podocin

摘要： 目的观察健脾益肾活血方对膜性肾病大鼠24 h尿蛋白定量及肾脏组织Nephrin、Podocin蛋白表达的影响。方法将40只SD大鼠随机分为正常组、模型组、贝那普利组、健脾益肾活血组,每组10只。除正常组外,其余组均采用抗FxlA血清一次性尾静脉注射诱导被动型Heymann肾炎模型。造模后第1天开始,贝那普利组给予0.15 mg/mL盐酸贝那普利片悬混液灌胃,健脾益肾活血组给予2.5 g/mL的健脾益肾活血汤灌胃,正常组、模型组给予等量生理盐水灌胃,均1次/d,连续4周。每周末检测各组大鼠24 h尿蛋白定量;于灌胃4周末处死大鼠,心脏取血,检测血清总蛋白、血清白蛋白、血肌酐、总胆固醇、三酰甘油;取肾脏组织,观察病理改变;免疫组化观察肾脏组织中Nephrin、Podocin蛋白阳性表达情况。结果造模后各造模组大鼠24 h蛋白尿定量均明显高于正常组(P均0.05)。末次灌胃结束后,模型组、贝那普利组、健脾益肾活血组血清白蛋白水平和肾脏组织中Nephrin、Podocin表达平均荧光强度均明显低于正常组(P均0.05);模型组、贝那普利组及健脾益肾活血组各血清指标水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05);贝那普利组、健脾益肾活血组Nephrin与Podocin表达平均荧光强度均明显高于模型组(P均<0.05),且健脾益肾活血组均明显高于贝那普利组(P均<0.05)。结论健脾益肾活血方可以降低膜性肾病大鼠的尿蛋白水平,能够上调肾脏组织中Nephrin、Podocin蛋白的表达。

摘要： 目的:观察益肾胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织SIRT6、podocin表达的影响。方法:SD健康雄性大鼠40只,随机选择30只大鼠建立DKD模型,实验分为4组:正常组、DKD组、益肾胶囊组、白藜芦醇组,益肾胶囊组每只大鼠灌胃益肾胶囊625 mg·kg^(-1)·d^(-1),白藜芦醇组每只大鼠灌胃白藜芦醇30 mg·kg^(-1)·d^(-1),正常组及DKD组每日给予等量的蒸溜水,灌胃8周。第0、4、8周末测定体重、血糖、24 h尿蛋白定量,第8周末处死大鼠,腹主动脉采血测定血肌酐、尿素氮、总胆固醇和三酰甘油,取大鼠肾组织,行HE染色和Masson染色,光镜检查肾组织病理变化,采用免疫组化检测肾组织中SIRT6、podocin表达的情况。结果:(1)与正常组相比,DKD组大鼠肾小球和肾小管损伤明显,体重明显减低(P0.05),但仍高于正常组,24 h尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮、总胆固醇和三酰甘油明显下降(P<0.05),肾组织病理改变明显减轻,免疫组化结果示:肾组织中SIRT6、足细胞podocin蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论:SIRT6在糖尿病肾病的发病机制过程中具有一定的作用,益肾胶囊可能通过上调DKD模型大鼠肾组织SIRT6的表达,改善DKD模型足细胞podocin损伤,进而延缓糖尿病肾病的进展。

摘要： 目的:观察大鼠在一次性力竭运动后肾脏裂孔膜蛋白的表达水平,探究PKC抑制剂对其蛋白表达水平的影响,揭示PKC在运动性蛋白尿形成中的作用机制。方法:SD雄性大鼠30只随机分为对照组(C)、运动组(E)、运动联合PKC抑制剂组(EPI),每组10只。E组和EPI组大鼠分别进行一次性跑台力竭运动(25 m/min),EPI组大鼠运动前1 d及1 h腹腔注射PKC抑制剂白屈菜红碱(chelerythrine, 5 mg/kg),C组和E组注射相应体积的生理盐水。运动后即刻麻醉后,取血液、尿液及肾脏组织,使用化学比色法检测尿蛋白、尿酸、尿糖、血尿素、血尿酸、血糖水平,使用荧光探针法检测肾脏ROS水平,使用Western blot法检测肾脏PKC、Nox2、Nox4、nephrin、podocin蛋白表达。结果:(1)与C组相比,E组尿蛋白、尿酸、尿糖、血尿素、血尿酸显著增多(P<0.05),血糖显著减少(P<0.01),肾脏ROS生成显著增多(P<0.01),肾脏nephrin、podocin蛋白表达明显降低(P<0.05),PKC、Nox2、Nox4蛋白表达明显增多(P<0.05);(2)与E组比,EPI组尿蛋白、尿糖、血尿素显著减少(P<0.05),血糖显著增加(P<0.01),肾脏ROS生成显著降低(P<0.01),EPI组肾组织中nephrin、podocin蛋白表达明显增加(P<0.05),PKC、Nox2蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论:一次性力竭运动通过PKC/NOX/ROS途径使大鼠肾脏裂孔膜蛋白nephrin、podocin表达下调;PKC抑制剂缓解力竭运动导致的肾脏裂孔膜蛋白表达下降,预防运动性蛋白尿的发生。

摘要： 目的观察舒洛地特对膜性肾病(MN)大鼠肾组织中podocin、nephrin表达的影响,探讨舒洛地特对MN的保护作用。方法将40只SD大鼠随机分为正常对照组(A组)、模型组(B组)、低剂量舒洛地特组(C组)、高剂量舒洛地特组(D组),每组各10只。除A组外,其他3组大鼠进行MN模型制备。造模成功后,C组和D组每只大鼠分别按照舒洛地特10 mg/kg、20 mg/kg剂量溶于生理盐水配成溶液灌胃,A、B组每只大鼠给予相同剂量生理盐水灌胃,均连续4周。各组大鼠分别于造模前、后及药物干预4周后检测24 h尿蛋白定量,在光镜和电镜下分别观察不同染色的大鼠肾组织病理形态。采用免疫组化检测大鼠肾组织podocin、nephrin平均积分光密度(IOD)。结果造模后,与A组比较,B、C、D组大鼠24 h尿蛋白定量均显著升高(P<0.05)。治疗后,C、D组大鼠24 h尿蛋白定量较同组造模后及B组同期均降低,D组24 h尿蛋白定量较C组同期显著降低(P<0.05)。光镜下,A组大鼠肾小球无固有细胞增多,无基底膜增厚;B组大鼠肾小球固有细胞增多,基底膜明显增厚;C、D组大鼠肾小球固有细胞轻度增多,基底膜增厚较B组减轻。电镜下,A组大鼠肾小球足细胞结构清晰,足突排列整齐;B组大鼠肾小球基底膜弥漫增厚,足突广泛融合或消失;C组大鼠肾小球基底膜不规则增厚,足突部分融合;D组大鼠肾小球基底膜轻度增厚,足突部分融合。与A组比较,B、C、D组大鼠podocin、nephrin IOD均降低;与B组比较,C、D组大鼠podocin、nephrin IOD均升高;与C组相比较,D组大鼠podocin、nephrin IOD均升高(P<0.05)。结论舒洛地特可降低MN大鼠24 h尿蛋白定量,上调MN大鼠肾组织中podocin、nephrin的表达,且上述作用具有剂量依赖性。

摘要： 目的 探讨肾苏Ⅳ对糖尿病肾病(DN)大鼠足细胞超微结构、podocin及血管内皮生长因子(VEGF)水平的影响.方法 将选用的健康大鼠平均分为正常对照组(NC组),DN大鼠模型组(DN组)和DN大鼠模型加肾苏Ⅳ治疗组(SC组).观察大鼠的一般状态、肾指数、血糖和生化指标水平并进行比较;电镜观察大鼠肾小球足细胞的超微结构;苏木素-伊红(HE)染色观察肾脏病的病理变化;Western印迹检测大鼠的podocin和VEGF蛋白水平.结果 NC组大鼠毛发很有光泽,自由活动且有灵敏的反应.DN组大鼠精神状况欠佳,且大鼠均反应缓慢,活动也很疲倦,毛发泛黄无光泽,还有大鼠出现脱毛的情况,大鼠伴随尿量也增多,体重也明显减轻;与DN组大鼠相比,SC组大鼠的情况明显出现好转.与NC组比较,DN组和SC组体重明显降低、肾指数、血糖水平均明显升高(均P<0.05);SC组体重明显高于DN组,且肾指数和血糖水平均明显低于DN组(均P<0.05).与NC组比较,DN组和SC组24 h尿蛋白(Pro)、血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)和血肌酐(Scr)水平均明显增高(P<0.05);与DN组比较,SC组各项指标水平均明显下降(均P<0.05).NC组足细胞结构完整,足突的排列整齐有序,清晰可见;与NC组相比,DN组足突有增宽的现象,有的足突已经融合并且消失,足细胞也不完整且减少,大鼠的基底膜有也明显增厚的情况出现.与NC组比较,DN组和SC组足突的平均宽度(FPW)、融合率及基底膜厚度(GBM)均明显增高,而足细胞个数明显下降(均P<0.05);与DN组比较,SC组FPW、融合率和GBM均明显下降,而足细胞个数明显上升(均P<0.05).NC组的肾组织形态均正常,与NC组相比,DN组肾小球肥大,毛细血管基底膜增厚,系膜基质中有增生出现,肾小管的上皮细胞也出现空泡样变,蛋白管型较为常见.与DN组相比,SC组肾组织形态明显变好.DN组肾组织中podocin蛋白的表达明显低于NC组,而VEGF蛋白的表达明显高于NC组(P<0.05);与DN组相比较,SC组大鼠肾组织中podocin蛋白明显升高,且VEGF蛋白的表达显著下降(P<0.05).结论 肾苏Ⅳ可有效调控podocin和VEGF蛋白表达的平衡,从而改善足细胞超微结构的病变,同时对DN有一定的防治作用.

摘要： 目的:研究环磷酰胺(CTX)能否减轻2型糖尿病肾病大鼠蛋白尿及其作用机制.方法:采用高糖高脂饮食+腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法成功建立2型糖尿病肾病(DKD)大鼠模型.将其分为DKD组和CTX组,CTX组药物干预4周后对大鼠肾脏组织进行常规病理染色及电镜观察以及生化指标、足细胞标志性蛋白和炎症指标检测.结果:(1)2型糖尿病肾病的大鼠模型成模率82.35％;(2)与对照组相比,DKD组大鼠尿蛋白持续增多,Podocin减少,Desmin增多,CTX组居中,三组对比P＜0.01;(3)糖尿病肾病早期的大鼠即能观察到肾小管间质炎症及纤维化因子异常.DKD组及CTX组的TGF-β1、CTGF、MCP-1 均高于对照组(DKD 组 P＜0.01;CTX 组 P＜0.05),DKD 组最高,与 CTX 组相比 P＜0.05.结论:环磷酰胺能够降低2型糖尿病肾病大鼠的尿蛋白,延缓肾脏病进展,并推测这与其稳定足细胞支架蛋白Podocin,减少足细胞转分化有关.

摘要： 目的 探究紫草素对紫癜性肾炎(HSPN)大鼠的肾脏保护作用及肾组织Nephrin、Podocin表达的影响.方法 采用灌胃牛血清白蛋白(BSA)+尾静脉注射脂多糖(LPS)+皮下注射四氯化碳(CCl4)的方法构建HSPN大鼠模型,将HSPN大鼠随机分为模型组(n=12)与实验组(n=12),另选择12只大鼠灌胃等量蒸馏水,皮下注射及尾静脉注射等量生理盐水作为对照组.实验组大鼠灌胃100 mg·kg-1·d-1紫草素,对照组与模型组灌胃等量生理盐水,连续干预12周.用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)水平;用全自动生化分析仪检测大鼠血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)水平及尿液24 h尿蛋白水平;用蛋白质印迹法检测肾组织Nephrin、Podocin蛋白表达.结果 对 照 组、模 型 组 及 实 验 组 大 鼠 血 清IFN-γ水 平 分 别 为(55.23±4.06),(36.73±3.84),(48.33±5.12)pg·mL-1;IL-4水平分别为(0.56±0.07),(1.13±0.21),(0.79±0.12)ng·mL-1;IFN-γ/IL-4分别为(0.11±0.02),(0.03±0.01),(0.07±0.04);尿液24 h尿蛋白水平分别为(5.69±2.21),(83.02±14.73),(35.46±6.52)mg;血清BUN水平分别为(5.78±0.84),(14.93±1.59),(8.11±1.32)mmol·L-1;血清Cr水平分别为(59.32±6.49),(158.11±20.03),(91.38±9.16)μmoL·L-1;肾组织Nephrin蛋白相对表达量分别为0.97±0.03,0.26±0.11,0.62±0.12;Podocin蛋白相对表达量分别为0.94±0.06,0.23±0.14,0.85±0.09,模型组分别与对照组、实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 紫草素可抑制HSPN大鼠的炎症反应,调节Th1/Th2平衡,同时改善HSPN大鼠的肾功能,其作用机制可能与上调HSPN大鼠肾组织Nephrin与Podocin蛋白表达相关.

摘要： 目的:探讨沙利度胺对膜性肾病(MN)大鼠VEGF、PLA2R、podocin及其mRNA表达水平的影响.方法:将48只SD大鼠随机分为对照组、模型组、沙利度胺组和来氟米特组各12只,应用自备阳离子化牛血清白蛋白制备MN大鼠模型.沙利度胺组给予沙利度胺溶液(100 mg/kg)灌胃,来氟米特组给予来氟米特(5 mg/kg)灌胃.治疗4周后,测定血肌酐、尿素氮、尿微量蛋白、IL-1β、IL-6和TNF-α水平;取对数生长期大鼠肾足细胞加入含有10％对应大鼠血清的培养液培养,CCK-8法检测各组细胞增殖;RT-PCR和Western Blot测定各组细胞VEGF、PLA2R、podocin蛋白和mRNA的表达.结果:与对照组相比,模型组大鼠的尿微量白蛋白、尿素氮、肌酐、IL-1β、IL-6、TNF-α、VEGF、PLA2R水平升高(P＜0.05),肾足细胞存活率和podocin表达下降(P＜0.05);与模型组相比,沙利度胺组和来氟米特组大鼠的尿微量白蛋白、尿素氮、肌酐、IL-1β、IL-6、TNF-α、VEGF、PLA2R水平降低(P＜0.05),肾足细胞存活率和podocin表达增加(P＜0.05).结论:沙利度胺可能通过抑制肾足细胞VEGF、PLA2R的表达,上调podocin的表达,改善MN大鼠的肾组织结构和功能损伤.