p-ERK1/2

摘要： 目的研究转分化肾小管上皮细胞是否分泌细胞外DJ-1蛋白,刺激甲状旁腺细胞增生、PTH分泌。方法TGF-β1诱导HK-2细胞转分化,ELISA检测培养液中分泌型DJ-1蛋白水平;用含分泌型DJ-1蛋白的上清或野生型分泌蛋白DJ-1培养甲状旁腺细胞,免疫共沉淀检测DJ-1与P-FGFR1的相互作用,Western blot检测P-ERK1/2的活化,CCK8法检测甲状旁腺细胞的增殖,电化学发光法检测PTH的分泌。结果TGF-β1培养72h,肾小管上皮细胞表达α-SMA升高,培养液中DJ-1蛋白表达升高;分泌型DJ-1蛋白与P-FGFR1相互作用,ERK1/2磷酸化;甲状旁腺细胞在含分泌型DJ-1蛋白上清及野生型分泌蛋白DJ-1培养下细胞增殖率显著增加、PTH分泌显著增加,且可被FGFR1抑制剂抑制。结论分泌型DJ-1蛋白可促进甲状旁腺细胞增殖。

摘要： 目的:观察电针"次髎""会阳"对间质性膀胱炎(IC)大鼠脊髓背角磷酸化的胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)及原癌基因(c-fos)表达的影响.方法:将雌性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组和电针组,每组各6只.采用环磷酰胺腹腔注射的方法建立IC大鼠模型.电针组于"次髎""会阳"给予电针干预,20 min/次,1次/d,连续3 d.造模后48 h及干预后24 h观察大鼠膀胱疼痛行为变化;Western blot法检测脊髓腰6至骶1节段p-ERK1/2和c-fos蛋白的相对表达量;免疫荧光染色法检测右侧脊髓背角p-ERK1/2和c-fos的表达.结果:与空白组比较,模型组膀胱机械疼痛阈值降低(P<0.05),脊髓p-ERK1/2和c-fos的蛋白表达及脊髓背角p-ERK1/2和c-fos的免疫荧光面密度值均升高(P<0.05).与模型组比较,电针组治疗后膀胱机械疼痛阈值升高(P<0.05),脊髓p-ERK1/2和c-fos的蛋白表达及脊髓背角p-ERK1/2和c-fos的免疫荧光面密度值均降低(P<0.05).结论:电针"次髎""会阳"可提高IC大鼠膀胱机械疼痛阈值,调节脊髓痛觉过敏,发挥镇痛作用,其机制可能与降低脊髓背角中p-ERK1/2和c-fos的表达有关.

摘要： 目的 探讨核因子受体激活因子κB配体(RANKL)、磷酸化细胞外信号调节激酶-1/2(p-ERK1/2)和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)相关信号通路在乳房外Paget病(EMPD)中的意义.方法 采用免疫组织化学染色检测RANKL、p-ERK1/2及p-mTOR在80例EMPD患者(于2008-2017年就诊于福建医科大学附属第一医院皮肤科及福建省皮肤性病防治院)标本中的表达情况.结果 RANKL定位于Paget细胞核,阳性66例,阴性14例,阳性率为82.5％.p-ERK1/2定位于Paget细胞核,阳性69例,阴性11例,阳性率为86.25％.p-mTOR定位于Paget细胞核,阳性71例,阴性9例,阳性率为88.75％.三者在EMPD中表达呈正相关(相关性系数分别为0.907、0.931、0.998,P<0.05).结论 RANK-RANKL信号通路、RAS-RAF-MEK-ERK信号通路、PI3K-AKT-mTOR信号通路在EMPD中被激活,存在相互联系、相互促进的作用,可能共同促使了肿瘤细胞的生长、增殖,增加了疾病的侵袭性.

摘要： 背景与目的肾癌是成人泌尿系统最常见的恶性肿瘤。晚期肾癌的治疗以靶向治疗为主,但总体疗效不佳,需要寻找新的靶标。不均一核糖核蛋白Ⅰ(heterogeneous nuclear ribonucleoproteinⅠ,hnRNPI)为一个多功能的RNA结合蛋白。近年的研究证实hnRNPI参与一系列生物学过程,与多种肿瘤发生发展密切相关。本研究旨在探讨hnRNPI在肾癌发生发展中的作用及其临床意义。方法收集2009年5月至2011年10月期间,于我院经过手术切除的31例肾癌患者的肾癌和癌旁组织标本,用免疫组织化学法观察hnRNPI在肾癌和癌旁组织中的表达情况,分析其与临床病理参数的相关性。应用CCK8法检测hnRNPI对肾癌细胞增殖能力的影响,应用Transwell实验检测hnRNPI对肾癌细胞迁移和侵袭的影响,应用蛋白质免疫沉淀实验检测hnRNPI对ERK信号通路相关蛋白的影响。结果hnRNPI在肾癌组织中的阳性表达率显著高于癌旁组织,差异具有统计学意义[41.9%(13/31)vs.12.9%(4/31),P=0.021]。hnRNPI的表达水平与T(Tumor,肿瘤原发)分期、N(Lymph node,淋巴结)分期、M(Metastasis,远处转移)分期、TNM(Tumor,Lymph node,Metastasis)分期(第6版美国癌症联合委员会癌症分期系统)相关,与患者的年龄和性别无关。应用干扰技术沉默hnRNPI的表达后,肾癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力下降,同时ERK1/2的磷酸化水平下降。结论hnRNPI在肾癌组织中高表达,可能通过调控Erk信号通路影响肾癌的发生发展。

摘要： 目的 探讨TGF-β1上调肝星状细胞LX-2表达程序性死亡配体1(PD-L1)的作用及机制.方法 5、10、20μg·L-1 TGF-β1与肝星状细胞LX-2共培养,流式细胞术和Western blot检测LX-2细胞PD-L1蛋白的表达,Western blot检测ERK1/2和p-ERK1/2蛋白的表达.结果 5、10、20μg·L-1 TGF-β1刺激LX-2细胞48 h后,LX-2表面的PD-L1表达明显增加;10μg·L-1 TGF-β1刺激LX-2细胞24、48、72 h后,LX-2表面的PD-L1表达明显增加;5、10、20μg·L-1 TGF-β1刺激LX-2细胞48 h后,LX-2细胞ERK1/2含量不变,LX-2细胞p-ERK1/2的表达增加,同时ERK1/2特异性阻断剂U0126下调TGF-β1增加的LX-2细胞p-ERK1/2和PD-L1表达.结论 TGF-β1能够增加LX-2表面PD-L1表达,其机制可能与ERK1/2信号通路有关.

摘要： 为探讨人参皂苷Rb1对Aβ1-42所致小鼠脑片微管相关蛋白(Tau)异常磷酸化的抑制作用及其可能机制,采用Aβ1-42诱导小鼠海马脑片建立Tau蛋白过度磷酸化模型,运用免疫印迹方法观察人参皂苷Rb1对Aβ1-42导致小鼠脑片p-Tau、p-Erk1/2、Erk1/2蛋白水平的影响.实验结果显示,模型组p-Tau、p-Erk1/2表达水平明显高于空白对照组(P＜0.01);与模型组比较,人参皂苷Rb1各剂量组p-Tau、p-Erk1/2表达水平显著性降低(P＜0.01或P＜0.05),且大、中剂量组优于小剂量组;人参皂苷Rb1呈一定的剂量依赖性下调Aβ1-42导致的p-Tau、p-Erk1/2的蛋白水平.本研究表明,人参皂苷Rb1可能通过抑制Erk1/2的激活逆转Aβ1-42所导致的Tau蛋白水平的升高来减少神经纤维缠结.

摘要： 目的 研究己糖激酶2(HK2)通过p-ERK1/2促进人子宫颈癌细胞HeLa增殖和迁移的分子机制.方法 用Western blot和细胞免疫化学检测HK2在宫颈癌细胞系中的表达;用G418压力筛选获取HK2稳定表达的HeLa-HK2及对照细胞系;用细胞划痕和Transwell小室法检测HeLa-HK2及对照细胞的迁移和侵袭;用细胞计数、MTT法、流式细胞仪检测HeLa-HK2及对照细胞的增殖、细胞活力及细胞周期的分布;用Western blot和细胞免疫化学检测ERK1/2、p-ERK1/2、cyclin A和Slug蛋白的表达;用ERK抑制剂(FR180204)抑制ERK1/2和p-ERK1/2表达后观察HeLa-HK2细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化.结果 成功构建HK2稳定表达的HeLa-HK2细胞系;HeLa-HK2细胞迁移、侵袭及增殖能力显著强于对照细胞,HeLa-HK2细胞中p-ERK1/2、cyclin A和Slug蛋白表达高于对照细胞;使用FR180204在HeLa-HK2细胞中抑制ERK1/2和p-ERK1/2表达后,可以抑制HK2对细胞增殖、迁移和侵袭的增强作用.结论 HK2通过p-ERK1/2上调cyclin A和Slug蛋白表达促进细胞的增殖、迁移和侵袭.

摘要： 目的:研究肿瘤环死因子α (tumor necrosis factor α,TNF-α)处理小鼠前成骨细胞株MC3T3-E1对其血液生成能力的影响及可能机制.方法:Western blot方法检测TNF-α处理MC3T3-E1细胞后,N-cadherin、p-Erk1/2和p-Akt的表达水平;将TNF-α预处理的MC3T3-E1细胞作为饲养层细胞,联合造血生长因子SCF、TPO和Flt3-配体,体外扩增分选的小鼠Sca-1(+)细胞7d后,检测粒-单系集落形成单位(CFU-GM)、红系形成单位(BFU-E)和前B淋系形成单位(CFU-pre-B).并检测Erk抑制剂FR180204对MC3T3-E1细胞N-cadherin和p-Erk水平的影响.结果:MC3T3-E1细胞经TNF-α预处理后,N-cadherin和p-Erk的表达上调,p-Akt没有明显变化.饲养层细胞联合造血生长因子体外扩增Sca-1(+)细胞7d,与对照组比较,TNF-α预处理组中的总CFU、BFU-E及CFU-GM数目下降(P＜0.05),但CFU-pre-B数目明显升高(P＜0.05).Erk抑制剂FR180204处理MC3T3-E1细胞可下调Erk的同时上调N-cadherin水平.结论:TNF-α可能通过影响骨髓微环境中造血支持细胞而间接影响血液生成和造血干细胞向各系列的分化;调节成骨细胞Erk1/2的磷酸化和N-cadherin的表达,可能是TNF-α影响骨髓血液生成的机制之一.

摘要： 目的:骨髓来源的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)在骨髓微环境中参与骨髓瘤细胞的耐药性.本研究旨在通过体外实验,研究经细胞因子预处理的骨髓MSCs在与人骨髓瘤细胞株H929共培养条件下,是否影响多西环素(doxycycline,DOX)对骨髓瘤细胞株的细胞毒性作用,并初步探讨其可能的作用机制.方法:经白细胞介素(interleudin,IL)-1β或肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-ɑ预处理的人骨髓MSCs,与H929细胞共培养,并以DOX处理细胞,分别采用CCK8法和流式细胞术(FCM),检测DOX对H929细胞增殖和凋亡的影响;采用FCM和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测IL-1β或TNF-α处理后,骨髓MSCs中血管细胞黏附分子(VCAM-1)表达;Western blot法检测在DOX存在时,不同处理的骨髓MSCs作为共培养饲养层细胞的条件下,H929细胞p-Erk1/2的变化.结果:DOX可抑制骨髓瘤细胞株H929的增殖并诱导其凋亡.人骨髓MSCs与H929共培养可以减少DOX对H929的细胞毒性作用,而经IL-1β或TNF-α预处理的人骨髓MSCs再与H929共培养,则可以进一步降低DOX的细胞毒性作用.人骨髓MSCs经IL-1β或TNF-α处理后,其VCAM-1 mRNA转录水平和蛋白表达水平均升高.经预处理的骨髓MSCs与H929共培养后,可以降低DOX对骨髓瘤细胞株p-Erk1/2的下调作用.结论:DOX在体外对骨髓瘤细胞株表现出剂量和时间依赖性的细胞毒性作用;而IL-1β和TNF-α可通过骨髓MSCs来间接拮抗DOX对H929的细胞毒性作用;IL-1β和TNF-α的这一作用机制可能与上调骨髓MSCs的VCAM-1表达与上调p-Erk1/2有关.%Objective:Bone marrow derived mesenchymal stem cells(MSCs)in bone marrow microenvironment was found to be involved in the chemoresistance of myeloma cells. In this study, we investigate the role of IL-1β or TNF-α-treated bone marrow MSCs in chemosensitivity of myeloma cell line H929 to doxycycline(DOX)in vitro, and find some possible mechanisms. Methods:CCK8 assay was employed to measure the proliferative rate of H929 cells in the presence of DOX at different concentration, either alone or coculture with bone marrow MSCs pretreated with IL-1β or TNF-α or not. The apoptotic ratio of H929 cells treated with DOX in the presence of IL-1β or TNF-α-treated bone marrow MSCs or not was determine by flow cytometry(FCM). FCM was also used with real time fluorescence quantitative polymerase chain reaction(RT-qPCR)to measure vascular cell adhesion molecule type one(VCAM-1) on MSCs. The p-Erk1/2 expression level in H929 was measured by Western blot. Results:DOX inhibited the proliferation and induced apoptosis of H929 in a time and dose-dependent manner. IL-1β or TNF-α-pretreated bone marrow MSCs reduced the cytotoxic effects of DOX in H929 cells. Expression level of p-Erk1/2 was down-regulated in H929 cells in the presence of DOX treatment, and this down-regulating effect of DOX was most pronounced when H929 cells were co-cultured with IL-1β or TNF-α-pretreated bone marrow MSCs. In addition, we found that VCAM-1 expression of bone marrow MSCs was up-regulated by IL-1β or TNF-α treatment. Conclusion: DOX was shown to have cytotoxicity to myeloma cells line H929 in a time and dose-dependent manner in vitro. IL-1β or TNF-α could abrogate the cytotoxic effects of DOX in H929 cells indirectly via bone marrow MSCs. Erk pathway in H929 cells and VCAM-1 expression on MSCs may be involved in this myeloma-protective effects by IL-1β or TNF-α.

摘要： Objective:To explore the expression and clinical pathological significances of ERKl, ERK 2 and p-ERK 1/2 by detecting expression of them in colorectal cancer tissues.Methods:120 ca-ses of human colorectal cancer tissues and adjacent tumor tissues were collected in our hospital from 2014-09 to 2016-09.The mRNA expression level was detected using reverse transcription PCR while protein level was detected by Western blotting and immunohistochemistry(IHC),respectively.The cor-relations between the protein level and clinical pathological significances were analyzed.Results:Com-pared with colorectal mucosa tissues,the mRNA expression of ERKl and ERK 2 in cancer tissues were significantly increased,respectively,and related to the level of tumor differentiation.The protein level of ERK 1,ERK 2 and p-ERK 1/2 showed by western blot were also significantly increased in cancer tis-sues.The positive rate of ERK 1,ERK 2 and p-ERK decided by IHC in cancer tissues were 85.0%、79.2%and 81.7%,significantly higher than adjacent tumor tissues,respectively.The high expression of these three proteins was significant correlation with the poor differentiation,high TNM staging,and lym-phatic metastasis.Conclusion:The significantly increased expression of ERKl,ERK 2 and p-ERK 1/2 in colonic and rectal cancer tissues are significantly related to differentiation of tumor cell,lymphatic metastasis and clinical stage.ERK 1/2 and p-ERK 2 may become potential therapeutic targets for the treatment of colorectal cancer.%目的:检测ERK 1、ERK 2及p-ERK 1/2在结直肠癌中的表达,探讨其表达水平与临床指标的相关性.方法:收集2014-09~2016-09在我院因结直肠腺癌行手术治疗的120例病人的癌组织及癌旁组织,通过qPCR检测ERK 1、ERK 2在癌和癌旁组织中的表达,通过IHC、Western blot检测ERK 1、ERK 2及p-ERK 1/2蛋白的表达,分析其与临床指标的相关性.结果:与癌旁组织相比,ERK 1、ERK 2 mRNA在癌组织中显著高表达,且与癌组织的分化程度相关.Western Blot显示ERK 1、ERK 2及p-ERK 1/2蛋白在癌组织中均高表达.免疫组化显示ERK 1、ERK 2和p-ERK 1/2在癌组织中的阳性率分别为85.0%、79.2%和81.7%,显著高于癌旁组织(分别为8.3%、10.8%和11.7%).癌细胞分化越差、TNM分期越高以及有淋巴结转移者,其ERK 1,ERK 2及p-ERK 1/2的蛋白表达量越高.结论:ERK 1、ERK 2及p-ERK 1/2在结直肠癌中显著高表达,与肿瘤的分化程度、淋巴结转移和TNM分期密切相关.ERK 1/2和p-ERK 1/2有望成为结直肠癌靶向治疗的关键靶点.

摘要： 在本发明的实施方案提供了用于产生特定类型激光的三合一二极管，其可用于治疗人和动物的所有细胞病变。受益的患者可以是任何年龄并且可以处于任何的病变状态。所提出的三合一二极管产生的激光源自三种特定分子的组合，即：锌，磷或磷酸盐和铝；有助于促进细胞再生，每个二极管提供1.2W到1.5W之间的有用功率，总功率在3.6W到4.5W之间，波长在780和808nm之间；锌、磷或磷酸盐和铝的分子可以组合成多达26种混合物。

摘要： 本发明公开了一种一二次融合开关的故障解析装置和一二次电气柜，涉及电路检测维修技术领域，该装置包括万用表、万用表安装机构、第一移动机构、第二移动机构；万用表上固定连接有检测端；万用表安装机构包括第一连接部、第二连接部，第一连接部固定连接在所述万用表上，所述第二连接部固定连接在第一移动机构的移动端上，第一连接部与第二连接部卡接；第一移动机构的移动端能够沿直线移动；第一移动机构固定连接在第二移动机构的移动端上，第二移动机构的移动端能够沿垂直于第一移动机构的移动方向的直线移动。本发明的优点在于：能够提高一二次融合开关故障检测的安全性和检测效率，便于后期维修。

摘要： 在本发明的实施方案提供了用于产生特定类型激光的三合一二极管，其可用于治疗人和动物的所有细胞病变。受益的患者可以是任何年龄并且可以处于任何的病变状态。所提出的三合一二极管产生的激光源自三种特定分子的组合，即：锌，磷或磷酸盐和铝；有助于促进细胞再生，每个二极管提供1.2W到1.5W之间的有用功率，总功率在3.6W到4.5W之间，波长在780和808nm之间；锌、磷或磷酸盐和铝的分子可以组合成多达26种混合物。

摘要： 本发明涉及一种适用于骨科创伤治疗的骨科外敷膏。本发明的配方为：对氯苯酚(≥98％)：90％左右，甲醛(36.5～37.4％)：9.5％左右，分子筛：0.5％左右。制备方法为：将熔化的对氯苯酚抽入搪玻璃反应釜中，加入甲醛、分子筛。加热至110°C回流2小时。减压蒸去未反应的对氯苯酚。待液温降至110°C左右，加入碱水(浓度为25kg NaOH加入600L水中溶解)搅拌均匀。将上述溶液抽入萃取釜中，搅拌充分，静置1小时，放出水层。再将余下的碱液抽入萃取釜中萃取。第三次加入清水洗涤。合并水层，调pH值10左右，将此溶液过筛后插入结晶釜中，继续用酸溶液滴至中性，搅拌10min，复测pH在近中性，离心甩干，用少量水洗涤结晶，甩干，100°C干燥。

摘要： 本发明提供了一种以PERK和CTR1为联合靶点的抑制胰腺癌细胞增殖的组合物及其应用，属于生物医药技术领域。所述的组合物包括PERK抑制剂和CTR1抑制剂。本发明首次提出将CTR1靶点与PERK靶点联合作为胰腺癌药物治疗的靶点，为胰腺癌的治疗提出了新的思路。研究显示，与正常对照组相比，PERK抑制剂和CTR1抑制剂联合使用后，能明显抑制胰腺癌细胞的增殖以及成瘤能力。

摘要： 本发明涉及医药技术领域，特别涉及PERK抑制剂在制备治疗和/或预防抑郁症的药物中的应用。实验表明，PERK抑制剂预处理能够明显减少小鼠被迫游泳实验与悬尾实验中的不动时间，增加小鼠糖水偏好百分比。表明，PERK抑制剂ISRIB能够明显改善LPS诱导的小鼠抑郁样行为，较高的临床应用价值和开发前景，为研究开发新的抗抑郁药物提供了新的途径。

摘要： 本文提供了式(I)化合物、组合物和方法，其用于抑制PERK且用于治疗相关病症、疾病和障碍。

摘要： 本文提供了式(I)化合物、组合物和方法，其用于抑制PERK且用于治疗相关病症、疾病和障碍。

摘要： 本实用新型公开了一种一二次融合开关的检测装置和一二次电气柜，涉及电路检测维修技术领域，该装置包括万用表、万用表安装机构、第一移动机构、第二移动机构；万用表上固定连接有检测端，万用表安装在万用表安装机构上；万用表安装机构固定连接在第一移动机构的移动端上，第一移动机构的移动端能够沿直线移动；第一移动机构固定连接在第二移动机构的移动端上，第二移动机构的移动端能够沿垂直于第一移动机构的移动方向的直线移动。本实用新型的优点在于：能够提高一二次融合开关故障检测的安全性和检测效率。

摘要： 本实用新型公开了一种用于一二次融合、一二次深度融合的固封极柱的采样或取能部件，包括独立外壳（盖和主筒），独立外壳的内腔插接有高压输入、输出端部件，独立外壳内装配有（采样或取能）高压电容器，独立外壳的内腔空余处填充有高压绝缘介质。通过设置独立壳体，对高压输入、输出端部件和高压电容器单独构建一个合适的闭合环境，对高压电容器进行包裹，将高压电场解决在本部件内部，使内部高压电场分布均匀，无气泡和气隙等问题，从而解决高压电容的局放问题，不再使用传统的工艺将高压电容器直接浇注在固封极柱内，在高压容器发生损坏后，不会造成整个固封极柱的报废，具有更高的经济效益。