以TaqMan探针定量多聚酶链反应技术检测基因单点突变的方法

摘要

本发明提供了一种使用TaqMan探针的实时荧光定量多聚酶链反应(FQ-PCR)技术。该方法针对一个待测DNA点突变位点，对一个待测样品，分别用特异引物和非特异引物进行FQ-PCR检测，通过两次反应Ct值大小的比较及两者差值ΔCt的大小，判断该突变位点是野生型纯合子、突变型纯合子和杂合子三者之一。本发明方法的特点在于，使用特殊的PCR体系，独特的PCR反应过程，特征性的检测有效性标准，以及明确的结果判断方式，提高了TaqMan探针实时荧光定量PCR检测单点突变的准确性和稳定性，适合临床实验室使用。