PTEN蛋白

摘要： 背景:选择性瞬变感受器电位蛋白V4(transient receptor potential vanilloid 4,TRPV4)激动剂GSK1016790A能够在短时间内激活TRPV4蛋白,表现为Ca2+内流,而蛋白表达量不变.但是在培养过程中,GSK1016790A会使HeLa细胞膜表面TRPV4表达降低,这一现象对神经再生是否产生影响仍不清楚.目的:探究TRPV4激动剂GSK1016790A在不同时期内对神经元轴突再生的影响.方法:取6-8周龄ICR小鼠背根神经节,经过胶原酶和胰酶处理使细胞充分解离,进行背根神经节细胞培养.在培养初期加入GSK1016790A刺激2 h后去除激动剂继续培养3 d,或者加入GSK1016790A持续处理3 d;空白对照组不进行任何处理.采用免疫印迹法检测TRPV4蛋白表达以及轴突再生相关蛋白表达,同时进行TUJ1和TRPV4免疫荧光染色,观察轴突分叉数目、轴突再生长度、细胞存活数变化.结果 与结论:①与空白对照组相比,GSK1016790A刺激神经细胞2 h后,TRPV4蛋白变化无明显差异(P>0.05);而刺激神经细胞3 d后TRPV4表达明显降低(P0.05);而刺激神经细胞3 d后轴突分叉数目及轴突长度均明显增加(P<0.05);③与空白对照组相比,GSK1016790A刺激神经细胞2 h或3 d后,细胞存活率均无明显改变;④与空白对照组相比,GSK1016790A刺激神经细胞3 d后,PTEN蛋白表达降低(P<0.05),神经轴突再生显著,这一过程可能经抑制PTEN蛋白表达介导的.

摘要： 目的观察脓毒症急性肺损伤(ALI)小鼠肺组织中微小RNA-21(miR-21)的表达情况,以及干预miR-21表达对肺水肿、血清炎症因子及氧化应激的影响,探讨该作用机制与PTEN的关系。方法取96只健康雄性昆明小鼠,采用随机数字表法分为6组:假手术组(n=32)、模型组(n=32)、miR-21前体组(MP组,n=8)、miR-21抑制剂组(MI组,n=8)、miR-21前体+PTEN抑制剂组(MP+Anti-PTEN组,n=8)、miR-21抑制剂+PTEN抑制剂组(MI+Anti-PTEN组,n=8)。假手术组仅进行开腹探查盲肠;模型组采用盲肠结扎穿孔术制作ALI模型;MP组、MI组分别在尾静脉注射miR-21前体腺病毒、miR-21抑制剂腺病毒4 d后再造模;MP+Anti-PTEN组、MI+Anti-PTEN组分别在转染miR-21前体、miR-21抑制剂后,造模前30 min给予尾静脉注射PTEN抑制剂。造模后24 h,取小鼠腹主动脉取血进行血气分析,计算氧合指数(OI)。取小鼠左肺组织,称取肺湿重和肺干重,计算肺湿重/干重比值(W/D)。取小鼠腹主动脉血,采用ELISA法检测血清炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和氧化应激指标活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)水平。分别于造模后6、12、24、48 h采用qRT-PCR法检测假手术组、模型组肺组织miR-21的相对表达量。于造模后24 h对假手术组、模型组、MP组、MI组采用qRT-PCR法检测肺组织miR-21表达,Western blotting法检测肺组织PTEN蛋白表达。结果造模后24 h,与假手术组比较,模型组OI下降,W/D、TNF-α、IL-6、ROS、SOD水平升高(P均0.05)。与假手术组比较,模型组造模后6、12、24、48 h肺组织miR-21表达均升高(P均<0.05),并于造模后24 h达峰。造模后24 h,与假手术组比较,模型组和MP组miR-21表达均升高、PTEN蛋白表达均下降,MI组miR-21表达下降、PTEN蛋白表达升高(P均<0.05);与模型组比较,MP组miR-21表达升高、PTEN蛋白表达下降,MI组miR-21表达下降、PTEN蛋白表达升高(P均<0.05)。结论脓毒症小鼠肺组织中miR-21表达增加,miR-21过表达可减轻脓毒症炎症反应及氧化应激,从而减轻肺损伤,其机制可能与抑制PTEN有关。

摘要： 目的:探讨外泌体miR-21参与肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblast,CAF)促进膀胱癌细胞侵袭转移的作用及机制.方法:利用组织块贴壁法分别从膀胱癌和癌旁组织分离CAF和正常成纤维细胞(normal fibroblast,NF),利用荧光实时定量PCR检测膀胱癌组织,CAF、NF和相应外泌体,以及外泌体共孵育的膀胱癌T24细胞中miR-21的相对表达.通过Transwell侵袭迁移实验检测CAF、CAF分泌的外泌体及miR-21对膀胱癌细胞侵袭迁移能力的影响.蛋白质印迹及荧光素酶实验明确miR-21的靶基因.结果:相较于癌旁组织,miR-21在膀胱癌组织,尤其是分期较晚的浸润性膀胱癌组织中高表达.CAF分泌的外泌体中miR-21的表达水平明显高于NF分泌的外泌体.与CAF、CAF分泌的外泌体孵育及转染miR-21,可显著增强T24细胞侵袭迁移的能力.进一步荧光素酶实验证实miR-21可靶向抑制同源性磷酸酶张力蛋白(PTEN)的表达.结论:CAF可释放高表达miR-21的外泌体,经膀胱癌细胞摄取后,通过靶向抑制PTEN,促进膀胱癌细胞侵袭转移的发生.

摘要： 目的 探讨甲状腺癌组织中人第10号染色体缺失的磷酸酶(PTEN)、P53蛋白的表达及其意义.方法 收集80例甲状腺癌组织及80例甲状腺良性肿瘤组织,应用免疫组化染色技术检测2组标本中的PTEN、P53蛋白表达情况,分析不同组织学类型、淋巴结转移、分化程度及TNM分期甲状腺癌组织中的PTEN、P53蛋白表达差异.结果 甲状腺癌组织中的PTEN蛋白阳性表达率为68.75％、P53蛋白阳性表达率(63.75％)均高于良性组的15.00％、17.50％,具有统计学差异(P<0.05);在不同TNM分期、是否发生淋巴结转移的甲状腺癌组织中的PTEN蛋白阳性表达率具有统计学差异(P<0.05);是否发生淋巴结转移的甲状腺癌组织中P53蛋白阳性表达率具有统计学差异(P<0.05);甲状腺癌组织中的PTEN蛋白与P53蛋白阳性表达呈显著的正相关关系(Spearman秩相关系数=0.836,P<0.05).结论 甲状腺癌中PTEN、P53蛋白呈高表达较甲状腺良性肿瘤组织,并且与肿瘤的发生发展具有一定的密切关系.

摘要： 目的 对前列腺癌中PTEN和Eg5蛋白进行免疫组化检测,探讨PTEN和Eg5蛋白表达与前列腺癌临床病理的相关性.方法 采用免疫组化SP法对2014年12月至2016年3月浙江大学医学院附属金华医院检测81例前列腺癌和45例前列腺增生PTEN和Eg5蛋白的表达,对前列腺癌临床病理资料与PTEN和Eg5表达分析,采用Spearmen对PTEN和Eg5蛋白表达进行相关性分析.结果 前列腺癌中PTEN蛋白表达阳性率为25.93％(21/81),前列腺增生中表达阳性率为88.89％(40/45),二者比较,差异有统计学意义(P<0.05).Eg5蛋白在前列腺癌中表达阳性率为70.37％(57/81),前列腺增生中表达阳性率为4.44％(2/45),二者比较,差异有统计学意义(P<0.05).PTEN蛋白缺失表达和Eg5蛋白增高表达与前列腺癌的Gleason评分、TNM分期、术前PSA、精囊浸润、盆腔淋巴结转移和五年生化复发密切相关(P<0.05).Spearmen相关性分析显示PTEN与Eg5蛋白的表达呈负相关(r=-0.763,P<0.05).结论 前列腺癌中PTEN蛋白下降表达,Eg5蛋白升高表达,它们异常表达与前列腺癌发生进展有关.

摘要： 目的:观察子宫内膜良、恶性病变患者组织内TESTIn、酶和张力蛋白同源物基因蛋白表达情况,分析TESTIn与PTEn蛋白间的相关性.方法:回顾性分析,选择医院2016-10～2019-10期间接受子宫内膜癌切除治疗并经病理组织活检证实为子宫内膜癌的患者100例作为病例组,另纳入同期在医院经分段诊刮术刮出子宫内膜组织蜡块标本,并证实为良性病变的患者33例作为良性对照组.检测并比较两组病理组织的TESTIn、PTEn蛋白表达情况,分析子宫内膜癌组织中TESTIn、PTEn蛋白表达的相关性,比较不同临床病理特征子宫内膜癌组织的TESTIn、PTEn蛋白阳性率.结果:TESTIn、PTEn蛋白在子宫内膜癌组织中阳性表达减弱,在子宫内膜良性病变组织中呈强阳性表达;较良性对照组,病例组子宫内膜组织中检出的TESTIn、PTEn蛋白阳性率低,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05);子宫内膜组织中TESTIn、PTEn蛋白间呈正相关(r=0.867,P＜0.05);不同年龄段子宫内膜癌组织TESTIn、PTEn蛋白阳性检出率比较差异无统计学意义(P＞0.05);高临床分期、肌层浸润严重、有淋巴结转移者阳性检出率较其他患者更低,不同病理类型患者阳性检出率的差异也有统计学意义(P＜0.05).结论:TES-TIn、PTEn蛋白在子宫内膜癌中表达缺失,二者相互影响、相互作用,可能参与了疾病的进展、浸润与转移.

摘要： 目的:探讨在高糖培养的肾小管上皮细胞中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)对PTEN/AKT/FAK通路的调控机制及对肾小管上皮细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响.方法:以高糖培养的肾小管上皮细胞NRK52E为研究对象,采用过表达及shRNA干扰技术分别上调和下调肾小管上皮细胞中PPARγ的表达,并培养48 h,应用细胞免疫荧光、Western blot和RT-qPCR方法检测PTEN及EMT相关蛋白的表达变化;然后,在过表达及敲减PTEN的情况下,分别给予PPARγ抑制剂GW9662及激动剂罗格列酮干预,进一步观察PPARγ对AKT/FAK通路的调节是否通过PTEN实现的.结果:过表达PPARγ组PPARγ和PTEN的mRNA及蛋白表达增加,E-cad?herin的表达明显上调,而vimentin和α-SMA蛋白表达显著下调(P<0.05);PPARγ敲减组PPARγ及PTEN的mRNA及蛋白表达水平明显降低,E-cadherin的表达也明显下调,而vimentin和α-SMA蛋白表达显著升高(P<0.05).GW9662干预组PTEN的表达减少,而p-AKT(Thr308)、FAK及p-FAK(Tyr397)蛋白水平均明显升高(P<0.05);与GW9662组相比,GW9662+过表达PTEN组PTEN表达明显增加,并伴随p-AKT(Thr308)、FAK及p-FAK(Tyr397)蛋白水平的降低(P<0.05);罗格列酮干预组PTEN的表达增多,而p-AKT(Thr308)、FAK和p-FAK(Tyr397)蛋白水平降低(P<0.05);与罗格列酮组相比,罗格列酮+PTEN shRNA组PTEN的表达减少,相应的p-AKT(Thr308)、FAK和p-FAK(Tyr397)蛋白水平升高(P<0.05).结论:PPARγ能调节肾小管上皮细胞PTEN的mRNA及蛋白表达水平,并影响肾小管上皮细胞的EMT;PPARγ对AKT及FAK通路的调节及对细胞EMT的影响主要是通过PTEN实现的.

摘要： 目的:观察子宫内膜良、恶性病变患者组织内TESTIn、酶和张力蛋白同源物基因蛋白表达情况,分析TESTIn与PTEn蛋白间的相关性。方法:回顾性分析,选择医院2016-10~2019-10期间接受子宫内膜癌切除治疗并经病理组织活检证实为子宫内膜癌的患者100例作为病例组,另纳入同期在医院经分段诊刮术刮出子宫内膜组织蜡块标本,并证实为良性病变的患者33例作为良性对照组。检测并比较两组病理组织的TESTIn、PTEn蛋白表达情况,分析子宫内膜癌组织中TESTIn、PTEn蛋白表达的相关性,比较不同临床病理特征子宫内膜癌组织的TESTIn、PTEn蛋白阳性率。结果:TESTIn、PTEn蛋白在子宫内膜癌组织中阳性表达减弱,在子宫内膜良性病变组织中呈强阳性表达;较良性对照组,病例组子宫内膜组织中检出的TESTIn、PTEn蛋白阳性率低,组间比较差异有统计学意义(P0.05);高临床分期、肌层浸润严重、有淋巴结转移者阳性检出率较其他患者更低,不同病理类型患者阳性检出率的差异也有统计学意义(P<0.05)。结论:TESTIn、PTEn蛋白在子宫内膜癌中表达缺失,二者相互影响、相互作用,可能参与了疾病的进展、浸润与转移。

摘要： 目的探讨Beclin-1和PTEN在甲状腺癌中的表达及与临床病理特征的关系。方法回顾性分析2018年10月至2019年10月中国人民解放军联勤保障部队第960医院收集的42例甲状腺癌患者的临床资料,将其术中切取的组织标本作为甲状腺癌组,取甲状腺正常组织标本36例作为健康对照组。检测两组研究对象组织中Beclin-1、PTEN蛋白表达水平;分析Beclin-1、PTEN蛋白表达与临床特征的关系;分析Beclin-1、PTEN蛋白表达的相关性。结果甲状腺癌组组织中Beclin-1、PTEN蛋白阳性表达率分别为30.95%、28.57%,显著低于健康对照组的86.11%、88.89%(P0.05);Beclin-1蛋白和PTEN蛋白在甲状腺癌组织中的表达呈正相关关系(r=0.635,P<0.05)。结论Beclin-1、PTEN蛋白在甲状腺癌组织中的表达显著低于正常甲状腺组织,Beclin-1、PTEN蛋白表达可用来初步评估甲状腺癌细胞的侵袭和转移程度,与临床病理特征密切相关。

摘要： 为了研究黄葵胶囊对大鼠肾小管-间质纤维化的治疗作用及其对抗纤维化因子PTEN表达的调节作用,本文以清洁级雄性SD大鼠为实验对象,分组造模后予黄葵胶囊灌胃,测定24小时尿蛋白定量、血肌酐和尿素氮,并对肾组织进行HE染色、PASM染色观察病理改变,以免疫荧光抗体技术、ELISA法、RT-PCR技术检测肾组织PTEN蛋白和PTENmRNA表达情况.结果显示:与模型组相比,黄葵胶囊治疗组大鼠肾小管-间质纤维化病变减轻,24小时尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮下降,PTEN蛋白和PTENmRNA表达增多.由此可见:(1)黄葵胶囊对肾小管-间质纤维化有显著治疗作用;(2)PTEN表达与肾小管-间质纤维化呈负相关;(3)黄葵胶囊能够通过上调PTEN蛋白及PTENmRNA的表达治疗肾小管-间质纤维化.本研究为探索慢性肾脏病的发生发展机制提供了重要方向.

摘要： 为了研究黄葵胶囊对大鼠肾小管-间质纤维化的治疗作用及其对抗纤维化因子PTEN表达的调节作用,本文以清洁级雄性SD大鼠为实验对象,分组造模后予黄葵胶囊灌胃,测定24小时尿蛋白定量、血肌酐和尿素氮,并对肾组织进行HE染色、PASM染色观察病理改变,以免疫荧光抗体技术、ELISA法、RT-PCR技术检测肾组织PTEN蛋白和PTENmRNA表达情况.结果显示:与模型组相比,黄葵胶囊治疗组大鼠肾小管-间质纤维化病变减轻,24小时尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮下降,PTEN蛋白和PTENmRNA表达增多.由此可见:(1)黄葵胶囊对肾小管-间质纤维化有显著治疗作用;(2)PTEN表达与肾小管-间质纤维化呈负相关;(3)黄葵胶囊能够通过上调PTEN蛋白及PTENmRNA的表达治疗肾小管-间质纤维化.本研究为探索慢性肾脏病的发生发展机制提供了重要方向.

摘要： 为了研究黄葵胶囊对大鼠肾小管-间质纤维化的治疗作用及其对抗纤维化因子PTEN表达的调节作用,本文以清洁级雄性SD大鼠为实验对象,分组造模后予黄葵胶囊灌胃,测定24小时尿蛋白定量、血肌酐和尿素氮,并对肾组织进行HE染色、PASM染色观察病理改变,以免疫荧光抗体技术、ELISA法、RT-PCR技术检测肾组织PTEN蛋白和PTENmRNA表达情况.结果显示:与模型组相比,黄葵胶囊治疗组大鼠肾小管-间质纤维化病变减轻,24小时尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮下降,PTEN蛋白和PTENmRNA表达增多.由此可见:(1)黄葵胶囊对肾小管-间质纤维化有显著治疗作用;(2)PTEN表达与肾小管-间质纤维化呈负相关;(3)黄葵胶囊能够通过上调PTEN蛋白及PTENmRNA的表达治疗肾小管-间质纤维化.本研究为探索慢性肾脏病的发生发展机制提供了重要方向.

摘要： 为了研究黄葵胶囊对大鼠肾小管-间质纤维化的治疗作用及其对抗纤维化因子PTEN表达的调节作用,本文以清洁级雄性SD大鼠为实验对象,分组造模后予黄葵胶囊灌胃,测定24小时尿蛋白定量、血肌酐和尿素氮,并对肾组织进行HE染色、PASM染色观察病理改变,以免疫荧光抗体技术、ELISA法、RT-PCR技术检测肾组织PTEN蛋白和PTENmRNA表达情况.结果显示:与模型组相比,黄葵胶囊治疗组大鼠肾小管-间质纤维化病变减轻,24小时尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮下降,PTEN蛋白和PTENmRNA表达增多.由此可见:(1)黄葵胶囊对肾小管-间质纤维化有显著治疗作用;(2)PTEN表达与肾小管-间质纤维化呈负相关;(3)黄葵胶囊能够通过上调PTEN蛋白及PTENmRNA的表达治疗肾小管-间质纤维化.本研究为探索慢性肾脏病的发生发展机制提供了重要方向.

摘要： 为了研究黄葵胶囊对大鼠肾小管-间质纤维化的治疗作用及其对抗纤维化因子PTEN表达的调节作用,本文以清洁级雄性SD大鼠为实验对象,分组造模后予黄葵胶囊灌胃,测定24小时尿蛋白定量、血肌酐和尿素氮,并对肾组织进行HE染色、PASM染色观察病理改变,以免疫荧光抗体技术、ELISA法、RT-PCR技术检测肾组织PTEN蛋白和PTENmRNA表达情况.结果显示:与模型组相比,黄葵胶囊治疗组大鼠肾小管-间质纤维化病变减轻,24小时尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮下降,PTEN蛋白和PTENmRNA表达增多.由此可见:(1)黄葵胶囊对肾小管-间质纤维化有显著治疗作用;(2)PTEN表达与肾小管-间质纤维化呈负相关;(3)黄葵胶囊能够通过上调PTEN蛋白及PTENmRNA的表达治疗肾小管-间质纤维化.本研究为探索慢性肾脏病的发生发展机制提供了重要方向.

摘要： 目的：观察桑仙降压颗粒对自发性高血压大鼠(SHR)心肌Shh、PTEN蛋白表达的干预,探讨其对高血压心肌血管新生促进因子、抑制因子的干预作用.方法：SHR随机分为三组,蒸馏水空白对照组、吲哒帕胺西药对照组、桑仙降压颗粒组,以Wistar大鼠为正常对照,4周及8周后观察SHR心肌Shh、PTEN蛋白的表达.结果：与空白对照组相比,实验4周及8周后,桑仙降压颗粒组Shh蛋白表达明显增多而PTEN蛋白密度值显著减少.结论：桑仙降压颗粒能增加血管新生促进因子Shh蛋白的表达及降低血管新生抑制因子PTEN的蛋白密度值.

摘要： 目的：观察桑仙降压颗粒对自发性高血压大鼠(SHR)心肌Shh、PTEN蛋白表达的干预,探讨其对高血压心肌血管新生促进因子、抑制因子的干预作用.方法：SHR随机分为三组,蒸馏水空白对照组、吲哒帕胺西药对照组、桑仙降压颗粒组,以Wistar大鼠为正常对照,4周及8周后观察SHR心肌Shh、PTEN蛋白的表达.结果：与空白对照组相比,实验4周及8周后,桑仙降压颗粒组Shh蛋白表达明显增多而PTEN蛋白密度值显著减少.结论：桑仙降压颗粒能增加血管新生促进因子Shh蛋白的表达及降低血管新生抑制因子PTEN的蛋白密度值.

摘要： 目的：观察桑仙降压颗粒对自发性高血压大鼠(SHR)心肌Shh、PTEN蛋白表达的干预,探讨其对高血压心肌血管新生促进因子、抑制因子的干预作用.方法：SHR随机分为三组,蒸馏水空白对照组、吲哒帕胺西药对照组、桑仙降压颗粒组,以Wistar大鼠为正常对照,4周及8周后观察SHR心肌Shh、PTEN蛋白的表达.结果：与空白对照组相比,实验4周及8周后,桑仙降压颗粒组Shh蛋白表达明显增多而PTEN蛋白密度值显著减少.结论：桑仙降压颗粒能增加血管新生促进因子Shh蛋白的表达及降低血管新生抑制因子PTEN的蛋白密度值.

摘要： 目的：观察桑仙降压颗粒对自发性高血压大鼠(SHR)心肌Shh、PTEN蛋白表达的干预,探讨其对高血压心肌血管新生促进因子、抑制因子的干预作用.方法：SHR随机分为三组,蒸馏水空白对照组、吲哒帕胺西药对照组、桑仙降压颗粒组,以Wistar大鼠为正常对照,4周及8周后观察SHR心肌Shh、PTEN蛋白的表达.结果：与空白对照组相比,实验4周及8周后,桑仙降压颗粒组Shh蛋白表达明显增多而PTEN蛋白密度值显著减少.结论：桑仙降压颗粒能增加血管新生促进因子Shh蛋白的表达及降低血管新生抑制因子PTEN的蛋白密度值.

摘要： 目的：观察桑仙降压颗粒对自发性高血压大鼠(SHR)心肌Shh、PTEN蛋白表达的干预,探讨其对高血压心肌血管新生促进因子、抑制因子的干预作用.方法：SHR随机分为三组,蒸馏水空白对照组、吲哒帕胺西药对照组、桑仙降压颗粒组,以Wistar大鼠为正常对照,4周及8周后观察SHR心肌Shh、PTEN蛋白的表达.结果：与空白对照组相比,实验4周及8周后,桑仙降压颗粒组Shh蛋白表达明显增多而PTEN蛋白密度值显著减少.结论：桑仙降压颗粒能增加血管新生促进因子Shh蛋白的表达及降低血管新生抑制因子PTEN的蛋白密度值.

摘要： 本发明提供了一种参与调控端粒长度的PTEN亚型蛋白质PTENγ及其应用，属于功能蛋白质技术领域。参与调控端粒长度的PTEN亚型蛋白质PTENγ，氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。PTENγ为新型的PTEN亚型蛋白质，以CUG639为翻译起始点。经蛋白定位实验证明，PTENγ蛋白质分布在细胞核内，且在核仁区有明显富集。构建PTENγ特异性敲除细胞系，发现与野生型对照组相比，该PTENγ特异性敲除细胞系的端粒长度显著缩短，且细胞增殖显著减慢，证明PTENγ发挥参与端粒长度维持的生物学作用。因此，本发明提供了所述PTENγ及其相关基因或重组表达载体在制备抗衰老或治疗肿瘤的药物中的应用。

摘要： 本发明提供了一种N端延长型PTEN亚型PTENζ蛋白及其编码基因和应用，属于功能蛋白技术领域。本发明提供的PTEN亚型是在PTEN蛋白基础上在N端连接有一段28aa的多肽，该多肽为一段高尔基定位信号肽段。PTENζ蛋白的翻译起始于5’‑UTR区域的一个非经典的AUG翻译起始位点‑ATT948，该位点下游的回文结构对翻译起始有重要作用。由ATT948起始翻译得到431个氨基酸序列的蛋白命名为PTENζ。PTENζ主要分布在高尔基体和细胞膜。本发明利用CRISPR‑Cas9特异性敲除Hela细胞中PTENζ，利用RUSH系统证实PTENζ特异性敲除导致内质网向高尔基体的囊泡运输时显著提高转运速度。

摘要： 本发明提供了一种N端延长型PTEN亚型PTENζ蛋白及其编码基因和应用，属于功能蛋白技术领域。本发明提供的PTEN亚型是在PTEN蛋白基础上在N端连接有一段28aa的多肽，该多肽为一段高尔基定位信号肽段。PTENζ蛋白的翻译起始于5’‑UTR区域的一个非经典的AUG翻译起始位点‑ATT948，该位点下游的回文结构对翻译起始有重要作用。由ATT948起始翻译得到431个氨基酸序列的蛋白命名为PTENζ。PTENζ主要分布在高尔基体和细胞膜。本发明利用CRISPR‑Cas9特异性敲除Hela细胞中PTENζ，利用RUSH系统证实PTENζ特异性敲除导致内质网向高尔基体的囊泡运输时显著提高转运速度。

摘要： 本发明提供了一种参与调控端粒长度的PTEN亚型蛋白质PTENγ及其应用，属于功能蛋白质技术领域。参与调控端粒长度的PTEN亚型蛋白质PTENγ，氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。PTENγ为新型的PTEN亚型蛋白质，以CUG639为翻译起始点。经蛋白定位实验证明，PTENγ蛋白质分布在细胞核内，且在核仁区有明显富集。构建PTENγ特异性敲除细胞系，发现与野生型对照组相比，该PTENγ特异性敲除细胞系的端粒长度显著缩短，且细胞增殖显著减慢，证明PTENγ发挥参与端粒长度维持的生物学作用。因此，本发明提供了所述PTENγ及其相关基因或重组表达载体在制备抗衰老或治疗肿瘤的药物中的应用。

摘要： 本发明提供了一种具有调控神经系统发育功能的PTEN亚型蛋白PTENδ及其应用，属于功能蛋白技术领域。一种抑癌基因PTEN家族的新亚型蛋白，命名为PTENδ。PTENδ蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，翻译起始密码子为GTG726。PTENδ主要定位于细胞质膜，在小鼠的大脑、小脑、心脏、脾脏、肝脏等神经器官中具有较高的表达量。构建的PTENδ‑/‑的C57BL/6N小鼠模型出现了多动以及社交新奇性丧失的异常行为和精神症状，符合自闭症的表现型，提示PTENδ具有调控神经系统发育的功能。

摘要： 本发明提供了一种融合蛋白，其包含以任意顺序的任选的信号肽、血清白蛋白、任选的连接子、磷酸酶与张力蛋白同源物（PTEN）和任选的纯化或可检测标志物，或基本上由其组成，或由其组成。还公开了相关的多核苷酸、载体、宿主细胞、药物组合物和试剂盒。进一步提供了用于递送融合蛋白给对象、治疗癌症或肿瘤、和/或产生融合蛋白的方法。

摘要： 本发明提供了一种PTEN亚型蛋白及其应用，涉及生物技术技术领域，所述的PTEN亚型蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明提供了新型的PTEN亚型蛋白，为与PTEN调控相关的疾病，尤其是肿瘤转移提供了新的诊断、治疗方法和药物筛选平台。

摘要： 本发明涉及一种PTEN低表达的LN‑229细胞系的构建方法。利用慢病毒体系构建PTEN稳定低表达的LN‑229细胞系。转染shPTEN及慢病毒包装质粒到HEK293T细胞中，收集病毒上清，感染LN‑229细胞，通过嘌呤霉素筛选转染后的LN‑229细胞，获得PTEN低表达的LN‑229稳定细胞系，最终经Western Blot技术检测细胞株PTEN的表达量下调80％以上，成功构建PTEN低表达的细胞系，可作为研究PTEN在胶质瘤中的分子作用机制及所参与代谢调控作用的理想细胞系。

摘要： 本发明公开了一种高效表达AFP3‑PTEN融合蛋白的方法，属于生物技术领域，本发明把HBx基因克隆到构建的表达载体中，把构建的载体转染人肝癌细胞，肝癌细胞内表达HBx蛋白后，把AFP第3个结构域和全长PTEN基因连接到表达载体，并转染到表达HBx蛋白的人肝癌细胞中，肝癌细胞内表达HBx蛋白，HBx蛋白促进人类AFP3‑PTEN融合蛋白的高效分泌表达，浓缩纯化培养基获得AFP3‑PTEN融合蛋白。本发明肝癌细胞表达的AFP3‑PTEN融合蛋白能抑制细胞增殖，它们使NIH 3T3细胞增殖能力下降了15％～60％。而对照蛋白AFP却使细胞增殖能力明显提高22～125％。血清白蛋白却没有显著促进NIH 3T3细胞增殖能力。本发明获得的AFP3‑PTEN融合蛋白可以用于肿瘤治疗的研究。

摘要： 一种PTEN‑Long蛋白纯化制备方法，包括以下步骤：S100.将PTEN‑Long质粒转入感受态细菌，获得转入质粒后的感受态细菌的菌落；S200.挑取若干个所述菌落，对若干个所述菌落中的细菌进行扩增以获得具有目标细菌浓度的第二菌液，并对所述具有目标细菌浓度的第二菌液中的细菌进行蛋白诱导得到蛋白诱导后的菌体；S300.裂解所述菌体，获得初级PTEN‑Long蛋白液；S400.用镍柱纯化所述初级PTEN‑Long蛋白液得到二级PTEN‑Long蛋白液；S500.对所述二级PTEN‑Long蛋白液进行脱盐及浓缩以收集所述二级PTEN‑Long蛋白液中的PTEN‑Long蛋白。采用本发明提供的PTEN‑Long蛋白纯化制备方法，只需要一次镍柱纯化即可制备出PTEN‑Long蛋白，且利用本发明制备的PTEN‑Long蛋白纯度更高，制备出的PTEN‑Long蛋白的表达率在80％以上。