受精

摘要： 精浆外泌体是由雄性性腺及副性腺上皮细胞分泌至雄性生殖道中,直径为30~100 nm的膜性小囊泡,其构成精子发育的主要环境,是精子成熟过程中不可或缺的一部分。精浆外泌体中富含蛋白质、脂质、核酸等物质,这些物质通过独特的转运机制被运送至精子表面以促进精子形态与功能的完善,精浆外泌体在提高精子活力、抑制精子提前获能、抗精子氧化等方面具有显著效果。本文主要阐述了精浆外泌体的分泌、转运机制及其在雄性生殖中发挥的多种生物学功能,为其进一步研究提供参考。

摘要： 目的探讨多囊卵巢综合征(PCOS)伴不孕患者单个卵泡卵泡液中脂溶性维生素水平与胚胎发育及新鲜胚胎周期临床结局的相关性。方法选取PCOS伴不孕且需进行体外受精-胚胎移植的97例患者作为研究对象。于月经周期第2天或第3天给予卵巢刺激方案治疗,皮下注射重组人绒毛膜促性腺激素36 h后,经阴道超声引导下取卵(成熟卵母细胞)并收集单个卵泡的卵泡液。采用高效液相色谱法检测单个卵泡卵泡液中维生素A、维生素E水平,采用酶联免疫吸附法检测单个卵泡卵泡液中维生素D、维生素K水平。评估培养第3天(D_(3))、第5天(D_(5))的胚胎质量并进行胚胎形态学等级评分。分析单个卵泡卵泡液中脂溶性维生素水平与卵母细胞受精、胚胎发育及新鲜胚胎周期临床结局的相关性。结果共收集到1036个成熟卵母细胞的卵泡液。单个卵泡卵泡液中维生素A水平为656.27(628.50,688.00)ng/mL,维生素D水平为21.39(17.22,22.91)ng/mL,维生素E水平为3129.55(3052.26,3193.00)ng/mL,维生素K水平为0.72(0.71,0.73)ng/mL。831个成熟卵母细胞成功受精,发育至D_(3)胚胎718个,发育至D_(5)胚胎397个。新鲜胚胎周期(单胚胎移植)中D_(3)移植胚胎82个,D_(5)移植胚胎15个,临床妊娠42例。单个卵泡卵泡液中维生素A、维生素E水平与其对应的卵母细胞成功受精均相关(均P0.05)。结论PCOS伴不孕患者单个卵泡卵泡液脂溶性维生素中,维生素A、维生素E水平升高是卵母细胞成功受精的保护因素,维生素D水平升高是胚胎发育及新鲜胚胎周期临床妊娠的保护因素,而单个卵泡卵泡液中脂溶性维生素水平均与胚胎形态学等级评分无关。

摘要： 目的:研究子宫内膜异位症不孕患者体外受精-胚胎移植(In vitro fertilization embryo transfer,IVF-ET)后受精、妊娠与卵泡输出率(Follicle output rate,FORT)的关系。方法:选取2019年3月至2022年1月本院收治的306例接受IVF-ET治疗的子宫内膜异位症不孕患者作为研究对象,依据FORT界值是否小于等于65分为对照组(n=96)和观察组(n=210)对比两组IVF-ET结局、受精、妊娠情况,分析IVF-ET后受精、妊娠与FORT的相关性。结果:两组人促性腺激素(Gonadotropin,Gn)用量、移植胚胎数无差异(P>0.05),观察组注射雌二醇(Estradiol,E_(2))水平、获卵数高于对照组(P0.05),观察组受精率、优质胚胎率、移植周期临床妊娠率均高于对照组(P<0.05)。据Pearson相关分析得知,FORT与Gn用量无相关性,而注射E_(2)水平、获卵数、受精率、移植周期临床妊娠率与FORT呈正相关(r=0.889、0.246、0.631、0.371,P<0.05)。结论:FORT值对预测卵巢反应性和IVF-ET具有重要价值,水平越高则提示子宫内膜异位症不孕患者IVF-ET结局相对越好。

摘要： 目的 筛选人卵丘颗粒细胞中影响卵母细胞多精受精的差异表达基因。方法 筛选3名因输卵管因素导致继发不孕的患者为研究对象,长方案促排卵后,在授精前10 min,对每个卵母细胞外围的卵丘颗粒细胞进行切割,分装无菌管保存。卵冠丘复合体(OCCC)进行微滴授精,受精后17~18 h,观察受精情况;并根据卵母细胞受精情况分为多精受精组和正常受精组,收集两组对应的颗粒细胞。提取颗粒细胞总mRNA,构建cDNA文库并进行测序,将得到的数据进行生物信息学分析,筛选出差异表达基因,并将差异表达基因进行基因本体论(GO)分析和京都基因和基因组数据库(KEGG)分析。结果 与正常受精组比较,多精受精组中显著上调的基因有106个,显著下调的基因有33个。上调的基因主要涉及P53信号通路、PI3K-AKT信号通路、肌动蛋白细胞骨架信号通路和HIPPO信号通路,其中基因BMP2、SESN3、CDK6、GRLF1(ARHGAP35)与多精受精有关。结论 与正常受精比较,多精受精时颗粒细胞存在差异表达的基因,对这些基因的进一步了解可能为后续开展异常受精的影响因素分析提供一定参考。

摘要： 龙须菜是中国重要的人工栽培海藻,主要用途是琼胶生产原料和鲍鱼饵料.目前龙须菜大规模栽培采用的是人工夹苗的方式,而其孢子采苗的生产方式也得到越来越多的关注.本文将人工培育的由四分孢子萌发长成的一对龙须菜雌、雄配子体进行受精,测试了雌雄配子体藻枝部位、温度、硝酸盐浓度等因素对果孢子体形成过程的影响,结果表明:龙须菜雌配子体藻枝的不同等级分枝表现出不同的生殖力,一级分枝最尖端新生细胞的成熟速度快于其它等级;温度对果孢子体形成有极显著影响(P<0.01),20°C为最适温度;硝酸盐浓度没有显著影响.

摘要： 外泌体(Exosomes,EXs)是一类膜状结构的纳米级细胞外囊泡,携带大量的生物活性调节分子进行细胞间信息转导.EXs携带的miRNA在配子发生、发育和受精过程中发挥重要的调控作用.本文主要对EXs中的miRNA在卵母细胞和精子成熟以及受精过程中的调控作用做一综述.

摘要： 哺乳动物的精子和卵母细胞由减数分裂产生,其遗传物质减半,功能高度特化.精卵结合后,染色体数恢复,获得发育的全能性,重启有丝分裂,开始个体的生长.受精时,精子引起卵母细胞内的钙离子(Ca2+)以一定的频率波动,称为钙振荡.Ca2+周期性的变化,驱动下游蛋白的活动,完成卵母细胞的激活.作者主要介绍了受精时钙振荡启动的机制,以及其持续时间、振幅、频率对哺乳动物卵母细胞正常受精的影响;同时,讨论了Ca2+在卵母细胞内外运输的通道和钙振荡发生和维持的机制;分析了钙振荡对卵母细胞的细胞周期恢复和母源mRNA翻译的调控作用和机制.目前,关于卵母细胞激活事件信号通路的研究已经取得了很大的进展,但每个单独事件所涉及的分子机制尚未完全确定.本综述探讨了哺乳动物受精时卵母细胞内钙信号研究的现状和未来研究的方向,为保障人类生殖健康和提高畜牧繁殖效率提供参考.

摘要： 外泌体(exosomes,EXs)是由细胞分泌的直径约为30～150 nm的小囊泡,介导细胞间的物质转运,在配子发育和成熟中发挥重要调控作用,也有研究显示精浆中的EXs对精子保存和受精具有重要调控作用,但目前关于精浆外泌体(seminal plasma EXs,spEXs)携带miRNAs在精子受精中作用尚未见报道.本研究探究优秀长白种公猪(Sus scrofa domestica)spEXs miRNAs表达及其对精子受精中基因表达的潜在调控作用.从优秀长白种公猪原精液中提取spEXs,通过电镜观察、粒径和标志性蛋白表达的分析等对spEXs鉴定;然后对所提取的spEXs进行miRNAs测序,分析高表达miRNAs和预测其靶基因,通过GO和KEGG通路富集分析归纳spEXs携带miRNAs在精子受精中的潜在作用机制.结果显示成功分离了特征性的spEXs,miRNAs测序结果共鉴定出617个miRNAs,新发现110个miRNAs.然后对表达丰度高的miRNAs进行功能分析,显示在精子获能、活力和能量代谢等方面具有潜在的调控作用.其中,高丰度表达的miR-10家族(ssc-miR-10a-5p和ssc-miR-10b)潜在调节磷酸二酯酶(phosphodiesterase,Pde)的表达,抑制精子体内第二信使环磷酸腺苷(cAMP)或环磷酸鸟苷(cGMP)的降解,促进精子获能和具备受精能力;精子运动抑制因子基因(sperm motility inhibitor,SPMI)可以抑制精子运动,降低精子活力,是ssc-miR-204的潜在靶基因;ssc-miR-28-5p潜在N-myc下游调节基因2(N-myc downstream regulated gene,Ndrg2),促进精子体内能量的产生和利用.本研究中的spEXs miRNAs将为精液保存和精子受精作用调控提供基础数据,对精子受精能力调控机制的研究具有重要参考价值.

摘要： 朱槿,又名中国蔷薇,它的一小撮花粉中包含成千上万颗花粉粒——植物的雄性生殖细胞。花粉粒的外面包裹着坚硬的外壳,即花粉外壁,上面有尖尖的凸起,这使花粉粒很容易附着在昆虫身上,并在抵达另-株植物前保持活性。成功抵达另一株植物后,花粉粒会使对方胚珠内的雌性生殖细胞受精,最终形成种子。花粉粒的直径通常在15~100微米之间,在这幅后期上色的扫描电子显微镜照片中,紫色小球就是朱槿花粉粒。

摘要： [目的]为建立海岛棉发育过程中花蕾长度与花药发育时期的关系.[方法]以海岛棉新海35为研究对象,采用改良的半薄切片和甲苯胺蓝染色技术,对不同生长时期花蕾的花药进行切片观察,明确花蕾长度与花药发育时期的对应关系.[结果]通过形态观察发现,在海岛棉的花发育过程不同时期花蕾的萼片、花瓣和花药的形态、颜色、大小以及花丝和柱头的长度出现明显变化.切片观察发现,从花芽出现到花药开裂,经历花原基的形成、花药原基的出现、花粉母细胞形成、四分体时期、绒毡层降解、减数分裂、花药开裂等14个发育时期.新海35花蕾长度5～6 mm、7～8 mm、8～9 mm和11～14 mm分别对应花药发育中的花粉母细胞形成期、四分体时期、小孢子释放期和绒毡层降解时期,也是成花过程中尤为关键的4个时期.通过对花粉萌发、花粉管伸长、受精过程、胚乳的发育等进行观察,明晰了海岛棉花粉成熟到完成受精再到纤维发育所需的具体时间和详细过程.[结论]海岛棉各个时期花蕾的表型与陆地棉不同,且花蕾大小及花药颜色随着花药细胞发育而变化,并伴随着细胞内部的代谢过程及正常发育所需物质的转换;通过花蕾大小及表型可以判定海岛棉花药发育时期.花粉成熟后,花粉的萌发、花粉管的伸长、双受精及胚乳发育分别发生在授粉后的0.5～1 h、8 h、24 h和50 h.

摘要： 受精生物学作为研究生命起动的一门学科,已成为生命科学研究的核心，但受精的分子机制长期未能得到完满的解释。数十年来有关精卵融合的理论,多次被修改,不少入选的蛋白分子逐一被淘汰。本研究发现了精子相关的精卵融合蛋白，实现了受精生物学的重大突破。

摘要： 中华绒螯蟹的精子无尾部，不能运动；其成熟卵为初级孵母细胞，无受精孔，业子可在卵的任何部位穿入卵内。精子人卵主要借顶体反应。虽多精着卵，但仅数精人狼，且单精受精。

摘要： 人类及哺乳动物生殖腺、生殖细胞和生殖激素都具有抗原性,均可引起机体免疫反应,影响生殖过程中配子的发生和发育、受精、胚泡着床、胚胎发育、分娩等各环节.若其中任一环节功能失调即可导致不育、流产及妊娠免疫性并发症。配子发生过程中,精子和卵子都表达一些特异性的蛋白,这些特异性的蛋白可以作为抗原刺激机体的免疫系统,引起免疫应答。免疫应答产生的抗体与相应的配子抗原结合,则会抑制配子的功能,阻断受精.因此,在理论上精子和卵子特异性蛋白可以作为避孕疫苗的候选抗原。

摘要： 本研究将采集的猪鲜精做体外获能处理,调整精子的浓度为5×107精子/mL,活力不低于0.5.受体母猪发情后注射HCG800IU,之后的24-30小时采用手术的方法按三种方式将精子注入受体母猪的生殖道内:从宫管接合部注入输卵管,从输卵管伞部注入输卵管,注入贴近宫管接合部的子宫角内.一侧注入后,按同样的方法注入另一侧,每侧0.5 mL.注入精子后,缝合创口,按常规饲养管理,观察其怀孕、分娩及产仔情况.结果表明:宫管接合部注入的受胎率1 00％(5/5),平均产仔数7.2头;输卵管伞部注入的受胎率为0(0/5);注入子宫角的受胎率60％(3/5),平均产仔数7.3头.本试验为更充分挖掘优秀公猪个体的遗传潜力、大幅度提高精子的利用率,为精子介导法构建转基因猪提供了新的技术途径.

摘要： 以我国的马鹿为试验对象，探讨温度、成熟培养液和不同级别卵丘卵母细胞复合体(COC)对鹿卵母细胞体外成熟的影响。结果表明：38.5°C条件下马鹿卵母细胞成熟率显著高于37.0°C时(P＜0.05)；试验中所设计的两组成熟培养液均可使马鹿卵子体外成熟且继续完成受精，添加胎牛血清(FBS)的比例由10％增至20％以及是否添加雌二醇(E2)对成熟培养的影响不显著(p＞0.05)；马鹿COC可分为四个等级，其中A、B级COC体外培养后成熟率均高于C、D级。

摘要： 本发明提供了一种延长鱼卵受精孔开放时间的溶液和利用受精孔导入外源基因的方法，属于转基因鱼研究与生产技术领域，所述溶液以水为溶剂，每升包括氯化钠6g、氯化钾0.15g、氯化钙0.1g、碳酸氢钠0.1g、磷酸二氢钠0.1g和葡萄糖1g。采用本发明提供的溶液能够延长鱼卵受精孔的开放时间，以方便外源基因直接进入鱼卵。

摘要： 本发明提供了一种应用三原核受精卵检测体外受精环境质量的方法，在待测体外受精操作环境中和已预先检测质量合格的体外受精操作环境中培养三原核受精卵，检测培养情况，对比两者差异，判断待测体外受精操作环境的质量。该方法操作简单，可靠性高。

摘要： 本发明涉及彭泽鲫人工授精设备技术领域，且公开了一种对彭泽鲫受精卵具有保护作用的人工受精装置及其使用方法，包括壳体，壳体顶端固定有上盖，上盖内壁贯穿固定连接有输精管，壳体侧壁开设有进料口，进料口侧壁固定有输卵斗，输卵斗底端固定有滤网。本发明中，通过输精管将鱼精子输送至壳体内部，通过电机驱动带动搅拌杆进行缓慢转动，电机为步进电机，搅拌杆为具有弹性的橡胶材质，从而在转动的过程中防止破坏鱼卵，且使鱼卵与精子充分混合受精，当混合完成后，将出料口打开，使混合后的卵子通过输送板流动至饲养缸内部，通过这样的方式，起到自动将鱼精子和卵子进行混合的效果，降低人工操作的繁琐性，使用起来更加便捷。

摘要： 本发明公开了一种牛体外受精的受精液及其使用方法，受精液包括不含肌醇的SOF基础培养基，还包括以下添加剂：L‑精氨酸、L‑天冬氨酸、L‑肉碱、肾上腺素、青霉胺、亚牛磺酸、肝素。采用本发明的受精液，可有效保证牛胚胎体外受精率和受精胚胎的发育质量。

摘要： 本发明涉及牛体外受精使用的培养液和提高牛体外受精的方法。牛体外受精的方法包括如下步骤：将成熟的卵丘‑卵母细胞复合体在受精培养液中洗涤，再转移到受精培养液中，放入培养箱中，备用；从液氮中取冻精细管，37°C水浴解冻，使精液注入盛有精液制备培养液的离心管中，离心后弃上清；将精液制备培养液加入上述离心管，重悬精子沉淀，取适当的精子悬液进行精子计数；将计算好体积的精子悬液加入盛有卵母细胞的受精培养液滴中，并将培养盘放入培养箱，使精卵共孵育，完成体外受精操作，以备用于胚胎体外培养。涉及的受精培养液和精液制备培养液包含丙酮酸钠和肝素等成分。本发明方法能够显著提高牛体外受精的效率。

摘要： 一种快速分离葡萄串状青鳉受精卵为单个受精卵并清理受精卵卵膜表面的方法，涉及一种鱼类人工精卵护理、处理的方法。本发明提供了一种能够快速分离葡萄串状青鳉受精卵为单个受精卵，同时清理受精卵卵膜表面丝状物的方法。方法：一、将青鳉受精卵剥离转入培养液或者曝气自来水中；二、将成簇的受精卵分离成n块；三、在培养皿底部铺上砂纸，再加入培养液或者曝气自来水浸没砂纸；四、将步骤二分离的受精卵放在步骤三湿润的砂纸上面，揉滚受精卵。本发明方法能够有效的实现葡萄串状受精卵分离为单个受精卵，去除青鳉受精卵卵膜表面丝状物，获得的青鳉胚胎卵膜表面干净、清洁，细胞发育清晰可见，便于观察胚胎发育时期观察和其它与之相关的实验。

摘要： 本发明涉及彭泽鲫人工授精设备技术领域，且公开了一种对彭泽鲫受精卵具有保护作用的人工受精装置及其使用方法，包括壳体，壳体顶端固定有上盖，上盖内壁贯穿固定连接有输精管，壳体侧壁开设有进料口，进料口侧壁固定有输卵斗，输卵斗底端固定有滤网。本发明中，通过输精管将鱼精子输送至壳体内部，通过电机驱动带动搅拌杆进行缓慢转动，电机为步进电机，搅拌杆为具有弹性的橡胶材质，从而在转动的过程中防止破坏鱼卵，且使鱼卵与精子充分混合受精，当混合完成后，将出料口打开，使混合后的卵子通过输送板流动至饲养缸内部，通过这样的方式，起到自动将鱼精子和卵子进行混合的效果，降低人工操作的繁琐性，使用起来更加便捷。

摘要： 本发明涉及牛体外受精使用的培养液和提高牛体外受精的方法。牛体外受精的方法包括如下步骤：将成熟的卵丘‑卵母细胞复合体在受精培养液中洗涤，再转移到受精培养液中，放入培养箱中，备用；从液氮中取冻精细管，37°C水浴解冻，使精液注入盛有精液制备培养液的离心管中，离心后弃上清；将精液制备培养液加入上述离心管，重悬精子沉淀，取适当的精子悬液进行精子计数；将计算好体积的精子悬液加入盛有卵母细胞的受精培养液滴中，并将培养盘放入培养箱，使精卵共孵育，完成体外受精操作，以备用于胚胎体外培养。涉及的受精培养液和精液制备培养液包含丙酮酸钠和肝素等成分。本发明方法能够显著提高牛体外受精的效率。

摘要： 本发明提供了一种应用三原核受精卵检测体外受精环境质量的方法，在待测体外受精操作环境中和已预先检测质量合格的体外受精操作环境中培养三原核受精卵，检测培养情况，对比两者差异，判断待测体外受精操作环境的质量。该方法操作简单，可靠性高。

摘要： 本发明提供了一种延长鱼卵受精孔开放时间的溶液和利用受精孔导入外源基因的方法，属于转基因鱼研究与生产技术领域，所述溶液以水为溶剂，每升包括氯化钠6g、氯化钾0.15g、氯化钙0.1g、碳酸氢钠0.1g、磷酸二氢钠0.1g和葡萄糖1g。采用本发明提供的溶液能够延长鱼卵受精孔的开放时间，以方便外源基因直接进入鱼卵。