一种人工合成的蝎氯离子通道神经毒素基因－rBmK CTa

摘要

依据大肠杆菌偏爱密码子的原则，将天然蝎氯离子通道神经毒素BmK CT基因进行24个位点的突变，设计了适合在大肠杆菌BL21(DE3)中表达的DNA序列，采用PCR技术完成了重组蝎氯离子通道神经毒素rBmK CTa基因的人工合成。在此基础上，将此基因克隆到pExSecI表达系统中，转化入大肠杆菌BL21(DE3)中，筛选得到高效表达的菌株，SDS-PAGE电泳检测到该基因的表达产物占全菌蛋白的19.936%。经亲和层析，得到较纯的具有生物学活性的蛋白，从一升培养液中可纯化得到2.4mg蛋白。采用本基因工程所得的改良的重组蝎氯离子通道神经毒素对神经胶质细胞具有抑制作用，可用于制备通过抑制神经胶质细胞可以治疗的疾病的药物，也可用于蝎神经毒素空间结构及药理学活性等研究。