一种采用荧光RT-PCR技术检测意大利蜜蜂气味结合蛋白基因OBP6表达的方法

摘要

本发明公开了一种采用荧光RT‑PCR技术检测意大利蜜蜂气味结合蛋白基因OBP6表达的方法，具体涉及生物技术领域，本发明中意大利蜜蜂气味结合蛋白基因OBP6表达检测方法的建立，包括以下步骤：(1)使用引物进行OBP6基因的检测；(2)总RNA的提取；(3)cDNA合成；(4)实时荧光PCR；(5)苯菌灵处理前后意大利蜜蜂OBP6的相对表达量计算；本发明采用的实时荧光RT‑PCR与常规PCR相比，实时荧光PCR技术由自动化仪器收集荧光信号，避免了肉眼判断的主观性，进一步提高灵敏度；实时荧光RT‑PCR技术全封闭反应，无须PCR后处理，避免污染，保证结果的可靠性和重复性。同时，免除常规PCR中电泳、定量扫描等后续繁琐步骤，大大缩短实验时间。