度变化策略进行了30-L发酵罐条件下的角蛋白酶发酵培养.结果表明,30°C发酵6h后调整至23°C能够显著提高角蛋白酶发酵水平,最高酶活可达1800 U/mL.

摘要： 角蛋白酶是可以特异性降解角蛋白的一种蛋白酶,其在饲料以及织物处理行业具有巨大的潜在用途.本文介绍了两株具有降解角蛋白活力的菌种所产角蛋白酶的酶学性质和30-L发酵罐条件下的发酵优化.首先将来源于Bacillus licheniformis BBE11-1的角蛋白酶基因ker成功的实现了在枯草芽孢杆菌WB600中的克隆表达,对重组角蛋白酶进行了纯化,获得分子量大小约32 kDa的重组角蛋白酶.酶学性质研究表明,该重组角蛋白酶最适温度为40°C,最适pH值为10.5,属于丝氨酸蛋白酶,金属离子Mg2+、Co2+、DMSO和DTT对酶活力有促进作用,而Mn2+对其有抑制作用.对重组菌在30-L罐条件下进行了发酵培养,酶活最高达到1425 U/mL.对另外一株Stenotrophomonas maltophilia BBE11-1所产角蛋白酶的研究发现,该菌的角蛋白降解活性由三种酶共同作用,其中两种(K1:48kDa;K2:36 kDa)具有降解角蛋白的活力,另一种酶蛋白(K3:16 kDa)具有二硫键还原能力,可能参与协助降解角蛋白的过程.K1角蛋白酶最适温度为50°C,最适pH值为9,属于金属丝氨酸双重蛋白酶,Zn2+和Mn2+对该酶具有显著抑制作用.应用两阶段溶氧控制策略及温度变化策略进行了30-L发酵罐条件下的角蛋白酶发酵培养.结果表明,30°C发酵6h后调整至23°C能够显著提高角蛋白酶发酵水平,最高酶活可达1800 U/mL.

摘要： 本发明提供敲除malR的地衣芽胞杆菌菌株在杆菌肽生产中的应用，本发明通过基因工程的方法敲除了地衣芽孢杆菌DW2的基因组内的负责转录碳代谢转录因子MalR的基因—malR基因，成功得到了缺失malR基因的地衣芽胞杆菌DW2ΔmalR。相对于地衣芽胞杆菌DW2来说，本发明所构建得到的菌株在杆菌肽发酵过程中发酵液中杆菌肽的产量提高了23％以上。

摘要： 本发明提供一种强化YvbW表达的地衣芽胞杆菌在杆菌肽生产中的应用，本发明通过基因工程的方法通过在地衣芽孢杆菌的基因组内插入氨基酸通透酶YvbW基因，得到地衣芽孢杆菌DW2‑yvbW，该菌株在杆菌肽发酵过程中发酵液中杆菌肽的产量提高了13％以上。

摘要： 本发明涉及微生物工程领域，公开了一种地衣芽胞杆菌高产杆菌肽的发酵培养基配方及其应用，通过采用富含半胱氨酸，价格低廉的菜籽粕来替代部分豆粕作为发酵原料，显著提高了杆菌肽发酵产量，杆菌肽效价达到849.3U/mL，比原始培养基提高了12.4%，同时对豆粕和菜籽粕的市场价格进行调研，豆粕的价格在3200元/吨左右小范围波动，菜籽粕的平均价格在2800元/吨左右小范围波动，发酵原料的替换显著的降低了发酵成本，提高了地衣芽胞杆菌发酵杆菌肽的效益。

摘要： 本发明提供一种低异味产杆菌肽地衣芽胞杆菌及其构建方法和应用，本发明通过基因工程的方法对地衣芽胞杆菌DW2基因组DNA序列中的

摘要： 本发明公开了一种提高地衣芽胞杆菌芽胞形成效率的方法，属于芽胞杆菌芽胞的制备领域。本发明发现柠檬酸具有调控芽胞形成效率的新功能，柠檬酸能缓解细胞的氧化胁迫，并可使芽胞形成过程中阻遏spo0A表达的abrB基因的表达量大幅下降。本发明方法为在发酵培养地衣芽胞杆菌的过程中加入柠檬酸，将柠檬酸作为代谢调控因子来使用，显著促进了芽胞的形成效率。本发明具有补料成分更简单、明确、原料易购、成本低、补加方法明确、操作可控性高、适用于发酵生产等优点。

摘要： 本发明公开了一种地衣芽胞杆菌高细胞密度和/或高芽胞量的发酵方法，属于芽胞杆菌芽胞的制备领域。本发明发现了柠檬酸具有提高芽胞杆菌生物量和/或芽孢量的应用。本发明发酵方法为在发酵培养地衣芽胞杆菌的过程中加入柠檬酸，将柠檬酸作为代谢调控因子来使用，能使地衣芽胞杆菌的细胞数和芽胞数得到极显著的提升。本发明具有补料成分更简单、明确、原料易购、成本低、补加方法明确、操作可控性高、适用于发酵生产等优点。

摘要： 本发明公开一种环二肽合成酶基因及其应用和副地衣芽胞杆菌，涉及基因工程技术领域。所述环二肽合成酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明提出的环二肽合成酶基因可以编码出一种环二肽合成酶，所述环二肽合成酶能够直接以细胞内氨酰‑tRNAs(aa‑tRNAs)作为底物合成出大量的环二肽cLL、cLP和cLM，合成工艺简单，且得到的所述环二肽cLL、cLP和cLM纯度高，并对根结线虫具有较强的毒杀活性，能用于制备根结线虫杀虫剂。

摘要： 本发明属于微生物基因工程技术领域，具体涉及一种高效合成羟基酪醇的地衣芽胞杆菌、构建方法及其应用。本发明首先在地衣芽胞杆菌DW2基础上进一步进行多种改造，获得重组地衣芽胞杆菌DH7；选择来源于大肠杆菌中的4‑羟基苯乙酸‑3‑羟化酶和乳酸乳球菌的酮酸脱羧酶，将其转入到地衣芽胞杆菌DH7底盘细胞中，实现了羟基酪醇产量的从头合成；通过组合表达4‑羟基苯乙酸‑3‑羟化酶HpaBC和酮酸脱羧酶KivD突变体，使得所述重组地衣芽胞杆菌利用葡萄糖等廉价碳源可以高效合成羟基酪醇，产量高达5.55±0.37。本发明公开的重组地衣芽胞杆菌可以解决羟基酪醇产量低，价格昂贵的问题，具有广阔的工业前景。

摘要： 本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种新的高效表达碱性蛋白酶的地衣芽胞杆菌工程菌株的构建及应用。本发明通过对克劳氏芽胞杆菌（Bacillus clausii）来源的碱性蛋白酶进行改造和筛选，获得了适用于地衣芽胞杆菌表达的碱性蛋白酶基因，所述基因为SEQ ID NO.7所示。将该基因在地衣芽胞杆菌BL10中进行表达，使用国标法检测，构得的地衣芽胞杆菌工程菌株的蛋白酶酶活力，该突变株的碱性蛋白酶酶活力达到29114.85 U/mL，相比原始的碱性蛋白酶生产株的酶活提高了19.41%，本发明促进了碱性蛋白酶应用水平的提高。

摘要： 本发明本发明属于微生物基因工程技术领域，具体涉及一株发酵法生产酪醇的地衣芽胞杆菌、及其构建方法和应用。申请人在地衣芽胞杆菌中引入来源乳酸乳球菌的酮酸脱羧酶基因