抗猪急性腹泻综合征冠状病毒N蛋白单克隆抗体、该单克隆抗体的识别区域及其应用

摘要

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种抗猪急性腹泻综合征冠状病毒（SADS‑CoV）N蛋白单克隆抗体。本发明将全长N蛋白基因克隆至pET32a载体中，构建出原核表达重组质粒pET32a‑N，通过诱导表达、蛋白纯化获得纯化的N蛋白。将纯化的N蛋白免疫Balb/c小鼠，随后取免疫鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤SP2/0细胞融合，筛选获得两个抗N蛋白的单克隆抗体，分别命名为4B10和6E8。通过截短表达，发现该抗体能特异性识别并结合N蛋白的N端区域，4B10和6E8识别区域是64～84aa。本发明提供的上述单克隆抗体，可利用基因工程或蛋白质工程方法获得。该抗体能特异性识别SADS‑CoV，对病毒还具有中和活性，为探究SADS‑CoV致病机制的研究、早期检测试剂盒和治疗性抗体的开发提供了新的原材料。