基于氧化损伤碱基的荧光探针及用于直接检测DNA甲基化的试剂盒与方法

摘要

本发明属于生物分析领域，涉及基于氧化损伤碱基的荧光探针及用于直接检测DNA甲基化的试剂盒与方法。本发明首次开发了一种基于氧化损伤碱基的荧光探针，通过循环切割信号放大准确检测单个位点的DNA甲基化。hOGG1酶可以特异性切割8‑oxoG/5‑mC碱基对中的8‑oxoG碱基，但对8‑oxoG/U碱基对中的8‑oxoG碱基无活性。目标物甲基化DNA的存在可以在hOGG1酶的辅助下诱导荧光探针的循环裂解，从而导致增强的荧光信号。该方法灵敏度高，特异性好,可以检测单个甲基化位点，检测下限达到3.458×10‑15M。而且该方法能在复杂的DNA混合体系中区分出0.01％的甲基化水平，也可以检测基因组中的DNA甲基化水平。