耐热菌的PCR快速检测方法

摘要

本发明公开了一种对苹果浓缩汁中耐热菌的快速检测方法，其技术原理是利用PCR技术，快速特异扩增核酸的方法，使浓缩汁中极微量的核酸在数小时之内扩增至原来的数百万倍以上，选择合适的引物，PCR就可特异性地扩增目标DNA片断至易检测水平，从而实现对耐热菌的快速检测目的。其操作程序如下：目的菌(耐热菌)浓集→预增菌(耐热菌的预扩增)→菌体破壁释放出核酸→提取核酸进行PCR扩增→扩增产物凝胶电泳检测→结果判断。由于苹果浓缩汁出口贸易中对耐热菌的要求为“不得检出”，因此本方法的检测结果完全满足实际生产的要求。且检测时间仅为10小时，比传统培养检测法4～5日的检测周期大大缩短，并可实现多样品的同时检测。