一种乙型肝炎病毒基因组DNA的5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷的标记和检测方法

摘要

本发明公开了一种乙型肝炎病毒基因组DNA的5‑乙炔基‑2’脱氧尿嘧啶核苷的标记和检测方法，具体的包括：(1)扩增NTCP基因，构建NTCP真核表达质粒pcDNA‑NTCP，将pcDNA‑NTCP转入Huh7肝癌细胞中构建NTCP稳定表达的Huh7‑NTCP细胞系；(2)使用EdU处理HepG2.2.15细胞，获取含EdU‑HBV的细胞上清，使用PEG8000处理，浓缩后进行HBV基因组拷贝数定量；(3)将HBV细胞传代培养至细胞汇合度为50‑80％时，使用EdU‑HBV感染Huh7‑NTCP细胞，然后进行EdU‑HBV荧光检测。本发明与现有技术相比，操作简单，图像结果无需进行后期处理，且各染色结果互不干扰。