RNP

摘要： 为了优化和筛选谷子中高效的CRISPR/Cas9(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats/CRISRP-associated nuclease 9)基因编辑系统,针对谷子八氢番茄红素脱氢酶基因(SiPDS)设计6种gRNA(gRNA1—gRNA2针对外显子1,gRNA3—gRNA6针对外显子12),构建多种CRISPR/Cas9基因编辑系统,通过聚乙二醇(PEG)介导的方法转入谷子原生质体中,然后利用开发的大规模平行测序技术快速检测它们对SiPDS的突变效率。结果表明,采用7 d谷子黄化苗幼茎建立的原生质体转化系统的转化效率较高,为50.44%~57.36%。将Super启动子(SP)、谷子内源的泛素启动子(Ubi)分别驱动Cas9基因的基因编辑系统转入谷子原生质体中,发现两者对SiPDS基因的突变效率分别为0.5%、5.5%。随后采用Ubi启动子驱动Cas9基因,比较单一gRNA、双gRNA和tRNA结构的基因编辑系统对SiPDS基因的突变效率,发现双gRNA基因编辑系统Ubi-dgRNAE1和Ubi-dgRNAE12的突变效率分别较单一gRNA基因编辑系统提高了1.66倍和1.11倍;tRNA基因编辑系统Ubi-tRNA的突变效率较单一gRNA基因编辑系统提高了5.87倍,为51.24%,且Ubi-tRNA可同时针对多个位点进行编辑,其多位点突变频率为3.23%。比较gRNA3、gRNA4、gRNA5体外转录产物分别与Cas9蛋白混合制成的核糖核蛋白(RNP)复合物的体外切割活性,发现RNP-gRNA5复合物体外切割活性最高,其对SiPDS基因的突变效率是2.0%,并且引起的突变类型主要为小于3 bp的缺失。

摘要： 多发飞机是中国民航主力机型,而一发失效标准仪表离场程序(EOSID)的广泛应用,既保证了飞行安全,还能提升飞机的最大起飞重量,从而提高经济效益.本文以A320飞机为试点,借助星基导航,将传统仪表程序与PBN程序编码结合,提高EOSID的可操作性.本文的成果能充分发挥机载设备和系统的功能,实现在起飞一发失效情况下对航迹的精确控制,降低机组在紧急情况下的工作负荷,实现更高的安全运行水平.

摘要： 多发飞机是中国民航主力机型,而一发失效标准仪表离场程序(EOSID)的广泛应用,既保证了飞行安全,还能提升飞机的最大起飞重量,从而提高经济效益。本文以A320飞机为试点,借助星基导航,将传统仪表程序与PBN程序编码结合,提高EOSID的可操作性。本文的成果能充分发挥机载设备和系统的功能,实现在起飞一发失效情况下对航迹的精确控制,降低机组在紧急情况下的工作负荷,实现更高的安全运行水平。

摘要： CRISPR/Cas9是目前最成功的基因组精准编辑技术.迄今为止至少在9种食药用真菌中已有相关的应用报道,包括刺芹侧耳(杏鲍菇)、糙皮侧耳(平菇)、双孢蘑菇、灵芝、裂褶菌、灰盖鬼伞、金针菇、蛹虫草和竹黄菌.本文综述了CRISPR/Cas9系统的工作原理及递送策略,针对在食药用真菌中应用存在的一些问题进行分析,并提出优化方案.最后借鉴目前CRISPR技术发展的前沿方向,如多基因编辑、碱基编辑、引导编辑、转录调控等,对未来在食药用真菌领域的应用前景进行了展望.

摘要： 本文分析了飞行模拟机导航位置数据计算的原理,从参与飞行模拟机位置计算的4方面模块的功能及其相互关系的角度,深入分析了在飞行模拟机实际运行当中出现的各种位置计算偏差产生的原因,对于消除飞行模拟机运行当中的位置误差,提高飞行训练质量有着实际的指导意义。

摘要： 随着我国民航事业的不断发展,机场航班数量越来越多,机场数量越来越多,航线网络越来越复杂,传统飞行程序已经不适应我国民航部分地区的发展需要,逐渐被PBN程序所取代,但是部分地区仍然使用传统飞行程序,因此,研究PBN程序与传统飞行程序对未来民航的发展具有重要意义.

摘要： 所需导航性能(RNP)和区域导航(RNAV)共同属于基于性能导航(PBN),前者具备机载导航性能监视和警告的能力,能够对飞机的实际导航性能(ANP)进行动态监视,并判断其是否满足PBN运行的要求.我国过去采用的ANP计算方法现如今已经无法适应北斗卫星导航系统,基于此,文章将提出一种新型的ANP计算评估方法,用于多星座的ANP计算评估.

摘要： 随着社会经济的发展和进步,CNS/ATM系统建设不断地被补充和完善,具有导航性能的PBN概念的进近程序被探讨和研发.本文探讨了PBN程序在提高飞行安全水平的前提下,合理利用选择各类进近程序,将机场容量和运行效能等方面的运用率最大化,以此满足我国民航快速发展的需求.

摘要： 本发明公开了一种高效的CRISPR RNP和供体DNA共位介导的基因插入或替换方法及其应用。该方法包括如下步骤：(1)将供体DNA进行生物素标记，得到生物素标记的供体DNA；(2)将Cas9蛋白与单价链霉亲和素的融合蛋白，sgRNA和生物素标记的供体DNA混合均匀，静置，得到CRISPR RNP‑供体DNA复合体；(3)将CRISPR RNP‑供体DNA复合体进行细胞核转化，实现基因插入或替换。本发明中利用该融合蛋白能结合生物素标记供体DNA的特性，使CRISPR RNP和供体DNA共同出现在目标位点，实现供体DNA在目标位点的精准插入或对目标位点基因的精准替换，适用于农作物和家畜育种方面。

摘要： 本发明涉及一种增强植物韧皮部RNP信号交流的伴侣蛋白与应用。本发明获得了一个新的韧皮部RNP信号交流辅助因子伴侣蛋白CCT复合体，通过根癌农杆菌梨叶片瞬时表达及发根农杆菌转基因方式证实缺少伴侣蛋白CCT复合体，明显减弱RNP复合体在韧皮部中的运输效率。通过伴侣蛋白CCT复合体的过量表达可快速提高RNP复合体在韧皮部中的交流，同时也可通过沉默伴侣蛋白CCT复合体减弱某些信号分子的长距离运输，使用协助因子促进RNP复合体通过嫁接口由砧木向接穗的远距离运输，人为操控砧木基因影响接穗性状，解决了RNP复合体在韧皮部中的运输性无法人为调控的问题，且能够普遍应用于各种类型植物。

摘要： 本发明提出一种用于RNP AR功能的自主监控与告警方法和系统。RNP AR功能以FMS（包括机载端RNP AR系统和云端FMS）作为核心功能载体，机载端RNP AR系统实时且高效地将机上数据传输至地面云端FMS服务站，并且云端FMS进行RNP AR计算。当计算结果诊断出影响RNP AR进近的故障或错误数据时，云端FMS同时向地面塔台和飞机自动发出告警信息，提示塔台和飞行员需要执行RNP AR复飞操作。

摘要： 本发明提出一种用于在不更改飞机现有航电系统驻留功能的情况下通过扩展型计算机在飞机上实现RNP AR运行能力的系统与方法。驻留有扩展型RNP AR计算机的飞行管理系统及自动飞行功能模块可实现RNP AR功能。同时，扩展型RNP AR计算机能接收飞机现有航电系统的航电综合处理机柜数据，对数据进行同步处理及监控比较后输出至其他用户系统。该非相似性、多冗余设备的架构设计方法，不仅能实现飞机RNP AR功能的运行，还能解决共模问题，提高飞机安全性。

摘要： 公开了使用CRISPR/CAS9系统的腺相关病毒(AAV)递送和用于整合的核糖核蛋白对细胞进行遗传工程改造的方法。在一些方面中，本文公开了用于进行该方法的AAV质粒。

摘要： 本发明属于飞蝗生物技术和基因编辑技术领域，具体涉及一种制备飞蝗Lmzen纯合突变体的方法、RNP复合物及应用，一种制备飞蝗Lmzen纯合突变体的方法，其包括以下步骤：1)构建Lmzen基因敲除RNP复合物，其包括从5’端到3’端的以下可操作性连接的元件：T7启动子，Lmzen基因靶点和tracRNA‑crRNA所转录而成的RNA(sgRNA)；Cas9蛋白；ddH2O；2)将步骤1)所述的Lmzen基因敲除RNP复合物共转新鲜飞蝗卵，孵化，得G0代，将G0代与野生型杂交得G1代；3)将步骤2)所述G1代自交，获得的G2代，即为飞蝗Lmzen纯合突变体。本发明利用CRISPR/Cas9技术敲除飞蝗zen基因，提供了稳定有效的Lmzen纯合突变体品系。首次敲除飞蝗zen基因，成功实现了纯合突变体的构建，其后代具有大量死亡表型。

摘要： 本发明公开了一种具有高效同源定向修复活性Cas9‑RNAi RNP的制备方法，其中，选择对NHEJ途径的关键蛋白Ligase 4进行短暂抑制，通过延长Cas9RNP的gRNA的3′端以构建shRNA的类似结构，利用大肠杆菌细胞“一步法”表达Cas9RNP技术，得到携带特定sgRNA‑shRNA的Cas‑RNAi RNP。本发明的Cas‑RNAi RNP实现了基因编辑与RNA干扰的功能联用，设计针对Ligase 4基因的shRNA碱基序列，以期对NHEJ途径进行暂时抑制，从而实现高效的HDR修复。

摘要： 本发明提出一种用于RNP AR功能的自主监控与告警方法和系统。RNP AR功能以FMS（包括机载端RNP AR系统和云端FMS）作为核心功能载体，机载端RNP AR系统实时且高效地将机上数据传输至地面云端FMS服务站，并且云端FMS进行RNP AR计算。当计算结果诊断出影响RNP AR进近的故障或错误数据时，云端FMS同时向地面塔台和飞机自动发出告警信息，提示塔台和飞行员需要执行RNP AR复飞操作。

摘要： 本发明提出一种用于在不更改飞机现有航电系统驻留功能的情况下通过扩展型计算机在飞机上实现RNP AR运行能力的系统与方法。驻留有扩展型RNP AR计算机的飞行管理系统及自动飞行功能模块可实现RNP AR功能。同时，扩展型RNP AR计算机能接收飞机现有航电系统的航电综合处理机柜数据，对数据进行同步处理及监控比较后输出至其他用户系统。该非相似性、多冗余设备的架构设计方法，不仅能实现飞机RNP AR功能的运行，还能解决共模问题，提高飞机安全性。

摘要： 本实用新型公开了一种辅助形成Cas9 RNP进行基因敲除的试剂盒，包括主盒体及盖合于主盒体上方的盒盖，还包括设于所述主盒体内的凹槽和能够拆卸的分盒体；所述凹槽内设有冰袋，所述凹槽下方设有温度监测系统；所述分盒体内设有若干cas9质粒离心管和滴管，所述cas9质粒离心管和滴管内分别装有对应体积的cas9质粒和电转液。本实用新型保证了实验过程中sgRNA的保存条件，避免sgRNA因高温降解而失效，分盒体从主盒体拆卸后单独存放于冰箱，占用空间小，冰箱能耗低。