TPO/FL基因转导骨髓间充质干细胞的方法

摘要

本发明提供TPO/FL基因转导骨髓间充质干细胞的方法：(1)从人胎肝分离TPO和FL的mRNA，通过RT-PCR技术合成两种cDNA并克隆到pBluescript载体上，构建FL-IRES-TPO重组片段，再将重组片段转移到反转录病毒载体pLXIN上，构建成pfl30表达载体；(2)对人骨髓间充质干细胞进行pfl30表达载体转导，构建高效表达外源TPO和FL的人骨髓间充质干细胞。本发明达到了一次性基因转导而获得人骨髓间充质干细胞同时高效表达TPO和FL两种外源性基因的效果；本发明方法构建的外源性表达TPO和FL的人骨髓间充质干细胞在组成造血干/祖细胞体外扩增培养体系中，降低了造血干/祖细胞体外扩增培养的成本，并同时有效提高了造血干细胞的体外自我更新、扩增和分化能力。