合成酶

摘要： Candy等早在1962年就发表了完整的昆虫几丁质合成通路,并在沙漠蝗虫中证实了该通路共有8种酶参与其中。为了进一步深入研究昆虫几丁质的合成通路,文章梳理了该通路中8种酶的相关研究现状,通过对已有相关研究内容的综合分析,以期为昆虫几丁质合成通路的后续科学研究提供新的思路。

摘要： 为获取马齿苋(Portulaca oleracea)类黄酮相关成分及其合成酶基因信息,该实验以马齿苋根、茎和叶为材料,进行代谢组学和转录组学联合分析,并从中选取6个差异表达基因进行qRT-PCR验证分析.结果显示:(1)代谢组分析发现,在马齿苋根、茎和叶中共获得32个类黄酮相关化合物,包括3个异黄酮、8个黄酮醇、11个黄酮、3个黄烷酮、5个黄烷醇和2个花青素,其中20种类黄酮化合物在马齿苋根、茎和叶部含量接近,而另外12种在不同部位含量差异明显.(2)转录组分析发现,在马齿苋根、茎和叶中共获得93条类黄酮主要合成酶基因簇信息,包括20条CHS、3条CHI、7条F3H、2条ANS、11条IFS、21条F3'H、2条F3'5'H、2条DFR、2条ANR、1条LAR和22条UF3GT.(3)qRT-PCR结果显示,所获取的6个参与类黄酮合成的酶基因,在马齿苋根、茎和叶中上下调表达趋势与转录组测序结果完全一致,但不同合成酶基因差异表达倍数不完全相同.研究表明,在马齿苋根、茎和叶中存在大量的类黄酮化合物及其合成酶基因,但不同类黄酮成分在不同部位含量不同,其合成代谢相关酶在不同部位的表达量也存在差异.

摘要： 为了解干旱对不同类型小麦籽粒灌浆期糖类、淀粉、蛋白质和微量元素的动态规律,明确干旱对营养物质在高产小麦、优质小麦和节水小麦灌浆过程中的差异,以黄淮北片麦区的小麦品种冀麦325、冀麦418、冀麦323为试验材料.选取同一天抽穗、开花的植株进行标记,于花后7～31 d每6 d取各品种籽粒样本,研究了灌浆期间干旱对籽粒中可溶性总糖、蔗糖、葡萄糖、果糖、蛋白质、Fe、Zn、Mn、Cu含量、直链和支链淀粉积累量、淀粉积累速率及淀粉合成关键酶活性的影响.结果表明,在灌浆过程中,干旱胁迫显著降低了小麦籽粒蔗糖和葡萄糖的含量,对果糖含量的影响相对较小,高产品种冀麦325的蔗糖和果糖受干旱影响较小.干旱胁迫降低了小麦籽粒支链淀粉和总淀粉含量,对直链淀粉含量的影响相对较小.干旱胁迫对高产品种和优质品种淀粉含量的影响明显大于耐旱品种冀麦418.干旱胁迫在灌浆初期和中期提高了淀粉合成酶的活性,中后期活性较灌溉对照迅速下降.随籽粒灌浆的进行,4种微量矿质元素的含量呈下降趋势,在小麦籽粒中的表现为Mg>Fe>Zn>Mn.冀麦325籽粒的Fe、Zn和Mg积累量较高.研究干旱条件下不同类型小麦籽粒灌浆过程中营养物质积累差异,为优化栽培措施,实现专用小麦优质、高产、节水提供理论数据和参考依据.

摘要： 以采自甘肃紫轩葡萄酒业葡萄园的酿酒葡萄赤霞珠为试验材料,对果实中葡萄糖、果糖、蔗糖含量及糖代谢相关酶活性进行测定.结果表明,随着赤霞珠葡萄果实的生长,蔗糖、葡萄糖、果糖含量显著上升.不同生长发育阶段,赤霞珠果实中酸性转化酶、中性转化酶、蔗糖合成酶、蔗糖磷酸合成酶活力不同.相关性分析表明,整个发育期的葡萄糖、果糖、蔗糖与酸性转化酶活性存在显著正相关,R值分别为0.789、0.726、0.719;葡萄糖、果糖、蔗糖与中性转化酶活性、蔗糖磷酸合成酶、蔗糖合成酶活性均表现为极显著正相关.

摘要： 神经酰胺是调控细胞分化、增殖、凋亡,调节机体衰老与肿瘤免疫等重大生命活动的重要活性脂质,同时也是糖鞘脂等一系列重要生理鞘脂合成的通用前体.作为鞘脂代谢的中心,神经酰胺在机体内的合成与降解受到严格调控,其合成包括从头合成途径、鞘磷脂酶途径及补救途径.尽管从头合成途径对于神经酰胺在机体内的合成量贡献仅为5％ ～10％,但近年来对该条途径中关键代谢酶的研究却表明了它们与诸多疾病密切相关,这也说明了该途径在机体生命活动中的复杂性与重要性.旨在系统性地综述神经酰胺从头合成途径关键代谢酶的研究进展,为深入了解该途径以及关键代谢酶的功能提供理论参考,同时也为今后针对该途径的个性化药物开发奠定基础.

摘要： 细菌纤维素(BC)因其独特性能被广泛应用于医药、食品等领域,目前其高产量菌株筛选、合成成本降低及合成途径改良等成为研究热点.本文依据国内外文献并结合团队研究成果对BC合成与鉴定的相关研究进行综述.首先对BC合成菌筛选及碳源利用的研究进行了分析,总结了降低BC合成成本的研究思路.其次对鉴定菌株合成产物的方法进行了归纳,总结了不同方法的特点.然后结合本团队筛选出的BC生产菌XJL-06-4 BC合成酶基因分析结果,综述了BC合成途径、合成酶存在形式以及基因水平调控作用,为BC在分子水平上通过改变合成途径提高产量提供新思路.最后,总结BC微生物发酵生产存在的问题,多角度提出解决方案.

摘要： 提供了一种生产苯甲醛的方法。苯甲醛由L-苯丙氨酸或碳源通过使用具有氨基酸脱氨酶、4-羟基扁桃酸合成酶、扁桃酸脱氢酶和苯甲酸酯脱羧酶的微生物产生。

摘要： 5-羟色胺(5-HT)是人体重要的神经递质和胃肠激素,中枢神经系统和外周循环中的5-HT分属于完全独立的系统,循环5-HT主要来源于肠道.循环5-HT对肝脏胆酸合成酶及外排转运体具有调控作用,并可通过调控回肠及肾脏胆酸转运体影响胆酸的肠-肝循环及肾排泄,说明外周5-HT对胆汁酸稳态具有调控作用.研究并阐明5-HT对胆酸稳态的影响及机制,可为胆汁酸紊乱性疾病的发病机制研究提供线索,并为其治疗靶点的发现提供依据.

摘要： 本文从来自福建古田地区的土壤中分离到一株高产的ε-聚赖氨酸生产菌株。对NK660菌株进行形态、生理生化和16SrDNA分析，结果表明NK660属于Strepyomyces albulus。利用M3G培养基以葡萄糖为碳源对其进行摇瓶培养，72h时检测到ε-聚赖氨酸产量为0.56g/L。又利用正交分析对NK660的摇瓶培养条件下的M3G精养基进行了优化，利用M3G培养基发酵72h后得到摇瓶发酵的产量为1.7g/L。接下来，利用30L自动发酵罐进行了控制pH的补料分批发酵的研究，并克隆到了NK660的ε-聚赖氨酸合成酶的基因，尝试了在大肠杆菌和变铅青链霉菌中进行ε-聚赖氨酸合成酶的异源表达。

摘要： 本文将对CoQ10的关键合成酶之一dps(decaprenyldiphosphate synthase)相关基因的研究意义、国内外研究现状和发展前景进行简要综述。

摘要： Salsolinol合成酶是一种催化多巴胺(DA)和乙醛生成Salsolinol的酶,它是脑内合成Salsolinol及其衍生物的关键酶,也是儿茶酚异喹啉类物质导致细胞毒性显著增加的有效激活因子,它分布于各个脑区,但主要分布于黑质-纹状体区域,它在整个代谢过程中起决定性作用,因此它可能是帕金森病(PD)的一种关键致病因子,其深入研究将有助于为PD致病机理和治疗的深入研究提供有力依据。该酶是一种新型的催化Pictet-Spengler反应的酶,目前仅局限于其代谢物毒性的研究,对酶本身知之甚少。鉴于此,本文从鼠脑中分离得到Salsolinol合成酶的粗提物,并采用HPLC-ECD方法检测其各个脑区的酶活,为该酶的进一步分离纯化及性能表征提供基础。

摘要： 为研究强筋小麦籽粒淀粉形成的机制,以强筋小麦秦麦Ⅱ为材料,对小麦灌浆期籽粒淀粉合成酶基因表达、相应酶活性及淀粉积累变化进行了研究.结果表明,腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶基因(AGPase)、束缚态淀粉合成酶基因(GBSSI)、可溶性淀粉合成酶基因(SSS)、淀粉分支酶基因(SBE)表达均呈单峰曲线变化,AGPase和SSS基因在花后12天左右相对表达量最大,GBSSI和SBE基因在花后15天左右相对表达量最大.四种淀粉合成酶活性变化趋势一致,花后25天或30天之前呈上升趋势,之后急剧下降.淀粉及其组分积累量随着灌浆的进行呈不断上升趋势.直、支链淀粉及总淀粉积累速率峰值在花后25天或30天.相关分析表明,AGPase、SSS、SBE基因在花后15天相对表达量与相应酶活性间呈极显著正相关,而GBSS基因的相对表达量与GBSS活性间未检测到相关.暗示AGPase、SSS、SBE基因在籽粒淀粉合成过程中属于转录水平调控,而GBSSI基因属于转录后调控.四种淀粉合成酶活性与直、支链淀粉及总淀粉积累速率均呈极显著正相关,说明这几种酶对淀粉合成共同起作用.

摘要： 本实验通过基因工程手段增强啤酒酵母菌株的GsH合成能力。通过电转法转入啤酒酵母采用高浓度抗生素平板筛选，分别得到成功导入含YEplac181-ADH1-Kanr-GSHI质粒、含YEplac181-ADH1-Hygr-GSHII质粒和同时含有YEplac181-ADH1-Kanr-GSHI和YEplac181-ADH1-Hygr-GSHII质粒的3株转化子。通过SDS-PAGE和四氧嘧啶法分析比较了各个转化子和亲本菌株中两种酶的表达量和GSH的生成量间的差异。结果显示，转化子的GSHI或GSHI工酶蛋白的表达量明显高于其亲本菌株的表达量。

摘要： 茶氨酸系茶树（Camellia sinensis）特征性成分。目前发现能催化茶氨酸生物合成的酶类有7种，它们分别是茶氨酸合成酶、谷氨酰胺合成酶、γ-谷氨酰甲胺合成酶、谷氨酸合成酶、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶、谷氨酰胺酶和γ-谷氨酰转肽酶。茶氨酸生物合成反应有两种代表性类型：⑴谷氨酸和乙胺为底物的连接合成反应（需ATP供能）；⑵谷氨酰胺和乙胺为底物的酰基转移反应。对茶氨酸酶促合成途径进行了系统综述，以此为茶氨酸微生物合成技术的开发应用提供参考依据。

摘要： 本研究室分离到一株能够以非相关性碳源(如葡萄糖,果糖等)发酵合成中长链聚羟基脂肪酸酯(Medium-chain-lengthP0lyhydroxyalkanoate,PHA)的细菌。经BIOLOG微生物分类鉴定系统和16S rRNA序列同源性分析鉴定,最终命名该菌为门多萨假单胞菌NK-01 (Pseudomonas mendocina NK-01)。该菌株在氮源限制的情况下,利用葡萄糖合成的PHA经核磁共振(NMR)、傅立叶红外(FT-IR)、气-质联用(GAS-MASS)等分析手段,确立了其结构由3-羟基己酸,3-羟基辛酸,3-羟基癸酸,△-3-羟基十六烷酸,3-羟基十八烷酸五种单体构成。PHA常温下具有很好的粘弹性,Mw为196,676,Tm为54.10°C。PHA占细胞干重50％。由phaCl基因编码的PHA合酶是PHA合成的关键酶。我们获得了PHA合成酶基因phaCl,利用大肠杆菌表达载体pBluescript SK-构建重组载体pBSphaCl,重组的E.coli JM109在PHA生产培养基中发酵并加入丙烯酸抑制大肠杆菌β氧化通路。以所构建的工程菌株进行了发酵合成。产物经鉴定确立为3-羟基辛酸(3HO)和3-羟基己酸(3HHx)共聚酯。

摘要： 目的:何首乌是具有良好的降脂活性的重要云药,二苯乙烯苷(TSG)是其主要活性成分,阐明TSG调节脂代谢的机理,为何首乌进一步更深层的研究奠定基础.rn 方法:采用含医用脂肪乳的培养液诱导肝L-02细胞48小时,建立肝细胞脂肪变性模型,给予TSG不同浓度刺激液进行培养,采用洛伐他汀、非诺贝特为阳性对照.24小时后测定肝细胞内甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)及其体内合成、分解途径中关键酶及蛋白含量.rn 结果:TSG可将脂肪化肝L-02细胞中TG含量降低约40％,TC含量降低约55％;可使DGAT(甘油三酯合成关键酶)、HMG-COA还原酶(胆固醇合成关键酶)含量降至正常细胞水平;可升高CYP7A(胆固醇分解关键酶)含量约50％,能将HTGL(甘油三酯分解关键酶)含量提升近8倍;同时可明显降低游离脂肪酸在体内的结合蛋白(L-FABP)、转运蛋白(FATP-4)的表达量,进而限制体内甘油三酯合成的原料供应.rn 结论:何首乌主要活性成分二苯乙烯苷对甘油三酯、胆固醇的合成、分解及转运的多个关键酶或关键蛋白均有良好的调控作用,具有较好的降脂活性.

摘要： 目的:何首乌是具有良好的降脂活性的重要云药,二苯乙烯苷(TSG)是其主要活性成分,阐明TSG调节脂代谢的机理,为何首乌进一步更深层的研究奠定基础.rn 方法:采用含医用脂肪乳的培养液诱导肝L-02细胞48小时,建立肝细胞脂肪变性模型,给予TSG不同浓度刺激液进行培养,采用洛伐他汀、非诺贝特为阳性对照.24小时后测定肝细胞内甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)及其体内合成、分解途径中关键酶及蛋白含量.rn 结果:TSG可将脂肪化肝L-02细胞中TG含量降低约40％,TC含量降低约55％;可使DGAT(甘油三酯合成关键酶)、HMG-COA还原酶(胆固醇合成关键酶)含量降至正常细胞水平;可升高CYP7A(胆固醇分解关键酶)含量约50％,能将HTGL(甘油三酯分解关键酶)含量提升近8倍;同时可明显降低游离脂肪酸在体内的结合蛋白(L-FABP)、转运蛋白(FATP-4)的表达量,进而限制体内甘油三酯合成的原料供应.rn 结论:何首乌主要活性成分二苯乙烯苷对甘油三酯、胆固醇的合成、分解及转运的多个关键酶或关键蛋白均有良好的调控作用,具有较好的降脂活性.

摘要： 本发明涉及一种从茄子中克隆得到的黄酮醇合成酶基因SmFLS及其在调节茄子果皮的黄酮醇含量中的应用，以及黄酮醇合成酶。根据茄子基因组数据设计全长引物克隆得到的黄酮醇合成酶基因SmFLS编码如SEQ ID NO.2所示的黄酮醇合成酶。该黄酮醇合成酶基因SmFLS的序列如SEQ ID NO:1所示。采用农杆菌介导法转化茄子，结果证实转基因茄子植株与野生型植株相比，黄酮醇含量显著提高，导致茄子果皮颜色变浅。本发明有助于进一步了解茄子果皮着色机理，从而可利用生物技术手段来调控茄子果皮着色、选育着色均匀的茄子新品种。

摘要： 本发明涉及编码脱乙酸基头孢菌素C合成酶(DAOCS)和脱乙酰头孢菌素C合成酶(DACS)活性的DNA化合物和表达载体。该化合物可用来构建用于多种宿主细胞包括大肠杆菌、青霉和头孢霉的重组DNA表达载体。本发明也涉及顶头孢霉DACS/DAOCS基因的调控成分。还提供了选择青霉转化体的方法，包括那些因DACS/DAOCS编码DNA的存在而能够合成头孢菌素抗生素的转化体。本转化系统利用乙酰胺酶基因来选择转化体。

摘要： 本发明的目的是抑制显示对将1－丙烯次磺酸转变为催泪成分作用的催泪成分合成酶基因的表达，提供了以该催泪成分合成酶基因的序列为基础设计的DNA和RNA、将催泪成分合成酶基因的表达抑制用DNA导入植物所必需的载体，以及使用这些抑制催泪成分基因表达的反复和抑制了催泪成分生成基因表达的植物。

摘要： 本发明涉及用于表达非核糖体肽合成酶（NRPS）、聚酮合成酶（PKS）或NRPS/PKS杂合合成酶的系统。NRPS、PKS或它们的杂合体是大型多结构域蛋白质或多结构域复合物，其用于生产肽的表达通常会造成困难。因此，本发明涉及用于表达酶片段的系统，所述酶片段可以通过特异性引入的蛋白质‑蛋白质相互作用在翻译后组装而形成功能性多酶复合物。本发明公开了这种组件的蛋白质片段以及它们的编码核酸。还公开了本发明蛋白质片段的载体系统及其用于制备功能性NRPS/PKS酶复合物的用途。

摘要： 本发明属于生物技术领域，利用表达聚谷氨酸合成酶的重组菌静息细胞和/或聚谷氨酸合成酶制备γ‑聚谷氨酸的方法。本发明的方法在优化反应体系后，重组菌(或酶)能在3小时内将70％以上的谷氨酸转化生成相应的γ‑聚谷氨酸，且γ‑聚谷氨酸的分子在10‑25kDa，属于低分子量的γ‑聚谷氨酸，可用做化妆品中的保湿剂，高效保湿，促进吸收，增加皮肤弹性；可作为医药领域中的药物载体，降低药物引起的副作用等。与现有技术相比，本发明合成反应条件温和反应体系简单、反应时间短、转化率高、无污染，大大加速了目标产物γ‑聚谷氨酸的合成效率，而且产物分子量较均一，属于低分子量范围的γ‑聚谷氨酸。

摘要： 本发明提供一种测定植物中蔗糖合成酶和蔗糖磷酸合成酶含量的方法，包括以下步骤：(1)蔗糖标准曲线的制作；(2)酶液的制备；(3)蔗糖合成酶或蔗糖磷酸合成酶活性的测定。本发明的方法能够准确的测定植物中蔗糖合成酶和蔗糖磷酸合成酶含量。

摘要： 本发明涉及谷氨酰胺合成酶反应方法、氨定量方法、谷氨酰胺合成酶反应用试剂和氨定量用试剂盒。[解决手段]一种谷氨酰胺合成酶反应用试剂，其包含螯合剂和谷氨酰胺合成酶；以及一种氨定量用试剂，其包含螯合剂和ATP、谷氨酸、谷氨酰胺合成酶、葡萄糖、氧化型的NAD系化合物、ADP依赖性己糖激酶和葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶。

摘要： 本发明涉及一种从茄子中克隆得到的黄酮醇合成酶基因SmFLS及其在调节茄子果皮的黄酮醇含量中的应用，以及黄酮醇合成酶。根据茄子基因组数据设计全长引物克隆得到的黄酮醇合成酶基因SmFLS编码如SEQ ID NO.2所示的黄酮醇合成酶。该黄酮醇合成酶基因SmFLS的序列如SEQ ID NO:1所示。采用农杆菌介导法转化茄子，结果证实转基因茄子植株与野生型植株相比，黄酮醇含量显著提高，导致茄子果皮颜色变浅。本发明有助于进一步了解茄子果皮着色机理，从而可利用生物技术手段来调控茄子果皮着色、选育着色均匀的茄子新品种。

摘要： 本发明公开一种孕激素在制备糖原合成酶激酶‑3β(GSK‑3β)抑制剂药物中的应用及糖原合成酶激酶‑3β(GSK‑3β)抑制剂，属于医药领域。本发明的孕激素作为活性成分在制备糖原合成酶激酶‑3β(GSK‑3β)抑制剂药物中的应用，所述孕激素选自17α‑己酸羟孕酮(17‑HPC)、醋酸甲羟孕酮(MPA)、或天然黄体酮(P4)中的一种或几种。本发明提供的孕激素作为活性成分的糖原合成酶激酶‑3β(GSK‑3β)抑制剂组成简单，制备方法简化，易于推广普及。

摘要： 本发明涉及与粉碎或切断洋葱等植物时发生催泪成分的生成有关的表现出将1－丙烯次磺酸转变为催泪成分的作用的蛋白质或多肽、编码该蛋白质或多肽的DNA(催泪成分合成酶基因)、使用用于属于葱属植物的催泪成分合成酶基因分离的引物以及使用该引物分离该基因的方法、含有上述DNA的重组载体、包含含有上述DNA的重组载体的转化体、对用含有上述DNA的重组载体转化的宿主细胞进行培养制造具有催泪成分合成酶活性的蛋白质或多肽的方法、具有催泪成分合成酶活性的蛋白质或多肽、以及具有抑制具有催泪成分合成酶活性的蛋白质或多肽的mRNA翻译的功能的核酸分子。