一种改进的生物样本中磷酸化肽段的鉴定及定量方法

摘要

本发明公开一种改进的生物样本中磷酸化肽段的鉴定及定量方法，该方法利用双甲基化标记技术实现相对定量并结合二氧化钛富集技术对复杂生物样本中含量极低的磷酸化肽段进行准确鉴定和定量；并将脱盐和双甲基化标记结合起来同时进行，减少了样品制备过程，有利于磷酸化位点的保持；在二氧化钛富集过程中，在上样缓冲液中加入乙醇酸，能够排除一些含有酸性氨基酸的肽段对磷酸化肽段的干扰，有利于提高富集效率；在脱盐和富集过程中，将制好的柱子放入EP管中通过离心的方法使柱子中加入的液体流过填料代替传统的柱层析方法，不仅节约了实验时间而且提高了一次处理样品的通量，有利于大通量磷酸化肽段的鉴定及定量分析。