一株产α-酮戊二酸重组菌的构建及用其实现α-酮戊二酸过量积累的方法

摘要

一株产α-酮戊二酸重组菌的构建及用其实现α-酮戊二酸过量积累的方法，属于代谢控制策略优化发酵过程技术领域。本发明采用将来源于酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中编码丙酮酸脱氢酶系亚基的PDA1(PDH-E1α)基因过量表达于丙酮酸工业生产菌株CCTCC NO：M202019中，获得了一株产α-酮戊二酸重组菌CCTCC NO：M209247。其丙酮酸脱氢酶(PDH)活性达到0.35U/mgprotein，为出发菌(0.092U/mg protein)3.8倍，过量表达PDA1基因提高了PDH途径的通量，可有效促进丙酮酸的进一步代谢，将碳代谢流导向TCA循环，α-KG产量达到31.7g/L，比出发菌(22.8g/L)提高39％。结果表明可以通过加强PDH活性的方法过量积累α-酮戊二酸(α-KG)，提高α-KG的生产强度。