合浦珠母贝

摘要： 为探究合浦珠母贝(Pinctada fucata)抗溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)感染的免疫应答机制,本研究利用转录组测序技术分析了合浦珠母贝凋亡抑制因子(inhibitor of apoptosis proteins,IAPs)蛋白家族中的几个关键差异表达基因在溶藻弧菌早期感染下的表达变化,发现有4个IAP蛋白家族的基因(BIRC2、BIRC3、BIRC4和BIRC7)在合浦珠母贝感染溶藻弧菌后基因表达变化显著,其表达量均在感染期间(0~24h)呈现先升后降的趋势;并通过基因功能分析发现IAP蛋白家族的基因主要富集到了NOD样受体信号通路(NOD-like receptor signaling pathway)、Toll和IMD信号通路(Toll and Imd signaling pathway)、弓形虫病(Toxoplasmosis)和泛素介导的蛋白质水解(Ubiquitin mediated proteolysis)等信号通路中。研究表明IAP蛋白家族中的BIRC2、BIRC3、BIRC4和BIRC7等基因参与了合浦珠母贝抗溶藻弧菌感染的免疫应答反应过程。

摘要： 以合浦珠母贝新品种“海优1号”、“海选1号”、“南科1号”和北海野生群体子一代为研究对象,对不同群体的壳长、壳高、壳宽、铰合部长和活体质量进行测量,通过通径分析和多元回归分析,探究各壳型性状对活体质量的影响。研究表明:各群体的表型性状中活体质量变异系数最大;各群体性状间相关系数均达到极显著水平(P<0.01);除北海野生群体子一代以外,另外3个新品种均表现为壳宽对活体质量的直接作用最大,壳宽是影响活体质量的主要因素;壳型性状对活体质量决定系数的分析结果与通径分析结果一致;决定系数表明影响不同群体合浦珠母贝活体质量的主要壳型性状并不相同,影响“海优1号”、“南科1号”和北海野生群体子一代活体质量的壳型性状已经找到(决定系数总和大于0.85);通过逐步回归的方法建立了不同群体合浦珠母贝壳长X_(1)、壳高X_(2)、壳宽X_(3)、铰合部长X_(4)与活体质量Y的最优多元回归方程:“海优1号”:Y=-14.54+0.2519 X_(1)+0.9178 X_(3),(X_(1)<0.01,X_(3)<0.01);“海选1号”:Y=-20.416+0.378 X_(2)+0.9664 X_(3),(X_(2)<0.01,X_(3)<0.01);“南科1号”:Y=-22.846+0.336 X_(2)+0.718 X_(3)+0.162 X_(4),(X_(2)<0.01,X_(3)<0.01,X_(4)<0.01);北海野生群体子一代:Y=-10.550+0.533 X_(1),(X_(1)<0.01)。

摘要： 为了探究C型凝集素(C-type lectin)家族成员在合浦珠母贝机体内的作用及表达模式,为进一步解析合浦珠母贝PfCLEC17A的免疫应答机制,通过RACE技术克隆获得合浦珠母贝C型凝集素基因PfCLEC17A;利用生物信息学方法分析了PfCLEC17A的分子特征,并通过荧光定量PCR检测PfCLEC17A基因在合浦珠母贝的鳃、外套膜、闭壳肌、性腺、血液、足和肝胰腺等组织及溶藻弧菌感染后在肝胰腺中的表达情况。结果显示,从合浦珠母贝中克隆获得新的C型凝集素基因PfCLEC17A,cDNA全长为699 bp,其中开放阅读框(ORF)长534 bp,编码178个氨基酸残基,含有一个CTL结构域。系统进化树分析表明,合浦珠母贝与其他贝类的PfCLEC17A基因聚集在一个分支。实时荧光定量PCR结果显示,PfCLEC17A在合浦珠母贝的鳃、外套膜、闭壳肌、性腺、血液、足和肝胰腺等各个组织中均有表达,其中在肝胰腺中的相对表达量最高且显著高于在其他组织中的相对表达量。肝胰腺作为软体动物重要的免疫器官,暗示PfCLEC17A基因可能参与机体免疫过程。藻弧菌感染1 h后,合浦珠母贝PfCLEC17A基因表达水平显著升高并达到最大值,说明该基因参与弧菌等微生物刺激的早期反应。综上所述,PfCLEC17A基因参与合浦珠母贝的免疫应激反应,具有一定的免疫功能。

摘要： 应用生物技术探索及活体珠母贝形成珍珠部位解透模拟天然珍珠形成由珠母贝体内分泌出的粘液异变形成散石结晶的成因,利用合浦珠母贝贝壳-贝肉-粘液成功研发筛选出南珠小分子细胞因子生物质,配以葡萄糖、维生素B12等,经生物技术工艺分解循环提取应用于合浦珠母贝养殖培育天然珍珠.该科学技术工艺培育珍珠成珠率高,质量安全性能好,颗粒状结实,一贝培育多珠,成本及费用低;与用珍珠贝壳人工制成的片状珠完全不同,保障了药用珍珠质量的稳定性和可靠性、安全性,合浦珠母贝(Pinctada martensii)培育生产无核海水珍珠科技应用于南珠产业生产中前景深远.

摘要： 目的 克隆合浦珠母贝(Pinctada fucata)水溶性基质蛋白Nacrein的基因,构建真核表达载体,并对Nacrein蛋白进行生物信息学分析.方法 根据GenBank公布的Pinctada fucata nacrein基因CDS序列(D83523.1),设计合成特异引物,以合浦珠母贝肉cDNA为模板,克隆获得nacrein基因,构建到真核表达载体pPICZαA上,PCR筛选阳性克隆子,并对其进行测序鉴定和生物信息学分析.结果 合浦珠母贝nacrein基因全长1344 bp,编码447个氨基酸,分子量约为50.11 kD,为一稳定的亲水性蛋白质,无跨膜结构域,为分泌性胞外蛋白质.具有2个碳酸酐酶结构域和1个Gly-Xaa-Asn重复结构域,存在多个蛋白酶酶切位点,其降解片段可能具有抑菌活性,且含有多个磷酸化位点,Nacrein蛋白糖基化程度低.Nacrein蛋白二级结构主要为无规卷曲,其次为α-螺旋和延伸链及β-折叠,其三维结构与所预测的Nacrein蛋白二级结构一致.结论 成功克隆获得合浦珠母贝nacrein基因及构建真核表达载体,并进行了生物信息学分析,为后续深入开发Nacrein蛋白生物功能提供了一定的理论和实验数据.

摘要： 【目的】比较不同地理群体合浦珠母贝(Pinctada fucata)双列杂交子代数量性状及确定形态性状对其体质量和软体质量的真实影响效应,为合浦珠母贝的选择育种提供参考依据。【方法】以海南三亚(SY)和广西北海(BH)2个地理野生合浦珠母贝群体为亲本,经双列杂交获得4个F1代群体(SY♂×SY♀、SY♂×BH♀、BH♂×SY♀和BH♂×BH♀),各随机挑选100只养殖至14月龄的个体进行数量性状(壳长、壳高、壳宽、铰合线长、体质量和软体质量)测量,并采用SPSS 18.0进行K-S检验、单因素方差分析、表型性状相关分析、通径分析和决定系数计算。【结果】4个F1代群体的体质量和软体质量变异系数明显大于形态性状的变异系数,其中又以软体质量的变异系数最大。SY♂×SY♀群体壳长与体质量和软体质量间的相关性最大,对应的相关系数分别为0.675和0.529;而其他3个F1代群体的壳宽与体质量和软体质量的相关性最大。剔除对体质量和软体质量不显著的形态性状,分别建立针对各F1代群体体质量和软体质量的回归方程,总决定系数(R2)均小于0.850。通径分析结果表明,对SY♂×SY♀群体体质量和软体质量直接影响最大的形态性状分别是壳高和壳长,对其他3个F1代群体体质量和软体质量直接影响最大的形态性状均是壳宽;SY♂×SY♀群体壳高对体质量的决定系数最大,壳长对软体质量的决定系数最大,其他3个F1代群体形态性状对体质量和软体质量决定系数最大的也均是壳宽。【结论】不同地理群体合浦珠母贝双列杂交子代数量性状中软体质量最具选择潜力。在只考虑形态性状选育时,SY♂×SY♀群体以体质量为选育目标时应选择壳高,以软体质量为选育目标时则应选择壳长,同时加强对壳高的选择;其他3个F1代群体在以体质量或软体质量为选育目标时均应选择壳宽。

摘要： 合浦珠母贝(Pinctada fucata)是中国培育海水珍珠的主要贝类之一,但随着珍珠养殖业的持续发展,养殖环境逐步恶化,近亲繁殖造成种质退化,母贝生长缓慢,个体小,死亡率高.基于合浦珠母贝壳色的多态性,开展了以壳色作为遗传标记,构建壳色纯系,评估育种材料的生产性能,进行生长和育珠性状的遗传改良成为目前育种工作研究热点.为全面评估合浦珠母贝白、黑、红和金壳色选育系F6代的育种性能,该研究对18个月龄合浦珠母贝4种壳色选育系个体的形态、质量、闭壳肌拉力和抗才女虫寄生病等12个性状指标进行了方差分析和多重比较,并计算了各性状间的相关系数.

摘要： 为探究骨形态发生蛋白(Bone morphogenetic proteins,BMPs)在合浦珠母贝幼体发育及贝壳形成中的潜在作用,本实验通过RACE技术克隆得到一个合浦珠母贝BMP3基因,命名为Pf-BMP3.Pf-BMP3基因cDNA全长2710bp,包含开放阅读框(Open reading frame,ORF)1470bp,5'非编码区(UTR)350bp,3'非编码区890bp.开放阅读框编码489个氨基酸.本实验可为BMP基因及贝壳形成机理的基础研究提供参考。

摘要： 流沙湾(20022'～20031'N,109055'～11001'E)海域面积69km2,位于雷州半岛西岸,是我国合浦珠母贝(Pinctada martensii)的主要原产地,海水珍珠年产量占全国80％以上.然而,自2006年以来,网箱养鱼和墨西哥湾扇贝(Argopecten irradians concentricus)筏式养殖在流沙湾快速发展,海水珍珠产量在养殖规模基本不变的情况下却急剧下降.本文采用生态系统动力学建模的方法以养殖容量作为关键指标研究了流沙湾合浦珠母贝产量变化的原因和机理.

摘要： 合浦珠母贝(Pinctada fucata)是我国重要的海水养殖贝类和生产海水珍珠的主要种类,目前养殖生产中,已出现生长缓慢,死亡率高,疾病频发等现象,其中多毛类凿贝才女虫是造成高死亡率的主要原因之一,淡水浸泡法、饱和盐水浸泡法、涂料涂覆法和水泥涂覆法等防治方法不但效果不显著,且在生产上大规模操作极其不便,筛选和培育具有较强抗病能力的合浦珠母贝新品系是重要的解决途径之一.本研究利用合浦珠母贝家系个体18月龄才女虫感染情况数据,通过对抗才女虫寄生病性状采用不同的性状定义方式(二元性状和分类性状)和不同的统计模型(二元线性模型、二元阈值Logit模型和有序阈值Logit模型)进行遗传分析,结果显示,各模型估计的抗才女虫寄生病性状的遗传力范围为0.3322±0.0943～0.4908±0.1235,均为高等遗传力.

摘要： 合浦珠母贝肉酶解液经膜分离后，采用葡聚糖凝胶G一25进行分离纯化，对分离组分的总抗氧化性、DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力和在化妆品中的应用效果进行测定，结果表明：经分离得到10个有效组分F1-F10,其中F4组分的总抗氧化性最强，DPPH自由基清除能力44.1±0.3％，羟自由基清除率76.0±1.5％，将合浦珠母贝抗氧化肽(F4组分)添加到营养霜中，当添加量为1.0％时，抗氧化活性A700nm为1.599±0.004,能有效提高营养霜的抗氧化性，且营养霜的性状没有发生改变。该研究为合浦珠母贝肉抗氧化肽的结构和在化妆品中的应用研究奠定基础。

摘要： 合浦珠母贝(Pinctada fucata ，又称马氏珠母贝P.Martensi)是我国一种重要的育珠贝，文明遐迩的“南珠”就是该贝所产。本文选用广西北海、广东徐闻和海南三亚的亲贝，采用双列杂交方式构建基础家系群，为培育优良合浦珠母贝育珠新品种奠定基础。

摘要： 运用电脉冲转基因仪对合浦珠母贝卵子进行电脉冲处理以优化电穿孔法转基因的电击参数.实验中调制百分比:100％;脉冲间隔:1.0s;电极距离:2mm;脉冲个数:5个,参数保持不变.用不同的电脉冲参数组合(脉冲电压100～400V、脉冲持续时间0.5～3.0ms、脉冲频率10～50kHz,共28个组合)对卵子电击,然后加入精子进行授精,统计各组受精率和孵化率,以受精率和孵化率这到50％以上为衡量指标.结果表明,合浦珠母贝卵子对低脉冲频率和高电压非常敏感,当频率低于20kHz或脉冲电压高于400V时对卵子损伤较大.脉冲持续时间对其影响不大,适应范围较宽.优化的转基因电击脉冲参数组合为:脉冲电压1.0kV/cm,脉冲持续时间2.0ms,脉冲频率50kHz,或者脉冲电压1.5kV/cm,脉冲持续时间1.5ms,脉冲频率50kHz。

摘要： 目的:克隆合浦珠母贝GIP结合蛋白亚基，并对其序列及表达分布进行研究。 方法:利用RNAzol从合浦珠母贝外套膜组织中提取总RNA，OligodT作引物进行反转录合成cDNA，并根据不同物种间氨基酸保守区设计简并引物，采用PCR的方法，从cDNA中扩增出目的基因约500bp，将所得基因片段与T载体连接，转化到JM109宿主菌中，挑选阳性克隆，通过酶切分析和核苷酸序列分析鉴定阳性克隆。分别提取合浦珠母贝外套膜、闭壳肌、生殖腺、腮腺和内脏断组织中的总RNA，并转印至尼龙膜上，利用α-P-dCTP随机引物标记基因探针，进行Northern Blot；同时利用地高辛随机引物标记基因探针，进行组织切片的原位杂交。 结果:克隆出的α亚基片段在GetBank中进行同源搜索，其氨基酸序列与章鱼、蜗牛的a亚基同源性为82％。Northern Blot．结果表明，α亚基在各种组织中的表达分布，由强到弱依次为腮腺、外套膜、生殖腺、闭壳肌和内脏团。 结论:本研究首次报道在合浦珠母贝GIP结合蛋白α亚基基因片段，为进一步研究合浦珠母贝G蛋白介导的信号转导途径及其对生物矿化的调节作用打下了基础。

摘要： 以合浦珠母贝(Pinctada Fucata)为实验材料,研究在珍珠囊形成过程中,其外套膜上碱性磷酸酶(ALP)相对比活力的变化,发现开始几天,ALP的相对经活力下降,但在两周后,相对比活力持续升高.PVP、ATP和促珠泌素的梯度实验表明,最适的浓度分别为1﹪、0.01﹪和1﹪.从混合药物的实验结果发现,本实验所采用的试剂对ALP均有活化作用,但经益贝宝预处理过的贝对药物的敏感性降低.

摘要： 本发明公开了一种合浦珠母贝底播养殖方法，包括以下步骤：S1：设计合浦珠母贝底播养殖装置；S2：将合浦珠母贝苗种在海区以网袋吊养的方式标粗；S3：将标粗后的合浦珠母贝苗种均匀置于底播板上，并在设有海水的水泥池中暂养，待合浦珠母贝长出足丝；S4：选取浅海滩涂，将固定柱固定在浅海滩涂中，将连接绳设置在固定柱上，将底播板从水泥池中取出，置于浅海滩涂中，并依次排列且连接在连接绳上，然后按日常管理对合浦珠母贝进行养殖即可。该方法使合浦珠母贝个体分布更均匀，个体间空间及饵料竞争压力减小，从而更有利于提高合浦珠母贝生长速率、养殖成活率、减小个体间生长差异，且养殖装置和养殖方法操作简单，可减少养殖成本和劳动量。

摘要： 本发明公开了一种利用菌种发酵制备合浦珠母贝肉调味基料的加工方法，包括以下步骤：(1)原料预处理：选取合浦珠母贝肉加入水进行匀浆处理，得合浦珠母贝肉匀浆液；(2)酶解液制备：在匀浆液中加入复合蛋白酶进行酶解，酶解结束后将酶解液冷却，离心，取上清液备用；(3)酶解液发酵：将上清液接种发酵菌种采用两段式发酵方式进行发酵，先添加米曲霉进行有氧发酵，再添加鲁氏酵母菌进行无氧发酵，得合浦珠母贝肉发酵液；(4)喷雾干燥：在发酵液中添加助干剂，进行喷雾干燥，获得合浦珠母贝肉调味基料。该方法采用米曲霉和鲁氏酵母菌两种菌种协同发酵，加工成的合浦珠母贝肉调味基料为淡黄色粉末、营养丰富、风味良好，食用与携带方便。

摘要： 本发明公开了一种用于合浦珠母贝微卫星家系鉴定的微卫星标记引物，所述微卫星标记引物共有9个引物对，分别为PF‑3、PF‑4、PF‑11、PF‑13、PF‑16、PF‑27、PF‑30、PF‑44和PF‑48，还公开了一种合浦珠母贝微卫星家系的鉴定方法及上述微卫星标记引物在合浦珠母贝家系鉴定中的应用。采用本发明中的微卫星标记引物，首次在合浦珠母贝上利用荧光标记的多态微卫星标记建立了亲子鉴定平台，其鉴定准确率达到了90.24％；本发明方法能快速、有效地鉴别合浦珠母贝不同家系及来源，为合浦珠母贝的选育，繁殖配组和增殖放流评估提供了依据。

摘要： 本发明涉及海产品贝类育种技术领域，特别涉及合浦珠母贝育珠受体贝培育方法，具体包括如下步骤：(1)基础群体的建立、(2)配子的获得、(3)构建壳宽型受体贝基础群体、(4)构建选育群体F2‑F4和(5)合浦珠母贝育珠受体贝新品种培育等步骤；该培育方法不需要通过转基因等复杂技术导入外源基因，在对生物和环境安全没有任何影响的前提下，通过专门化的选育，提供了一种珍珠贝型大、壳厚、抗逆性好的育珠受体贝，弥补现有技术不足。

摘要： 本发明涉及海产品贝类育种技术领域，特别涉及合浦珠母贝小片贝新品种培育方法，具体包括如下步骤：(1)基础群体的建立、(2)亲贝的选择、(3)配子的获得、(4)构建第一代选育群体F1和(5)构建选育F2代至F4代及以上等步骤；该方法通过专门化的选育，得到一种珍珠质分泌能力强，珍珠层光泽度高的合浦珠母贝小片贝新品种，弥补现有技术不足。

摘要： 本发明公开了一种合浦珠母贝半乳糖结合凝集素PFL‑96及其编码基因和应用，属于生物医药技术领域。该凝集素蛋白PFL‑96的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示，在体外能够抑制金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、白丝念珠菌、溶藻弧菌的生长并具有杀菌活性，此外还能够显著抑制人鼻咽癌细胞C666‑1、人肝癌细胞HepG2、人宫颈癌细胞Hela增殖，因此本发明的凝集素蛋白PFL‑96可用于制备抗菌、抗癌药物。

摘要： 本发明公开了一种合浦珠母贝近红外活体无损检测方法，包括以下步骤：（1）建立合浦珠母贝品质数据库；所述合浦珠母贝品质数据库中含有营养指标以及与营养指标数值相对应的光谱信息；（2）采用近红外光谱仪扫描合浦珠母贝活体样本，获取样本的光谱信息；（3）将步骤（2）获取的样本的光谱信息输入合浦珠母贝品质数据库中，获得样本的营养指标数值，即完成合浦珠母贝的化学成分含量测定。本发明通过建立合浦珠母贝数据库，然后通过简单的光谱扫描就可以达到营养成分定量分析和品质分级的目的，对营养指标的粗蛋白、氨基酸、脂肪酸、类胡萝卜素含量检测准确性极高，填补了合浦珠母贝分级的量化指标空白，分级准确度95%以上。

摘要： 本发明公开了一种富含类胡萝卜素的合浦珠母贝新品种培育方法，其是在测量闭壳肌类胡萝卜素含量的基础上，利用家系基因聚合育种技术培育富含类胡萝卜素的合浦珠母贝新品种，包括以下步骤：a．种质资源收集；b．基础家系构建；c．亲本的选择；d．核心家系‑‑第二代家系的构建；e．核心家系‑‑第三代家系的构建；f．按步骤e的方法继续构建核心家系至5代以上，最后获得富含类胡萝卜素的合浦珠母贝新品种。本发明培育的合浦珠母贝新品种具有抗逆性强和生长速度快的优点，有效解决了个体小型化和死亡率高等问题。

摘要： 本发明属于细胞培养技术领域，公开了一种合浦珠母贝外套膜细胞体外培养液、制备方法及使用方法，其中细胞体外培养液包括以下组分：基础细胞培养基、茶多酚、胎牛血清、珍珠贝体液、卡那霉素、平衡盐溶液、葡萄糖。本发明通过在基础细胞培养基中添加中草药提取物茶多酚、珍珠贝体液及其他组分，以合理的配比来实现抑菌、抗氧化和抗细胞衰老的目的，具有无毒副作用，不易对环境造成污染，且无残留；不仅提高了外套膜细胞培养的成活率，降低操作成本，降低了操作难度，而且突破了外套膜细胞体外培养的瓶颈。

摘要： 本实用新型公开了一种合浦珠母贝底播养殖装置，包括至少一组合浦珠母贝底播养殖单元，所述合浦珠母贝底播养殖单元包括底播板、连接绳和固定柱，所述底播板为一个以上且依次排列并连接在所述连接绳上，所述连接绳设于所述固定柱上。该装置使合浦珠母贝个体分布更均匀，个体间空间及饵料竞争压力减小，从而更有利于提高合浦珠母贝生长速率、养殖成活率、减小个体间生长差异。