用VP16替代Nanog转录激活域CD2的Nanog基因突变体、携带其的载体,构建方法及其用途

摘要

本发明公开了用VP16替代Nanog转录激活域CD2的Nanog基因突变体、携带其的载体、构建方法及其用途。Nanog是一个可以使小鼠胚胎干细胞在不依赖于LIF(白血病抑制因子)的情况下维持自我更新能力的转录因子。将Nanog的转录激活域CD替换成病毒中的一个已知更强有力的转录激活域VP16，可使Nanog失去维持胚胎干细胞自我更新能力的作用，并抑制内源Nanog表达从而促进细胞向各个方向的分化；该突变体还能使Nanog对于其报告基因p5N的激活倍数高出几十倍，使得检测Nanog的活性更加容易。该替换重组突变体的构建途径，对研究其它结构域及其它转录因子提供了借鉴意义。