同时检测乙型肝炎病毒三种核苷酸类似物耐药位点的方法及其试剂盒

摘要

本发明提供了一种同时检测乙型肝炎病毒三种核苷酸类似物耐药位点的方法及其试剂盒。该发明以乙型肝炎病毒基因型序列为基础，在HBV聚合酶区域设计了四条巢式扩增引物和针对十个耐药位点的二十七条野生、耐药检测的寡核苷酸探针，使用地高辛标记的寡核苷酸通用引物进行巢式PCR反应扩增靶DNA片段，利用被标记的靶DNA扩增产物与特异性寡核苷酸探针在基质上杂交，通过杂交结合物偶联的酶促显色反应，判断HBV对三种核苷酸类似物耐药的存在。该方法提高了检测的准确性、可靠性、灵敏度，可以同时检测三种核苷类似物的10个耐药位点，从而实现了高通量，多位点，经济，快速的检测，更加贴合临床需求。对实现早期监测，并合理指导临床个体化用药有着重要的意义。