RNA聚合酶

摘要： 2022年1月12日《研究》(Research)在线发表了浙江大学医学院那仁满都拉教授团队最新研究成果“Heat treatment promotes ubiquitin-mediated proteolysis of SARS-CoV-2 RNA polymerase and decreases viral load”(DOI:10.34133/2022/9802969)。研究发现,相对温和的热激(40°C)能够显著地诱导严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-Co V-2)RNA依赖的RNA聚合酶(又名NSP12)及其突变体降解。

摘要： 酶的相关知识在高中生物学教学中具有非常重要的地位。本文重点讨论在教学中关于聚合酶的两个问题。

摘要： 重组在RNA病毒中很常见,但有关重组的许多关键问题目前尚无法解释.本文主要针对RNA重组的发生机制及其影响因素,解释重组频率发生变化的原因,阐述RNA重组未来仍需解决的问题.RNA重组是RNA病毒特殊的遗传信息交换方式,其频率在不同的RNA病毒中显著不同.目前,研究者普遍认为重组发生的机制可分为复制型、非复制型重组以及重配,并且借助新方法和新技术,逐渐了解了影响该过程的病毒和细胞因子.有研究表明,RNA病毒中RNA的重组和重配率非常高,这与RNA依赖性RNA聚合酶(RdRp)的保真性相关.因此,深入了解病毒重组机制并发现其中的规律,可实现对新型病毒以及新疫情的预警预报,从而有预见性地控制疫病的发生和流行.

摘要： 当前,生命科学正处于第三次革命中,关注于生物信息存储、传输与表达,是理解“生命是什么”的最佳契机。生物医学也处于一个百花开放、百家争鸣的时代,“生物信息学”“系统生物学”“合成生物学”等多个学科快速发展,“Hi-C”“单细胞”“相分离”“焦亡”等是当前分子生物学领域最火的名词。分子生物学的研究大都绕不开“基因的表达”。调控基因表达最关键的调控元件就是启动子,它负责和RNA聚合酶的特异性结合,从而转录出RNA。

摘要： 瑞德西韦是一种核苷类似物前体药物,能够抑制病毒RNA聚合酶,体外实验显示其具有抗2019新型冠状病毒(2019-nCoV)的活性。为此,有学者进行了相关研究,研究人员以同情用药的方式向住院接受治疗的新型冠状病毒肺炎(新冠肺炎)患者提供了瑞德西韦。患者均为2020年1月25日至3月7日接受瑞德西韦治疗并且至少有随后1 d临床数据的2019-nCoV感染确诊患者,他们在呼吸环境空气时的血氧饱和度≤0.94或需要吸氧治疗。患者均接受瑞德西韦治疗10 d,方案为第1天静脉给药200 mg,在随后9 d中每日给药100 mg。

摘要： [背景]大肠杆菌中Small RNA EsrE调控琥珀酸脱氢酶的表达并影响细胞生长,对其调控机制的探究有利于加深EsrE对细胞生长影响的认识.[目的]探究大肠杆菌Small RNA EsrE的转录调控机制.[方法]通过双质粒报告系统筛选转录调控因子,并通过凝胶迁移实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)和qRT-PCR研究方法验证转录调控因子.[结果]双质粒报告系统证明RNA聚合酶亚基σ32 (RpoH)上调PesrE,β-羟酰-ACP脱水酶(FabZ)下调PesrE.EMSA结果和体内实验显示RpoH结合PesrE片段,FabZ不结合PesrE片段.[结论]RpoH直接结合启动子序列参与调控,FabZ以其他方式间接参与Small RNA EsrE的转录调控.

摘要： 细菌RNA聚合酶(RNA polymerase,RNAP)在细菌的生命周期中发挥重要的作用,是催化转录合成RNA的关键酶.RNAP抑制剂可通过作用于RNAP的活性中心及其附近,阻止细菌的RNA链的延伸从而抑制RNAP的活性.近年来,RNAP已成为筛选高效广谱抗菌药物的热门靶标,新型RNAP抑制剂的研究取得了较大的进展,已获得多种结构类型的新型RNAP抑制剂.本文就近年来报道的RNAP抑制剂进行综述.

摘要： 寨卡病毒是一种新出现的蚊媒病毒,属黄病毒家族,于1947年首次在乌干达恒河猴中发现,1952年在乌干达和坦桑尼亚联合共和国的人体内被确认.寨卡病毒在北美地区的爆发蔓延以及越来越多的致畸和神经病学证据引起了世卫组织极大的关注,粗略估计寨卡病毒感染者中20％严重残疾,接近5％的患者死亡,但目前仍没有针对寨卡病毒的特异性抗病毒药物,所以发现新的高效低毒抗寨卡病毒药物是一个刻不容缓的任务.通过本研究得到靶向作用于NSS的高效，低毒，选择性强的抗病寨卡病毒活性先导物。

摘要： 寨卡病毒是一种新出现的蚊媒病毒,属黄病毒家族,于1947年首次在乌干达恒河猴中发现,1952年在乌干达和坦桑尼亚联合共和国的人体内被确认.寨卡病毒在北美地区的爆发蔓延以及越来越多的致畸和神经病学证据引起了世卫组织极大的关注,粗略估计寨卡病毒感染者中20％严重残疾,接近5％的患者死亡,但目前仍没有针对寨卡病毒的特异性抗病毒药物,所以发现新的高效低毒抗寨卡病毒药物是一个刻不容缓的任务.通过本研究得到靶向作用于NSS的高效，低毒，选择性强的抗病寨卡病毒活性先导物。

摘要： 寨卡病毒是一种新出现的蚊媒病毒,属黄病毒家族,于1947年首次在乌干达恒河猴中发现,1952年在乌干达和坦桑尼亚联合共和国的人体内被确认.寨卡病毒在北美地区的爆发蔓延以及越来越多的致畸和神经病学证据引起了世卫组织极大的关注,粗略估计寨卡病毒感染者中20％严重残疾,接近5％的患者死亡,但目前仍没有针对寨卡病毒的特异性抗病毒药物,所以发现新的高效低毒抗寨卡病毒药物是一个刻不容缓的任务.通过本研究得到靶向作用于NSS的高效，低毒，选择性强的抗病寨卡病毒活性先导物。

摘要： 目的：探讨水飞蓟煎剂治疗急性鹅膏肽类毒素所致肝损伤的解毒机制.rn 方法：选用健康SD大鼠32只,随机分成4组(每组8只)：正常对照组、中毒对照组、水飞蓟煎剂1g/ml组、水飞蓟煎剂3g/ml组.除正常对照组外,其余3组均制成急性鹅膏毒蕈中毒鼠模型.造模后每日给予相应药物,3d后观察大鼠的存活情况,并采血检查谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和用紫外分光光度法测定肝细胞RNA聚合酶活性.rn 结果：中毒对照组的血浆ALT和AST较正常对照组明显增加(P＜0.01),不同剂量水飞蓟煎剂灌胃治疗3天后,两组血浆ALT和AST较中毒对照组明显降低,两组间比较差异有统计学意义;中毒对照组肝细胞RNA聚合酶活性明显低于正常对照组(P＜0.01),水飞蓟煎剂治疗组肝细胞RNA聚合酶活性明显高于正常对照组(P＜0.01),同时治疗组之间呈量-效关系(P＜0.01).rn 结论：水飞蓟煎剂对鹅膏毒蕈中毒肝有明显保护作用,且作用呈量-效关系,其机制可能与提高肝细胞RNA聚合酶活性有关.

摘要： 目的：探讨水飞蓟煎剂治疗急性鹅膏肽类毒素所致肝损伤的解毒机制.rn 方法：选用健康SD大鼠32只,随机分成4组(每组8只)：正常对照组、中毒对照组、水飞蓟煎剂1g/ml组、水飞蓟煎剂3g/ml组.除正常对照组外,其余3组均制成急性鹅膏毒蕈中毒鼠模型.造模后每日给予相应药物,3d后观察大鼠的存活情况,并采血检查谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和用紫外分光光度法测定肝细胞RNA聚合酶活性.rn 结果：中毒对照组的血浆ALT和AST较正常对照组明显增加(P＜0.01),不同剂量水飞蓟煎剂灌胃治疗3天后,两组血浆ALT和AST较中毒对照组明显降低,两组间比较差异有统计学意义;中毒对照组肝细胞RNA聚合酶活性明显低于正常对照组(P＜0.01),水飞蓟煎剂治疗组肝细胞RNA聚合酶活性明显高于正常对照组(P＜0.01),同时治疗组之间呈量-效关系(P＜0.01).rn 结论：水飞蓟煎剂对鹅膏毒蕈中毒肝有明显保护作用,且作用呈量-效关系,其机制可能与提高肝细胞RNA聚合酶活性有关.

摘要： 目的：探讨水飞蓟煎剂治疗急性鹅膏肽类毒素所致肝损伤的解毒机制.rn 方法：选用健康SD大鼠32只,随机分成4组(每组8只)：正常对照组、中毒对照组、水飞蓟煎剂1g/ml组、水飞蓟煎剂3g/ml组.除正常对照组外,其余3组均制成急性鹅膏毒蕈中毒鼠模型.造模后每日给予相应药物,3d后观察大鼠的存活情况,并采血检查谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和用紫外分光光度法测定肝细胞RNA聚合酶活性.rn 结果：中毒对照组的血浆ALT和AST较正常对照组明显增加(P＜0.01),不同剂量水飞蓟煎剂灌胃治疗3天后,两组血浆ALT和AST较中毒对照组明显降低,两组间比较差异有统计学意义;中毒对照组肝细胞RNA聚合酶活性明显低于正常对照组(P＜0.01),水飞蓟煎剂治疗组肝细胞RNA聚合酶活性明显高于正常对照组(P＜0.01),同时治疗组之间呈量-效关系(P＜0.01).rn 结论：水飞蓟煎剂对鹅膏毒蕈中毒肝有明显保护作用,且作用呈量-效关系,其机制可能与提高肝细胞RNA聚合酶活性有关.

摘要： 目的：探讨水飞蓟煎剂治疗急性鹅膏肽类毒素所致肝损伤的解毒机制.rn 方法：选用健康SD大鼠32只,随机分成4组(每组8只)：正常对照组、中毒对照组、水飞蓟煎剂1g/ml组、水飞蓟煎剂3g/ml组.除正常对照组外,其余3组均制成急性鹅膏毒蕈中毒鼠模型.造模后每日给予相应药物,3d后观察大鼠的存活情况,并采血检查谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和用紫外分光光度法测定肝细胞RNA聚合酶活性.rn 结果：中毒对照组的血浆ALT和AST较正常对照组明显增加(P＜0.01),不同剂量水飞蓟煎剂灌胃治疗3天后,两组血浆ALT和AST较中毒对照组明显降低,两组间比较差异有统计学意义;中毒对照组肝细胞RNA聚合酶活性明显低于正常对照组(P＜0.01),水飞蓟煎剂治疗组肝细胞RNA聚合酶活性明显高于正常对照组(P＜0.01),同时治疗组之间呈量-效关系(P＜0.01).rn 结论：水飞蓟煎剂对鹅膏毒蕈中毒肝有明显保护作用,且作用呈量-效关系,其机制可能与提高肝细胞RNA聚合酶活性有关.

摘要： 目的：探讨水飞蓟煎剂治疗急性鹅膏肽类毒素所致肝损伤的解毒机制.rn 方法：选用健康SD大鼠32只,随机分成4组(每组8只)：正常对照组、中毒对照组、水飞蓟煎剂1g/ml组、水飞蓟煎剂3g/ml组.除正常对照组外,其余3组均制成急性鹅膏毒蕈中毒鼠模型.造模后每日给予相应药物,3d后观察大鼠的存活情况,并采血检查谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和用紫外分光光度法测定肝细胞RNA聚合酶活性.rn 结果：中毒对照组的血浆ALT和AST较正常对照组明显增加(P＜0.01),不同剂量水飞蓟煎剂灌胃治疗3天后,两组血浆ALT和AST较中毒对照组明显降低,两组间比较差异有统计学意义;中毒对照组肝细胞RNA聚合酶活性明显低于正常对照组(P＜0.01),水飞蓟煎剂治疗组肝细胞RNA聚合酶活性明显高于正常对照组(P＜0.01),同时治疗组之间呈量-效关系(P＜0.01).rn 结论：水飞蓟煎剂对鹅膏毒蕈中毒肝有明显保护作用,且作用呈量-效关系,其机制可能与提高肝细胞RNA聚合酶活性有关.

摘要： 目的：探讨水飞蓟煎剂治疗急性鹅膏肽类毒素所致肝损伤的解毒机制.rn 方法：选用健康SD大鼠32只,随机分成4组(每组8只)：正常对照组、中毒对照组、水飞蓟煎剂1g/ml组、水飞蓟煎剂3g/ml组.除正常对照组外,其余3组均制成急性鹅膏毒蕈中毒鼠模型.造模后每日给予相应药物,3d后观察大鼠的存活情况,并采血检查谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和用紫外分光光度法测定肝细胞RNA聚合酶活性.rn 结果：中毒对照组的血浆ALT和AST较正常对照组明显增加(P＜0.01),不同剂量水飞蓟煎剂灌胃治疗3天后,两组血浆ALT和AST较中毒对照组明显降低,两组间比较差异有统计学意义;中毒对照组肝细胞RNA聚合酶活性明显低于正常对照组(P＜0.01),水飞蓟煎剂治疗组肝细胞RNA聚合酶活性明显高于正常对照组(P＜0.01),同时治疗组之间呈量-效关系(P＜0.01).rn 结论：水飞蓟煎剂对鹅膏毒蕈中毒肝有明显保护作用,且作用呈量-效关系,其机制可能与提高肝细胞RNA聚合酶活性有关.

摘要： 为研究鸭病毒性肝炎病毒RNA聚合酶(RdRp)的分子生物学特性及其在细胞中的定位，本文构建了RdRp与绿色荧光蛋白(GFP)融合表达的真核重组表达质粒;然后用脂质体介导转染MDCK细胞。分别使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜，DAPI染色和蛋白免疫电泳试验等方法，检测了RdRp的表达和在亚细胞中的定位情况。实验结果表明，RdRp与EGFP不仅在MDCK细胞中获得了良好的融合表达。而且证明RdRp蛋白主要分布于细胞核，提示RdRp在细胞核中发挥复制酶功能。本研究为进一步探讨RdRp的生物学功能奠定了基础。

摘要： 拟南芥中RNA聚合酶III转录的AtR8长非编码RNA的应用，它涉及拟南芥中长非编码RNA的应用；本发明的目的是要为了解决分子层面上还不清晰的拟南芥种子萌发生理机制，尤其是AtR8长非编码RNA与种子萌发的机制问题。本发明发现AtR8 lncRNA是拟南芥种子萌发过程中，RNA聚合酶III转录的响应ABA应激的长非编码RNA。证明了AtR8 lncRNA参与了ABA胁迫下拟南芥种子萌发过程。正常生长条件下，参与拟南芥角果、莲座叶、种子的生长和发育。并分析AtR8 lncRNA可能通过影响ABA信号经路关键基因ABI5、EM6表达在拟南芥正常发育和ABA胁迫种子萌发中起重要作用。本发明应用于拟南芥领域。

摘要： 本发明提供一种全转录组范围同时获取RNA丰度及活性RNA聚合酶位点的方法及试剂盒。该方法基于活性RNA聚合酶可在体外将未修饰的三磷酸核苷、N6‑烯丙基三磷酸腺苷(a6ATP)、N4‑烯丙基三磷酸胞苷(a4CTP)转录进新生RNA中，经化学处理诱导使修饰碱基在逆转录成DNA过程中发生碱基突变，然后通过核酸测序手段识别突变位点，进而得到N6‑烯丙基腺嘌呤(a6A)和N4‑烯丙基胞嘧啶(a4C)位点，该位点即为活性RNA聚合酶原本所在的位点。未突变的部分即为原有的RNA，即可得到新生RNA的丰度。本发明首次实现了在隔离的染色质中进行a6A、a4C的特异性标记，能够借助突变测序的手段进行定位，并利用一次测序获取活性聚合酶位点与RNA丰度两种信息。

摘要： 结球甘蓝中RNA聚合酶III转录的BoNR8长非编码RNA及其应用，它涉及结球甘蓝中长非编码RNA及其应用，本发明的BoNR8长非编码RNA在结球甘蓝种子萌发阶段根伸长区表皮层组织大量表达，作为负调节子调解了正常和胁迫条件下种子萌发和幼苗根生长。它用于甘蓝的分子育种。正常条件下，BoNR8长非编码RNA可能通过影响AtRAVI表达抑制种子萌发、幼苗根生长、角果生长；盐胁迫下，BoNR8长非编码RNA可能通过影响AtRAVI表达以独立于ABA信号方式抑制种子萌发；ABA存在下，BoNR8长非编码RNA通过影响ABA信号中重要基因表达，降低了萌发种子对ABA的敏感。所以，BoNR8长非编码RNA是结球甘蓝中RNA聚合酶III转录的多功能长非编码RNA。

摘要： 本发明公开一种以RNA为模板的RNA聚合酶制备方法及该聚合酶的应用，该制备方法以alpha坏死病毒属病毒作为原料，利用含聚合酶结构域且无N‑末端的跨膜区或跨膜区突变的病毒复制蛋白为基础制备重组蛋白，获得具有RNA依赖的RNA聚合酶，具体为首先选取番茄丛矮病毒科的alpha坏死病毒属病毒作为原料；然后利用截短或突变除去病毒RNA的N‑末端的跨膜区，得到模板RNA；最后通过原核表达或真核表达在细胞内或细胞外进行RNA聚合酶的合成；采用本发明的方法获得重组蛋白，其RNA产量大于1毫克/毫升，适合工业化RNA的合成与生产。

摘要： 本发明属于生物技术领域，涉及一种线粒体RNA聚合酶转录因子Mtf1和聚合酶-转录因子组合物。本发明提供了一种线粒体RNA聚合酶附属转录因子Mtf1，它的氨基酸序列包括序列表SEQ ID NO：3中的1-366位。RNA聚合酶蛋白和Mtf1可以相互作用，形成聚合酶-转录因子复合体。Mtf1可用于转录RNA，涉及调控细胞周期，还可用作肿瘤药物筛选的药靶。本发明为基因转录、尤其是细胞核内的基因转录提供了一套精确有效的转录工具，为基因功能的研究提供了一种新途径。同时，Mtf1涉及调控细胞周期，Mtf1的基因敲除菌株无法形成克隆，Mtf1可作为抗肿瘤药物筛选的靶标。

摘要： 本发明涉及一种以基本依赖或不依赖方式，RNA扩增和/或RNA标记用的RNA依赖的RNA聚合酶，方法及试剂盒，特别是，应用于生物技术和医药领域的病毒RNA、真核RNA、原核RNA和双链核糖核酸(RNA)。所述的RNA依赖的RNA聚合酶具有右手螺旋构象，并由以下序列部分的氨基酸序列组成：a.XXDYS、b.GXPSG、c.YGDD、d.XXYGL、e.XXXXFLXRXX，含义如下：D：天冬氨酸、Y：酪氨酸、S：丝氨酸、G：甘氨酸、P：脯氨酸、L：亮氨酸、F：苯丙氨酸、R：精氨酸、X：任一氨基酸。本发明所涉及的扩增方法尤其适用于微阵列技术、siRNA的制备和通过检测病人样品中的病毒RNA的病毒性感染的诊断。本发明所涉及的标记方法尤其适用于通过亲和连接进行RNA的纯化，及适用于病毒RNA、真核RNA、原核RNA和双链核糖核酸(RNA)的功能和/或结构特征的分子生物学研究中。

摘要： 本发明涉及一种以单链多核苷酸为模板合成互补RNA链的方法，该方法包括以下步骤：采用有效量的微波能量对含有所述模板以及一种杯状病毒科家族病毒的RNA聚合酶的混合物在RNA聚合反应条件下并在引物存在或缺席的条件下进行辐照，所述引物与模板杂交。本发明的另一主题涉及一种将一个或多个核苷酸转移至单链多核苷酸模板的3’端上的方法，该方法包括以下步骤：采用有效量的微波能量对含有杯状病毒科家族病毒的RNA聚合酶的混合物在rATP或rGTP或rUTP或rCTP或其修饰的或标记的类似物存在的条件下进行辐照。

摘要： 本发明涉及一种在体外使用沙波病毒或诺瓦克病毒的热稳定的RNA依赖的RNA聚合酶进行指数式扩增RNA的方法。

摘要： 本发明公开了靶向新型冠状病毒RNA依赖性RNA聚合酶的特异性TCR，涉及细胞免疫治疗技术领域。该TCR可特异性识别来源于新型冠状病毒RNA依赖性RNA聚合酶的表位多肽(RdRp829‑837，LPYPDPSRI)，具体地，所述TCR具有识别HLA‑B*51:01‑RdRp829‑837抗原复合物的特性，所述TCR包括TCRα链可变区和TCRβ链可变区。本发明还提供包含编码所述TCR的核苷酸序列或其互补序列的核酸分子，以及含有所述核酸分子的载体，以及转导所述核酸分子或所述载体的细胞，以及包含所述TCR、核酸分子、载体或细胞作为活性成分的药物组合物，以及所述TCR、核酸分子、载体、细胞、药物组合物的用途。本发明提供的识别人新型冠状病毒HLA‑B*51:01限制性RdRp829‑837表位多肽的TCR具有特异性与亲和性良好的性能。

摘要： 本申请涉及基因工程技术领域，具体而言，涉及一种转录反应液、锁核酸修饰的RNA的制备方法以及突变的T7RNA聚合酶的应用。用于制备锁核酸修饰的RNA的转录反应液，包括DNA模板、突变的T7RNA聚合酶、LNA‑NTPs以及缓冲液；其中，突变的T7RNA聚合酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6或SEQ ID NO.7所示。本申请通过将上述突变的T7RNA聚合酶加入转录反应液中以用于合成锁核酸修饰的RNA时，可以显著提高锁核酸修饰的RNA的转录产率，操作简单，利于工业化生产。