通过测定二氧化碳浓度来计算草酸脱羧酶活力的方法

摘要

本发明涉及一种通过测定二氧化碳浓度来计算草酸脱羧酶活力的方法，包括：1)底物+草酸脱羧酶+醋酸缓冲溶液，30-37℃，反应0.5-1h；2)配制pH 7.3～8.5的含磷酸烯醇式丙酮酸、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶、NADH、苹果酸脱氢酶的Tris-HCl缓冲液，30-37℃，温育，380nm处测A₁；3)在步骤2)中添加步骤1)反应液，30-37℃反应，380nm处测A₂；4)根据ΔA_380nm＝A₁-A₂计算NADH减少量，再根据反应原理计算生成二氧化碳的浓度，从而计算草酸脱羧酶的活力。本方法可靠，灵敏度高，与测定草酸脱羧酶的经典方法所测值相近，是一种很好的测定草酸脱羧酶酶活的方法。