一种基因优化的方法和以此方法获得的抗草甘膦基因及其表达载体

摘要

本发明利用DNA序列同源重组的特性和传统PCR扩增法的热循环反应，设计出以两个或两个以上同源性大于50%的基因序列为源模板，并采用两步PCR扩增反应的简便高效的基因优化方法。并以此方法获得了两个发生多点突变的，具有较强草甘膦抗性的EPSP合成酶基因。其编码的酶具有比野生型低得多的K_[PEP]，而K_[草甘膦]却明显增加。既提高了酶的催化效率，又减低了酶与草甘膦的亲和力，使该酶抵御草甘膦的能力大幅度提高。