表达传染性法氏囊病毒基因编码蛋白永生化细胞制备方法

摘要

本发明公开了一种表达传染性法氏囊病毒基因编码蛋白永生化细胞制备方法。反转录获得传染性法氏囊病毒A节段基因组cDNA，PCR扩增不同编码蛋白的基因片段与哺乳动物细胞真核表达pCI-neo构建成重组表达质粒。在Lipofectamine 2000介导下转染Vero细胞，在G418的抗性下，通过极限稀释法克隆单细胞，经PCR、RT-PCR、Southern blot、Northern blot、IFA/IPMA检测，获得含目的基因的克隆化细胞系，经反复传代培养后不丢失。这些细胞系可作为研究传染性法氏囊病毒基因编码蛋白对宿主细胞基因表达调控的载体，以及将表达传染性法氏囊病毒基因编码蛋白应用于传染性法氏囊病的免疫接种。本发明应用基因工程技术、细胞重组技术制备表达传染性法氏囊病毒基因编码蛋白的永生细胞，具有重复性强、稳定性好，再生能力强等特点。