一种耐热角质酶-CBD的制备及其在棉纤维精练中的应用

摘要

一种耐热角质酶-CBD的制备及其在棉纤维精练中的应用，属于酶基因工程领域。本发明以pET20b-Tfu_0883质粒DNA及嗜热子囊菌WSH03-11总DNA为模板，设计引物分别PCR得到编码角质酶Tfu_0883基因和纤维素酶Tfu_1074中CBD基因，再通过重叠PCR获得编码角质酶-纤维素结合域(cellulose-bindingdomain，CBD)的融合基因，简写为耐热角质酶-CBD；以pET20b(+)为表达载体，以E.coli BL21(DE3)为表达宿主，实现了耐热角质酶-CBD基因的高效表达。该融合酶具有角质酶活性，最适温度为50℃，最适pH 8，在50℃下保温50h，酶活仍可达50％以上。角质酶-CBD对棉纤维的吸附率为50％，6h达到反应平衡，生成180μmol脂肪酸。此融合酶非常适合在棉纤维精练中的应用。