用于序列饱和诱变(SeSaM)的方法

摘要

具有(+)链和互补(-)链的n个碱基对的双链多核苷酸序列(主序列)诱变的方法，其包括步骤：(i)产生主序列(+)链的单链片段集合，其中该集合的所有成员具有相同的5’末端并且具有3’末端缺失，从而该集合代表具有n-1、n-2、n-3......个核苷酸长度的(+)链；(ii)在步骤(i)中产生的(+)链的3’末端导入至少一个通用核苷酸或简并核苷酸；(iii)利用(-)链或其片段作为延伸的模板链，将步骤(ii)中产生的(+)链延伸至主序列的全长；(iv)通过使用步骤(iii)中产生的(+)链作为模板链合成(-)链，从而与主序列相比，在(-)链中前面的通用核苷酸或简并核苷酸位置实现突变。