嗜中性粒细胞

摘要： 目的嗜中性粒细胞(Neu)性慢性鼻窦炎伴有鼻息肉(CRSw NP)主要发生于东亚国家的患者,到目前为止尚未发现有效的治疗方法,本研究旨在评估局部用糖皮质激素布地奈德鼻喷剂对Neu性CRSw NP的治疗作用。方法15例CRSw NP患者受到招募,并接受局部布地奈德鼻喷剂治疗3个月。分别从正常鼻黏膜组织和CRSw NP患者的鼻息肉(NP)组织中获取样本,用免疫荧光染色方法确定NP的内表型,以免疫组织化学染色方法检测治疗前后NP组织中Neu的浸润情况,用苏木精-伊红和过碘酸-雪夫染色方法分别对治疗前后NP组织中杯状细胞和黏膜下腺体细胞进行检测,最后用酶联免疫吸附试验对治疗前后NP组织中炎症介质髓过氧化物酶(MPO)和γ-干扰素(IFN-γ)以及黏蛋白(MUC)5AC和MUC5B进行了检测。结果15例CRSw NP患者的NP内表型均为Neu性,Neu在NP组织中浸润数目显著多于正常鼻黏膜,布地奈德鼻喷剂局部治疗后NP组织中Neu计数没有显著降低;杯状细胞的计数和黏膜下腺体细胞的染色评分在NP组织中显著高于正常黏膜组织,治疗后这些指标无显著降低;NP组织中MPO、IFN-γ、MUC5AC和MUC5B的含量显著多于正常黏膜组织;布地奈德治疗前后,NP组织中这些物质的含量差异无统计学意义(P<0.05)。结论布地奈德鼻喷剂对Neu性CRSw NP无显著治疗作用。

摘要： 目的建立一种基于流式细胞术快速定量分析小鼠角膜组织中嗜中性粒细胞的技术和方法。方法选取6~8周龄SPF级雌性C57BL/6小鼠15只,使用高尔夫样刀机械性刮除小鼠角膜上皮细胞层,生成直径2 mm的创面,在创伤后18 h切除带有完整角膜缘的小鼠角膜,采用胶原酶I和DNA酶联合消化法获得单细胞悬液,采用FACSCanto流式细胞分析仪画门技术分选角膜细胞中嗜中性粒细胞的数量。另取6只小鼠,应用随机数字表法分为创伤组和正常组,每组3只,使用抗CD45、Ly6G和CD11b荧光抗体进行角膜细胞染色,计数并比较未创伤和创伤角膜中嗜中性粒细胞的数量变化。结果建立流式细胞仪检测角膜组织中嗜中性粒细胞的分析流程。CD45+细胞占角膜组织所有细胞的比例为(20.93±1.72)%,在角膜CD45+细胞群中可分选出Ly6G+CD11b+双阳性嗜中性粒细胞群,Ly6G+和CD11b+细胞在CD45+细胞中所占比例分别为(75.50±3.25)%和(93.40±4.53)%,Ly6G+和CD11b+共阳性细胞占角膜组织CD45+细胞的比例为(67.33±2.80)%。创伤后18 h,角膜中角膜缘募集嗜中性粒细胞数量为(151.47±10.82)%,多于正常角膜的(15.36±1.02)%,差异有统计学意义(t=21.689,P<0.01)。结论流式细胞检测方法可快速、准确地定量分析创伤角膜中嗜中性粒细胞群,为进一步评价不同原因造成角膜炎症反应中嗜中性粒细胞的数量变化提供了一种快速定量分析方法。

摘要： 目的 建立一种基于流式细胞术快速定量分析小鼠角膜组织中嗜中性粒细胞的技术和方法.方法 选取6～8周龄SPF级雌性C57BL/6小鼠15只,使用高尔夫样刀机械性刮除小鼠角膜上皮细胞层,生成直径2 mm的创面,在创伤后18 h切除带有完整角膜缘的小鼠角膜,采用胶原酶I和DNA酶联合消化法获得单细胞悬液,采用FACSCanto流式细胞分析仪画门技术分选角膜细胞中嗜中性粒细胞的数量.另取6只小鼠,应用随机数字表法分为创伤组和正常组,每组3只,使用抗CD45、Ly6G和CD11b荧光抗体进行角膜细胞染色,计数并比较未创伤和创伤角膜中嗜中性粒细胞的数量变化.结果 建立流式细胞仪检测角膜组织中嗜中性粒细胞的分析流程.CD45+细胞占角膜组织所有细胞的比例为(20.93±1.72)％,在角膜CD45+细胞群中可分选出Ly6G+CD11b+双阳性嗜中性粒细胞群,Ly6G+和CD11b+细胞在CD45+细胞中所占比例分别为(75.50±3.25)％和(93.40±4.53)％,Ly6G+和CD11b+共阳性细胞占角膜组织CD45+细胞的比例为(67.33±2.80)％.创伤后18 h,角膜中角膜缘募集嗜中性粒细胞数量为(151.47±10.82)％,多于正常角膜的(15.36±1.02)％,差异有统计学意义(t= 21.689,P＜0.01).结论 流式细胞检测方法可快速、准确地定量分析创伤角膜中嗜中性粒细胞群,为进一步评价不同原因造成角膜炎症反应中嗜中性粒细胞的数量变化提供了一种快速定量分析方法.

摘要： 目的探讨5-氧代-6,8,11,14-二十碳四烯酸(5-oxo-6,8,11,14-eicosatetraenoic acid,5-oxo-ETE)体外能否促进鼻息肉中嗜中性粒细胞(neutrophils,Neu)释放炎症介质髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)。方法用免疫组织化学法检测正常鼻黏膜组织和鼻息肉组织中Neu的浸润,将两种组织进行体外培养,用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测其中MPO含量,后将5-oxo-ETE或5-oxo-ETE+百日咳毒素(pertussis toxin,PT)加入两种组织的培养基中,再以ELISA法检测其中MPO浓度。结果鼻息肉组织中Neu数目明显多于正常鼻黏膜组织,体外培养的鼻息肉组织中MPO含量显著高于正常鼻黏膜组织,单纯5-oxo-ETE干预后鼻息肉中MPO浓度明显升高,而5-oxo-ETE+PT干预后该炎症介质浓度下降,但与未经任何干预的鼻息肉中MPO含量相比,无统计学差异。结论5-oxo-ETE体外可以促进鼻息肉组织中Neu释放炎症介质MPO。

摘要： 目的:探讨人嗜中性粒细胞弹性蛋白酶(HNE)体外干预对嗜中性粒细胞型鼻息肉(NNP)上皮中杯状细胞(GC)合成和释放黏蛋白(MUC5AC)的影响.方法:收集正常鼻黏膜组织和NP组织,免疫荧光染色法鉴定鼻息肉(NP)内表型.将2种组织进行体外培养,HE染色检测GC数量,ELISA和RT-PCR法检测MUC5AC mRNA及蛋白表达.将HNE加入体外培养的NNP组织,进行GC计数,ELISA和RT-PCR法分别检测NNP培养基中MUC5AC mRNA表达.结果:与正常鼻黏膜组织相比,体外培养的NNP组织中GC数明显上升,MUC5AC mRNA及蛋白水平显著上升,当HNE对NNP组织进行体外干预后,GC数及MUC5AC mRNA及蛋白水平均显著上调.结论:HNE体外干预可促进NNP中MUC5AC的合成和释放.

摘要： 小李上班期间感觉腹痛难忍,到附近医院诊断为急性阑尾炎,医生建议实施手术切除阑尾。阑尾炎的致病原因较为复杂,是一种常见的外科疾病,高发人群为青年人,且男性患者多于女性患者。临床中阑尾炎常为急性发作,阑尾炎急性发作的时候,常见的症状为患者转移性右下腹部疼痛,同时还会伴有恶心、呕吐和发热等情况,血液检测会发现白细胞和嗜中性粒细胞升高,确认病因为感染或梗阻。

摘要： 炎症是动物机体对外界刺激产生的重要防御反应.微血管内皮细胞具有重要的生理学功能,参与机体多种平衡调节、细胞功能及炎症反应,维持局部内环境的稳态,在抑制炎症发生等病理性过程中具有重要的作用,中药通过对MVECs的保护作用,为兽医临床使用和研究中药防治细菌性疾病提供了一定的理论依据.

摘要： 本试验旨在寻找一种高效、简便、经济及可靠的方法从大鼠外周血中分离出嗜中性粒细胞(PMNs),为后续抗菌药物筛选及机理研究提供基础.在常规的Percoll密度梯度离心法基础上加入淋巴细胞分离液以去除淋巴细胞,并对离心温度、Percoll浓度等进行改良,考察优化后方法提取的PMNs数量、活力及纯度.试验结果显示:(1)优化后提取的PMNs数量与常规方法相比差异显著(P＜0.05),约为常规提取方法的1.2倍;(2)优化后方法和常规方法提取的PMNs活力均为97％以上,无差异(P＞0.05);(3)优化后方法提取的PMNs纯度约为80％,常规方法提取纯度为20％,优化后方法与常规提取方法相比差异极显著(P＜0.01).表明优化改良后的方法分离出的PMNs纯度高,活性好,数量多,是一种简单、高效的PMNs分离方法.

摘要： 目的:本研究旨在通过前期实验室的蛋白质组学研究找到微血管内皮细胞上激活嗜中性粒细胞的因子,并验证白头翁汤是否通过筛选出的这些因子保护内皮以激活嗜中性白细胞杀灭细菌,为建立体外筛选激活嗜中性白细胞的抗菌中药提供一个新的方法. 方法:通过分析DIA蛋白芯片技术定量技术检测不同处理下的微血管内皮细胞的差异蛋白表达结果,根据结果及文献查询筛选蛋白进行Western blot验证.再用阻断剂阻断差异因子后作用于微血管内皮细胞考察跨内皮嗜中性白细胞的杀菌能力,确定微血管内皮细胞上激活嗜中性白细胞杀灭细菌的因子. 预期结果:验证出白头翁汤作用LPS损伤微血管内皮细胞差异蛋白的结果,确定白头翁汤是否可通过验证出的因子激活嗜中性白细胞杀灭细菌的能力,建立体外筛选中药的方法. 创新点:筛选微血管内皮细胞上激活嗜中性白细胞杀菌功能的因子目前尚无报道.中药能通过调动筛选出的因子保护内皮以激活嗜中性白细胞杀菌功能的研究尚无报道.

摘要： 目的:旨在研究调动微血管内皮细胞、从而激活嗜中性粒细胞杀灭细菌的中药,并筛选其中具有显著保护内皮细胞激活嗜中性粒细胞杀菌的单味中药成分及其有效水溶性成分,为日后研发治疗动物细菌性疾病的药物奠定基础. 方法:首先确定白头翁汤中的四种中药成分(黄连、黄柏、秦皮、白头翁)以及马齿苋对降低LPS诱导微血管内皮细胞损伤的浓度和时间,其次收集跨过内皮细胞的嗜中性粒细胞,通过庆大霉素保护试验与大肠杆菌共同作用涂板观察其胞内外杀菌情况,同时ELISA方法测定溶菌酶活性、琼脂糖火箭电泳法测定溶菌酶浓度,并采用流式细胞术法、RT-PCR法检测LL37释放表达情况. 预期结果:五种中药在有效安全浓度下对受LPS损伤的RIMVECs有保护作用,并且激活嗜中性粒细胞的溶菌酶含量和LL37释放量提高,胞内外杀菌情况有显著差异,从而筛选出对嗜中性粒细胞杀菌功能有激活作用的中药水溶性成分. 创新点:马齿苋通过调理微血管内皮细胞激活嗜中性粒细胞杀菌尚无报道,从调动微血管内皮细胞激活嗜中性粒细胞的角度探讨中药水溶性成分,为临床治疗细菌性疾病奠定基础.

摘要： 微血管内皮细胞(Microvascular endothelial cells,MVECs)是存在于血液与组织液之间的一层单层的扁平上皮细胞,从结构上来说,MVECs是微血管通透性主要的物理屏障;从功能上来说,MVECs是血管内外物质交换的重要场所,在机体内形成主要防御屏障.尤其是在炎症发生时,与机体固有免疫细胞一嗜中性粒细胞相互作用,调节其颗粒酶活性和功能,从而发挥抵御病原体,控制炎症发生的作用.近年来已证实多种中药及有效成分能从多个方面调节内皮细胞活性物质分泌、抗细胞凋亡等,达到保护内皮细胞功能的目的.

摘要： 构建支气管上皮细胞(BEAS-2B细胞)和嗜中性粒细胞共培养体系,探讨二者联合培养对白细胞介素-8(Interleukin-8,IL-8)的影响.应用蛋白微阵列筛查BEAS-2B细胞和嗜中性粒细胞单独培养、联合培养12h后细胞因子表达差异,应用ELISA方法定量测量上述不同培养体系不同培养时间(2h,6h,12h,18h)IL-8浓度,应用Real-time PCR方法检测上述不同培养体系培养12h后BEAS-2B细胞和嗜中性粒细胞中IL-8基因表达.各体系经12h培养后上清液中IL-8有不同程度升高,BEAS-2B细胞和嗜中性粒细胞联合培养上清液中IL-8浓度显著高于两种细胞单独培养所分泌IL-8之和,联合培养后BEAS-2B细胞中IL-8基因表达水平明显上调.研究结果证明嗜中性粒细胞与BEAS-2B细胞联合培养可上调BEAS-2B细胞中IL-8基因表达和显著增加细胞培养上清液中IL-8浓度.

摘要： 围产期奶牛对细菌性疾病的易感性升高。本研究的目的在于探讨Nod-2受体在围产期奶牛嗜中性粒细胞(PMN)中的表达变化及其对PMN细胞呼吸爆发功能的影响。采用RT-PCR法检测围产期和非围产期泌乳奶牛外周PMN细胞中Nod-2 mRNA的表达变化;全血分别用佛波醇酯(PMA)和Nod-2受体特异性配体MDP刺激，采用流式细胞仪检测PMN呼吸爆发功能。结果显示，围产期奶牛PMN细胞Nod-2 mRNA表达量显著低于非围产期奶牛(P0.05)。本研究结果表明，围产期奶牛对细菌性疾病易感性升高可能与Nod-2表达下调有关。

摘要： 本课题以“中(兽)医药学可能主要通过保护、激活动物体维持细胞环境的结构及其功能达到防止疾病目的的一门学科”、“中药方剂治疗细菌感染性疾病的机制在于阻断细菌毒素对微血管内皮细胞的伤害”等观点为指导,旨在探寻一条既不同于抗生素样作用、又能清除机体感染细菌的新途经,期望通过深入研究致病菌和非致病菌对体外嗜中性白细胞溶酶体活性影响的差异、细菌毒素损伤微血管内皮细胞对嗜中性白细胞溶酶体活性的影响及中药方剂对其作用,证实抗菌中药方剂清除机体感染细菌的机制是调理微血管内皮细胞激活嗜中性白细胞溶酶体活性.本课题的预期成果将为抗菌中药成分复方的原则形成奠定基础,为新型治疗细菌药物的研发夯实技术依据.

摘要： 本课题以“中(兽)医药学可能主要通过保护、激活动物体维持细胞环境的结构及其功能达到防止疾病目的的一门学科”、“中药方剂治疗细菌感染性疾病的机制在于阻断细菌毒素对微血管内皮细胞的伤害”等观点为指导,旨在探寻一条既不同于抗生素样作用、又能清除机体感染细菌的新途经,期望通过深入研究致病菌和非致病菌对体外嗜中性白细胞溶酶体活性影响的差异、细菌毒素损伤微血管内皮细胞对嗜中性白细胞溶酶体活性的影响及中药方剂对其作用,证实抗菌中药方剂清除机体感染细菌的机制是调理微血管内皮细胞激活嗜中性白细胞溶酶体活性.本课题的预期成果将为抗菌中药成分复方的原则形成奠定基础,为新型治疗细菌药物的研发夯实技术依据.

摘要： 本课题以“中(兽)医药学可能主要通过保护、激活动物体维持细胞环境的结构及其功能达到防止疾病目的的一门学科”、“中药方剂治疗细菌感染性疾病的机制在于阻断细菌毒素对微血管内皮细胞的伤害”等观点为指导,旨在探寻一条既不同于抗生素样作用、又能清除机体感染细菌的新途经,期望通过深入研究致病菌和非致病菌对体外嗜中性白细胞溶酶体活性影响的差异、细菌毒素损伤微血管内皮细胞对嗜中性白细胞溶酶体活性的影响及中药方剂对其作用,证实抗菌中药方剂清除机体感染细菌的机制是调理微血管内皮细胞激活嗜中性白细胞溶酶体活性.本课题的预期成果将为抗菌中药成分复方的原则形成奠定基础,为新型治疗细菌药物的研发夯实技术依据.

摘要： 本课题以“中(兽)医药学可能主要通过保护、激活动物体维持细胞环境的结构及其功能达到防止疾病目的的一门学科”、“中药方剂治疗细菌感染性疾病的机制在于阻断细菌毒素对微血管内皮细胞的伤害”等观点为指导,旨在探寻一条既不同于抗生素样作用、又能清除机体感染细菌的新途经,期望通过深入研究致病菌和非致病菌对体外嗜中性白细胞溶酶体活性影响的差异、细菌毒素损伤微血管内皮细胞对嗜中性白细胞溶酶体活性的影响及中药方剂对其作用,证实抗菌中药方剂清除机体感染细菌的机制是调理微血管内皮细胞激活嗜中性白细胞溶酶体活性.本课题的预期成果将为抗菌中药成分复方的原则形成奠定基础,为新型治疗细菌药物的研发夯实技术依据.

摘要： 本课题以“中(兽)医药学可能主要通过保护、激活动物体维持细胞环境的结构及其功能达到防止疾病目的的一门学科”、“中药方剂治疗细菌感染性疾病的机制在于阻断细菌毒素对微血管内皮细胞的伤害”等观点为指导,旨在探寻一条既不同于抗生素样作用、又能清除机体感染细菌的新途经,期望通过深入研究致病菌和非致病菌对体外嗜中性白细胞溶酶体活性影响的差异、细菌毒素损伤微血管内皮细胞对嗜中性白细胞溶酶体活性的影响及中药方剂对其作用,证实抗菌中药方剂清除机体感染细菌的机制是调理微血管内皮细胞激活嗜中性白细胞溶酶体活性.本课题的预期成果将为抗菌中药成分复方的原则形成奠定基础,为新型治疗细菌药物的研发夯实技术依据.

摘要： 本发明涉及一种用于从第一生物样品中预测和/或检测纤溶功能不全的体外工艺，所述纤溶功能不全优选地与伴有/没有弥散性血管内凝血(DIC)的病状和NET相关，所述工艺包含测量纤溶酶原和/或其至少一个片段的浓度。本发明还涉及一种用于确定纤溶酶功能不全的治疗的效率的工艺以及纤溶酶原和包含纤溶酶原的药物组合物，其用作治疗纤溶功能不全的药物，所述纤溶功能不全优选地与脓毒性休克和弥散性血管内凝血(DIC)相关。

摘要： 本发明提供了用于评估哺乳动物受试者中自身免疫糖尿病的风险和进程的方法。所述方法包括测量受试者中嗜中性粒细胞弹性蛋白酶和蛋白酶3的酶活性和/或蛋白浓度，和将这些蛋白酶的测量水平与各自的参考水平比较。

摘要： 本发明涉及具有人嗜中性粒细胞弹性蛋白酶抑制特性的咪唑酮衍生物和它们在治疗中的用途。

摘要： 本发明涉及式1的经取代的双环二氢嘧啶酮，及其作为嗜中性粒细胞弹性蛋白酶活性的抑制剂的用途，含有其的药物组合物，及使用其作为药物以治疗和/或预防肺、胃肠及泌尿生殖疾病、皮肤及眼的炎症以及其他自体免疫及过敏性病症、同种异体移植排斥及肿瘤疾病的方法。

摘要： 用于估计动物体液中吞噬细胞数量的方法包括刺激吞噬细胞的NADPH氧化酶活性；以及使用能够测量光的仪器通过化学发光底物的发射的化学发光来定量所述化学发光底物的还原性脱氧。吞噬细胞的NADPH氧化酶活性优选由能够激活吞噬细胞的呼吸爆发的免疫或化学物质刺激。吞噬细胞的NADPH氧化酶活性优选通过溶液中的或被涂覆到吞噬细胞接触的表面上的刺激物来刺激。该刺激物优选为佛波醇肉豆蔻酸乙酸酯(PMA)。所述动物优选为人，所述体液优选为血液和/或脊髓液。吞噬细胞优选为嗜中性粒细胞，并且化学发光底物优选为光泽精(N,N′‑二甲基‑9,9′‑双吖啶鎓二硝酸盐)。还提供了基于该估计方法的治疗方法。

摘要： 本文提供了使用聚合物颗粒作为嗜中性粒细胞功能的约束物的治疗方法、组合物、系统和试剂盒。此类方法包括但不限于预防、治疗和/或改善炎性疾病、感染、自身免疫疾病、恶性疾病和可能涉及嗜中性粒细胞的其他疾病或疾患的方法。在一些实施方案中，聚合物颗粒可用于诊断嗜中性粒细胞相关疾病或疾患。

摘要： 本发明的问题在于提供一种嗜中性粒细胞吞噬能力增强剂，该嗜中性粒细胞吞噬能力增强剂通过增强嗜中性粒细胞的吞噬能力，从而作为各种细菌感染症、病毒感染症、真菌感染症、寄生生物感染症、它们的混合感染症的治疗剂或治疗辅助剂而发挥功能。通过含有HRG作为有效成分的嗜中性粒细胞吞噬能力增强剂来解决上述问题。本发明的发明人着眼于HRG具有嗜中性粒细胞活性的控制功能并反复进行深入研究的结果是，新发现HRG能够有效地增强嗜中性粒细胞活性中的针对细菌、病毒、真菌、寄生生物等所引起的病原体、异物的吞噬能力。

摘要： 公开了在个体的牙龈沟内增加减少与嗜中性粒细胞募集相关的信号的蛋白质，并且减少诱导嗜中性粒细胞募集的蛋白质的方法。所述方法包含向所述个体的口腔施用口腔护理组合物，施用量能有效在个体的牙龈沟内增加减少与嗜中性粒细胞募集相关的信号的蛋白质，并且减少诱导嗜中性粒细胞募集的蛋白质，所述口腔护理组合物包含：磷酸锌、氟化亚锡和任选的有机酸缓冲体系。

摘要： 本发明公开了一种光调控嗜中性粒细胞在治疗癌症的药物中的应用，其中，所述光调控嗜中性粒细胞在光照条件下表达用于招募并扩增免疫细胞的细胞因子。本发明利用嗜中性粒细胞自身可以被肿瘤招募的能力，通过在嗜中性粒细胞中表达光调控细胞因子系统，在体外验证光控制不同时间及强度下，测定改造后的细胞释放不同细胞因子的水平，以及这些细胞因子对肿瘤细胞的促进或者抑制作用。从而实现人为可控的在肿瘤细胞周边释放细胞因子并招募其他免疫细胞，继而可影响肿瘤的生长和增殖，最终达到改变肿瘤细胞生长微环境的目的。

摘要： 公开了一种表征和/或分离嗜中性粒细胞的方法，该方法包括根据嗜中性粒细胞上CD101的表达将嗜中性粒细胞表征和/或分开为包含增殖嗜中性粒细胞的第一群体和包含成熟嗜中性粒细胞的第二群体。还公开了包含呈CD10‑CD101‑的增殖嗜中性粒细胞的组合物，和使用其嗜中性粒细胞的治疗、诊断或预后方法，以及用于基于CD101或CD10的表达表征和/或分离增殖嗜中性粒细胞的试剂盒。在一个优选的实施方案中，嗜中性粒细胞群体如果是CD10‑CD101‑可以表征为增殖嗜中性粒细胞，如果是CD10‑CD101+可以表征为未成熟嗜中性粒细胞，而如果是CD10+CD101+可以表征为成熟嗜中性粒细胞。