基于高通量测序和杂合杂交瘤技术的小分子化合物抗体的制备方法

摘要

本发明提供一种基于高通量测序和杂合杂交瘤技术的小分子化合物抗体的制备方法。包括：1)根据小分子化合物M的结构，设计半抗原，合成免疫原，免疫实验动物；然后收集动物血清测定效价，选取效价高的免疫动物提取B淋巴细胞；2)将B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合，得到杂合杂交瘤细胞；3)筛选阳性杂交瘤细胞并体外扩大培养；4)对阳性杂交瘤细胞进行转录组测序，获得抗体重链和轻链的编码序列，然后利用原核或真核表达系统，制备得到小分子化合物M的抗体。本发明有效解决了传统大鼠单克隆抗体腹水制备难以及兔瘤细胞来源受限的问题，最终获得高特异性、高灵敏度和高稳定性的单克隆抗体，该方法在科研与实际应用中具有十分广阔的前景。