一种改造羰基还原酶立体选择性的方法、羰基还原酶突变体及应用

摘要

本发明公开了一种改造羰基还原酶立体选择性的方法、羰基还原酶突变体及应用，通过酶结合口袋的大小和形状鉴定羰基还原酶立体选择性，反Prelog酶的口袋外部形状接近于立方体，Prelog酶的口袋外部形状更类似于长方体，通过调控关键位点氨基酸可实现酶立体选择性的反转或提升。本发明制备的羰基还原酶突变体KmCR‑E87D/A129C/V239N的立体选择性(99.5％deP,R)较野生型KmCR(99.5％deP,S)得到反转，在10h能不对称合成35.4mM的6‑氰基‑(3R,5R)‑二羟基己酸叔丁酯。