葡萄酒中DNA的提取方法

摘要

葡萄酒中DNA的简单快速提取方法，包括以下步骤：A 用纯水将5g的Silica清洗干净，加入5ml水悬浮Silica沉淀，混匀，置4℃备用；B 建立最佳吸附条件的葡萄酒；C 葡萄酒DNA的吸附及回收：(1)向上述葡萄酒混合液中加入Silica悬浮液；(2)4℃下保育1-2小时，不断摇晃、振荡；(3)离心，5000g，5min，4℃；(4)弃上清液，用含0.1M Tris-HCl，pH 8.0，1％CTAB，1M NaCl的冲洗液短暂冲洗Sliica沉淀1-2次；(5)离心，5000g，5min，收集Silica沉淀；(6)向上述Silica沉淀加入等量的纯水，摇匀，于65℃保温5-10min热洗脱DNA；(7)离心(10000g，5min)收集含有DNA的上清液；(8)等体积氯仿抽提步骤(7)的上清液，离心10000g，3min，收集含有DNA上相；(9)用异丙醇沉淀法回收、浓缩上清液中DNA；(10)回收的葡萄酒DNA溶于50μl TE(10mM Tris-HCl，pH 8.0)缓冲液。